人脑胶质瘤GDNF基因启动子I区H3组蛋白乙酰化修饰情况

目的：明确GDNF启动子I区在人脑胶质瘤中H,赖氨酸残基9位乙酰化（H3K9Ac）情况,探讨其对于GDNF在胶质瘤中表达的影响。方法：RT-PCR检测各组中GDNFmRNA的表达;建立基于Real．timePCR分析的染色质免疫共沉淀（CHIP）方法,检测12例胶质瘤与6例正常脑组织中GDNF基因启动子I区王H3组蛋白乙酰化情况。结果：Real-timePCR验证人脑胶质瘤GDNFmRNA的表达,转录水平随级另q的增高而增高,且低级别组、高级别组与正常组之间存在显著的统计学差异（P〈0．05）。启动子I区的H,组蛋白乙酰化水平,正常组与低级别组和高级别组之间比较均有显著性差异（P〈0．05）,且低级别与高级别之间也有显著性差异。结论：在人脑胶质瘤组织中,GDNF启动子I区发生了H3组蛋白高乙酰化修饰,这种修饰很可能会影响GDNF基因的表达。     

MMP-7和Survivin在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Wnt信号通路中基质金属蛋白酶7（matrix melluoproteinases7,MMP-7）和凋亡抑制基因Survivin在结直肠癌组织中表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色（Elivision）方法检测100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中MMP-7和Survivin蛋白的表达。结果MMP-7蛋白在100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中的阳性表达率分别为77．00％（77／100）和13．33％（8／60）,两组问差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin蛋白在100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中的阳性表达率分别为65．00％（65／lOO）和15．00％（9／60）,两组问差异有统计学意义（P〈0．01）。MMP-7与Survivin蛋白阳性表达均与肿瘤的淋巴结转移和Dukes分期有关（P〈0．05）,此外,MMP-7蛋白在结直肠癌中的阳性表达也与肿瘤的浸润深度有关（P〈0．05）。而MMP-7与Survivin蛋白的阳性表达无相关性（r=0．097,P〉O．05）。结论MMP-7和Survivin在结直肠癌中的高表达可能与结直肠癌的发生、发展、浸润和转移等相关,检测癌组织中MMP-7和Survivin的表达有助于为结直肠癌的病情进展及预后判断提供帮助。     

肾小球系膜细胞中硫氧还蛋白1过表达对基质金属蛋白酶9表达的影响

为进一步探讨硫氧还蛋白1（thioredoxin1,Trx1）过表达对高糖环境下肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinase9．MMP0）表达的影响．采用RT-PCR和明胶酶谱法检测细胞中MMP-9mRNA和酶活性的变化．用脂质体介导瞬时转染法转染正义Trx1及反义Trx1,观察高糖环境Trx1过表达对MMP9表达的影响．结果表明．HBZY-1高糖组与正常糖组比较,MMP9mRNA在12h,24h,48h时表达增加（P〈0．05）,同时酶活性于12h、24h、48h也明显增高（P〈0．01）．转染正义Trx1组细胞,MMP．9mRNA水平及MMP9酶活性,在高糖组与正常糖组差异无统计学意义（P〉0．05）;但转染反义Trx1组和未转染组细胞的MMP9 mRNA水平及酶活性．高糖组均比正常糖组表达增加,差异有统计学意义（P〈0．01）．提示Trx1过表达可抑制高糖环境诱导的肾小球系膜细胞MMP9高表达．     

重复性低氧对小鼠脑组织MMP-2及 MMP-9含量与活性的影响

目的：探讨重复性低氧对小鼠脑组织内MMP-2和MMP-9的蛋白表达量及活性的变化。方法：将BALA／C小鼠随机分成常氧对照组（I加）、急性低氧1、2、3、4次组（H1～H4）共5组。应用SDS-PAGE、Western—blot等生化技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测5组小鼠大脑皮层和海马组织内MMP-2及MMP-9的蛋白表达量及其活性的变化。结果：①随着低氧次数的增加,小鼠海马组织内MMP-2的蛋白表达量呈现先增后降的趋势,其中H4组MMP-2蛋白表达量的降低显著（P〈0．05,n=6）,而小鼠大脑皮层组织内MMP-2的蛋白表达量变化不明显。此外,在海马和大脑皮层组织内均未检测到MMP-2的活性组分;②海马组织内MMP-9的蛋白表达量随重复性低氧次数的增加,其含量也呈现先增后降的趋势,且H1组MMP-9表达量的增高和H4组MMP-9表达量的降低均具有显著意义（P〈0．05）。同样,海马组织内MMP-9活性组分的变化与其蛋白表达量变化趋势一致,与H0组相比．H1组MMP-9活性组分增高和H4组的降低均显著（P〈0．05）。大脑皮层组织内MMP-9表达量及其活性组分在脑低氧预处理过程中均无显著性变化。结论：MMP-2和MMP-9可能在脑低氧预处理过程中具有一定的作用．且提示其蛋白表达量及活性在大脑皮层和海马组织内的差异变化可能与大脑皮层和海马组织对低氧的选择易损性不同有关。     

孕酮对新生大鼠低氧缺血性脑损伤中MMP-3表达的影响

目的：研究孕酮（PROG）对新生大鼠低氧缺血后脑内基质金属蛋白酶3（MMP-3）表达的影响。方法：建立新生大鼠低氧缺血性脑损伤动物模型,伊文思兰（EB）染色和电镜观察新生鼠低氧缺血性脑损伤血一脑屏障的通透性改变;免疫印迹（Western blot）方法检测大脑皮层MMP-3表达。结果：电镜显示低氧缺血组血-脑屏障完整性明显破坏：EB染色结果表明低氧缺血组血-脑屏障通透性明显高于假手术组,差异极显著（P〈0．01）,孕酮组血-脑屏障通透性明显低于低氧缺血组,有显著性差异（P〈0．05）;Western blot结果显示低氧缺血组MMP-3蛋白表达显著高于假手术组（P〈0．01）;孕酮组MMP-3蛋白表达显著低于低氧缺血组（P〈0．05）。结论：孕酮通过减少MMP-3的表达,降低血一脑屏障的损伤,这可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

乳铁蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的：通过对乳铁蛋白生物学特性的研究,分析其在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法：通过免疫组化方法测定10例非肿瘤脑组织和46例胶质瘤（其中低级别胶质瘤27例（I级和II级）和高级别胶质瘤19例（III级和Ⅳ级）中乳铁蛋白的表达情况并分析二者的相关性。用RT—PCR技术及Westem—blot方法测定非肿瘤脑组织、低级别组胶质瘤和高级别胶质瘤组乳铁蛋白的表达量并分析二者的相关性。结果：乳铁蛋白在非肿瘤脑组织及不同级别胶质瘤中的表达情况不同,其在低级别胶质瘤中有表达,略低于非肿瘤脑组织;而在高级别胶质瘤中表达显著减少或者表达不明显,明显低于低级别胶质瘤和非肿瘤脑组织（免疫组化、RT．PCR及Western．Blot的P值分别为P=0．001、P=0．003、P=0．004）。结论：乳铁蛋白在非肿瘤脑组织和不同级别胶质瘤中的表达有差异,提示乳铁蛋白参与了人脑胶质瘤发生与发展的过程。高级别胶质瘤的高度恶性和高侵袭性可能与乳铁蛋白表达的下调从而丧失对肿瘤细胞的抑制作用相关。     

来氟米特联合依那西普对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

目的：研究来氟米特和依那西普联合使用对佐剂性关节炎（AA）大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法：建立AA大鼠关节炎模型,分为正常对照组、模型组、来氟米特组、依那西普组、来氟米特联合依那西普配伍组;采用关节炎指数评分法评价大鼠关节炎症程度,半定量RT-PCR和放射免疫法检测滑膜组织及血清中IL-1β、TNF-α表达水平,免疫组化方法检测滑膜组织中MMP－3含量。结果：①相较于AA模型组,来氟米特组、依那西普组和配伍组中大鼠的AI评分均显著下降（P〈0．01）,其中以配伍组关节炎指数为最低（P〈0．05）。②模型组大鼠血清及滑膜组织的IL-1β和TNF-α水平明显高于正常对照组（P〈0．01）,用药后各组的IL-1β和TNF-α水平均有所下降,并以配伍组降低最为明显（P〈0．01或P〈0．05）;③模型组大鼠滑膜组织MMP-3表达阳性密度显著高于正常对照组（P〈0．01）,用药后备组的MMP-3阳性密度降低（P〈0．01）,其中配伍组下降程度明显高于来氟米特组和依那西普组（P〈0．01）。结论：来氟米特和依那西普联合使用可明显减轻AA大鼠的关节炎症,降低血清和滑膜组织中IL-1β和TNF-α平,减少滑膜中MMP-3的表达,疗效优于单独使用来氟米特或依那西普。     

胶质瘤组织中PTEN、p57／Kip2蛋白的表达及临床意义研究

探讨PTEN、p57／Kip2在脑胶质瘤中的表达情况和临床意义。选取54例胶质瘤手术切除标本,采用sP法进行免疫组织化学染色。PTEN、p57／Kip2阳性表达率分别为48．1％（26／54）和44．4％（24／54）,两者在高度恶性组（Ⅲ～Ⅳ级）的表达强度明显低于低度恶性组（Ⅰ—Ⅱ级）,且随着胶质瘤的恶性程度不同表现出明显的统计学差异（P〈0．05）。PTEN与p57／Kip2的低表达可能参与肿瘤的生长分化和进展,可能提示预后不良。     

结直肠癌中Claudinl、ZEB-1和E-cadherin的表达及意义

目的探讨Claudinl、ZEB-1和E-cadherin在结直肠癌中的表达及三者之间的关系与临床病理的联系。方法免疫组织化学技术检测51例结直肠癌及癌旁组织中Claudinl、ZEB-1和E—cadherin蛋白的表达情况。结果在结直肠癌组织中Claudinl、ZEB-1、E—cadherin的表达率分别为68．6％、23．5％、56．9％,癌旁组织分别为37．3％、0、98．0％。三种蛋白在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达差异均具有显著性（P〈O．01）。Claudinl及ZEB-1的表达率在III_IV期组（87．5％、41．7％）高于I-II期组（51．9％、7．4％;P〈0．01、P〈0．01）,有淋巴结转移组（90．9％、45．5％）高于无淋巴结转移组（51．7％、6,9％;P〈0．01、P〈0．01）,ZEB-1表达率在高级别组（42．1％）高于低级别组（12．5％;P〈0．05）。E—cadherin的表达率在I—II期组（74．1％）高于Ⅲ—IV期组（37．5％;P〈O．05）,无淋巴结转移组（72．4％）高于有淋巴结转移组（36．4％;P〈0．05）。Claudinl、ZEB-1与E-cadherin的表达均呈负相关（P〈0．05）,Claudinl与ZEB-1的表达呈正相关（P〈0．05）。结论Claudinl、ZEB-1和E-cadherin在结直肠癌发展,浸润和转移中起着重要作用,三者可能存在协同作用。     

MMP - 9、VEGF、bFGF 在非何杰金淋巴瘤的表达及临床意义

目的：探讨MMP-9、VEGF、bFGF在非何杰金淋巴瘤（NHL）中的表达及意义。方法：免疫组化法。结果MMP-9、VEGF、bFGF在NHL中表达率分别为43．66％、33．80％、25．35％,均高于正常淋巴结组织中的表达,差异均有显著性（Pm=0．0023,Pv=0．001,Pb=0．0049）。组5年生存率明显低于MMP-9（-）组（P=0．008）。VEGF在T细胞型中表达率高于B细胞型（P=0．019）,VEGF阳性组治疗缓解率低（P=0．045）。巨块型NHL中bFGF表达率较高（P=0．028）,bFGF（＋）组5年生存率明显低于bFGF（-）组（P=0．041）。MMP-9、VEGF、bFGF之间无协同表达。结论：MMP-9、VEGF、bFGF在NHL中的表达高于正常淋巴组织,可能与淋巴组织恶变有关。MMP-9、bFGF均与生存期呈负相关,是NHL预后差的指标,联合检测更有助于判断预后。VEGF阳性组治疗效果差,提示VEGF阳性NHL患者加用VEGF靶向治疗可能会提高疗效。     

RECK及MMP-9蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义（英文）

目的：观察RECK基因及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在皮肤鳞状细胞癌（CSCC）中的表达,探讨其与肿瘤浸润转移的关系。方法：应用免疫组化SP法检测40例CSCC组织、17例癌旁不典型增生组织及14例正常皮肤组织中RECK及MMP-9蛋白的表达。结果：①RECK在CSCC、癌旁不典型增生及正常皮肤中的表达率依次增高（30.0%、47.1%、85.7%）,组间比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）;MMP-9蛋白在CSCC、癌旁不典型增生及正常皮肤中的表达率依次降低（82.5%、76.4%、28.6%）,组间比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）②RECK及MMP-9与CSCC的组织学分级、淋巴结转移密切相关（P均＆lt;0.05）;与CSCC患者的性别、年龄无关（P均＆gt;0.05）③RECK及MMP-9在CSCC中的表达呈负相关（r=-0.475p＆lt;0.01）。结论：RECK和MMP-9与CSCC的浸润转移密切相关,RECK在CSCC中表达减少或缺失可能是通过上调MMP-9的表达从而促进CSCC的侵袭与转移。     

腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2表达

目的:研究腮腺腺样囊性癌组织中抑癌基因PTEN、癌基因MDM2蛋白表达,探讨PTEN、MDM2在腮腺腺样囊性癌中两者之间的相关性,为将来临床应用提供参考。方法:选取腮腺腺样囊性癌手术存档石蜡标本30例,另取10例腮腺腺样囊性癌癌旁正常组织石蜡标本作为对照组,采用免疫组化SP法检验PTEN、MDM2表达情况。结果:腮腺腺样囊性癌和癌旁正常组织中PTEN蛋白的阳性率分别为20%(6/30)和70%(7/10),二者存在显著性差异(P0.05)。MDM2蛋白在两种组织中阳性率分别为66%(20/30)和20%(2/10)(P0.05),二者存在显著性差异(P0.05)(r=-0.657),在腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2的表达负相关。结论:PTEN、MDM2蛋白异常表达在腮腺腺样囊性癌的发生发展中起重要作用。     

结直肠癌PTEN基因表达及与p-ERK相关性研究

目的 研究结直肠癌中的PTEN、p-ERK蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在结直肠癌的发生发展中的生物学意义.方法 应用免疫组织化学染色快捷法,检测40例结直肠癌组织、18例结直肠腺瘤、13例结直肠正常黏膜中PTEN蛋白、和p-ERK蛋白的表达情况,比较PTEN蛋白表达与临床病理指标的关系,及其与p-ERK蛋白表达的相关性.结果 1.结直肠癌癌组织PTEN蛋白表达的阳性率(57.5％)明显弱于腺瘤(72.2％)及正常组织(100％),组间比较差异有显著性(P＜0.05),其表达水平与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期有关,与患者的性别、年龄,肿瘤大小及位置无关(P＞0.05)2.结直肠癌组织p-ERK蛋白表达的阳性率(72.5％)明显高于正常结直肠黏膜组(0.00％)及腺瘤组(66.6％),组间比较差异有显著性(P＜0.01),其表达随结直肠癌侵润深度增加、淋巴结转移、Duke分期的进展而增高.3.PTEN蛋白表达强度与p-ERK蛋白表达强度之间呈负相关(r=-0.452,P＜0.05).结论 提示抑癌基因PTEN的表达与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能由于PTEN蛋白的低表达或失表达不能有效抑制ERK磷酸化,使细胞发生癌变,并促进癌变细胞的浸润、转移.     

神经胶质瘤中PTEN、Ki-67和HIF-1α的表达及临床意义

目的:抑癌基因PTEN、癌基因Ki-67及HIF-1α对多种人类肿瘤的恶性进展均起重要的调控作用。本研究主要探讨PTEN、Ki-67及HIF-1α在人脑胶质瘤中的表达及临床意义,为胶质瘤患者预后的判定、分子病理学的诊断、基因靶向的治疗奠定理论基础。方法:在83例原发性人脑胶质瘤组织样本中,通过免疫组化的方法检测PTEN、Ki-67及HIF-1α的表达情况,并分析其表达相互间及其表达与肿瘤恶性级别之间的相关性。结果:在正常脑组织中,PTEN的表达均为阳性,Ki-67的表达均为阴性,10%(1/10)的样本HIF-1α的表达为阳性。在胶质细胞瘤中,PTEN的表达显著降低(P=0.001),而Ki-67(P0.001)和HIF-1α(P=0.001)的表达明显增高。随肿瘤恶性级别的增高,PTEN的表达呈降低趋势(P0.001),而Ki-67和HIF-1α的表达呈升高趋势(两者P均0.001)。相关性分析表明,PTEN的表达与Ki-67和HIF-1α的表达呈负相关(r值分别为-0.289和-0.304;P值分别为0.008和0.005),Ki-67的表达与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.833;P0.001)。结论:胶质瘤组织缺乏抑癌基因PTEN蛋白的表达,而高度表达癌基因Ki-67和HIF-1α。抑癌基因PTEN表达减少或失活,癌基因Ki-67和HIF-1α的过表达对胶质瘤恶性进展可能起到至关重要的作用。PTEN、Ki-67和HIF-1α蛋白的联合检测对胶质瘤恶性程度和预后的判定有十分重要的临床意义。     

BRCA1、PTEN、Rb、C-myc和C-myb在乳腺癌中的异常表达及临床意义探讨

目的 探讨BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白异常表达在乳腺癌发生、发展中的作用及其临床意义.方法应用免疫组织化学S-P法检测150例乳腺癌、20例不典型增生和30例良性增生性病变组织中BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白的表达;结合临床病理指标进行分析.结果 乳腺癌组织和不典型增生组织中 BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白表达与良性增生性病变组织中表达均具有显著性差异(P<0.05).BRCA1蛋白失表达率随乳腺癌组织学分级的增高而增高,在年龄<50岁和ER(雌激素受体)阴性时BRCA1蛋白失表达率增高.PTEN蛋白的失表达与淋巴结转移、ER失表达有关(P<0.05).Rb蛋白在乳腺癌Ⅲ级中失表达率较高,但无统计学差异(P＞0.05).C-myc蛋白的过表达与组织学分级、淋巴结转移及病理类型有关(P<0.05).C-myb蛋白的过表达与乳腺癌组织学分级有关(P<0.05).结论 BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白异常表达均在乳腺癌的发生过程中起作用;PTEN、C-myc、C-myb 蛋白的异常表达参与了乳腺癌的浸润和转移.     

子宫内膜癌中PTEN与PI3K-Akt通路的表达及意义

目的：研究PTEN与P1K3-Akt通路在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化技术检测正常子宫内膜组织（24例）、子宫内膜样腺癌组织（55例）及子宫内膜浆液性癌组织（26例）中PTEN、P13Kp110α及P—AKTSer473的表达情况,分析其表达与组织病理参数的关系。结果：免疫组化结果显示：子宫内膜癌的PTEN表达缺失率,P13Kp110α及p-AKTser473表达阳性率均高于正常子宫内膜组织,且正常子宫内膜组织与子宫内膜样腺癌组织比较有统计学意义（P〈0．05）;随着肌层浸润深度增加,PTEN表达缺失率增加（P〈0．05）。结论：PTEN的表达缺失及P13Kp110α与P-AKTSer473的表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关,尤其是在子宫内膜样腺癌的发生发展机制中占重要地位。     

大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区组蛋白高乙酰化可能参与了其高转录调控过程

目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因高转录与其启动子Ⅰ区组蛋白乙酰化的关系。方法:应用Real-time PCR和ChIP-PCR技术分别检测了大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达水平以及其启动子Ⅰ区组蛋白H3K9的乙酰化程度;利用Real-time PCR技术,检测了不同浓度的组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)或去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA表达的影响。结果:较之正常星形胶质细胞,C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达量极显著增高(P0.01),并且其启动子Ⅰ区H3K9的乙酰化水平也显著升高(P0.05)。C6胶质瘤细胞经Curcumin处理24 h后,gdnf基因mRNA的表达量随药物浓度的升高而降低,且100μmol/L作用浓度时其表达量下降了74.17%(P0.001);相反,TSA处理后gdnf基因mRNA的表达量呈上升趋势,且200nmol/L组其表达量约上升145.35%(P0.05)。结论:在大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区H3K9发生了高乙酰化修饰,这种修饰可能是其高转录的原因。     

PTEN和β-cat在尖锐湿疣、Bowen＇s病和皮肤鳞癌中的表达及意义

目的：探讨PTEN和β-cat在尖锐湿疣、Bowen＇s病和皮肤鳞癌中的表达及意义。方法：采用免疫组化法检测蛋白PTEN和β-cat在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen＇s病、皮肤鳞状细胞癌（Scc）中的表达。结果：在正常皮肤、尖锐湿疣、Bowen＇s病、皮肤鳞状细胞癌（Scc）中PTEN蛋白的高表达率分别为100%,80.95%,46.67%,36.67%;β-cat蛋白的异常表达率分别为16.67%,30.16%,53.33%,70.00%,与正常皮肤组织相比,Bowen＇s病及Scc中PTEN蛋白的高表达率表达下降（P〈0.05,P〈0.01）;β-cat蛋白的异常表达率明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。在Scc中两者的表达呈负相关（r=-0.416,P〈0.05）。结论：蛋白PTEN、β-cat在Scc的发生、发展中有重要的意义。     

急性冠状动脉综合症患者血浆溶血磷脂酸及基质金属蛋白酶-9水平的检测及意义

目的：探讨急性冠状动脉综合症（acute coronary syndromes,ACS）患者血浆溶血磷脂酸（lysophatidic acid,LPA）及基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP．9）水平的变化,探讨其在ACS中可能的临床意义。方法：入选100例ACS患者,根据病情将其分为怠性心肌梗死（AMI）组50例,不稳定型心绞痛（UAP）组50例,并入选40例健康者作为对照组,分别用无机磷定量法和酶联免疫吸附测定法测定血浆LPA、MMP-9水平。结果：AMI组血浆LPA、MMP-9水平显著高于UAP组（LPA：3．29±0．42vs2．67±0．37;MMP-9：481．7±86．5VS237．85±65．34,P〈0．01）并且两组均显著高于对照组（LPA：1．82±0．31;MMP-9：87．42±23．85P〈0．01）;LPA与MMP-9水平呈正相关（r=O．224,P〈0．05）。结论：UIA与MMP-9可能是提示不稳定斑块的形成、破裂,进而导致急性冠状动脉综合征的危险信号。