转基因Bt水稻花粉在桑叶上的自然飘落浓度

实地(杭州)调查了桑稻混种地区水稻花粉飘落到桑叶上的浓度,同时对转Bt基因水稻花粉向桑叶上飘飞程度进行了田间试验。20个采样点的调查结果显示,超过一半(54．5％)的桑叶检测到了水稻花粉,其浓度变化范围为13．3—199．0粒/cm^2,平均浓度为92．9粒/cm^2,与109．1粒/cm^2(该浓度影响家蚕生长发育)持平(t＝0．10,P＞0．5)。不同桑稻距离(0-10m)的桑叶花粉浓度总体上是距离越近花粉浓度越高。将处于开花期的转基因Bt水稻和非转基因水稻植株(各3株)同时放入桑园中,然后观察水稻植株周边桑叶飘落上水稻花粉的浓度。两次试验采集的桑叶自然飘落的水稻花粉平均为3．8粒/cm^2,这一结果证明水稻花粉可飘落到桑叶上,从而支持上述调查结果;试验同时证实转基因Bt水稻和非转基因水稻植株的花粉飘飞能力没有差异。以上研究结果表明,Bt水稻在我国南方养蚕地区推广将可能对家蚕的生长发育造成负面影响。     

Bt/CpTI转基因稻及其非转基因亲本对照在间隔种植条件下的转基因漂移

随着转基因技术的迅速发展,越来越多的转基因作物被培育出来。转基因作物的外源转基因通过花粉传播向非转基因作物的漂移,会影响非转基因作物品种的种子纯度,从而可能导致一系列生物安全问题。为了研究转基因栽培水稻(Oryzasativa)中的外源转基因通过花粉介导向非转基因水稻品种逃逸的可能性及其频率,我们选用3个含双价抗虫基因(Bt/CpTI)的转基因水稻品系及其相对应的非转基因水稻亲本品种(近等基因系)进行了转基因漂移的实验。为了获取在近距离状况下转基因水稻与非转基因水稻品种之间的转基因漂移频率,采用了转基因与非转基因水稻品种间隔种植的栽培方式,分别在福建省福州市和海南省三亚市的转基因环境安全实验地进行实验,并利用潮霉素抗性筛选标记基因来鉴定转基因和非转基因稻的杂种。共检测了从非转基因水稻品种随机收获的70,056颗种子,以此计算转基因漂移频率。结果表明,在相邻种植的情况下,由这3个转基因水稻向对应的非转基因水稻品种的转基因漂移的频率比较低(0.275–0.832%)。如此近距离条件下获得的低转基因漂移频率表明,对于严格自花授粉的水稻而言,通过一定的隔离措施,能有效地降低由花粉介导的转基因漂移导致的非转基因种子混杂。     

hpt与bar基因作为水稻转基因筛选标记的比较研究

标记基因的选择是影响植物遗传转化和转基因后代筛选成败的关键因素。hpt与bar作为两种常用的水稻转化筛选标记被广泛应用于水稻的转化。为比较两者在实际应用中的效果, 文章首先对比了在潮霉素和除草剂(Bialaphos)两种筛选剂下水稻遗传转化的情况。研究表明, hpt基因的转化筛选体系相对于bar基因在转化效率上提高近两倍, 转化周期提前至少10 d, 且插入基因拷贝数更低。随后, 文章分析了利用潮霉素浸种法在田间筛选转基因水稻的可行性, 研究显示当潮霉素浓度大于167 mg/L时, 可以对以水稻品种kitaake为亲本的转基因材料进行有效筛选, 达到常规除草剂的筛选效果。但与除草剂相比较, 潮霉素的田间筛选成本却处于劣势。文章研究和讨论了hpt和bar基因在遗传转化和后代田间筛选中的优缺点, 并提供了一种利用潮霉素浸种法筛选转基因后代阳性植株的手段, 为将来在水稻转基因研究工作中根据实际需求选择合适的遗传转化、筛选体系提供参考。     

环介导等温扩增技术在转基因水稻Bt63检测中的应用

采用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)对转基因水稻Bt63进行应用检测。研究表明,环介导等温扩增技术检测转基因水稻Bt63特异性好,并且灵敏度达到0.01%(W/W),具有简便、快速、准确等特点,可以在进出口检验检疫、食品安全监测等领域进行应用。     

Bt水稻杂交育种中转基因的遗传分析

利用PCR、GUS染色和Western印迹杂交技术检测了Bt水稻杂交后代群体,发现在394株GUS阳性株中,共有392株表达Bt蛋白,协同表达株率达99.49%。由此表明,在杂交后代中报告基因Gus和目的基因crylAb紧密连锁遗传与表达。本试验还发现,在BC1、BC1F2和粳粳交F2群体中转基因呈单基因显性遗传,而在籼粳交F2群体中偏离3:1分离。 Abstract:Improved histochemical staining for GUS activity,PCR and Western blotting were used to detect the population of Bt rice crossed to conventional rice varieties.A total of 392 plants expressing Bt toxin protein were found in 394 GUS positive plants.The result demonstrated that cry1Ab gene closely inherited and expressed with reporter gene gus.Therefore,it is possible to develop GUS-assisted-selection to preliminarily identify the Bt gene and study the inheritance of transgenes in (back)cross breeding.Mendelian segragation of reporter gene Gus was observed in F2,BC1 and BC1F2 progenies.Thus indicated that transgenes inherited as a single dominant gene in the progenies of Bt rice crossed to conventional rice varieties.     

Bt水稻"克螟稻”花粉对家蚕生长发育的影响

本试验以家蚕为供试对象研究Bt水稻"克螟稻”花粉对家蚕生长发育的影响.结果发现,与正常无花粉处理相比,无论是非Bt水稻花粉处理,还是Bt水稻花粉处理,对初孵家蚕幼虫的致死率无多大影响,而对家蚕的体重有较大影响,其中三龄期家蚕体重存在极显著差异.还发现Bt水稻花粉处理组家蚕在3龄时期大小很不一致,最轻体重为18.1mg,而最重体重为183.8mg.这是由于采用人工抖粉桑叶上花粉浓度不均匀造成的.鉴于实际生态条件下桑叶上的花粉浓度可能远远低于试验条件,因此,在实际稻桑共作环境下,Bt水稻"克螟稻”花粉对家蚕生长发育可能不会造成太大的影响。 Abstract:The effect on the development of silkworm larvae of Bt transgenic rice pollen containing cry1 Ab gene from Bacillus thuringiensis were investigated.Compared with normal treatment,mortality of newly hatched silkworm lar vae in either Bt rice pollen or susceptible rice pollen treatment were not significantly different,while the variances of silkworm larvae weight at third instar were significant at 0.01level.In addition,the weight of each silkworm larva at third instar in Bt rice pollen treatment showed a big difference,the biggest and smallest silkworm larvae were 183.8rug and 18.lmg respectively,which was probably caused by the difference of Bt rice pollen concentration on the mulberry leaves.As pollen concentration on the mulberry leaves in actual field was lower than in lab,the influence on the development of newly hatched silkworm larvae of Bt rice pollen is not likely significant in actual ecological cnvi ronment.     

Bt水稻对田间非靶标害虫种群动态的影响

以转cry1Ab/cry1Ac基因水稻汕优63(以下简称汕优63/Bt)为材料,亲本汕优63(以下简称汕优63/CK)为对照,在田间自然感虫条件下研究汕优63/Bt对稻田几种非靶标害虫种群消长动态的影响。结果表明,汕优63/Bt上稻苞虫Pelopidas mathias(Fabricius)和稻眉眼蝶Mycalesis gotamaMoore幼虫数量都显著低于对照品种,但汕优63/Bt对稻苞虫的毒性强于稻眉眼蝶。汕优63/Bt上稻飞虱(白背飞虱Sogatellafurcifera(Horvath)和褐飞虱Nilaparvatalugens(Stal))混合种群数量通常与对照品种基本一致,在少数调查时间显著高于对照品种。相反,除少数调查时间与对照品种没有显著差异外,稻叶蝉(黑尾叶蝉Nephotettixcincticeps(Uhler)和二点黑尾叶蝉N.viriscens(Distant))混合种群数量通常显著高于对照品种。稻飞虱和叶蝉成为汕优63/Bt上的主要害虫。     

转基因水稻表达的Bt蛋白对拟环纹豹蛛(Pardosa pseudoannulata)生长发育的影响

为明确转基因水稻表达的Bt蛋白沿捕食性食物链的传递及其对生态系统中较高营养级生物的影响,在实验条件下(28±0.5 ℃,R.H=80%,L∶D=12h∶12h)以田间优势自然天敌拟环纹豹蛛为对象,以取食转Cry1Ab/Cry1Ac基因水稻汕优63(简称Bt水稻)叶片24 h的稻纵卷叶螟幼虫为猎物饲养拟环纹豹蛛,并测定了...     

转基因欧洲黑杨中Bt基因表达特性的研究

利用PCR检测了转基因欧洲黑杨当代和杂交后代群体 ,外源Bt基因在 7年生的转基因欧洲黑杨 1 4个无性系中稳定存在 ,Bt基因在杂交后代中分离比例为 1∶1。转基因欧洲黑杨作母本进行杂交时有落花、落果现象 ,可能是基因改造影响了它们的某些生理功能。     

G418和氯霉素作为转基因盐藻的抗生素筛选标记

寻找可以作为筛选标记的抗生素是进行盐藻转基因的前提,尤其是分子更小,反应更灵敏的抗生素,通过降低培养液中NaCl浓度至0.25mol/L以后,进行抗生素筛选,得到了一种可以作为筛选标记的抗生素-G418,700μg/ml G418在第5d即比较完全地杀死野生型盐藻细胞,由于未知的原因,实验中氯霉素表现出的抑制浓度是400μg/ml,作用时间是10d以上,不同于已有报道。在含1.5mol/L NaCl的盐藻培养基中,氯霉素,潮霉素,壮观霉素,G418,氨苄青霉素,卡那霉素都没有表现出杀死盐藻细胞的能力,这说明G418在低盐培养基中可以作为一种快速有效的筛选转基因盐藻的抗生素筛选标记。     

转Bt基因水稻稻谷对几种主要储粮害虫的影响

为了评价转Bt稻谷储藏期的生态安全性,通过对在自然条件下不同储藏期Bt稻谷与非Bt稻谷抽样调查。结果表明,随着稻谷储藏期的延长,在储藏17个月后Bt稻谷上的虫蚀率依次为0.70%,1.20%,显著低于另外两种非Bt稻谷上的虫蚀率(汕优63:1.7%,2.0%;9311稻:2.70%,3.00%,P<0.05)。但Bt稻谷和非Bt稻谷中的赤拟谷盗、谷蠹、书虱、麦蛾数量,在19个月储藏期内,大部分调查结果差异不显著。     

转Bt基因稻谷对小鼠生理与生殖的影响

目的:通过对小鼠饲以Bt转基因稻谷,观察Bt转基因稻谷对小鼠的生理与生殖能力的影响,为评价Bt转基因稻谷的安全性提供科学依据.方法:将雌、雄昆明小鼠48只分开饲养,各按体重随机分为转基因稻谷组和非转基因稻谷组,饲以对应的稻谷进行90天喂养试验,检测相关生理与生殖指标.结果:与非转基因稻谷组相比,饲以Bt转基因稻谷组小鼠...     

转Bt基因抗虫水稻的研究进展与生态安全评价

表达杀虫蛋白的转Bt基因植物正在改革着现代农业．综述了国内外转Bt基因水稻及其抗虫性的研究进展及水稻害虫对Bt水稻的抗性风险及抗性管理策略,提出了对转基因Bt水稻进行生态安全风险评价的具体内容．     

转Bt抗虫基因水稻的研究进展和生物安全性及其对策

转基因抗虫水稻的商品化种植已成为国内外广泛关注的热点问题.综述了转Bt(Bacillus thuringiensis)抗虫基因水稻的研究进展、食品安全性、生态安全性以及对转Bt基因水稻本身的性状变化的影响,并提出了防范策略,以期为转Bt基因水稻的生物安全性评价和商品化种植提供科学参考.     

转Bt基因抗虫玉米的研究

对转Bt基因抗虫玉米的研究概况、转化方法、转化体的鉴定方法、遗传评价以及其存在的问题进行了综述.     

Effects of Nitrogen Fertilizer on the Bt Protein Content in Transgenic Rice and Nitrogen Metabolism Mechanism

Journal of Plant Growth Regulation - Transgenic rice with Bacillus thuringiensis (Bt) genes has been successfully cultivated in recent years. The stable and sustainable expression of Bt protein is...     

转基因抗虫棉Bt基因插入区碱基组成分析

利用TAIL－PCR的方法克隆不同来源的转基因抗虫棉中外源基因插入区的侧翼序列并对其进行序列和结构分析,结果表明,同一个较基因的单构自交得到的不同株系中外源基因插入区的两侧DNA序列完全相同,不同的转基因抗虫棉虫的外源基因插入位置各不相同,不同来源的转基因品种外源基因插入的上游侧翼片段含有一段残留质粒片段,外源基因插入的下游侧翼片段为富含AT碱基结构,其中泗棉3号转基因抗虫品系中下游侧翼片段的AT碱基高达92％,Southern杂交结果显示这些侧翼序列为高AT含量的多拷贝序列,序列中没有发现拓扑异构酶的结合位点。     

Transgenic Bacillus thuringiensis (Bt) Rice Is Safer to Aquatic Ecosystems than Its Non-Transgenic Counterpart

Rice lines genetically modified with the crystal toxin genes from Bacillus thuringiensis (Bt) have experienced rapid development, with biosafety certificates for two Bt rice lines issued in 2009. There has still been no commercial release of these lines yet due to public concerns about human health and environmental risks. Some studies confirmed that Bt rice was as safe as conventional rice to non-target organisms when pesticides were not applied, however, pesticides are still required in Bt rice to control non-lepidopteran pests. In this study, we assessed the environmental effects of two Bt rice lines expressing either the cry1Ab/1Ac or cry2A genes, respectively, by using zooplanktons as indicator species under normal field management practices using pesticides when required. In the whole rice growing season, non-Bt rice was sprayed 5 times while Bt rice was sprayed 2 times, which ensured both rice achieved a normal yield. Field investigations showed that rice type (Bt and non-Bt) significantly influenced zooplankton abundance and diversity, which were up to 95% and 80% lower in non-Bt rice fields than Bt rice fields. Laboratory rearing showed that water from non-Bt rice fields was significantly less suitable for the survival and reproduction of Daphnia magna and Paramecium caudatum in comparison with water from Bt rice fields. Higher pesticide residues were detected in the water from non-Bt than Bt rice fields, accounting for the bad performance of zooplankton in non-Bt field water. Our results demonstrate that Bt rice is safer to aquatic ecosystems than non-Bt rice, and its commercialization will be beneficial for biodiversity restoration in rice-based ecosystems.