上皮性卵巢癌患者血清 microRNA-21 的水平及其临床意义研究

目的:检测上皮性卵巢癌患者血清中microRNA-21的表达,并探讨其作为标记物预测上皮性卵巢癌化疗耐药患者预后的可行性。方法:采用探针型实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测和比较20例上皮性卵巢癌患者和10例正常人卵巢血清标本中microRNA-21的表达,并分析血清microRNA-21水平与上皮性卵巢癌患者化疗耐药及其临床病理特征的相关性。结果:正常人、上皮性卵巢癌化疗敏感和化疗耐药患者血清中micro RNA-21的相对表达量分别为0.573±0.318、2.606±1.057、26.766±26.710,上皮性卵巢癌化疗敏感和化疗耐药患者血清中miR-21的相对表达量均显著高于正常人血清中miR-21的相对表达量(P<0.05),而上皮性卵巢癌化疗耐药患者血清中miR-21表达显著高于上皮性卵巢癌化疗敏感患者,差异有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌化疗耐药患者血清miR-21表达水平与其手术-病理分期无及是否发生淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05)。结论:上皮性卵巢癌患者血清microRNA-21水平显著升高,可能作为其化疗耐药的预测参考指标,但血清microRNA-21水平与上皮性卵巢癌化疗耐药患者的不良预后并无显著相关性。     

大鼠Mocs2基因跳跃型外显子可变剪接保留率的检测

可变剪接是真核生物基因表达调控的一种重要方式,它通过剪接位点调控ORFs (Open reading frames)区域外显子或内含子的表达,产生不同的mRNA剪接体,进一步翻译成具有相同或不同功能的蛋白质,从而对诸如发育、疾病、环境响应等生物学过程产生重要影响.已有文献报道,人类Mocs2基因exon 1a与exon 1b外显子发生互斥型可变剪接,产生的两个剪接体分别编码钼喋呤合酶的大小亚基,参与钼辅因子生物的合成过程.基于本课题组前期大鼠肺部组织RNA-seq测序的结果,发现Mocs2基因2号外显子转录后可被剪接或保留,产生两个不同的剪接体.为验证测序结果的准确性,本研究利用半定量PCR与实时荧光定量PCR两种方法检测大鼠脑、海马、肺组织中Mocs2基因2号外显子的保留率.半定量PCR方法检测大鼠肺、海马、大脑组织中Mocs2基因的保留率分别为(88.28±3.09)％、(99.44±0.24)％、(99.54±0.19)％.实时荧光定量PCR检测的保留率分别为(66.76±20.47)％、(75.60±12.44)％、(87.28±16.4)％.实验结果表明,Mocs2基因2号外显子在大鼠中存在可变剪接现象,且不同组织具有一定差异.本工作进一步验证了两种PCR方法检测前体mRNA可变剪接保留率的可行性.     

miR-450a-5p在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:检测miR-450a-5p在浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析miR-450a-5p的表达与浆液性卵巢癌临床病理特征之间的关系,探讨其在浆液性卵巢癌发生、发展中的意义。方法:采用实时荧光定量PCR技术,检测101例浆液性卵巢癌组织及对照50例正常输卵管伞端组织中miR-450a-5p的表达情况,并分析miR-450a-5p表达水平与临床病理特征之间的关系。实验数据采用统计学软件进行分析。结果:miR-450a-5p在浆液性卵巢癌组织中的表达量显著低于正常输卵管组织对照组(P0.01)。miR-450a-5p的表达水平与浆液性卵巢癌临床病理特征之间差异均无统计学意义(P0.05)。结论:miR-450a-5p可能作为抑癌基因,在卵巢癌的发生、发展中发挥重要作用,进一步的研究有望为浆液性卵巢癌的早期诊断及个体化治疗提供新的理论依据。     

MicroRNA-141在上皮性卵巢癌患者组织和血清中的表达及临床意义的探讨

目的：探讨微小RNA-141（miR-141）在卵巢癌患者组织和血清中的表达情况并初步探讨其作为肿瘤标记物早期诊断上皮性卵巢癌的可行性。方法：采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-timeRT—PCR）检测16例上皮性卵巢癌患者和4例正常人卵巢组织及血清标本中miR-141的表达;检测4例良性卵巢肿瘤血清中miR-141的表达。结果：miR-141在卵巢癌患者组织中相对表达量分别为（72．846±76．671）显著高于正常人（2．869±3．201）（P〈0．05）;miR-141在卵巢癌患者血清中相对表达量（31．581±52．885）显著高于良性卵巢肿瘤患者（0．668±1．196）和正常人（1．690±1．697）（P〈0．05）,后两组间表达无差异（P〉0．05）;miR-141表达随卵巢癌临床分期的进展呈上升趋势（P〈0．01）,在无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组（P〈0．05）,与组织分级和CA125的升高无关（P〉0．05）。在组织中miR-141表达水平与上皮性卵巢癌临床病理特征均未见明显差异（P〉0．05）。结论：miR-141可能在上皮性卵巢癌的发生发展中发挥癌基因的作用;miR-141用于检测上皮性卵巢癌敏感性和特异度较高,有望成为上皮性卵巢癌早期诊断的新指标。     

MicroRNA-141 在上皮性卵巢癌患者组织和血清中的表达 及临床意义的探讨

目的:探讨微小RNA-141(miR-141)在卵巢癌患者组织和血清中的表达情况并初步探讨其作为肿瘤标记物早期诊断上皮性卵巢癌的可行性。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测16例上皮性卵巢癌患者和4例正常人卵巢组织及血清标本中miR-141的表达;检测4例良性卵巢肿瘤血清中miR-141的表达。结果:miR-141在卵巢癌患者组织中相对表达量分别为(72.846±76.671)显著高于正常人(2.869±3.201)(P<0.05);miR-141在卵巢癌患者血清中相对表达量(31.581±52.885)显著高于良性卵巢肿瘤患者(0.668±1.196)和正常人(1.690±1.697)(P<0.05),后两组间表达无差异(P>0.05);miR-141表达随卵巢癌临床分期的进展呈上升趋势(P<0.01),在无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组(P<0.05),与组织分级和CA125的升高无关(P>0.05)。在组织中miR-141表达水平与上皮性卵巢癌临床病理特征均未见明显差异(P>0.05)。结论:miR-141可能在上皮性卵巢癌的发生发展中发挥癌基因的作用;miR-141用于检测上皮性卵巢癌敏感性和特异度较高,有望成为上皮性卵巢癌早期诊断的新指标。     

检测人老化胎盘组织中miR-182的表达

目的：通过检测miR-182在正常妊娠各期、老化胎盘组织中的表达,探讨miR-182在胎盘发育过程中的调控作用,并同时探讨miR-182与血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的相关性,为寻找胎盘老化特别是胎盘提前老化发生机制提供依据。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测42例标本（早孕绒毛和胎盘组织）中miR-182的表达情况。结果：miR-182在正常妊娠早孕绒毛组织、正常妊娠胎盘组织及老化胎盘组织中均表达。miR-182表达水平各个组间比较：早期与中期妊娠组、中期与晚期未足月妊娠组、晚期未足月与晚期足月妊娠组有显著差异（P〈0.05）;胎盘老化组与正常妊娠早期、中期、晚期未足月、晚期足月组有极显著差异（P〈0.01）;妊娠的早期、中期、晚期,miR-182的表达逐渐增多,老化胎盘组织中miR-182高水平表达。结论：miR-182与胎盘老化的发生高度相关,可能在胎盘老化机制中起重要的调控作用。     

大肠癌组织及癌旁组织中c—myc，COX-2和CD44v6基因表达量差异的检测

目的：通过检测大肠癌组织和癌旁组织中c-myc,COX-2以及CD44v6的表达水平,探讨这三种基因在大肠癌发生和发展中的意义。方法：应用实时荧光定量PCR技术检测了10例大肠癌组织和相应癌旁组织中c-myc,COX-2以及CD44v6基因表达水平的差异,并探讨了各基因在癌纽织中的表达水平与大肠癌临床病理指标之间的关系。结果：c-myc,COX-2以及CD44v6在大肠癌组织和癌旁组织中的表达均有非常显著性差异（P〈0．01）;癌组织中COX-2和CD44v6的表达与淋巴结转移、分化程度及Dukes分期有关（P〈0．05）。结论：c—myc,COX-2和CD44v6的异常表达均与大肠癌密切相关,三者从不同方面对大肠癌的发生和发展起到了重要作用,可作为早期诊断和预后的参考指标。     

大肠癌组织及癌旁组织中c-myc,COX-2和CD44v6基因表达量差异的检测

目的:通过检测大肠癌组织和癌旁组织中c-myc,COX-2以及CD44v6的表达水平,探讨这三种基因在大肠癌发生和发展中的意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测了10例大肠癌组织和相应癌旁组织中c-myc,COX-2以及CD44v6基因表达水平的差异,并探讨了各基因在癌组织中的表达水平与大肠癌临床病理指标之间的关系。结果:c-myc,COX-2以及CD44v6在大肠癌组织和癌旁组织中的表达均有非常显著性差异(P<0.01);癌组织中COX-2和CD44v6的表达与淋巴结转移、分化程度及Dukes分期有关(P<0.05)。结论:c-myc,COX-2和CD44v6的异常表达均与大肠癌密切相关,三者从不同方面对大肠癌的发生和发展起到了重要作用,可作为早期诊断和预后的参考指标。     

实时荧光定量PCR在猪肺炎支原体检测中的应用

实时荧光定量PCR技术是一种利用荧光检测方法来定量核酸的技术,具有高度的灵敏性、特异性和精确性.综述了荧光定量PCR技术的基本原理及其在猪肺炎支原体检测中的应用.     

CD147 在前列腺癌中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系

目的:研究CD147在还没前列腺癌组织中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法:选择2013年10月-2015年10月我院收治的前列腺癌患者61例作为研究对象,另选取同期接受手术治疗的前列腺增生患者49例作为对照组,术中收集前列腺癌患者的肿瘤组织和癌旁组织以及前列腺增生患者的组织标本,采用免疫组化法检测CD147在前列腺癌组织、癌旁组织及前列腺增生组织中的表达情况。结果:CD147在前列腺癌组织中的阳性表达率(95.08%)显著高于癌旁组织(32.79%)和前列腺增生组织(16.32%),差异具有统计学意义(P0.05);CD147在癌旁组织中的阳性表达率(32.79%)高于前列腺增生组织(16.32%),差异具有统计学意义(P0.05)。CD147的阳性表达与前列腺癌Gleason分级、临床分期、淋巴结转移及远处转移呈正相关关系(P0.05)。结论:CD147在前列腺癌组织中呈阳性表达,且Gleason病理分级≥5、临床分期T3~4、淋巴结转移N1及远处转移M1均为前列腺癌组织中CD147m RNA阳性表达的危险因素。     

Effects of flanking genes on the phenotypes of mice deficient in basigin/CD147

The induction of null mutations by means of homologous recombination is a powerful technique for clarifying the biological activities of target genes. However, the problems of the genetic background and flanking genes should be borne in mind. Here we employed a breeding strategy to compare three lines of mice deficient in the basigin (Bsg)/CD147 gene. The first line was F2 from F1 hybrid offspring of the 129/SV chimera and C57BL/6J. The second one was from a C57BL/6J congenic line. Both lines showed high embryonic lethality, sterility, and blindness. The third one was 'reverse F2' from 'reverse F1' hybrid offspring of the C57BL/6J congenic line and 129/SV. Surprisingly, this line showed a normal birth rate, while sterility and blindness persisted. Our results clearly separate the effects of the induced null mutation from those of flanking genes and the genetic background, and provide a useful means of investigating the biological functions of Bsg.     

细胞外基质金属蛋白酶诱导分子(CD147)在胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中的表达(英文)

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导分子(CD147)在胰腺癌细胞(Panc-1)及胰腺星状细胞(PSCs)的表达。方法:应用QRT-PCR,免疫细胞化学和免疫印迹分析方法检测Panc-1和PSCs细胞中EMMRPIN的表达,应用脱糖基化试剂N-glycosidase F及Endoglycosidase H鉴定CD147糖基化形式。结果:CD147在Panc-1和PSCs细胞质膜及细胞质中高表达,通过脱糖基化法首次鉴定出胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中CD147不同的糖基化修饰。结论:CD147的糖基化修饰具有细胞特异性,可能与细胞恶性程度相关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导分子（CD147）在胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中的表达

目的：探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导分子（CD147）在胰腺癌细胞（Panc-1）及胰腺星状细胞（PSCs）的表达。方法：应用QRT—PCR,免疫细胞化学和免疫印迹分析方法检测Panc-1和PSCs细胞中EMMRPIN的表达,应用脱糖基化试剂N—glycosidase F及Endoglycosidase H鉴定CD147糖基化形式。结果：CD147在Panc-1和PSCs细胞质膜及细胞质中高表达,通过脱糖基化法首次鉴定出胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中CD147不同的糖基化修饰。结论：CD147的糖基化修饰具有细胞特异性,可能与细胞恶性程度相关。     

CD147在调节性T细胞中作用的研究进展

CD147是一种免疫球蛋白超家族,它与肿瘤侵袭和转染,类风湿性关节炎,病毒入侵,淋巴细胞的迁移和活化,老年痴呆症,疟原虫入侵等病理过程密切先关,已成为癌症等疾病的新型药物靶标分子。作为一个单次跨膜蛋白,CD147的多功能性依赖于它的胞外结构域以及细胞膜和细胞外多种分子的相互作用。有研究发现CD147可作为细胞膜受体并且在上皮细胞,肿瘤细胞和免疫T细胞中均有表达。其可作为T细胞亲环素受体并具有趋化T细胞的功能。近几年研究发现,CD147在调节性T细胞高表达并且具有标志性意义。该文就以作为活性调节性T细胞标志的CD147的潜在作用进展综述如下。     

人脑胶质瘤中CD147 和MMP-2 的表达及临床意义

目的:通过探讨CD147和MMP-2在人脑胶质瘤中的表达及临床意义,为临床治疗提供参考。方法:选择2010年1月至2015年5月本院手术切除并经病理诊断确诊的脑胶质瘤标本70例作为观察组,根据WHO分型,将其分为低级别组31例和高级别组39例。另选取20例脑外伤患者并作内减压切除的标本作为对照组。采用免疫组化SP法检测CD147与MMP-2蛋白的表达,RT-PCR检测CD147mRNA表达,并探讨CD147表达与患者预后的关系。结果:观察组中CD147阳性表达率为75.71%,MMP-2阳性表达率74.29%,两者存在相关性(r=0.870,P0.05)。高级别组和低级别组CD147mRNA表达水平均强于对照组,差异有统计学意义(均P0.05),且高级别高于低级别组,差异有统计学意义(P0.05)。复发患者CD147阳性表达率显著高于非复发患者,差异有统计学意义(P0.05);生存时间5年患者CD147阳性表达率显著高于生存时间≥5年患者,差异有统计学意义(P0.05)。结论:人脑胶质瘤中CD147和MMP-2的表达与肿瘤恶性程度和患者预后密切相关,可为患者临床预后判断和临床治疗提供参考。     

TMAO通过CD147/MMPs通路诱导巨噬细胞活化

肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)可通过多种途径促进动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的进展,现研究发现,在临床上其与斑块稳定性存在密切联系,但其分子机制目前尚不明确.金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloprot...     

Novel Functions of CD147 in the Mitochondria Exacerbates Melanoma Metastasis

Melanoma is an aggressive form of skin cancer characterized by rapid invasion and metastasis. CD147 is known to be functioning in cell invasion. In this study, we showed that CD147 was translocated from the cell membrane to the mitochondria in advanced melanoma. Melanoma patients with CD147 localized to the mitochondria confer a worse prognosis. The mitochondrial CD147 levels are correlated with the invasion potential of various melanoma cell lines as well as mitochondrial energy metabolism. Depletion of CD147 decreased the activity of mitochondrial complex V. STRING analysis for protein-protein interaction networks (PPIN) in CD147-depleted melanoma cells showed that mitochondrial proteins HSP60 and ATP5B, a subunit of mitochondrial complex V, were node proteins. HSP60 upregulation was correlated with a worse prognosis of melanoma patients. Co-immunoprecipitation (Co-IP) assay indicates that CD147 interacts with HSP60. These data suggested that mitochondrial CD147 may prompt HSP60 to activate ATP5B, thereby promoting the mitochondrial aerobic oxidation and the invasive abilities of melanoma cells. Correlation analysis of the data acquired from patients was helpful to draw a 5-year survival curve for patients who screened positive and negative for mitochondrial CD147. This study unravels the function of CD147 in tumor invasion and highlights it as a potential tumor therapeutic target.     

人成骨肉瘤细胞CD147基因编码区的克隆和序列测定

克隆人成骨肉瘤细胞CD147基因编码区并进行序列测定。以人成骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用RT-PCR方法得到人CD147的编码区cDNA,克隆至载体pcDNA3．1( )中,酶切鉴定后进行序列分析。结果获得人CD147编码区基因和重组质粒pcDNA3．1( )／asCD147,并经DNA序列分析证实其序列和献报道一致。以上结果证明了CD147在成骨肉瘤细胞中也有表达,为进一步进行其结构和功能研究打下了基础。