重组人肿瘤坏死因子α和白细胞介素6融合基因的构建和表达

本文利用ＰＣＲ技术和基因定位突变技术,将编码人肿瘤坏死因子α（ｈＴＮＦα）和白细胞介素６（ｈＩＬ－６）成熟肽的基因通过中间接头连接成编码单一蛋白的基因,构建了融合蛋白表达载体ｐＢＩＴ,并在大肠杆菌中得到了表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的电泳胶薄层扫描显示,融合蛋白的表达量是菌体总蛋白量的２０％,其分子量约为３７ｋＤ。活性检测证实,融合蛋白既有ＴＮＦ活性,又有ＩＬ－６活性。     

膝关节炎患者关节置换术后细菌感染严重程度与IL-1β、TNF-α、IL-6水平的相关性

目的探讨膝关节炎患者关节置换术后细菌感染严重程度与IL-1β、TNF-α、IL-6水平的相关性。方法选取2016年8月至2018年8月于我院进行治疗的70例膝关节炎关节置换术后细菌感染患者作为试验组,参照Michel Lequesen推荐的膝关节炎严重性判断标准将膝关节炎关节置换术后细菌感染患者分为极严重组、非常严重组、严重组、中度组和轻度组。选取同期来我院体检中心进行体检的健康者50例为对照组。采用全自动生化免疫分析仪测定血清IL-1β、IL-6及TNF-α水平。结果试验组患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平均明显高于对照组(均P<0.05)。极严重组患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著高于非常严重组、严重组、中度组和轻度组(均P<0.05)。非常严重组患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著高于严重组、中度组和轻度组(均P<0.05)。严重组患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著高于中度组和轻度组(均P<0.05)。IL-1β、TNF-α、IL-6水平与膝关节炎关节置换术后细菌感染严重程度呈显著正相关(均P<0.05)。结论膝关节炎关节置换术后细菌感染患者血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平明显升高,并且病情越严重,IL-1β、TNF-α、IL-6水平越高。     

人IL-6和TNF突变体重组融合蛋白表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达

本文利用PCR技术,对人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因进行了改造,并将其与人白细胞介素-6(hIL-6)成熟肽编码区cDNA进行融合,构建了5′IL-6-TNF△融合蛋白的表达质粒pBVIL6-TNFA△。DNA序列分析证明,PCR扩增片段核苷酸序列与引物设计序列及相应的cDNA序列完全一致;重组子用限制性内切酶酶切鉴定,含有正确的IL6-TNF△融合cDNA片段;表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,分子量约为37kD,与预计的相符合;生物学活性分析初步表明,该融合蛋白具有抗肿瘤活性。     

重组人骨保护素对激素性股骨头坏死患者骨密度及髋关节Harris评分 的影响

目的:探讨重组人骨保护素对于激素性股骨头坏死患者的骨密度和髋关节Harris评分的影响。方法:选取我院骨科已经确诊的110例激素性股骨头坏死患者,随机分为对照组(给予仙灵骨葆胶囊)和观察组(给予仙灵骨葆胶囊和重组人骨保护素),连续治疗4周,检测并比较两组患者治疗前后的骨密度、髋关节Harris评分、血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、Ⅱ型胶原羧基端端肽(CTX-Ⅱ)水平以及复发率变化。结果:与对照组相比较,观察组患者腰椎骨和股骨近端的骨密度较高平(P0.05);髋关节Harris评分总有效率(92.73%)显著高于对照组(76.36%)(P0.05)。两组血清TRAP及CTX-Ⅱ水平显著低于治疗前,且试验组血清TRAP及CTX-Ⅱ水平显著低于对照组(P0.05),与对照组相比,观察组复发率较低(P0.05)。结论:重组人骨保护素能够抑制骨吸收,提高骨密度和强度,改善髋关节功能,有望成为激素性股骨头坏死的新型治疗方法。     

白黎芦醇和香青兰总黄酮抑制哮喘小鼠TNF-α和IL-6的释放

为研究白藜芦醇和香青兰总黄酮对哮喘小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6 (IL-6)水平的影响,本研究采用卵清蛋白致敏来建立小鼠哮喘模型,给予白藜芦醇和香青兰总黄酮干预后,采用ELISA法检测小鼠BALF中TNF-α和IL-6的含量。结果显示,95 mg·kg^-1·d^-1的白藜芦醇和香青兰总黄酮均可降低哮喘小鼠BALF中的TNF-α和IL-6;95 mg·kg^-1·d^-1的白藜芦醇和香青兰总黄酮对小鼠体重有影响。本研究表明,白藜芦醇和香青兰总黄酮对哮喘炎症因子TNF-α和IL-6的释放具有一定抑制作用。     

大肠杆菌表达的人IL-6复性条件研究

采用稀释法复性,筛选重组人白细胞介素-6(rhIL-6)包涵体蛋白的复性条件。结果显示,复性液的浓度、pH值、复性时间和复性蛋白浓度,对重组人白细胞介素-6复性效果有很大影响。在复性液为2mol/L尿素、pH8.5、复性时间为24h和复性蛋白浓度50μg/ml条件下,重组人白细胞介素-6包涵体蛋白的复性效果最佳。     

维吾尔族与汉族支气管哮喘患儿血清IL-6、TNF-α与IgE水平比较

目的探讨并比较维吾尔族与汉族支气管哮喘患儿血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及Ig E水平的变化及临床意义。方法采用双抗夹心酶联免疫法(ELISA)分别测定100例汉族及100例维族哮喘患儿急性发作期、缓解期血清中IL-6、TNF-α及Ig E水平,并以200例健康儿童为对照。结果维族与汉族哮喘急性发作期患儿血清中IL-6、TNF-α及Ig E水平均高于哮喘缓解期及对照组,缓解期3项指标仍高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。维族对照组及哮喘缓解期、急性发作期IL-6水平均高于汉族,哮喘急性发作期与缓解期TNF-α低于汉族,急性发作期Ig E水平高于汉族,差异均有统计学意义(P0.05)。结论维族及汉族支气管哮喘患儿不同时期血清中IL-6、TNF-α及Ig E水平存在差异,掌握其变化规律对指导两民族支气管哮喘患儿的诊断及治疗具有十分重要的临床价值。     

骨巨细胞瘤M-CSF、IL-1和TNF-α免疫组织化学研究

本实验应用免疫组织化学方法,检测巨噬细胞相关抗原、巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ┐ＣＳＦ）、白细胞介素┐１（ＩＬ┐１）和肿瘤坏死因子┐α（ＴＮＦ┐α）在骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）中的表达,结果表明,在ＧＣＴ中,Ｍ┐ＣＳＦ主要由纤维母细胞样基质细胞（ＦＣ）分泌;巨噬细胞样基质细胞（ＨＣ）是单核┐巨噬细胞系早期的未成熟细胞,主要分泌ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α,少数多核巨细胞（ＭＧＣ）也可产生ＴＮＦ┐α。本文提示,ＧＣＴ中的三种主要细胞能分泌Ｍ┐ＣＳＦ、ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α细胞因子,通过自分泌或旁分泌作用相互影响,共同促进ＧＣＴ的发生、发展及其侵袭性的生物学行为     

蜂胶黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后IL-1β、IL-6和TNF-α含量的影响

目的探讨蜂胶黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO）,研究蜂胶黄酮对脑缺血再灌注脑梗死体积和行为学评分的影响,对脑组织内IL-1β、IL-6和TNF-α含量的影响。结果蜂胶黄酮能够减少MCAO脑梗死体积和行为学评分,降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量（P〈0．05）。结论蜂胶黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制与降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量有关。     

冠脉缺血对血清IL-6、TNF-α水平的影响与意义

通过对比有无侧枝循环的冠心病患者冠脉内缺血(CAI)前后白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,并与反映冠脉缺血强度的量化指标-缺血积分之间进行相关性分析,探讨CAI后早期炎性反应与术后再狭窄的机制,以及侧支循环的作用与意义.73例冠心病患者(Ⅰ),分为CAI组(IA)47例,单纯造影组(IB)26例,CAI组再分为有侧支循环组(IAa)16例,无侧支循环组(IAb)31例.参照Leaman冠脉积分系统,对CAI球囊阻断引起的冠脉缺血强度进行量化;检测正常对照组(Ⅱ)与冠心病组CAI手术前后的IL-6、TNF-α水平变化,并进行相关性分析.冠脉缺血性刺激前IL-6和TNF-α分别为9.601±1.789 pg.mL-1和27.014±1.970 pg.mL-1,在缺血刺激后4 h分别为26.998±1.890 pg.mL-1和79.052±1.555 pg.mL-1,呈显著性差异;有侧支循环组人均总缺血积分与人均最大缺血积分(分别为156.80±24.01与788.70±11.99),显著低于无侧支循环组(分别为341.78±30.58与1111.00±25.31).IL-6、TNF-α是反映冠脉缺血后早期炎性反应的敏感指标,缺血积分可作为反映CAI术中缺血/再灌注损伤程度的的量化指标,侧支循环可减轻冠脉缺血后早期炎症反应,对冠脉缺血有重要代偿与保护作用。     

重组人白细胞介素－6与肿瘤坏死因子突变体融合蛋白的构建及表达

针对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在肿瘤治疗剂量下产生的严重毒副作用及一些肿瘤细胞上白细胞介素－６（ＩＬ－６）受体明显增高的事实,根据ＴＮＦ结构与功能研究的最新信息,利用ＰＣＲ技术,对人ＴＮＦα基因进行了改造,并将其与人ＩＬ－６成熟肽编码区ｃＤＮＡ通过人工接头进行融合。融合蛋白在大肠杆菌中表达后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明,分子量约为３７ｋＤ;活性检测结果证实,该融合蛋白兼具有ＴＮＦ抗肿瘤活性和结合ＩＬ－６受体的能力,在高表达ＩＬ－６受体的人骨髓瘤细胞上测得的细胞毒活性较同样位点突变的ＴＮＦ高约３倍。     

连续肾脏替代治疗对脓毒症患者血清中TNF-alpha、IL-6 和IL-8 表达的影响

目的：探讨连续肾脏替代治疗（CRRT）对脓毒症患者血清中肿瘤坏死因子alpha（TNF-alpha）、白介素-6（IL-6）和白介素-8（IL-8）的 影响。方法：将我院2013 年1 月-2014 年6 月间收治的80 例脓毒症患者随机分为观察组与对照组各40 例,两组患者均给予脓毒 症常规治疗,观察组另给予CRRT 治疗。观察比较两组患者治疗前1 天,治疗后24 h,72 h空腹静脉血TNF-alpha、IL-6、IL-8 水平。结 果：观察组治愈率为85.0%（34/40）,明显高于对照组的55.0%（22/40）,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗24h、72h 后两组患者 TNF-alpha、IL-6和IL-8 水平均明显下降,其中观察组下降更显著,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：CRRT 能有效降低脓毒症患 者血清中TNF-alpha、IL-6 和IL-8 水平,有助于对炎症反应的正向调节。     

糖皮质激素对大叶性肺炎患儿血清TNF-alpha、IL-6、IL-8水平的影响

目的：探究糖皮质激素对大叶性肺炎患儿血清TNF-alpha、IL-6、IL-8 水平的影响。方法：选取2014 年3 月至2014 年8月我院收 治的大叶性肺炎患儿60 例,并将其随机分为对照组和实验组。对照组30 例,给抗炎、退热、镇咳、平喘等临床常规治疗;实验组30 例,在与对照组相同治疗的基础上加用糖皮质激素联合治疗。治疗结束后,比较两组患儿治疗前后血清TNF-alpha、IL-6、IL-8 水平的 变化。结果：治疗前,两组患儿的血清TNF-alpha、IL-6、IL-8 水平比较均无统计学差异(P 均>0.05);治疗后,两组患儿的血清TNF- alpha、 IL-6、IL-8 水平均较治疗前显著降低(P 均<0.05),且实验组患儿的血清TNF-alpha、IL-6、IL-8 水平均显著低于对照组,差异均有统计 学意义(P 均<0.05)。结论：糖皮质激素辅助治疗可降低大叶性肺炎患儿血清TNF-alpha、IL-6、IL-8 的水平,这可能是其治疗儿童大叶 性肺炎的药理学作用之一。     

全髋关节置换术用于股骨颈骨折患者的临床疗效评价及对血清OPG、BGP、ALP、CRP、IL-6的影响

目的:分析全髋关节置换术用于股骨颈骨折患者的临床效果及对血清骨保护素(OPG)、骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:选择我院2014年3月~2016年3月收治的102例股骨颈骨折患者,按抽签法分为对照组与研究组,每组各51例。对照组采用半髋关节置换术治疗,研究组采用全髋关节置换术治疗。比较两组的临床疗效,治疗前后Harris评分、血清OPG、BGP、ALP、CRP、IL-6水平的变化及术后并发症的发生情况。结果:治疗后,研究组的优良率显著高于对照组(P0.05);两组Harris评分、血清OPG、BGP、ALP、CRP、IL-6水平均较治疗前显著上升,且研究组Harris评分显著高于对照组(P0.05),而两组OPG、BGP、ALP、CRP、IL-6水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:全髋关节置换术用于股骨颈骨折的临床效果肯定,虽可引起血清OPG、BGP、ALP、CRP、IL-6水平上升,但未增加手术风险。     

24例人工全膝关节置换术患者手术前后的护理

目的：观察2000年3月至2003年4月人工全膝关节置换术（TKR）患者围手术期进行系统康复训练的护理.方法：选择接受TKR的患者24例30个膝关节,入院后进行术前康复教育和肢体的康复训练（包括肌肉、关节训练及步态训练等）,术后护理包括有针对性的心理护理及系统规范的康复训练.结果：本组术后随访6-12周,效果满意,优良率达95.8%,未发生并发症.结论：TKP患者围手术期间进行系统康复训练,可以减少膝关节并发症,增强膝关节活动范围,满足日常生活所需的关节活动,提高生活质量.     

前外侧入路治疗髋关节置换术患者的疗效及对血清CRP, IL-6,D-二聚体水平的影响分析

目的:探讨前外侧入路治疗髋关节置换术患者的疗效及对血清C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、D-二聚体水平的影响。方法:选择2013年2月~2015年1月经由我院诊治的102名人工髋关节置换术患者,均征求患者的意愿分为观察组和对照组。对照组54例通过常规的入路方式进行髋关节置换术,观察组48例采用前外侧入路方式进行髋关节置换术。手术前后比较两组患者的血清CRP、IL-6和D-二聚体水平,并通过随访比较两组患者的疗效。结果:治疗后,观察组患者的总有效率显著高于对照组(P0.05),两组患者的血清CRP、IL-6及D-二聚体在手术后12 h时升高,在7 d和14 d时,逐渐下降。观察组患者血清CRP、IL-6及D-二聚体水平在术后12 h、7 d和14 d均明显低于对照组(P0.05)。结论:前外侧入路对髋关节置换术患者的临床疗效较常规入路方式更显著,且可有效降低血清CRP、IL-6和D-二聚体水平,更加有利于患者的术后恢复。     

溃疡性结肠炎患者外周血C 反应性蛋白、血清降钙素原及白细胞介素-6 水平及临床意义

目的:分析溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)患者血清降钙素原(Procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平与病情严重程度的关系。方法:选择2013年5月-2015年5月在我院就诊的溃疡性结肠炎患者91例作为研究对象,另选择同期在我院接受健康体检的志愿者69例作为对照组。检测并比较两组研究对象血清降钙素原(PCT)、C反应性蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)的水平,并分析PCT,CRP及IL-6水平与溃疡性结肠炎的相关性。结果:溃疡性结肠炎患者PCT水平为(1.24±0.23)ng/m L,对照组PCT水平为(0.12±0.10)ng/m L,溃疡性结肠炎患者PCT水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);溃疡性结肠炎患者CRP水平为(105.27±19.93)mg/m L,对照组CRP水平为(7.62±2.97)mg/m L,溃疡性结肠炎患者血清CRP水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);溃疡性结肠炎患者IL-6水平为(248.15±35.60)ng/m L,对照组IL-6水平为(144.05±20.26)ng/m L,溃疡性结肠炎患者血清IL-6水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。溃疡性结肠炎患者血清PCT,IL-6及CRP水平之间均呈正相关关系(r=0.301,0.468,0.413,P0.01)。结论:溃疡性结肠炎患者血清PCT,CRP及IL-6水平均显著高于健康人群,其水平变化与患者病情严重程度有关。因此,我们在临床实践中应予以重视。     

血清IL-4、IL-6、IL-33与老年重症肺炎患者肠道菌群的相关性分析及对预后的影响

摘要 目的：探究老年重症肺炎患者血清白介素（IL）-4、IL-6、IL-33与肠道菌群变化的相关性及预后影响因素。方法：选取我院2020年1月-2022年1月期间收治的老年重症肺炎患者中筛选82例纳入重症组,从同期老年健康体检志愿者中选取50例纳入正常组。对比两组的IL-4、IL-6、IL-33与肠道菌群水平差异,Pearson相关系数分析肠道菌群与IL-4、IL-6、IL-33水平相关性,根据重症组随访6个月的预后情况分为生存组55例、死亡组27例,对比生存组、死亡组的临床因素差异,多因素Logistic回归模型分析重症肺炎死亡的影响因素。结果：（1）对比正常组,重症组的IL-4、IL-6、IL-33水平均明显升高（P<0.05）;（2）对比正常组,重症组的大肠埃希菌水平均明显升高且双歧杆菌水平明显降低（P<0.05）;（3）大肠埃希菌与IL-4、IL-6、IL-33均呈正相关,双歧杆菌与IL-4、IL-6、IL-33均呈负相关;（4）对比生存组,死亡组年龄、急性生理和慢性健康（APACHE-Ⅱ）评分、IL-4、IL-6、IL-33、大肠埃希菌、机械通气比例、餐后2 h平卧比例均明显更高且双歧杆菌明显更低（P<0.05）;（5）重症肺炎死亡的独立危险因素包括年龄增加、APACHE-Ⅱ评分升高、IL-4升高、IL-6升高、IL-33升高、大肠埃希菌升高、机械通气、餐后2 h平卧且独立保护因素是双歧杆菌升高。结论：老年重症肺炎患者存在明显的炎症反应与肠道菌群失衡,患者的IL-4、IL-6、IL-33、大肠埃希菌、双歧杆菌异常变化并且存在密切关系,老年重症肺炎患者的年龄、机械通气、餐后体位等因素均会影响其预后生存结局。     

重组hS100A6蛋白的原核表达及其对人骨肉瘤细胞系143B的生物学作用

目的:制备重组hS100A6蛋白,并研究其对人骨肉瘤细胞系143B的生物学作用。方法:构建pGST-HRV3C-hS100A6质粒,经转化至E.coli BL21,IPTG诱导表达融合蛋白GST-HRV3C-hS100A6,经超声破菌,谷胱甘肽-琼脂糖4B球珠纯化,GST-HRV3C酶切,再纯化,Western blot鉴定,分光光度法蛋白定量。以人骨肉瘤细胞系143B为研究对象,MTT检测细胞增殖,Hoechst检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测hS100A6对β-catenin表达的影响。结果:成功制备重组hS100A6蛋白,测得该蛋白产量约为4mg/L菌液。30μg/ml重组hS100A6促进143B细胞的增殖、迁移、侵袭以及β-catenin的表达(P0.05),对143B细胞的凋亡无明显影响(P0.05)。结论:成功制备重组hS100A6蛋白,30μg/ml重组hS100A6蛋白对143B细胞有一定的促进作用。     

IL-6 对胆管癌细胞凋亡的作用机制研究

目的：探讨不同浓度白细胞介素6（IL-6）对胆管癌细胞的凋亡作用及其机制。方法：采用胆管癌细胞株QBC939 进行试验, 用MTT 法检测不同浓度IL-6 对人胆管癌细胞系QBC939 增殖的影响,用Annexin V和PI染色检测不同浓度IL-6对人胆管癌细 胞系QBC939 凋亡的影响,RT-PCR 检测细胞内Bcl-2、Bax 的mRNA水平,并且将QBC939 细胞移植至裸鼠皮下观察移植瘤的 生长速度、重量以及体积的变化。结果：同时间段不同浓度IL-6 的QBC939 细胞增殖明显高于对照组（P<0.05）,且IL-6 的浓度越 高,其增殖的水平也越高,OD 值与IL-6 的浓度呈正相关关系;不同浓度IL-6 对胆管癌细胞的凋亡率较对照组明显下降 （P<0.05）,且随着IL-6 的浓度不断的增高,细胞的凋亡率逐渐下降,IL-6 的浓度与细胞的凋亡率呈负相关关系;对照组细胞培养 48 h 后的凋亡率显著高于培养24 h后（P<0.05）,而IL-6 实验组的细胞的24 h凋亡率与48 h凋亡率差异无统计学意义（P>0.05）。 Bcl-2 的mRNA水平随着IL-6 浓度增加逐渐升高,而Bax 的mRNA水平随着IL-6 的浓度增加逐渐降低,且IL-6 浓度与Bcl-2 mRNA水平呈正相关关系,IL-6 的浓度与Bax mRNA水平呈负相关关系。IL-6 实验组的肿瘤体积和重量与对照组相比均明显增 大（P<0.05）,且IL-6 实验组移植瘤的生长速度明显高于对照组（P<0.05）。结论：IL-6 能够促进QBC939细胞增殖,抑制其凋亡,可 能与上调Bcl-2 的mRNA水平以及下调Bax的mRNA水平有关。