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十余年来,随着转基因技术的快速发展,基因表达调控的转基因研究已逐渐开展。本文在下列几方面介绍了转基因动物技术在基因表达调控中的应用。转基因动物可作为在体内研究外源基因表达调控的“反应器”,例如研究酶对底物作用的种属特异性。可以精确研究DNA顺式作用序列,探讨包括改变基因表达在内的组织和阶段特异性表达,增强子、内含子和核基质附着区的调节作用以及各基因间相互作用。转基因动物可研究发育中的时、空调节(如β-珠蛋白基因和同源异形盒基因)以及基因多级调节系统。通过同源重组得到基因缺陷动物(基因敲除动物)可探讨目的基因突变所致的异常表型以研究基因功能与调控。 相似文献
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一、前言最初研究高等动物基因表达调控采用的是细胞融合技术,然而细胞融合只能把两套基因组合并而并不能有选择地把特定的基因转入到细胞中。基因工程的诞生克服了如上的不足,推动了基因表达调控的研究。但在早期由于理论和技术的限制也只能把外源基因导入体外培养的动物细胞中,此法因局限于部分分化或完全分化的细胞中,故仍难于直接揭示胚胎发育过程中基因表达的动态分子机 相似文献
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神经组织中基因特异性表达的调控是由顺式作用元件和反式作用因子相互作用完成的 ,所以 ,寻找并鉴定这些顺式作用元件就成为这一研究领域中不可缺少的一个环节。利用报告基因在体外培养细胞的瞬时表达实验寻找和鉴定顺式作用元件是广泛应用的重要手段之一 ,但这一方法有其明显的局限性 ,即( 1 )体外培养细胞脱离了整体动物发育和生长环境的调节 ;( 2 )体外构建的可能包含转录调控序列的报告基因表达载体使研究的片段脱离了整个基因组背景 ;( 3)报告基因表达载体在体外培养细胞瞬时表达的研究体系使基因表达脱离了可能作为转录起始开关调节因… 相似文献
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转基因动物研究中存在问题 总被引:2,自引:0,他引:2
15年来已建了许多用作研究人类疾病的转基因动物模型。转基因动物已作为研究代谢调节、分化、发育中有关基因功能的工具,它已作为一种分子农场可生产基因产品等。但要看到,转基因还有许多问题要解决。首先是转基因的阳性率低,这是受了许多因素如DNA样品质量,分子大小和结构,动物种属,原核的可见性,注射针的调节和微注射技术等影响。通常转基因首建的阳性率在10-20%,有时甚至低于1%。在基因操作后,外源基因整合 相似文献
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戴斌 《国外医学:分子生物学分册》1994,16(4):161-165
本综述着重讨论在转基因动物中外源基因转移及表达的分子机制,包括外源基因在宿主染色体上整合的分子基础及其影响因素:启动子、内含子、增强子、反式作用因子及载体等各种因素对外源基因在宿主内表达的调节。 相似文献
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基质结合区与转基因动物的基因表达 总被引:2,自引:0,他引:2
基质结合区(MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用.这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向.文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述.指出在转基因动物中,MAR的应用能导致建立独立的基因活性结构域.它对基因高效表达无疑具有重要作用.MAR可能是一种新的顺式作用元件,与增强子、启动子协同作用调节基因的表达. 相似文献
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内含子对提高转基因动物基因表达效率的影响 总被引:10,自引:0,他引:10
综述了内含子在转基因动物基因表达中的作用,对内源性内含子和异源内含子对转基因表达的影响进行分析,讨论了内含子提高转基因动物基因表达效率的三种可能机制,并指出在表达载体构建中应考虑到内含子的重要性. 相似文献
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转基因动物技术及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
转基因动物技术及其应用张涛(北京医科大学生物遗传教研室北京100083)关键词转基因动物80年代初期,由于分子生物学和动物实验胚胎学的发展和相互渗透,使科学家可以借助实验手段,将特定的目的基因从某一动物体分离出来,进行扩增或加工,再导人另一动物的早期... 相似文献
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转基因动物的遗传修饰与应用(上) 总被引:6,自引:0,他引:6
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转基因动物的发展前景 总被引:4,自引:0,他引:4
随着新技术的发展和对基因功能的了解,转基因技术获得了更加广泛的应用。基因治疗载体慢病毒载体、精子介导基因转移(SMGT)和睾丸介导基因转移(TMGT)等方法的发展和完善,可能会取代传统的显微注射技术。用于细胞基因调控研究的RNA干涉技术和基因诱导表达方法,现在移植到了转基因动物中,并获得了理想结果。本展望了转基因技术在基因调控、制备生物反应器和改良畜牧动物等方面的应用和发展前景。 相似文献
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四环素调控SV40Tag转基因小鼠模型的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建四环素调控的SV40T转基因小鼠模型。方法同时显微注射外源基因p205-rtTA-C3和pTRE-Tag至FVB小鼠原核,注射受精卵移植到同期发情的假孕受体出生个体,经PCR和Southern检测获得阳性转基因小鼠。结果经PCR结合Southern检测得到rtTA和Tag双阳性转基因小鼠一只,rtTA单阳性两只和Tag单阳性一只。结论通过饮水给与四环素的双阳性小鼠可在卵巢中检测到Tag mRNA的表达。 相似文献
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转基因的整合与表达检测技术 总被引:2,自引:0,他引:2
本文着重介绍并比较转基因研究中外源基因整合(染色体及基因水平)与表达(转录及翻译水平)的各种检测方法,并就它们的适用范围、优缺眯等作了比较。 相似文献
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<正>前言 自人成为农牧民以来,就不断地试图改良牲畜品种和生产率,这本来是生存所要求,而现今是商业上所迫切需要的。传统的培养方法是以选择具有所需要特性的动物为基础,一段时间来,此法受到人工受精和相关参数统计分析技术应用的帮助而得到改进。尽管传统方法有效而且是成功的,但就其本质来说,仍然是逐渐前进的。近来经济和消费者的要求表明家畜生产率和品种都需要量变。例如, 相似文献
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猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究 总被引:3,自引:0,他引:3
将猪生长激素基因(PGH)克隆到质粒pUC19上,经酶切分析,确定其酶切图谱。把PGH转录起始位点以前的序列切掉,换上羊MT-1a基因的启动子,构建成可以调控的表达载体pSMTPGH,用于转基因动物的研究。采用微注射法将线状pSMTPGH导入猪、鼠和金鱼的受精卵中,得到了相应的转基因动物。对这些动物鉴定分析表明,外源基因整合率因动物不同而异,但该基因在这3种动物中的整合率均在9%以上,其生长速度都 相似文献