橘小实蝇快速检疫鉴定方法

采用形态学观察与PCR技术相结合的方法,针对台湾水果中截获的可疑橘小实蝇Bactroceradorsalis(Hendel)幼虫和蛹进行快速鉴定。采用异硫氰酸胍方法快速提取昆虫基因组DNA,并根据特异性引物,采用PCR技术从截获的可疑橘小实蝇幼虫和蛹样本中均扩增得到224 bp的特异性条带,经测序比较发现,扩增产物序列与橘小实蝇目的基因序列完全相同,由此证明可疑样本为橘小实蝇的幼虫和蛹。该方法解决了橘小实蝇幼虫和蛹等未成熟虫态的快速检疫难题,大大缩短了检测周期,值得口岸检验检疫借鉴应用。     

橘小实蝇神经肽sulfakinin的分子生物学特性及其表达模式

【目的】分析橘小实蝇sulfakinin的时空表达模式及其对饥饿的响应,初步明确sulfakinin在调节橘小实蝇行为和生理方面的功能。【方法】利用RT-PCR技术克隆橘小实蝇神经肽sulfakinin的c DNA序列,采用实时定量PCR技术分析该基因在橘小实蝇不同发育阶段、成虫不同组织、幼虫不同组织及其在饥饿胁迫下的表达模式,并运用半定量RT-PCR技术进一步验证。【结果】实时定量PCR分析结果表明,sulfakinin在橘小实蝇的幼虫期和成虫期显著性高表达,卵期和蛹期几乎不表达。其中早期成虫表达量最高,约为晚期成虫的2倍,幼虫期表达量位于两者之间。在橘小实蝇幼虫、成虫不同组织中,sulfakinin在中枢神经系统的表达量显著高于其他组织,在触角的表达量仅次于中枢神经系统。此外,橘小实蝇在经饥饿处理24 h的过程中,sulfakinin的表达量均出现下调,其中从饥饿处理结果可知在6 h下降幅度最大,12 h和24 h表达量下降幅度减少。半定量RT-PCR技术进一步检测结果与实时定量PCR技术检测结果一致。【结论】sulfakinin在橘小实蝇中枢神经系统可能调节橘小实蝇成虫对饥饿胁迫的响应。其在触角中的高表达可能与橘小实蝇嗅觉的敏感性相关。本研究为进一步研究橘小实蝇sulfakinin的生理功能、评估其药靶潜力奠定了理论基础。     

橘小实蝇的风险分析

从地理评估和管理标准、传人的可能性、传播途径、定殖、定殖后扩散的可能性及橘小实蝇危害性评估等方面对橘小实蝇传人中国风险进行定性分析,筛选了橘小实蝇传人中国的风险因子。根据我国各气候大区的30a（1961—1990）的平均气温、月最高平均气温、月最低平均气温及年降雨量等气候因子和橘小实蝇的发生规律,将我国地域划分为适生区、次适生区、非适生区,明确了南亚热带湿润大区、边缘热带湿润大区、边缘热带亚湿润大区为橘小实蝇的适生区;暖温带湿润大区、北亚热带湿润大区、南亚热带亚湿润大区、高原亚温带湿润大区为橘小实蝇的次适生区。提出了降低橘小实蝇风险的管理措施,为制定检疫政策提供依据。     

橘小实蝇交配行为观察

在实验室内对橘小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）的交配行为进行了观察。描述了橘小实蝇交配中雄虫的“求偶场”,雄雄相遇、雌雌相遇、雌雄相遇时的相互反应,雌雄虫的交配行为与交配后行为。     

橘小实蝇天敌种类及其应用研究进展

橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)是一种广泛分布于亚洲及夏威夷群岛等地的入侵有害生物,对我国的水果和蔬菜造成了严重的影响.橘小实蝇的防治大多使用化学杀虫剂,然而化学杀虫剂的大量使用会导致橘小实蝇产生不同程度的抗性,同时也会杀伤其天敌,防治变得越来越困难;相较于化学防治,在不同地区筛选有效的天敌对橘小实蝇进行生物防治是有效控制的绿色防控措施,契合我国农业农村部大力推进特色优势农作物病虫害绿色防控的工作重点.目前,国内外报道的橘小实蝇寄生性天敌有70余种;捕食性天敌主要为蚂蚁、蠼螋、隐翅虫、螨、蜘蛛、步行虫等;寄生性微生物主要为真菌、细菌、病原线虫、共生菌等;食虫动物主要为鸡、鸟等.橘小实蝇生物防治中,多天敌资源的联合利用可有效增强防治效果.因此,本文系统全面地整理了国内外可查的橘小实蝇天敌种类,以及部分优势单种或多种组合的控害潜能,以期为橘小实蝇天敌种类的筛选和高效的生物防治应用提供参考.     

广东橘小实蝇寄生蜂调查

本文记述广东省橘小实蝇的寄生蜂4科8种,包括茧蜂科Braconidae的阿费氏茧蜂Fopius arisanus（Sonan,1932）、凡氏费氏茧蜂Fopius vandenboschi（Fullaway,1952）、长尾全裂茧蜂Diachasmimorpha longicaudata（Ashmead,1905）和弗氏短背茧蜂Pasyttalia fletcheri（Silvestri,1916）、姬小峰科Eulophidae的印啮小蜂Aceratoneuromyia indica（Silvestri,1910）、小蜂科Chalcididae的吉氏角头小蜂Dirhinus giffardii（Silvestri,1914）和匙胸瘿蜂科Eucoilidae的柔匙胸瘿蜂属Aganaspis sp．1和Aganaspis sp．2。     

橘小实蝇复合体分类学研究进展

橘小实蝇复合体Bactroceradorsaliscomplex是以橘小实蝇命名的实蝇类群,已知75种,广泛分布于亚洲、澳洲及环太平洋周边地区。文章概述基于形态学和遗传学特征基础上的橘小实蝇复合体的分类鉴定及系统发育研究进展,介绍近年来分子生物学技术在橘小实蝇复合体分类及系统发育研究中的应用情况,展望系统发育和行为学研究是橘小实蝇复合体未来研究的重点领域。     

橘小实蝇和番石榴实蝇幼虫之间的竞争机制

为了明确橘小实蝇Bactrocera dorsalis (Hendel)和番石榴实蝇Bactrocera correcta (Bezzi)资源利用的种间竞争机制,比较两者的竞争实力,本文研究了两种实蝇幼虫在26℃条件下于人工饲料和番石榴中的种间竞争关系。结果显示,两种实蝇同龄幼虫在共同饲养的竞争条件下,橘小实蝇幼虫期缩短、存活率提高,而番石榴实蝇蛹重变轻、存活率降低,橘小实蝇通过加快自身生长和抑制番石榴实蝇生长的方式在资源利用竞争中获得更多资源。因此,两种实蝇幼虫在种间竞争中,橘小实蝇可通过调整生活史对策获得竞争优势。     

橘小实蝇雌雄成虫生殖系统中可培养细菌的分离鉴定

本研究分离鉴定了来自赣南脐橙基地橘小实蝇Bactrocera dorsalis (Hendel)雌性和雄性成虫生殖系统中的可培养细菌.采用LB培养基分离纯化和菌株16S rRNA基因序列分析相结合的方法,从饲养10 d的橘小实蝇雌雄成虫生殖系统,获得15株具有不同表观特征的细菌,分属变形菌门Proteobacteria...     

低温对橘小实蝇羽化的影响

【背景】橘小实蝇是重要的检疫性害虫,发生危害严重。有关低温对橘小实蝇成虫羽化的影响尚未见报道。【方法】通过设置不同温度(8、4、0和-4℃)及处理时间(12、18和24 h),研究了橘小实蝇羽化率和羽化时间的变化。【结果】随着温度的降低,橘小实蝇羽化率和羽化时间显著降低和延长。羽化率可从正常温度(28℃)下的100.0%降低至6.7%(0℃);羽化时间可从正常温度(28℃)下的9.0 d延长至12.5 d(0℃)。当温度为-4℃时,橘小实蝇不能正常羽化。【结论与意义】橘小实蝇的耐寒性较差。本研究可为该虫适生区划定提供理论依据。     

橘小实蝇和番石榴实蝇重复利用寄主的产卵选择性

检疫性害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis和番石榴实蝇Bactrocera correcta是近缘种。本研究显示,两种实蝇对已被产卵寄主的识别与产卵选择性极相似。当寄主中至少含有600粒新鲜卵时,橘小实蝇或番石榴实蝇的雌成虫在其上继续产卵的数量才被抑制,而对同种实蝇卵和异种实蝇卵的反应几乎没有差异;两种实蝇在已被产卵的寄主中再次产卵,并没有刻意回避原产卵孔;寄主中的卵孵化为幼虫对后续实蝇的产卵行为产生了显著的抑制作用,随着幼虫数量的增多与龄期的增长,便不再有雌蝇选择该寄主产卵。因此,寄主中幼虫的存在是驱避橘小实蝇和番石榴实蝇在其上继续产卵的重要因素。两种实蝇幼虫寄主标记信息素的鉴定与利用将是今后研究的重点,利用其进行有害实蝇的种群控制将有很大的应用前景。     

蝇蛹俑小蜂对橘小实蝇和瓜实蝇的偏好性

【背景】蝇蛹俑小蜂是实蝇类害虫蛹期的一种重要寄生蜂,对压制下一代实蝇类害虫的种群数量具有重要作用,但有关其对不同实蝇害虫的寄生特性尚缺乏研究。【方法】采用"H"型装置和培养皿测定方法,研究了蝇蛹俑小蜂的寄主选择偏好性。【结果】蝇蛹俑小蜂在橘小实蝇蛹和瓜实蝇蛹共存的情况下,偏好在橘小实蝇蛹上停留,且寄生率较高,最高寄生率达61.11%。【结论与意义】本研究为合理利用蝇蛹俑小蜂控制实蝇类害虫提供了理论基础。     

小麦谷蛋白亚基基因的PCR鉴定及其在品质改良中的应用

小麦谷蛋白是胚乳中的主要贮藏蛋白,对面包品质具有重要作用。因此,改变品种的谷蛋白等位基因组成是品质改良的主要内容,而谷蛋白亚基基因的选择手段是决定品质育种成效的关键。本文介绍了近年来发展起来的小麦谷蛋白亚基基因PCR分子鉴定技术,通过与传统SDS－PAGE方法的比较,总结了PCR技术应用于谷蛋白基因鉴定和品质改良计划的优越性及其研究进展,并讨论了分子标记技术在小麦品质改良计划中的应用前景及今后的研究方向。     

小麦谷蛋白亚基基因的PCR鉴定及其在品质改良中的应用

小麦谷蛋白是胚乳中的主要贮藏蛋白,对面包品质具有重要作用。因此,改变品种的谷蛋白等位基因组成是品质改良的主要内容,而谷蛋白亚基基因的选择手段是决定品质育种成效的关键。本文介绍了近年来发展起来的小麦谷蛋白亚基基因PCR分子鉴定技术,通过与传统SDSPAGE方法的比较,总结了PCR技术应用于谷蛋白基因鉴定和品质改良计划的优越性及其研究进展,并讨论了分子标记技术在小麦品质改良计划中的应用前景及今后的研究方向。     

橘小实蝇与番石榴实蝇卵及蛹的种间竞争

【背景】实蝇的竞争可能发生在生活史的各个阶段,但未见卵和蛹的种间竞争的相关报道。【方法】将橘小实蝇与番石榴实蝇的卵及蛹按照相应的比例或龄期分别进行混合培养,分析2种实蝇的卵或蛹混合后的发育历期和存活率是否受到彼此影响。【结果】橘小实蝇与番石榴实蝇的卵同龄等量混合,对彼此卵的历期和孵化率无影响。当橘小实蝇和番石榴实蝇的蛹为新鲜蛹时,分别与比它们蛹龄大1 d的对方蛹混合,蛹的羽化率分别为(87.67±3.61)%和(84.33±2.56)%,显著小于对照,说明在此混合蛹处理中,后化蛹者的发育可能受到先化蛹者的抑制。【结论与意义】总体上,在卵和蛹期,橘小实蝇与番石榴实蝇未产生竞争作用;但不排除蛹期竞争的可能性,这种竞争可能存在于特定的蛹期。     

李产区橘小实蝇转移为害规律研究

[目的]明确橘小实蝇Bactrocera dorsarlis(Hendel)在李产区不同寄主间的转移为害规律,为制定控制其种群的策略和防治技术提供参考和依据.[方法]选择广西李主产区,调查橘小实蝇潜在寄主种类、潜在寄主果实成熟期、寄主受害率及橘小实蝇成虫在各寄主上的转移为害规律,采用Pearson相关性分析与主成分分析方法分析影响橘小实蝇发生的气象因子.[结果]李产区不同月份成熟的11种瓜果中,李受害率最为严重,最高达22％,枇杷、酸梅、黄皮、沙糖橘、皇帝柑、柚和柿可作为橘小实蝇的潜在寄主;橘小实蝇的转移为害规律为枇杷(4月)→三月李、三华李、酸梅和黄皮(5-8月)→沙糖橘、皇帝柑、柚和柿(9-10月)→柿(11月);李产区橘小实蝇始见日和终见日分别为4月26日和12月22日,全年共有2个成虫发生高峰期,分别为7月上中旬和9月中下旬,其发生规律与气温显著相关.[结论]明确了李产区橘小实蝇的转移为害规律及其与气象因子的相关性,建议李产区应在4月份集中防治枇杷上的橘小实蝇有利于减轻对李的危害.     

橘小实蝇染色体研究与相关技术探讨

以橘小实蝇Bactroceradorsalis(Hendel)性腺和唾液腺为材料,采取改良苯酚品红染色后压片法,制备染色体标本。对橘小实蝇进行染色体组型研究和唾液腺染色体形态学的观察。结果表明:橘小实蝇成虫性腺染色体数目为2n=12条,染色体长度基本呈连续性变化,其性染色体属于XX/XY型。幼虫唾液腺染色体包含5条较长的多线染色体,与成虫常染色体相对应。实验显示苯酚品红染色后压片为制备染色体标本简单有效的方法。     

海南儋州地区橘小实蝇成虫数量动态

【背景】橘小实蝇是热带、亚热带水果的重要害虫,在海南发生严重。【方法】利用橘小实蝇性诱剂进行田间诱捕,以诱到的雄成虫为指标,通过定期调查,获得了海南儋州地区4种样地橘小实蝇成虫的种群动态,并进一步通过相关分析,研究了芒果园橘小实蝇种群动态与温度和降雨量的相关性。【结果】儋州地区橘小实蝇种群周年发生,冬季种群数量较低,夏季种群数量较高。橘小实蝇种群高峰期发生于6月,其中芒果园达327.6头,蔬菜地为182.8头,办公区为150.0头,植物园为209.6头。在芒果园中,随着温度的升高,橘小实蝇的种群数量呈指数增长,其相关系数R=0.799;而与降雨量的相关系数较低,为0.367。【结论与意义】本研究可为儋州地区制定橘小实蝇综合防治策略提供理论依据。     

临海柑橘园橘小实蝇种群数量消长规律

【背景】近年来,随着种植结构的改变以及南方携虫水果的频繁调运,橘小实蝇逐渐向北扩散危害,对水果生产造成严重威胁。【方法】2008～2010年应用性诱剂的监测方法对柑橘园橘小实蝇种群数量进行了定点、系统的跟踪监测;并结合气象资料和田间调查情况,通过对当旬成虫数量与当旬及其前延逐句气象要素的筛选来建模,进而确定影响橘小实蝇种群数量的主要气象因子。【结果】临海柑橘园橘小实蝇种群数量时序变化呈单峰型曲线,其性诱成虫初见期在6月下旬至8月初,高峰期在9月上旬至11月上旬,11月中旬后成虫数量逐渐下降,到12月下旬未诱集到成虫。气象因子筛选和建模结果表明,柑橘园橘小实蝇成虫种群数量年度变动以旬平均温度为决定要素,季节性变化以旬降雨量为决定要素。【结论与意义】临海柑橘园橘小实蝇种群数量随温度和土壤湿度的增大而增长。本研究对提高橘小实蝇监测预警水平、有效控制橘小实蝇危害具有重要意义。     

橘小实蝇、瓜实蝇和南亚果实蝇人工饲料的优化

在温度25²8℃、相对湿度70%28℃、相对湿度70%⁷5%和光照周期L∶D=14∶10条件下进行了人工大量饲养橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)和瓜实蝇B.cucurbitae(Coquillett)成虫人工饲料配方的筛选试验。结果显示,1∶2重量比例混合的蔗糖和啤酒酵母是饲养这2种果实蝇的最佳成虫人工饲料,用其饲养的单雌产卵量、产卵期和孵化率分别为424.1675%和光照周期L∶D=14∶10条件下进行了人工大量饲养橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)和瓜实蝇B.cucurbitae(Coquillett)成虫人工饲料配方的筛选试验。结果显示,1∶2重量比例混合的蔗糖和啤酒酵母是饲养这2种果实蝇的最佳成虫人工饲料,用其饲养的单雌产卵量、产卵期和孵化率分别为424.16⁴45.75粒,30.90445.75粒,30.90³1.87 d,74.60%31.87 d,74.60%⁷5.40%。同时,对18种由不同配方配制成的幼虫人工饲料饲养橘小实蝇、瓜实蝇和南亚果实蝇B.tau(Walker)的效果进行了比较。结果表明,玉米和麦麸作为饲料的介质优于麦片和麦麸。橘小实蝇幼虫人工饲料的优化配方为:玉米+麦麸(125 g+25 g),蔗糖25 g,啤酒酵母25 g,对羟基苯甲酸甲酯0.9 g,1 mol/L盐酸4 mL,纸巾4 g,自来水300 mL;用其幼虫人工饲料饲养该虫的生物学参数包括子代孵化率、化蛹率、羽化率和平均蛹重分别为81.17%±0.05%,96.41%±0.02%,94.85%±0.01%与(19.40±0.08)mg。而瓜实蝇和南亚果实蝇幼虫人工饲料的优化配方为:玉米+麦麸(100 g+50 g),蔗糖30 g,啤酒酵母25 g,以及一定量的其他组分(同上);用其饲料饲养这2种果实蝇的相关参数:子代孵化率、化蛹率、羽化率和平均蛹重分别为78.50%±0.04%与76.96%±0.12%,95.73%±0.03%与94.69%±0.02%,94.57%±0.02%与95.82%±0.03%,(18.62±0.23)mg与(22.83±1.38)mg。试验证实,优化后的成、幼虫人工饲料具有饲养效果好、方法简便,配方材料来源广泛和价格低廉等优点,可用于室内人工大量饲养上述3种果实蝇属害虫。