肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核骨架和染色体骨架的组成成分

自多头绒泡菌(Physarum polycephalum Schw.)的原质团中分离细胞核和染色体,分别经DNaseⅠ消化和2 mol/L NaCl抽提后制备成细胞核骨架和染色体骨架。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、FITC标记的羊抗兔IgG抗体作二抗进行的间接免疫荧光实验结果显示,细胞核骨架和染色体骨架都分别与抗体呈阳性反应。间接免疫斑点印迹实验结果进一步证实,细胞核骨架和染色体骨架的蛋白质成分中存在与肌动蛋白抗体呈阳性显色反应的抗原。以抗肌动蛋白的抗体作一抗、金颗粒标记的蛋白A作二抗的间接免疫电镜实验结果表明,在实验组间期细胞核的核仁、集缩染色质和核基质以及中期染色体上都有很多金颗粒分布。上述结果证明,肌动蛋白是多头绒泡菌细胞核和染色体及其骨架的组成成分。     

Na_2SeO_3对血影收缩蛋白(spectrin)与肌动蛋白(actin)相互作用的影响

Na_2SeO_3不影响肌动蛋白(actin)的聚合,但它可通过与血影收缩蛋白(spectrin)作用而间接促进actin的聚合。Na_2SeO_3的作用具有浓度依赖性:低浓度(0.5-5.0ppm)可提高actin聚合过程的成核速度及延伸速度,高浓度则产生相反的效应。巯基试剂如N-乙基马来酰亚胺(NEM)可消除硒的效应。因此,推测适量的硒可能导致spectrin构象发生一定变化,增强spectrin与actin的结合,降低actin链解聚的倾向性,从而稳定红细胞膜骨架。     

寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)细胞核骨架与中间纤维的研究

甲藻(涡鞭毛虫,dinoflagellate)的细胞核是现存真核生物中最原始的。我们采用整装细胞制样和非树脂包埋去包埋剂超薄切片电镜技术,结合选择性生化抽提方法显示在寇氏隐甲藻(Cryptheccdinium cohnii)细胞中存在一个以水不溶性纤维蛋白成份为主的,贯穿于细胞核和细胞质的纤维网架系统,即核骨架-中间纤维结构体系,而Lamina结构不明显。免疫印迹法显示,甲藻细胞中存在类角蛋白组分,分子量为63kD和67kD,哺乳动物Lamin抗体与甲藻细胞全蛋白反应阴性。实验结果表明,在原始真核细胞中已经出现了类似于哺乳动物细胞的核骨架和中间纤维,并提示核骨架-中间纤维细胞骨架体系可能起源于真核细胞起源早期。本文对Lamina与中间纤维在进化上的关系及Lamina在真核细胞进化中的功能意义作了讨论。     

Na_2SeO_3对血影收缩蛋白(spectrin)与肌动蛋白(actin)相互作用的影响

Na_2SeO_3不影响肌动蛋白(actin)的聚合,但它可通过与血影收缩蛋白(spectrin)作用而间接促进actin的聚合。Na_2SeO_3的作用具有浓度依赖性:低浓度(0.5-5.0ppm)可提高actin聚合过程的成核速度及延伸速度,高浓度则产生相反的效应。巯基试剂如N-乙基马来酰亚胺(NEM)可消除硒的效应。因此,推测适量的硒可能导致spectrin构象发生一定变化,增强spectrin与actin的结合,降低actin链解聚的倾向性,从而稳定红细胞膜骨架。     

高等植物自交不亲和反应中花粉管信号传导研究进展(综述)

高等植物自交不亲和反应是由基因控制、避免发生自花授粉的一种机制。本文介绍以虞美人为主的高等植物在自交不亲和反应中肌动蛋白骨架的动态变化及Ca2 的时空变化,着重阐述花粉管生长被抑制的最初信号传导。     

烟草花粉母细胞减数分裂前期Ⅰ肌动蛋白的免疫细胞化学定位(简报)

肌动蛋白是一种主要的收缩蛋白,在肌肉细胞中是广泛存在的,而在非肌肉细胞中,如在藻类细胞以及高等植物的根尖细胞、表皮细胞中,也存有肌动蛋白。在花粉萌发过程中,肌动蛋白丝集聚成束,对于花粉管的形成和受精过程有着重要作用。但已有的工作,多数限于动物细胞和植物体细胞中,关于高等植物的生殖细胞中的报道则比较少见。     

洋葱细胞核仁内DNA的结构变化及排布过程(英文)

以洋葱 (AlliumcepaL .)细胞为研究材料 ,应用DNA细胞化学特异染色方法 (NAMA_Ur)及常规电子显微镜技术 ,观察了洋葱细胞核仁FC(纤维中心 )内DNA的超微结构 ,发现FC内DNA存在着一个介于集缩到解集缩之间的变化过程 ,并揭示了DNA在核仁内的连续排布过程 ,即核仁外DNA经过核仁通道进入到FC后 ,继续沿FC的边缘或DFC(致密纤维成分 )与FC的交界处环绕FC而排布 ,再经FC之间的核仁通道 ,延伸到另外的FC区域     

胞浆Ca~(2 )和某些激酶对NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用

为澄清中性粒细胞胞浆 Ca2 和某些 O-·2 产生相关激酶对 NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用 ,利用分化为中性粒细胞样的 HL- 60细胞研究了胞浆 Ca2 螯合剂 BAPTA- AM和激酶抑制剂对这些激酶激活、NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的影响 .使用 1 0 μmol/L的 Ca2 螯合剂 BAPTA- AM去除胞浆 Ca2 后 ,趋化肽 f MLP诱导的 O-·2 产生明显减少 ,但不影响 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;8μmol/L的 PKC激酶抑制物 GF1 0 92 0 3x几乎完全抑制 O-·2 产生 ;50 μmol/L的p38激酶抑制物 SB2 0 3580、50 μmol/L的 ERK激酶抑制物 PD0 980 59和 0 .1 μmol/L的 PI3激酶抑制物渥曼青霉素 (Wortmannin)使 f MLP诱导的 O-·2 产生大约减少一半 ;其中 Wortmannin还抑制 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;f MLP刺激细胞后 ,PI3- K、p38和 ERK激酶迅速激活 ,但这些激酶的激活对 Ca2 是非必需的 .这些结果说明 Ca2 依赖途径 (PKC)和 Ca2 非依赖途径 (PI3- K、p38和ERK)对 NADPH氧化酶激活都起着重要作用 ,而 Ca2 非依赖途径中的 PI3- K激酶还参与中性粒细胞样 HL- 60细胞的肌动蛋白聚合 .     

核骨架基质结合区(S/MAR)提高逆转录病毒载体介导egfp在NIH3T3细胞中的表达

为减轻逆转录病毒介导的外源基因的沉默 ,进一步提高逆转录病毒MFG载体介导的转移基因的表达 ,将人 β INF基因上游 80 0bp的核骨架基质结合区 (S MAR)分别反向和正向克隆至MFG载体 3′LTR上游 ,以egfp为报告基因观察S MAR对egfp基因表达水平以及对病毒滴度的影响 .结果显示 :反向和正向的S MAR在瞬时表达的情况都不能提高egfp的表达 ,但在稳定整合的情况下反向S MAR可明显提高egfp在NIH3T3细胞内的表达 ,而正向的S MAR作用不明显 ,另外反向S MAR可明显提高MFG逆转录病毒载体的滴度约 5倍 ;因此改造后的MFG逆转录病毒载体将能更好地用来介导外源治疗基因的表达 .同时还观察到 ,同一个载体骨架在稳定表达的情况下 ,磷酸钙介导较逆转录病毒载体介导的表达水平高 .提示逆转录病毒的生活史可能参与其介导的外源基因的沉默     

核基质与细胞凋亡

阐述了凋亡过程中,核基质所发生的形态、生化变化及相关凋亡基因的表达,尤其是凋亡早期便出现核基质蛋白的降解.核基质是细胞核最基本的组分,对维持细胞核形态结构和功能非常重要,其主要由核纤层,核内骨架及核孔复合体构成,在DNA复制、转录、RNA加工转运等事件中起支持作用.多少年来,关于凋亡时细胞核形态及生化改变的分子机理一直未阐明,最近对核基质与细胞凋亡的研究取得了重大进展.     

SARS冠状病毒主要结构蛋白的研究进展

严重急性呼吸综合征(SARS)因其传染性强、危害性大而受到广泛关注。世界各国密切合作,在对SARS的研究方面取得了许多突破。本文针对2005年前后的相关研究进展,综述了对S、N、M和E等4种SARS冠状病毒的结构蛋白的功能、实际应用等研究情况,其中对S、N蛋白进行了更为详细的介绍,重点阐述了主要结构蛋白的特征性功能区域、特异性蛋白、特征性反应、实验研究技术的改进以及疫苗研发等进展。     

肌动蛋白相关蛋白2/3复合体的结构、功能与调节

微丝参与了细胞形态维持及细胞运动等多种重要的细胞过程。微丝由肌动蛋白单体组装而成 ,肌动蛋白相关蛋白 2 / 3(Arp2 /Arp3,Arp2 / 3)复合体在微丝形成过程中起重要作用。Arp2 / 3复合体由 7个亚单位组成 ,在细胞内受到多种核化促进因子的调节 ,并与这些因子协同作用来调节肌动蛋白的核化。Arp2 / 3复合体结构、功能及调节的研究对于阐明微丝形成机制及细胞骨架与某些信号分子的关系有重要意义。     

核仁含磷蛋白B_(23)mRNA的部分提纯

用蔗糖梯度离心法对Novikoff肝癌细胞的多聚(A)~+mRNA进行了链长分部。沉降在13S和15S的组分6和组分7富集了B_(23)mRNA,其体外转译产物可特异地被抗蛋白B_(23)的抗体免疫吸附,被吸附的蛋白在SDS-PAGE中迁移到大约37,000道尔顿的区带。另外,用多聚核糖体免疫吸附技术提纯了少量B_(23)mRNA,它在体外转译系统中也指导合成了分子量约为37,000道尔顿的蛋白质。     

植物细胞核基质(Nuclear Matrix)的形态结构及其NuMA蛋白成分的研究

应用细胞选择性抽提并结合DGD包埋去包埋剂电镜技术对植物细胞核基质的形态结构进行了观察。结果显示胡萝卜悬浮培养细胞、银杏花粉细胞和精子细胞的细胞核内存在一个非染色质性的纤维蛋白网络体系。免疫荧光染色结果说明植物细胞核基质中含有与动物NuMA多抗交叉反应的多肽。免疫印迹反应显示胡萝卜悬浮培养细胞核基质蛋白与NuMA蛋白多抗的阳性反应条带为74KD和76 KD;银杏花粉细胞只有78 KD一条阳性带。以动物核基质NuMA蛋白保守杆状区的cDNA片段作为探针,与白菜子叶总DNA进行Southern杂交的结果表明植物细胞基因组中含有动物NuMA蛋白cDNA的同源序列。     

染色体端粒DNA与核骨架的结合关系(简报)

端粒是真核生物染色体的一种特化结构,对于染色体的稳定以及染色体的完全复制有着十分重要的意义。许多种生物的端粒DNA序列已被发现:四膜虫,草履虫为(G_4T_2)_n;人、锥虫、短膜虫为(AG_3T_2)_n;尖毛虫、棘尾虫、游仆虫为(T_4G_4)_n;拟蓝芥菜为(AG_3T_3)_n。     

小鼠基质重塑相关7(MXRA7)基因产物在肝内互作蛋白质的鉴定（英文）

基质重塑相关7(matrix remodeling associated 7,MXRA7)基因于2002年被命名,但无论在人类或其他动物体系,该基因或其蛋白质产物的功能均未知。直至我们最近的研究表明,该基因可能参与眼睛发育或肝损伤及修复。在本研究中,应用酵母双杂交策略,用小鼠MXRA7诱饵载体对小鼠肝cDNA文库进行筛选,发现23种蛋白质(MUP1, Cpt1a, Mat1a, aldh1l1, Cytb, H2-K1, Psmb1, marc2, Atp5j2, Sec24D, Trf, Rdh7, Apoe, Glud1, Gmfb, Alb, Hdlbp, Pzp, Etnk2, Nrn1, Serpina1a, Apoa2, GNMT)可能直接或间接地与MXRA7蛋白发生相互作用。其中,主要尿蛋白1(major urinary protein,MUP1)或其同家族蛋白质占所有候选克隆的1/6,提示其很可能是小鼠肝内与MXRA7蛋白有较强相互作用的蛋白质。通过基因重组在Hepa 1-6肝癌细胞系中同时过表达MXRA7和MUP1蛋白,荧光染色证明这两种蛋白质在细胞内共定位,应用抗MXRA7或MUP1的抗体进行Pull-down检测,则证明二者共同存在于细胞裂解液中。另外,重组MXRA7蛋白和MUP1蛋白在无任何其他蛋白质的缓冲液体系中直接形成复合体。因此,至少在小鼠肝组织体系中,MXRA7蛋白可能通过与MUP1等蛋白质的相互作用而发挥作用。     

培养介质pH和EGTA对水霉(Saprolegnia ferax)菌丝细胞肌动蛋白的分布与结构的影响

菌丝在pH 5.0—8.0介质中维持顶端生长,Rhodamin-phalloidin荧光探针显示在菌丝顶端都存在F-actin的“帽子”结构;加入EGTA到培养介质中不影响菌丝的顶端生长和actin的“帽子”结构。值得注意的是:菌丝的Rhodamin-phalloidin荧光强度大小与菌丝顶端生长速率成正比;在含有或不含有EGTA的pH5.0培养条件下,菌丝的生长速率均很低,且后部颗粒状的荧光斑点消失;在pH 3.0-4.0培养介质中菌丝生长停止,不但F-actin“帽子”结构消失,整个菌丝荧光也变得非常微弱无法观察,提示酸性pH可引起F-actin的解聚,从而导致生长速率下降甚至生长停止。     

人载脂蛋白(a)中Kringle域的结构与功能

Kringle domain,也称Kringle域是蛋白质分子中由3个二硫键形成的特殊的i环状结构。人体很多种蛋白质均含有这种结构,其中以载脂蛋白（a）中所含有的Kringle域数目为最多。载脂蛋白（a）是脂蛋白（a）的重要组成部分,而Kringle域在脂蛋白（a）完整颗粒的结构组装及载脂蛋白（a）的功能方面均发挥这十分重要的作用。载脂蛋白（a）与纤维蛋白溶解酶原之间具有高度的同源性,而且载脂蛋白（a）dp的部分Kringle域能够通过抑制血管生长实现抑制肿瘤生长的目的。这些研究进一步明确了脂蛋白（a）与载脂蛋白（a）的病理生理学意义,并对临床相关疾病的治疗提供了理论依据。     

F肌动蛋白作为胞间连丝组分的结构与生理学证据

以蒜(Allium sativum L.)瓣鞘外表皮为材料,利用荧光特异探针与共焦镜检术,结合透射电镜与免疫金标记对表皮细胞间胞间联络的性质、结构进行了系统观察.结果表明,加厚壁上的通道是由狭长的管状胞质和初生纹孔场上成束的胞间连丝衔接组成,前者实为原生质体的一部分.单个胞间连丝的孔径为60～70 nm,属正常胞间连丝范围,它们乃相邻细胞间共质联系的所在.荧光探针TRITC-Phalloidin (TRITC-Ph)标记的结果显示,整个通道上呈现红色荧光的纤索在接近初生纹孔场处明显变窄,与超微结构观察中所见的结构特点相吻合,共焦镜下观察到的初生壁上的荧光亮斑乃初生纹孔场中成束胞间连丝被标记的反映,从而有效地证实了F肌动蛋白在常态胞间连丝上的存在.免疫金标记实验显示在管状胞质中和胞间连丝上有金颗粒分布,这一结果为证实荧光标记物具肌动蛋白性质提供了有说服力的补充.     

F肌动蛋白作为胞间连丝组分的结构与生理学证据

以蒜 (AlliumsativumL .)瓣鞘外表皮为材料 ,利用荧光特异探针与共焦镜检术 ,结合透射电镜与免疫金标记对表皮细胞间胞间联络的性质、结构进行了系统观察。结果表明 ,加厚壁上的通道是由狭长的管状胞质和初生纹孔场上成束的胞间连丝衔接组成 ,前者实为原生质体的一部分。单个胞间连丝的孔径为 6 0～ 70nm ,属正常胞间连丝范围 ,它们乃相邻细胞间共质联系的所在。荧光探针TRITC_Phalloidin (TRITC_Ph)标记的结果显示 ,整个通道上呈现红色荧光的纤索在接近初生纹孔场处明显变窄 ,与超微结构观察中所见的结构特点相吻合 ,共焦镜下观察到的初生壁上的荧光亮斑乃初生纹孔场中成束胞间连丝被标记的反映 ,从而有效地证实了F肌动蛋白在常态胞间连丝上的存在。免疫金标记实验显示在管状胞质中和胞间连丝上有金颗粒分布 ,这一结果为证实荧光标记物具肌动蛋白性质提供了有说服力的补充。