蚕豆根尖细胞分裂同步化的方法

从事染色体研究工作,经常要求得到较高的细胞分裂指数,这就需要使细胞同步分裂,为此本文作者试图通过在动物细胞培养同步化过程中成功地应用的几种方法如低温、经基脉以及用于诱导植物染色体G带的放线菌素D,特别是首次在蚕豆上应用coffeine使细胞同步生长,通过实验得到结果,运用统计学处理说明这几种方法的优缺点。     

观察根尖生长的简易方法

取一干净透明度好的试管,内装少量清水,取大小适宜的卫生纸团吸足水,置于试管中上部,将吸足水的饱满籽粒的小麦、玉米等种子或已发芽的种子,选取2～3粒均匀放于试管中的卫生纸团中,最后试管口加棉塞。上述装置为根尖和根毛生长创造了有利的条件。一般在适宜温度25℃左右,经2～3天,萌发的种子可长出3cm以上的幼根。这时可用肉眼（或放大镜）清楚地观察到从伸长区最上部开始有根毛突起,并逐渐变长形成根毛密布的根毛区,根毛区以上部分根毛稀疏,萎缩消失。为了观察根尖生长过程,可以在试管上用碳素墨水或蜡笔划一短横线与伸长区和…     

大量繁殖橡皮树的简易方法

在繁殖橡皮树的实践中 ,我发现常规茎扦插法 ,有如下不足 :繁殖数量少 ;茎段相对上位的芽优先生长 ,强烈抑制下部芽的萌发 ,这样的扦插苗造形不美观。我摸索出的“1叶 1茎节繁殖法”可弥补常规法的不足。选取无病害的健壮的枝条 ,枝条上最好有芽的雏形。用利刀截成 2 0～ 30 mm长的节段 ,每段只保留一片叶 ,在距叶腋处的叶芽 (芽基 )上端 1～ 3mm处用刀整削平齐 ,下端切成 4 5°斜面。将这样的小茎段放于新鲜的草木灰中 ,让伤口沾满草木灰 ,以防扦插时伤口溃烂 ,促进伤口愈合。再将处理好的小茎段斜插于细砂培养基中 ,深度以细砂刚覆盖住叶…     

获取大蒜根尖高分裂指数的优化方法

大蒜根尖是观察植物细胞有丝分裂的好材料 ,而细胞有丝分裂是中学、卫校、师范院校及医学院校传统的生物学实验内容之一。特别是从事染色体研究工作 ,更需要得到较高的分裂指数 ,所以分裂指数的高低直接影响实验教学质量及研究工作的进展 ,作者曾用低温处理大蒜根尖 ,获得了较多的各期分裂相。但大蒜根尖的分裂指数是否与根尖长度及取材时间有关 ?目前尚未见报道 ,本研究以大蒜为实验材料 ,采用恢复培养和未恢复培养两种方法培根 ,分别按不同根长 ,不同时间取材 ,获得了初步结果 ,现介绍如下 :1　材料与方法1 )培根方法　将去皮蒜瓣 (非休眠…     

获取观察用草履虫的简易方法

选择温暖晴朗的日子 ,到池塘或水沟等处瓢取一定量的水装入瓶内 (根据我们的经验 ,在腐殖质丰富、生长有大量浮萍的水体中瓢取的水含草履虫较多 ) ,带到实验室后用滤纸进行过滤。过滤的目的是滤去大部分的水 ,使草履虫集中于剩下的水中 ,从而提高水中草履虫的含量。过滤时 ,将滤纸折成漏斗状放在玻璃漏斗上 ,再将采集来的水缓慢倒入漏斗内进行过滤 ,滤出的水和采集瓶底部带有杂质的水不要 ,直到漏斗里只剩下 2 0 ml左右的水时 ,停止过滤 ,并将漏斗内的水倒入干净的大培养皿里。大培养皿里水含有草履虫的数量与瓢取水量的多少成正比。将上面…     

清洁大量玻片的快速方法

在组织切片制作过程中,需用大量载玻片和盖玻片(统称玻片).按通常采用的清洁玻片方法,必须先入清洁液浸泡一天以上,然后经流水冲洗,再转入95%酒精中浸泡脱脂,用干净     

一种获取鱼腥藻的简易方法

一种获取鱼腥藻的简易方法鱼腥藻（Ａｎａｂａｅｎａ）因其结构典型而被选作相关学科里蓝藻门教学的代表属，实验课中常因缺乏该材料或材料不纯而影响教学效果。作者经多次试验，总结出了从红萍中分离鱼腥藻的简易方法。１基本原理红萍（又称满江红）是普生性的漂浮蕨类植...     

镉离子对蚕豆根尖细胞分裂的影响

蚕豆根尖经孙同浓度（0.1-10.0ppm）的CdCl2溶液处理24-48小时后,根的生长受到不同程度的抑制。对根尖细胞分裂的毒害则表现为低毒C-有丝分裂和高毒的染色体断裂、粘连和液化。此外,对Cd++的毒害机理进行了简略讨论。     

镉离子对蚕豆根尖细胞分裂的影响

蚕豆根尖经不同浓度(0.1—10.0ppm)的CdCl_2溶液处理24～48小时后,根的生长受到不同程度的抑制.对根尖细胞分裂的毒害则表现为低毒的C-有丝分裂和高毒的染色体断裂、粘连和液化.此外,对Cd~( )的毒害机理进行了简略讨论.     

硫酸铜对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响

以蚕豆根尖为材料,研究硫酸铜对蚕豆根尖细胞的遗传毒性效应。采用蚕豆根尖细胞的微核试验方法和染色体畸变试验方法,以不同浓度的硫酸铜为诱变剂,测定蚕豆根尖细胞的有丝分裂指数、微核率和染色体畸变率。结果表明:不同浓度的硫酸铜均能使蚕豆根尖细胞有丝分裂指数明显增加,即5个实验组的分裂指数均明显高于对照组(P<0.01或P<0.001);不同浓度的硫酸铜对蚕豆根尖细胞有丝分裂各期百分数的影响有异;能诱发较高频率的微核率,即在一定浓度范围内,其微核率随硫酸铜处理浓度的升高而增加,但随着硫酸铜浓度的进一步升高而呈下降趋势;硫酸铜还能诱导染色体产生多种类型的畸变,染色体畸变率随硫酸铜处理浓度的升高而增加,随着硫酸铜浓度的进一步升高而呈下降趋势,但均明显高于对照组(P<0.001)。结论是硫酸铜对蚕豆根尖细胞具有明显的遗传毒性效应。     

硝基苯对蚕豆根尖细胞凋亡的影响

细胞凋亡(apoptosis)是一自然生理过程。是由一个主动由基因决定的自动结束生命的过程。由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程序性调控,所以也常常被称为细胞程序性死亡(PCD,programmed cell death)。植物在正常发育时也会发生细胞程序性死亡,     

乙酸铜对蚕豆根尖细胞致畸效应

采用蚕豆根尖细胞的微核试验和染色体畸变试验方法,以不同浓度的乙酸铜为诱变剂,选择不同的处理时间,测定蚕豆根尖细胞的有丝分裂指数、微核率和染色体畸变率。结果表明：乙酸铜能诱发较高频率的微核率,处理6h、12h时微核率均随着乙酸铜浓度的升高而增加,具有明显的剂量效应;处理24h时在实验浓度范围内,其微核率随乙酸铜浓度的升高而增加,但高于一定浓度后反而呈下降趋势。不同浓度的乙酸铜在不同处理时间均使蚕豆根尖细胞有丝分裂指数增大。乙酸铜还能诱导蚕豆根尖细胞产生较高频率的染色体畸变,且产生多种类型的染色体畸变。因此,乙酸铜对蚕豆根尖细胞具有明显的致畸效应。     

土荆芥挥发油对蚕豆根尖细胞的氧化损伤

土荆芥是一种入侵植物,对周围植物具有较强的化感潜力.采用培养皿土培法和培养皿滤纸法,分别模拟土荆芥挥发油通过淋溶和挥发两条途径对蚕豆根尖细胞膜脂过氧化和抗氧化酶活性的影响,并分析了挥发油诱导的细胞凋亡.结果表明:在培养皿土培和培养皿滤纸处理中,在处理前期(24 h),蚕豆根尖细胞超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性均随土荆芥挥发油剂量的增大呈先升高后降低的趋势;根尖丙二醛含量随处理时间的延长和处理剂量的增大呈上升趋势.在处理中期(48 h)和处理后期(72 h),出现了典型的DNALadder条带,表明土荆芥挥发油可诱导蚕豆根尖细胞凋亡,并且随着挥发油剂量的增大和处理时间的延长,细胞凋亡程度加剧.土荆芥挥发油可以通过淋溶和挥发两种途径作用于周围植物,使受体植物的膜脂过氧化程度加剧,抗氧化酶活性受到抑制,诱导根尖细胞发生氧化损伤和细胞凋亡,从而抑制周围植物生长.而且,当挥发油以淋溶途径进入土壤时,蚕豆根尖抗氧化酶活性整体较高,DNA损伤程度较小,土荆芥挥发油通过挥发途径的化感作用大于通过淋溶途径.     

快速简易凝胶板干燥方法

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳广泛应用于生物化学及免疫化学等研究方面。人们希望能将电泳凝胶板制成干片,以便进行放射自显影或使电泳结果可以长期保存。国内外已有凝胶真空干燥器生产,可以使凝胶板在加热和真空情况下迅速干燥。但价格昂贵,而且每次只能干燥1—2片,不能适应大量干燥凝胶板的需要。虽然Ginlian和王育东在室温下用简易方法干燥凝胶板,但凝胶板需先用甘油预处理     

干燥处理诱发蚕豆根尖细胞多倍体化

1964年在细胞学试验中,曾偶然发现蚕豆种子在幼根生长期间缺水,则有诱发根尖形成瘤肿的现象。于是我们进行了“干燥处理诱发蚕豆根尖细胞多倍体化”的试验。先将种子放入湿沙中发芽,当幼根生长到1.5厘米时,将已发芽的种子埋入干沙中处理24小时,然后再放入湿沙内继续生长24小时,使幼根生长得到恢复。     

甲硝唑诱导蚕豆根尖细胞微核的研究

本实验研究了甲硝唑诱导蚕豆根尖细胞微核的效应。实验表明：(1)浓度为0.1、6、12、40和500 mg/L甲硝唑均能使蚕豆根尖细胞微核率显著增加,且蚕豆根尖细胞微核率和甲硝唑浓度之间存在明显的剂量-效应关系;(2)甲硝唑能引起DNA损伤,具有分子诱变剂的性能。     

重铬酸钾对蚕豆根尖细胞致畸效应的研究

以蚕豆根尖为材料,研究重铬酸钾对蚕豆根尖细胞的致畸效应。采用蚕豆根尖细胞的微核试验和染色体畸变试验方法,以不同浓度的重铬酸钾为诱变剂,测定蚕豆根尖细胞的微核率和染色体畸变率。结果表明:重铬酸钾能诱发较高频率的微核率,即在一定浓度范围内,其微核率随重铬酸钾处理浓度的升高而增加,但高于一定浓度后反而呈下降趋势;不同浓度的重铬酸钾均使蚕豆根尖细胞有丝分裂指数增大;重铬酸钾还能诱导蚕豆根尖细胞产生较高频率的染色体畸变,且产生多种类型的染色体畸变。结论是重铬酸钾对蚕豆根尖细胞具有明显的致畸效应。     

明矾对蚕豆根尖细胞遗传毒性的研究

为研究明矾的遗传毒性和潜在危害提供细胞遗传学证据。以蚕豆作为实验材料观察其根尖细胞在不同浓度明矾溶液中微核率变化情况,实验证明微核率随浓度呈先上升后下降情况,总体微核率均大于对照组,故不同浓度明矾溶液均能强烈诱发蚕豆根尖细胞产生微核。     

重铬酸钾对蚕豆根尖细胞致畸效应的研究

以蚕豆根尖为材料,研究重铬酸钾对蚕豆根尖细胞的致畸效应。采用蚕豆根尖细胞的微核试验和染色体畸变试验方法,以不同浓度的重铬酸钾为诱变剂,测定蚕豆根尖细胞的微核率和染色体畸变率。结果表明：重铬酸钾能诱发较高频率的微核率,即在一定浓度范围内,其微核率随重铬酸钾处理浓度的升高而增加,但高于一定浓度后反而呈下降趋势;不同浓度的重铬酸钾均使蚕豆根尖细胞有丝分裂指数增大;重铬酸钾还能诱导蚕豆根尖细胞产生较高频率的染色体畸变,且产生多种类型的染色体畸变。结论是重铬酸钾对蚕豆根尖细胞具有明显的致畸效应。Abstract：We studied the aberrant effects of different concentrations of potassium dichromate on Vicia Faba root tip cells. The micronucleus and chromosome aberration assay was conducted to determine the micronucleus rate and chromosome aberration rate of Vicia faba root tip cells induced by potassium dichromate. The result indicated that potassium dichromate could increase the micronucleus rate of Vicia faba root tip cells. Within certain range of concentration the rate of micronucleus was found to be increased with the increase of potassium dichromate concentration,but beyond this range the rate of micronucleus decreased with further increase of potassium dichromate concentration. The potassium dichromate at different concentrations could increase the cell mitosis index. Besides,it also caused various types of chromosome aberration,and the rates of chromosome aberration were always higher than that of the control group. The conclusion of this study was that potassium dichromate has obvious teratogenic effect on vicia faba root tip cells.     

快速鉴定和大量纯化质粒DNA的方法

为了快速鉴定重组质粒DNA, Birnboim等 人^[1]建立了快速碱性抽提法。在此基础上,我 们作了某些修改,不仅较有效地防止了质粒 DNA变性形式的出现,而且可以用来大量抽提 质粒DNA。若再协同轻基磷灰石柱层析121和酸 酚法^[6]处理,可获得纯度较高的质粒DNA。我 们用修改法提取了分子量从2.6X10^[6]-26X10^[6] 道尔顿的4种不同质粒DNA,均收到了比较理 想的结果,特别对于难于抽提的或大质粒DNA 更为有效。