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申本昌 《微生物学免疫学进展》1993,(3):23-26
丙型肝炎是一种严重危害人们健康的传染性疾病之,如何提高其确诊率是近年来流行病学及基础医学研究的热门课题,本文就聚合酶链反应(PCR)技术应用于丙型肝炎研究方面的进展作一综述。 相似文献
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丙肝病毒RNA磁分离PCR检测陈明哲,陈禹保(中国科学院北京科海医疗生物工程公司.100080)丙肝病毒(HCV)是输血后引起非甲非乙肝炎的主要病因。目前尽管已有HCV病体检测试剂盒,但尚无HCV抗原检测试剂盒。抗HCV抗体的检测不能确诊IICV的真... 相似文献
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PCR—ELISA在检测血清中丙型肝炎病毒上的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了一个替代目前使用的套式PCR的血清中丙型肝炎病毒RNA检测的新方法,该方法只需经过一次PCR扩增,即可通过对掺入标记物的PCR产物的ELISA检测得到与套式PCR相同的结果。与套式PCR相比,该方法具有耗时少、易操作、较少产生假阳性等特点。 相似文献
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抗—HCV阴性献血员中丙型肝炎病毒RNA检测及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
对95份抗—HCVIgG阴性献血员采用逆转录聚合酶链反应法(PCR)检测丙型肝炎病毒RNA,结果8次中有6次其检测出17份阳性标本(17/95,17.9%),复查抗—HCVIgG仍为阴性。对其中8份阳性产物中高变区1的序列分析结果表明均为不同株HCV序列.排除了PCR污染的可能性。对其中2份阳性产物测定了全序列并与HCV各基因型代表株的相应序列比较,与HCVⅡ型相应序列的核苷酸同源性为77%~79%。而与HCVⅠ、Ⅲ、Ⅳ相应序列间的同源性为62%~69%,表明为HCVⅡ型序列。结果提示献血员抗—HCVIgG筛选不能完全排除HCV感染者,漏检不是由于HCV基因序列变异.而是检测方法本身缺陷所致。 相似文献
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流行性腮腺炎是儿童常见呼吸道传染病,并发症多为睾丸炎、无菌脑炎等。个别患者甚至因严重的脑炎并发症而死亡[1]。故有必要对患者进行早期病原诊断,以利于早期治疗。腮腺炎病毒RNA中小疏水蛋白(SH)基因作为高变区在不同毒株的分子特性鉴别中比其它基因片段更... 相似文献
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为了解广州市儿童呼吸道支原体感染情况,用一条共同的上游引物,二条特异性的下游引物建立的PCR方法能同时扩增MP的691bp和MG的438bp粘附因子基因片段,但不会扩增其他支原体和细菌的DNA。 相似文献
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本文讨论了检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)的样本来源和处理,引物的设计,合成和选择等问题;重点介绍了蛋白酶K消化法,聚乙二醇沉淀法,异硫氰酸胍一步法,硅凝胶提取法和直接捕获法提取HCV RNA的5种方法,以及一步PCR法,常规RT-巢式PCR,直接RT-巢式PCR,化学修饰的RT-巢式PCR,联合PCR,双温PCR和定量竞争性PCR等7种PCR方法检测HCV RNA,用PCR检测HCV RNA方法的标准化以及检测HCVRNA具有非常重要的意义。本文还介绍了一种新型的定量方法-bDNA信号放大技术检测HcVRNA。 相似文献
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丙型肝炎病毒PNA打点杂交检测方法同RT—PCR方法的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
采用HCV基因组结构区C区cDNA探针和非结构区NS3-4区cDNA探针,建立了用打点杂交检测血清中HCV RNA的方法,同采用HCV基因组5'端非编码区的一对寡核苷酸引物通过逆转录-聚合酶链式反应检测血清中HCV RNA折方法相比较,发现两种方法都能快速早期和特异的检出血清中HCV RNA,但RT-PCR法敏感性优于RNA打点杂交法。对于无血清学指标的慢性NANB肝炎病人的诊断,可采用这两种方法 相似文献
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互补引物/模板评价毕加酵母表达的丙型肝炎病毒RNA依赖的RNA聚合酶 总被引:6,自引:0,他引:6
构建含有感染性克隆HCV非结构基因5b区序列的酵母表达质粒,转化毕加酵母,获得持续、可溶性HCV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)的表达,纯化蛋白在SDS-PAGE及Western blot中显示出特异性的64.2kD HCV RdRp蛋白带,同聚引物/模板测定显示RdRp的活性极低,延长反应时间,RNA聚合活性仅轻度升高.采用合成的杂聚互补引物/模板,未发现核苷酸在毕加酵母表达的RdRp作用下掺入模板,随时间延长,杂聚互补引物/模板降解. 相似文献
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QRT—PCR内标准RNA的选择与构建 总被引:4,自引:0,他引:4
谭文斌 《国外医学:分子生物学分册》1997,19(1):7-11
QRT-PCR是当前精确定量分析基因表达的一种最快速,第三的方法,其关键在于如何设立一个合适的内标准RNA。本文就这一方面最新进展进行概述。 相似文献
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PCR技术用于HBV DNA检测的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杨振 《微生物学免疫学进展》1995,23(4):231-234
PCR技术自八十年代在美国问世以来,已成功地用于多种病原体的检测,八十年代末在美国成功的利用此技术对HBV DNA进行了检测,我国在九十年代初也世开始了这方面的工作,并取得了成功,本文综合介绍国内外这方面的工作,并对一些具体的PCR方法进行了详细的介绍,并对利用PCR技术检测HBV DNA时因实验设计及操作误差造成的负面影响进行了讨论。 相似文献
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本文采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对212例住院及门诊病人其中肝病患者98例(慢性肝炎43例、肝炎后肝硬化47例、原发性肝细胞癌8例)进行HCV-RNA检测。结果98例慢性肝病患者血清中HCV-RNA-PCR阳性27例(27.6%),114例非肝病患者血清中HCV-RNA-PCR阳性9例(7.9%),两组间差异非常显著(P〈0.01),各种肝病患者的HCV-RNA-PCR阳性率均高于 相似文献
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