丁酸钠对小鼠细胞干扰素基因表达的调节作用

某些核酸和蛋白质大分子合成抑制物是动物细胞干扰紊合成的有效超诱导物,它们在抑制DNA或蛋白质合成的同时,明显地促进其干扰素的合成。丁酸钠能可逆地抑制细胞增殖,并使组蛋白乙酰化,抑制DNA合成。它对人的类淋巴母细胞干扰素的合成     

雌激素在兔胚泡着床中的作用——子宫雌激素受体的研究

为了验证雌激素作用存在于完整的和去卵巢兔胚泡着床过程中,本文用~3H—雌二醇交换法测定了早期妊娠 D_3、D_5、D_7子宫组织的雌二醇受体浓度,并与去卵巢后仅补充孕酮的 D_7子宫作比较。结果显示:在 D_3、D_5、D_7的子宫细胞浆和细胞核中都存在雌二醇受体。妊娠7天去卵巢兔的子宫细胞核中雌二醇受体量与妊娠7天卵巢完整的兔作比较,二者无明显差异。这说明去卵巢后子宫细胞核中雌激素受体浓度并未受影响,因此雌激素作用依然存在。关于胚泡是否有雌激素受体的问题,本工作在胚龄5、6、7天胚泡中未测得雌二醇受体。据此,胚泡着床时,雌激素的作用可能主要通过母体子宫组织而发挥其生理效应。     

丁酸钠对小鼠细胞千扰素基因表达的调节作用

某些核酸和蛋白质大分子合成抑制物是动物细胞干扰素合成的有效超诱导物[1],它们在抑制DNA或蛋白质合成的同时,明显地促进其千扰素的合成。丁酸钠能可逆地抑制细胞增殖,并使组蛋白乙酸化,抑制DNA合成^[2,4]。它对人的类淋巴母细胞千扰素的合成也有明显的促进作用^[3]。     

雌二醇对大鼠颌下腺EGF、NGF生成的影响

为了研究雌二醇（estradiol-17β,E2）对颌下腺表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF)和神经生长因子（nerve growth factor,NGF)生成的影响,研究采用免疫组织化学方法,对外源性投予雌二醇后的大鼠颌下腺进行了观察。结果证实E2明显促进颌下腺EGF和NGF的生成。提示雌二醇可能对EGF和NGF的合成起重要的调节作用。     

在大鼠胚泡着床过程中孕酮及其受体含量的变化

本文测定了早期妊娠大鼠(D_1—D_7)血清和子宫组织中孕酮和孕酮受体含量;对着床点和未着床子宫组织中的孕酮和受体含量作了比较;分析了血清和子宫组织中孕酮与雌二醇-17β含量的比值。初步结果表明:(1)血清孕酮含量在 D_4明显升高,达到44.13±5.69ng/ml,但子宫组织中的孕酮含量一般随妊娠时间逐渐升高;(2)胞质受体在 D_1最高(45304±1008分子/细胞),在 D_6最低(1121±149分子/细胞),而核受体含量在 D_6比 D_5和 D_7显著升高;(3)孕酮与雌二醇-17β的比值无论在血清和子宫组织中都是在 D_5和 D_7为最高;(4)在 D_6着床点子宫组织孕酮含量明显高于非着床部位,在 D_7两者无异;(5)在 D_6着床点中核受体含量要比未着床点部位高4倍;在 D_7着床点中胞质受体含量明显高于 D_6,也明显高于 D_7中非着床部位子宫胞质受体量。上述资料表明,(1)在 D_5(大鼠胚泡着床时间)子宫贮留更多的孕酮,这可能有利于子宫处于一种“静态”环境,以利于胚泡着床;(2)在 D_6着床点孕酮核受体含量增加,这可能是由于着床的胚泡局部分泌一种或一些因子,发动或加强激素受体复合体由细胞质向细胞核的转入,(3)在 D_7子宫组织中,孕酮水平明显上升,这说明胚泡至少在 D_7已能合成孕酮。     

鳗鲡繁殖生物学研究Ⅴ．性类固醇激素诱导雌鳗促性腺激素(GtH)分泌和卵巢发育的作用

多次注射雌二醇或睾酮对雌鳗促性腺激素(GtH)的合成与分泌活动以及卵巢发育都有明显的促进作用,其中睾酮的作用更较雌二醇显着;多次注射LHRH-A的促进作用则不明显.多次埋植雌二醇或睾酮都能促使脑垂体合成GtH,但所取血清样品中的GtH含量都未见明显增加;多次埋植雌二醇后血清中卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢GSI增长幅度小,表明埋植雌二醇虽能促使肝细胞合成卵黄蛋白原并释放到血液中,但未能全部渗入卵母细胞内;多次埋植睾酮后血清中的卵黄蛋白原含量虽未见明显增加,但卵巢明显发育长大,这表明埋植睾酮能促使肝细胞合成的卵黄蛋白原迅速地通过血液运送到卵巢,并渗入卵母细胞内.       

酪氨酸对大鼠子宫卵巢和睾丸组织核酸合成的影响

据报道,酪氨酸可能影响生殖机能。本实验证明,酪氨酸对大鼠子宫、卵巢、睾丸和肝脏的 RNA 合成有显著抑制作用,同对照组比较,各组P<0.001;对DNA合成也有抑制性影响,各组P<0.05—0.01。而酪氨酸不影响~3H-UR或~3H-TdR 对心脏、脾脏和肾脏核酸的参入。提示酪氨酸对核酸代谢的影响有器官特异性。实验还比较了酪氨酸、孕酮和放线菌素D 对大鼠子宫和卵巢核酸合成的作用,结果表明,三者对DNA和RNA合成均有抑制效应。提示酪氨酸可能是影响大鼠某些性器官核酸生物合成的因子之一。     

利用DNA芯片技术高效合成OstreococcusTauri叶绿体基因组

目的：21世纪以来,随着合成生物学的高速发展及其所遇到的问题,开发下一代DNA合成技术已经成为了必然趋势。基因芯片技术和DNA大片段组装技术是建立下一代DNA合成平台的关键技术力量。方法：为了开发具有工业化标准的DNA芯片一基因组合成平台,我们首次利用电化学DNA芯片和DNA大片段组装技术合成了72kb的Ostreococcusmud的全叶绿体基因组。结果：首先,我们使用电化学DNA芯片合成仪合成了564条150bp的OligoMix,并成功扩增分离了其中96％的Oligo序列,剩下的基因组序列是通过传统的固相亚磷酰胺三脂合成法合成。在此基础上,我们利用DNA重组技术将564条150bpOligo片段分三步克隆到了一个pGSYN系统。通过高通量测序,我们证实叶绿体基因组被成功地人工合成。整个合成成本大约是目前传统基因合成成本的10％．20％。结论：研究证实基因芯片技术和DNA大片段组装技术的应用是能够明显的降低现阶段基因组合成工艺的成本。新技术的成熟推广和成本的有效控制也会进一步加速科学家对基因组功能的深入研究以及合成生物学的质的飞跃。     

基于数据挖掘分析MTERF2基因在子宫内膜癌的表达及意义

目的:基于数据挖掘分析线粒体转录终止因子2(MTERF2)基因在子宫内膜癌及正常子宫内膜组织中的表达情况,并进一步探讨MTERF2对子宫内膜癌患者预后的影响。方法:利用Oncomine数据库分析MTERF2基因DNA拷贝数在子宫内膜癌组织中的变化;利用cBioportal分析MTERF2基因在子宫内膜癌组织中的突变情况;通过基因表达谱动态分析(GEPIA)探讨人体正常组织及其相应的肿瘤组织中MTERF2基因的表达差异;经MethHC分析子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中MTERF2基因DNA启动子区甲基化水平的差异;利用OncoLnc对MTERF2基因的表达水平与子宫内膜癌患者生存率做Kaplan-Meier生存分析和Log-Rank检验;在String-DB数据库中探索MTERF2基因在线粒体DNA表达调控过程中关系密切的相关基因。结果:与正常子宫内膜组织相比,子宫内膜癌组织中MTERF2基因DNA拷贝数无明显变化(P0.05),在mRNA水平呈显著低表达(P0.05),DNA启动子区甲基化水平显著降低(P0.005);MTERF2基因的表达水平与子宫内膜癌患者的总体生存时间无显著相关性(Log-Rank P0.05);TFB1M、TFB2M、POLMT、MTERFD1、MTERFD2、PTCD1、SSBP1、COA3、HDGFRP3等基因与MTERF2基因关系密切,可能存在相互作用。结论:大样本数据挖掘能迅速获取子宫内膜癌组织中MTERF2基因表达的相关信息,为深入探究MTERF2基因在子宫内膜癌发生发展中的作用机制及其预后价值奠定基础。     

雌激素对兔子宫内膜细胞EGF受体和细胞周期的调控

 由受体放射配基结合分析证明家兔子宫内膜细胞的EGF受体Kd值为0.53nmol/L,每个细胞的最大结合容量为1.11×10~4结合位点。10~(-10)mol/L雌二醇处理24h,细胞的最大结合容量增至2.75×10~4结合位点数/细胞,而Kd值无明显变化,可是,当10~(-5)mol/L雌二醇处理24h,细胞的EGF受体结合率,DNA合成速度率均下降。G_0/G_1期细胞比值明显下降,而G_2+M期和S期细胞明显上升。     

采用磁微粒分离酶联免疫法构建基于KGN细胞的雌激素生物合成筛选模型

雌激素在机体生长发育中发挥着重要作用,其合成代谢紊乱会导致乳腺癌和骨质疏松等疾病发生.目前,基于细胞的雌激素合成筛选模型需用到放射性底物,对环境污染大,成本较高,限制了具有组织特异性调控雌激素合成的药物筛选.我们以高表达芳香化酶的KGN细胞为检测对象,比较基于聚苯乙烯酶联免疫法和磁微粒分离酶联免疫法的雌二醇ELISA试剂盒的交叉反应和灵敏度,发现相对于聚苯乙烯酶联免疫法,磁微粒分离酶联免疫法能够稳定高效的检测雌激素合成.进一步比较培养基中酚红和底物睾酮对雌二醇检测的影响,成功建立通过磁微粒酶联免疫法检测KGN细胞雌二醇合成的筛选模型.     

丁酸钠等对小鼠腹水型肝癌全组蛋白电泳图谱及DNA含量的影响

Pieler等用丁酸钠等诱导药物作用于小鼠神经母细胞瘤细胞系,发现在抑制细胞分裂,诱导形态分化和一系列生化变化的同时,出现组蛋白Hl~0的积累。一般认为,组蛋白Hl~0是在分化程度高,DNA合成不旺盛的组织中才含有的一种赖氨酸丰富的组蛋白,它在细胞分裂活跃的组织如胸腺、癌细胞系中则很少或完全缺如。它和DNA合成呈反相关。为了探讨丁酸钠等药物抑制癌细胞的机制,及组蛋白Hl~0与DNA合成的关系,我们首先比较了小鼠腹水肝癌和正常小鼠肝全组蛋白的电泳图谱,并观察了丁酸钠等药物对小鼠腹水肝癌细胞的全组蛋白电泳图谱及DNA含量的影响。     

性类固醇激素对去势和未去势雄鼠脑微管蛋白合成的影响

雌性激素在某些方面改变着神经功能,在雌性激素敏感的神经元中,雌二醇调节各种PNA的表达,包括rRNA、神经多肽和神经传导物受体。这咎影响可能伴有在基因产物合成方面的相应改变或翻译后修饰。最近的研究已经揭示雌性激素能改变轴突生长以及突触器度。在我们以前的实验中注意到性别对脑微管蛋白合成的影响,也发现雌性激素可刺激雄鼠脑微管蛋白合成。雌性激素可能是成年动物神经突生长的一种调节物。这种假设已经得到深入研究和证实;发现性激素对大脑皮质、海马、中脑和间脑神经元的形态和数量有着重要的影响,并改变神经突生长和突触的连接。实验分为去势（GM）和未去势（IM）两组。第一组（GM）为1月龄鼠,去势后10天分为睾丸酮（GMT）、雌二醇（GME）、雌二醇加孕酮（GMEP）三个治疗实验组和一个对照组（GMC）。第二组（IM）为老年雄鼠,分为睾丸酮（IMT）、雌二醇（IME）、雌二醇加孕酮（IMEP）三个治疗组二组（IM）为老年雄鼠,分为睾丸酮（IMT）、雌二醇（IME）、雌二醇和孕酮（IMEP0三个治疗组和对照组（IMC）。对照组注射芝麻油。处理结束,迅速断头,制备脑匀浆液。取上清液进行^H秋水仙碱标记反应,液闪计数,离微管蛋白的生成量。实验结果如表一：微管蛋白每分钟的放射量在GM组中,GME比GMC增加37％－43％,GMT与GMC增加18％－23％;IM组中,IME比IMC增加34％,IMT比IMC增加13％－15％。睾丸酮和雌二醇均能刺激6月龄鼠脑微管蛋白的合成,但两者作用有明显差异,雌二醇作用强于睾丸酮。而且对雌雄鼠具有相同作用,对成年和老年鼠均能促进脑微管蛋白合成。微管蛋白是神经轴突和树突生长必需的成分。对于脑组织和脑功能的至关重要。雌性激素能促进雌雄鼠脑发育临界期以后脑微管蛋白的合成。因而,在临床上可以用于治疗脑发育缺隐和延缓衰老。甲状腺激素也具有促进微管蛋白合成的作用。甲状腺激素缺乏会引起神经细胞分化和神经突生长的停滞。但是,它的作用仅限于胎儿至新生儿早期。雌性激素可以于脑发育时限之外替代甲状腺。衰老首先开始于神经系统,然而波及其它器官或组织。脑衰老的原因是由于一些神经元死亡,突触未端减少,轴突、树突萎缩。外源雌性激素可以促进脑微管蛋白的合成,因而可以延缓衰老。对于微管蛋白的合成,与雌二醇相比,睾丸酮有较弱的促进作用。这被解释为：睾丸酮是通过它的芳香化作用转变成雌二醇而发挥作用的。因而,睾丸酮能否起作用槿起作用的大小,取决于其芳香化程度的大小。如果受到如雌二醇拮抗剂的抑制,睾丸酮的作用甚至会消失。     

Snail-shRNA抑制子宫内膜癌细胞的增殖

目的探讨子宫内膜癌细胞中Snail水平变化与子宫内膜癌细胞增殖的关系。方法免疫组织化学检测Snail在正常子宫内膜组织与子宫内膜癌组织中表达的差异性;CCK-8实验检测应用Snail-sh RNA沉默Snail对子宫内膜癌细胞增殖的影响。结果在子宫内膜癌组织中,Snail的表达明显高于正常子宫内膜组织。Snail-sh RNA沉默子宫内膜癌细胞ISK细胞中Snail表达后,ISK细胞增殖能力明显下降。结论 Snail通过促进细胞增殖参与子宫内膜癌的发生和发展。     

花生种子萌发早期胚轴DNA合成与种子活力的关系

随着花生种子萌发率和活力指数的下降,胚轴DNA开始合成的时间推迟,其合成水平也降低。但DNA合成都是先于吸胀的12h(高活力胚)或18h(低活力胚)出现一个峰,然后再持续上升。腐胺预处理明显地促进老化胚轴萌发早期(12～2dh)的DNA合成。钙离子预处理则有一定抑制作用,但两种预处理均能提高种子的活力指数,并能促进吸胀30h以后的DNA合成。     

中药异位康冲剂治疗子宫内膜异位症小鼠的研究

目的：探讨中药异位康冲剂对小鼠子宫内膜异位症的作用及可能机理。方法：通过对小鼠一般情况、血常规、肝肾功及各主要脏器的组织学观察,观察中药异位康冲剂急性和长期毒副作用。通过一般情况、阴道脱落细胞观察、激素检测、病理组织学检查及血液流变学的改变,了解中药异位康冲剂对小鼠子宫内膜异位症模型的药理作用。结果：急性和长期毒性实验表明,中药异位康冲剂无明显毒性反应。异位康冲剂能抑制大鼠子宫内膜异位模型,降低血清雌二醇水平（P〈0.01）。病理学观察显示异位子宫的内膜腺体及腺上皮明显萎缩,其作用与丹那唑相似。结论：中药异位康冲剂无明显毒副作用,可促进子宫内膜异位组织细胞凋亡、抑制子宫内膜异位组织增殖,为临床用药提供了实验依据。     

大白菜花药培养中花粉早期DNA的合成

应用显微放射自显影技术,在大白菜(Brassica pekinensis Rupr.)花药离体培养初期观察了~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入花粉核及其DNA复制类型。花粉去分化进入第一次孢子体分裂主要发生在DNA合成的单核和非均等分裂的营养核的花粉粒中。 实验证明花粉的DNA合成在低温预处理过程中已经开始,离体花药培养后,大大促进花粉DNA的合成。花粉单核在培养后24小时~3H-TdR掺入达到高峰,花粉有丝分裂产生两个均等子核的最大数量是在培养后48小时。 讨论了花药体细胞组织——绒毡层和药内壁对花粉核DNA合成的影响。     

1,4—二取代酰氨基硫脲类化合物(DATCDs)的植物生理效应与应用研究——Ⅴ.DATCD-A对离体黄瓜子叶扩张及核酸代谢的影响

本实验以离体黄瓜子叶为材料,研究了 DATCD—A 对子叶扩张及核酸代谢的影响。结果表明,DATCD—A 可显著地促进离体黄化子叶扩张,使其鲜重明显增加;并且在处理后期逐渐提高子叶干重。在离体子叶扩张变绿的过程中,DATCD—A 促进离体黄化子叶 RNA、DNA 含量和 DNA/RNA 比率明显上升,且 RNA 的增加发生在 DNA 合成增加之前。凝胶电泳证明,RNA 的增加主要是25s 和18s 的 rRNA。     

鳗鲡繁殖生物学研究Ⅴ.性类固醇激素诱导雌鳗促性腺激素分泌…

多次注射雌二醇或睾酮对雌鳗促性腺激素的合成与分泌活动以及卵巢发育都有明显的促进作用,其中睾酮的作用更较雌二醇显著;多次注射ＬＨＲＨ－Ａ的促进作用则不明显。多次埋植雌二醇或睾嗜促使脑垂体合成ＧｔＨ,但所取血清样品中的ＧｔＨ含量都未见明显增加,多次埋植雌二醇后血清中卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢ＧＳＩ增长幅度小,表明埋植雌二醇虽能促使肝细胞合成和卵黄蛋白原的含量明显增加,但卵巢明显发育长大,这表明埋     

碱性成纤维细胞生长因子与胶原对组织工程软骨体外构建的影响

目的：以三维成团培养为培养系统,探讨bFGF与胶原对组织工程软骨体外构建的影响。方法：成团培养兔生长板软骨细胞,设bFGF、胶原及联合作用组。HE染色观察新生组织形态;免疫组化检测Ⅰ、Ⅱ型胶原表达以观察细胞表型;Hoechst 33258法检测细胞DNA含量;羟脯氨酸法与阿新蓝法测定基质中胶原与蛋白多糖的合成。结果：新生软骨的组织学形态近似自然软骨;各实验组软骨细胞DNA含量明显上升;胶原可以显著促进基质的合成;各实验组Ⅰ型胶原的表达少于对照组,Ⅱ型胶原的表达则高于对照组;联合作用组效果更加明显。结论：三维的成团培养可以促进基质合成,有效维持软骨细胞表型;bFGF与胶原有利于工程化软骨构建,其效果具有协同效应,两者联合应用可进一步促进软骨再生。