pWPT-GFP慢病毒载体的改构及鉴定

目的:为实现慢病毒感染后可用抗生素筛选外源基因稳定整合的细胞,我们对慢病毒载体质粒(pWPT-GFP)进行了改构。方法:将三种抗生素抗性基因(puro、hygro、neo)连同其启动子分别克隆入慢病毒载体(pWPT-GFP)。酶切鉴定载体构建正确后,将这三种改构载体分别与辅助质粒psPAX2、pMD2.G共转染293T包装细胞,收获病毒上清并感染靶细胞,使用相应抗生素筛选细胞验证抗性基因的插入。结果:成功构建了重组慢病毒载体pWPT-GFP-puro、pWPT-GFP-hygro、pWPT-GFP-neo,通过调整病毒上清的用量可以达到靶细胞100%的感染效率;用相应抗生素筛选细胞证明了抗性基因的表达。结论:我们成功改构了慢病毒载体(pWPT-GFP),从而使病毒感染后用抗生素筛选稳定整合的细胞成为可能。     

放线菌来源活性天然产物发现研究进展

放线菌(Actinomycetes)是抗生素等活性天然产物的重要来源，在临床治疗病原菌感染等重大疾病方面发挥着重要作用。由于抗生素滥用等原因导致临床上出现的以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)等为代表的耐药病菌的种类和数量急剧增加，对人类生存造成了重大威胁。结合现代生物技术进展，加大放线菌来源新抗生素的开发力度刻不容缓。本文对新时期放线菌来源抗生素的发现现状、基于生理操作和基因操作的放线菌来源天然产物挖掘的技术方法等进行综述，以期对放线菌来源活性天然产物的发现提供借鉴。     

金黄色葡萄球菌体外抗菌活性分析

抗生素在临床上已广泛应用了数十年 ,在抗感染疾病中发挥了极其重要的作用 ,特别是金黄色葡萄球菌耐药菌株相继出现 ,给临床治疗带来困难。目前已知这种耐药是由位于染色体外的 DNA上的耐药基因所编码 ,并通过接合、转导和转化等方式在细菌间传播 ,其中以接合为最主要。同时在传播过程中 ,这种耐药基因又可不断重新组成新的耐药基因而产生对多种抗生素同时耐药的多重耐药菌株。因此本文对174株金黄色葡萄球菌的耐药机理及抗生素耐药性进行研究 ,对如何减少耐药菌株的产生控制医院内感染的流行 ,指导临床治疗有着一定的意义。1　材料与方法…     

噬菌体与抗生素联合疗法的可行性与挑战

噬菌体是能特异性感染细菌的病毒，自发现以来一直被用作抗菌药物。但随着抗生素的广泛使用，噬菌体疗法逐渐被淡忘。目前，抗生素耐药性（尤其是多药耐药）的出现，严重威胁着患者的生命和健康，抗生素耐药已成为一个全球性的公共卫生问题，因此寻找新的治疗方法非常必要。在西方国家长期被忽视的噬菌体疗法，如今正重现生机。本文通过查阅国内外大量病例，对噬菌体与抗生素联合治疗的一些实例进行了讨论，阐述了这种双重治疗的可行性，指出其面临的挑战，并且还阐述了噬菌体和抗生素之间可能存在的作用机制。     

肾移植术后抗生素预防性使用与绿脓杆菌的定植及感染

本文就肾移植术后的预防性抗生素使用与控制咽部绿脓杆菌的定值及其感染作了前瞻性研究。36例上述病人分为常规抗生素治疗和改进治疗两组各18人。肾移植术后常规治疗组病人咽部定植绿脓杆菌的16人(88.89%),发生绿脓杆菌继发感染的7人,感染率为38.89%。改进治疗组中,18例病人咽部定植绿脓杆菌的5人(27.78%),发生感染的1人,感染率为5.56%,此组患者感染明显低于常规治疗组(P<0.05)。绿脓杆菌的血清型83.15%为第四群6型。质粒分析表明咽部定植绿脓杆菌的同感染灶上的绿脓杆菌具有相同的质粒图谱。作者认为:肾移植术后预防性使用抗生素可以有效地预防术后感染,但必须控制抗生素的疗程和剂量,否则将会导致机体正常菌群微生态平衡失调,耐药性绿脓杆菌定植于局部,极易造成感染的爆发.     

农用抗生素筛选模型的发展概述

农用抗生素是指微生物产生的,可用于防治农业有害生物的次级代谢产物。随着筛选模型的贫乏,发现新型农用抗生素的难度越来越大,同时农用抗生素的研究应用与筛选模型密切相关,并随筛选模型的不断改进而向前推进。近年来,随着新技术特别是现代生物技术在微生物研究中的应用,从微生物中筛选新的农用抗生素的几率逐渐加大。主要对传统筛选模型、特定筛选模型以及高通量筛选模型进行了阐述,并对我国未来农用抗生素筛选模型的发展方向提出了预测。     

抗生素伴侣调节小鼠肠道菌群作用的研究

抗生素伴侣是我院最近研制的一种有生理活性的新型微生态制剂。它作为抗生素治疗的辅助制剂 ,可预防和治疗抗生素引起的人体肠道内菌群失调。长期以来 ,在治疗细菌感染时 ,习惯上使用抗用素。抗用素虽然对治疗各种细菌引起的感染十分有效 ,但也引起一系列的副作用。抗生素在抑制或杀死致病菌的同时 ,也抑杀了人体正常菌群 ,使正常的肠菌群失去平衡 ,影响人体的正常功能 ,而且极易引起二次感染 ,特别是对老年及儿童的影响较大 ,目前由于滥用抗生素所造成的严重后果 ,愈来愈受到人们的重视 [1 - 3 ] 。但抗生素由于其目前无法替代的巨大作用决…     

抗生素的三大不良反应

抗生素又称“抗菌素”，作用是杀灭导致疾病的细菌，因而对细菌引发的疾病有治疗作用。它对病毒引发的疾病是无治疗作用的。我们常用药中的抗生素有沙星类、霉寨类、头孢类，磺胺类等，如链霉素、氯霉素、甲砜霉素、头孢唑林、头孢拉定、头孢哌酮、阿莫西林、甲硝唑、磺安密啶、磺安甲恶唑等。抗生素的不良反应主要有以下三类：     

抗生素耐药性机理研究进展

抗生素通过干扰或抑制微生物的某一代谢环节,抑制微生物的生长或致死,抗生素耐药性的出现已成为治疗传染性疾病的最大障碍,不同抗生素,其耐药性机理各不相同,本文就几类常见抗生素耐药性的产生机理及传递作了简要综述。     

幽门螺杆菌感染治疗的新靶位

抗生素治疗幽门螺杆菌感染面临着细菌耐药性的威胁,研究该细菌未知基因的功能,寻找新的抗菌靶,将为预防和治疗幽门螺杆菌感染开辟新途径。将机体适应性免疫应答运用于幽门螺杆菌感染的治疗,亦有广阔前景。     

抗菌药物交替使用方案对细菌耐药性的影响

目前,由细菌多重耐药导致的医院感染问题日益突出,临床上很多病例因感染耐药菌而得不到适当的抗感染治疗,导致治疗失败。研发一种新的抗菌药物一般需要10年左右的时间,而产生一代耐药菌只需要2年的时间,如果依靠研发新的抗生素远远不能解决细菌耐药性问题。因此,对现有抗生素的合理使用是控制细菌耐药及其引起医院感染问题的根本措施。最近,一种新的抗生素交替使用方案,由于其显著的临床效果引起了各方面的广泛关注。     

抗生素耐药防控的One Health策略

抗生素耐药作为威胁公共卫生的巨大挑战已经制约了世界经济发展。我国抗生素使用量大,是世界上抗生素滥用最严重的国家之一。文中对人群、食用动物、环境中抗生素耐药产生的原因以及抗生素耐药现状进行综述,针对我国目前抗生素使用与耐药情况,从One Health理念提出了促进抗生素的科学使用、积极探索新型抗生素研发、建立抗生素立体监测网络系统、推广抗生素耐药教育、预防感染等措施,呼吁建立跨学科、跨部门、跨地域的交流与合作,推进我国抗生素耐药防控工作进一步开展,加强环境保护,维护人类与动物的共同健康。     

土壤噬菌体及其介导的抗生素抗性基因水平转移研究进展

土壤中抗生素耐药性的扩散对全球的公共卫生和食品安全造成威胁,严重挑战人类感染类疾病的预防与治疗.噬菌体介导的抗生素抗性基因(ARGs)的水平转移是环境中抗性基因扩散的重要机制.但是,噬菌体对土壤环境中抗性基因传播的贡献尚未见报道.本文综述了土壤环境中噬菌体的分布特征与影响因子,总结了纯化和富集土壤噬菌体的主要研究方法;...     

一种利用基因表达变化检测、鉴别抗生素的新方法

本研究利用基因表达变化构建一个高通量检测筛选抗生素化合物的新方法。采用含luxCDABE报道子的质粒pCS26和pMS402为载体,构建大肠杆菌重组质粒、筛选铜绿假单胞菌以及沙门氏菌的随机启动子库,获得对抗生素有反应的启动子-报道子融合体,构成抗生素筛选体系。通过重复实验筛选出15个启动子-报道子融合体,它们对不同抗生素有不同的反应,通过这一系统可以检测样品中的抗生素,并初步判断与现有抗生素的异同。使用这种方法可以进行高通量筛选潜在的抗菌物质。     

普通外科常见G+病原菌对抗生素耐药的分析

目的：研究普通外科感染的G^ 病原菌及其对常用抗生素的耐药性，以指导临床用药。方法：采用API—ATB System和Kirby—Bauer法，对外科临床标本进行细菌培养并检测其对多种抗生素的耐药性。结果：普通外科病房24个月共分离得到265株G^ 球菌，位列前3位的分别是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌。金葡菌对常用抗生素的耐药性较高，万古霉素仍是治疗G^ 球菌的有效药物。结论：监测G^ 球菌的耐药性，对指导外科临床抗生素的合理应用，提高外科抗感染疗效有重要意义。     

细菌耐药性应对策略研究进展

细菌耐药性(Antimicrobial resistance,AMR)持续增长,但新上市抗生素数量却持续下降。抗生素耐药基因(Antimicrobial resistance gene,ARG)和抗生素耐药菌感染已严重威胁人类健康。因此,需要多方面联合采取措施来应对AMR所带来的各种挑战,包括创新生物医药、改善抗生素使用和抗生素耐药监测系统、减少抗生素耐药基因产生速度、阻止健康护理相关感染和多重抗生素耐药菌传播与扩散、开发微生物学快速诊断方法与设备、减少临床和兽医抗生素滥用等。庆幸的是,AMR已受到各国政要、科学家和企业家等的高度重视与支持,相信随着新技术、新产品的不断问世和管理新措施的不断出台,AMR问题一定会得到控制和缓解。     

用抗生素给蛇类防病治病

抗生素原称抗菌素 ,是细菌、真菌、放线菌等微生物的代谢产物 ,以其低微的浓度就可以抑制或杀灭病原微生物及全身性细菌感染 ,是人类临床上常用的、不可缺少的高效药物之一 ,它同样适用于蛇病的预防和治疗。作者养蛇过程中常在蛇的食饵中加入适量抗生素 ,不仅能预防蛇类疾病 ,还能改善蛇类的新陈代谢 ,促进生长 ,提高蛇的成活率。　　蛇常用的抗生素有青霉素、红霉素、先锋霉素、氯霉素、庆大霉素、土霉素等。使用粉针剂型抗生素时 ,如青霉素、链霉素等 ,应现用现配 ,稀释后的药液超过 2 4h后禁止使用。　　现在市场上销售的兽用药物种类很…     

难治性下呼吸道感染的临床诊断和治疗

目的探讨难治性下呼吸道感染在医院的发生、临床诊断和治疗中的注意问题。方法回顾2005年难治性下呼吸道感染的病例情况,分析临床诊断和治疗方法。结果28例病例中患者年老(大于60岁)体弱者为17人,占60.7%;22例存在侵入性操作,占78.6%;所有病例的住院天数都在13 d或以上,抗生素的使用都在2种或以上。结论患者的体质和是否存在侵入性操作是感染的相关因素,临床诊断时要以症状和病原学的结果作为依据,治疗过程中要针对感染的病原菌合理使用抗生素。     

抗生素可以预防和治疗蛇病

人类常用于抑制或杀灭病原微生物及全身性细菌感染的抗生素同样适用于蛇病的预防和治疗。作者在养殖蛇类的实践中 ,常在蛇的食饵中加入抗生素 ,不仅能预防蛇类疾病 ,而且还能改善蛇类的新陈代谢 ,促进生长 ,提高成活率或饲料转换率。　　常用的抗生素有青霉素、红霉素、先锋霉素、氯霉素、庆大霉素、土霉素等。使用粉针剂型抗生素时 ,如青霉素、链霉素等 ,应现用现配 ,稀释后的药液超过 2 4 h后禁止使用。　　现在市场上销售的兽用药物种类很多 ,如果在给蛇治病时不注意配伍禁忌 ,不但起不到应有的预防和治疗作用 ,还可能引起病蛇中毒死亡。…     

动态监测血清降钙素原水平在优化全身性感染患者抗菌治疗策略中的价值

目的:评估动态监测血清降钙素原水平(PCT)在优化全身性感染患者抗菌治疗策略中的价值。方法:选取2015年4月~2015年12月全身性感染患者85例,随机分为常规组42例和PCT组43例。常规组按照《抗菌药物临床应用指导原则(2015年版)》决定抗生素疗程;PCT组在抗生素治疗后第3、5、7、10、14 d监测血清PCT水平,若PCT0.25 ng/mL停用抗生素、PCT≥0.25 ng/mL继续使用抗生素。分别比较两组患者间一般情况、传统全身炎症性反应指标及抗生素使用的种类、时间、费用以及预后的差异。结果:两组患者间治疗前后传统全身炎症性反应指标无明显差异(P0.05);两组患者间常用的抗生素种类并无明显统计学差异(P0.05);PCT组患者抗生素使用的天数为(9.9±3.9)d,明显少于常规组的(13.9±5.2)d,差异有统计学意义(P0.05);PCT组患者抗生素日均费用为(422.39±139.9)元,明显低于常规组的(514.78±155.2)元,差异有统计学意义(P0.05);两组患者间停用抗生素后14天后全身感染复发率以及28天病死率无明显统计学差异(P0.05)。但PCT组患者总住ICU时间明显少于常规组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:动态监测血清PCT水平在优化全身性感染患者抗菌治疗策略中具有重要价值。