一种改进的阴茎电刺激采精法和猕猴藏酋猴及熊猴的采精及其精液特征的初步研究

本文报道了一种改进的阴茎电刺激采精法,用脱脂棉和铝箔作为电极,以避免直接用金属电极可能对阴茎的损伤,并运用这一方法对猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ）、藏酋猴（Ｍ．ｔｈｉｂｅｔａｎａ）和熊猴（Ｍ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）进行了电刺激采精及其精液特征研究。电刺激采精模式为连续刺激和间断刺激方式。在采精过程中没有发生阴茎损伤。对初次接受电刺激采精的动物以间断刺激模式效果较好。猕猴、藏酋猴和熊猴的射精体积分别为２．０±０．１、６．３±１．１和３．２±０．６ｍｌ;液化体积分别为０．７±０．６、２．１±０．４和１．７±０．３ｍｌ;精子浓度分别为１２．６±１．２×１０~８、４５．６±５．６×１０~８和１１．５±０．９×１０~８／ｍｌ。３种动物精液的液化率分别为：猕猴３６．２±０．９％,藏酋猴３４．０±１．４％;熊猴５１．８±１．２％。３种动物的精子总数与射精体积和凝块体积没有相关性（ｒ~２＝０．０７９;０．０１６;０．０９４和ｒ~２＝０．０６４;０．０２０;０．０７２）。上述结果表明：１）改进的阴茎电刺激采精法适用于猕猴,特别是阴茎表面较为粗糙的藏酋猴和熊猴;２）藏酋猴的射精体积和精子总数是迄今已报道的非人灵长类中最大的,可能     

滇南小耳猪精液的直接冷冻保存

目的建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育。方法利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精。利用直接冷冻新技术（DFM）研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响。结果在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%。但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差。此外,3%甘油、60 s植冰、1.5mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可。结论玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存。     

麋鹿人工授精技术初步研究

为了为麋鹿的人工繁殖提供理论基础,2007年7月～2009年6月对麋鹿人工授精技术进行了研究.2007年7月,对5只雄性麋鹿进行了6次电刺激采精试验,成功率100%(6/6),采得的精液品质优良,采精量为0.7～4.0 mL,平均采精量(1.7±1.3)mL,平均精子密度(14.25±2.88)亿/mL,精子活力为50%～80%.2007年,应用孕激素类药物(CIDR)对6只雌鹿进行同期发情处理,采用定时1次人工输精,鲜精输精6只,受胎1只,受胎率为16.7%;2008年,5只雌鹿发情采用雄鹿试情,冻精输精5只,受胎1只,受胎率20%.这两只麋鹿孕期分别为288 d和268 d.     

一种改进的阴茎电刺激精法和猕猴藏酋猴及熊猴的采精及其精液特征…

本文报道了一种改进的阴茎电刺激采精法,用脱脂棉和铝箔作为电极,以避免直接用金属电极可能对阴茎的损伤,并运用这一方法对猕猴（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）、藏酋猴（Ｍ．ｔｈｉｂｅｔａｎａ）和熊猴（Ｍ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）进行了电刺激采精及其精液特征研究。电刺激采精模式为连续刺激和间断刺激方式。在采精过程中没有发生阴茎损伤。对初次接受电刺激采精的动物以间断刺激模式效果较好。猕猴、藏酋猴和熊猴的射精体     

微弱电刺激对失眠者睡眠状况及睡眠脑电影响的初步研究

根据睡眠是由脑内亿万神经元同步振荡所刻划的观点［１］,及各种电刺激对动物睡眠影响的实验［２,３］,设计了用特定θ频率的正弦波微弱电流,刺激失眠病人颈部安眠２穴,以观察其对受试者脑电频率的客观影响。其结果是刺激后失眠病人由醒到２期的脑电记录中,θ波逐渐增加,增加了病人的总睡眠时间。这启示我们这种脑部的特殊频率微弱电流刺激,可能有引起脑部神经元群的共振现象,改变了受试者脑电中频率成分的分布特征,从而有助于失眠的治疗。这一现象是值得进一步研究的。     

原鸡采精技术与精液品质研究

以原鸡滇南亚种为研究对象,利用性欲反射强度、精液采集量等评判指标,探索适合于原鸡的人工采精技术.通过对精液感官评定和显微镜检,构建精液常规生理指标;在精液中,分别添加NaCl(0.9%、1%)、葡萄糖(5%、5.7%)、卵黄液(10%、13%)、蔗糖液(11%、13%)等4种稀释液,测量不同处理精子的活力、畸形率、质膜完整性、存活时间和生存指数,探讨稀释液、不同季节及二者交互作用对精液品质的影响,筛选新鲜精液的最优稀释液.结果表明:改进后的人工采精技术可使采精量增至0.16 ml、成功率达96%以上.精液中性微偏酸性(pH∶ 6.7～7.0),呈现"有云雾状"特性、春秋季较明显,呈乳白色或乳黄色,略带腥味.精液量为(0.13±0.02) ml (0.10～0.16 ml),精子密度为(15.03±4.46)×10~8个/ml(11.61×10~8～22.16×10~8个/ml),活力为(93.91±0.08)%(93.20%～95.00%),质膜完整性为(93.75±2.71)%(91.60%～95.64%),畸形率为(5.53±1.59)%(4.55%～6.48%).NaCl(0.9%、1%)、葡萄糖(5%、5.7%)和11%蔗糖液均可作为新鲜精液稀释液,其总存活时间达32 h以上,考虑对畸形率、活力和质膜完整性等影响,以1%NaCl处理效果相对最佳.就精子活力和质膜完整性而言,原鸡采精的季节(月份)对稀释液具有一定选择性.     

电刺激家鸽中脑诱导运动的初步研究

用电刺激方法研究浅麻醉状态下家鸽中脑的不同区域诱发的行为反应,认识家鸽中脑运动相关脑区的空间编码规律。在中脑的半环隆枕(TOS)、丘间核等核团区域诱导出扇动翅膀、呼吸加快、羽毛倒伏等运动行为。     

激光辐射奶牛冷冻精液对精子诱变效应的研究

为了探索激光辐射精子的诱变效应,本试验采用ＴＳＴ（Ｔｒｉｐｌｅ Ｓｔａｉｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ,即精子三重染色法）、ＳＰＡ（Ｓｐｅｒｍ Ｐｅｎｅｔｒａｉｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ,即精子穿透分析法和ＣＡＳ（Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ Ａｎｅｕｐｌｏｉｄｙ ｉｎ Ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ,即精子单倍染色体制备技术）,三项有关精子的现代分析技术,对激光辐射精子的受精学、遗传学效应进行了研究。结果表明：Ｈｅ－Ｎｅ激     

硬膜外皮质电刺激治疗急性颅脑脑损伤的初步实验研究

目的:探讨硬膜外皮质电刺激(EECS)对急性颅脑脑损伤(ACCI)后的影响.方法:SD大鼠24只,随机分为A组(假损伤组),B组(损伤组)和C组(治疗组),侧方液压打击损伤(LFPI)大鼠脑组织建立ACCI模型后,C组给予硬膜外电刺激治疗.术后24小时处死动物,检测A组脑组织含水量、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量与B、C组上述指标的差异.结果:与A组相比,B组与C组脑组织含水量明显增加(P＜0.01),与B组相比,C组大鼠脑含水量减少(P＜0.05),差异有统计学意义;与A组相比.B组与C组大鼠血清NSE明显增加(P＜0.01),与B相比,C组大鼠大鼠血清NSE明显减少(P＜0.01),差异有统计学意义.结论:EECS可减轻ACCI后脑水肿,降低血清NSE水平,从而起到脑保护的作用.     

CRYOPRESERVATION OF SEA URCHIN EMBRYOS AND SPERM

A simple method for preserving live sea urchin embryos and sperm in liquid nitrogen (LN) wasdeveloped through the use of DMSO as a cryoprotective additive. Samples of late embryos in double test tubes were cooled to— I96°C by two-step freezing, first to — 76°C and then by plunging in LN. In the case of fertilized eggs, samples were previously frozen to — 40°C, at which temperature the samples were kept for 15 min; they were then transferred into LN. After preservation in LN for various lengths of time, samples in the double test tubes were thawed in water at 15°C. The post-thaw survival was more than 90% for late embryos, and about 10% for fertilized eggs. Difference in the length of the cryopreservation period did not affect survival. Post-thaw development in cryopreserved embryos often showed abnormalities in structure. Sperm with 1.5 M DMSO was successfully preserved in LN by a similar method to the one used for cryopreservation of late embryos. Fertilizability in cryopreserved sperm was complete, regardless of the length of the preservation period. Nearly all the eggs fertilized by cryopreserved sperm developed to normal plutei.     

兰州鲇精液超低温冷冻保存技术研究及细胞损伤检测

为保护兰州鲇(Silurus lanzhouensis Chen)种质资源,促进新品种选育,文章开展了兰州鲇精液超低温冻存抗冻剂筛选及程序保存技术研究,并通过精子解冻激活率、核DNA检测、扫描电镜和透射电镜检测技术对冻存效果和冻存损伤情况进行了评测。结果表明:兰州鲇精液以10%DMSO为抗冻剂, 4℃平衡20min,–80℃平衡30min后立即置于液氮超低温保存,并于40℃水浴解冻时精子冻存效果较佳,冻精激活率达(75.56±3.91)%。SCGE检测DNA损伤结果显示超低温冻存10d、20d及30d兰州鲇精液的彗星率和损伤系数无显著差异。扫描电镜检测显示兰州鲇精子明显分头部,中段及尾部3部分,属于单鞭毛型,无顶体,无侧鳍,中心粒相互垂直呈"T"形,鞭毛为典型的"9+2"微管结构。冻存结构损伤主要表现为膜损伤,细胞质膜与染色质膜发生破损、折皱、囊泡化或整体脱落,细胞核膜与质膜空隙加大,核发生变形,核质疏散,线粒体结构弥散,线粒体内容物外流,中心粒复合体易位,鞭毛外膜变形脱离,中段位置断裂,微管结构基本完好。研究筛选的超低温冷冻保存技术可长期有效保存兰州鲇精液,为兰州鲇种质资源保护及今后...     

草莓愈伤组织超低温贮藏及植株再生研究

本文介绍了草莓愈伤组织的诱导,超低温贮藏及不同解融方法对其细胞存活率和芽分化的影响。     

红豆草组织培养物的超低温保存及其超微结构的观察

红豆草(Onobrychis viciaefolia Scop.)组织培养物在5%DMSO+10%甘油+8%蔗糖的冰冻保护剂及以1℃/分钟的速度降温到-35—-40℃,停留2小时后,投入液氮,40℃水浴快速化冻等条件下,存活率达60—70%,并保持了高的分化能力。电子显微镜的观察结果表明,快速冰冻和1℃/分钟慢速冰冻至-35℃—40℃不停留,对细胞结构造成严重的致死性破坏;-35℃停留30分钟对细胞结构的损伤是可逆性的;停留2小时的其超微结构基本上与对照材料无明显差别。     

低温和超低温保存对中国大鲵成熟精子的影响

中国大鲵Andrias davidianus是中国特有的一种濒危有尾两栖类动物,为了保护这一珍稀物种并且为中国大鲵人工辅助繁育建立一套可靠的技术,对中国大鲵的精子在0—4℃下低温短期保存和在液氮中超低温长期保存进行了研究。研究表明中国大鲵精子原液在常温下一般仅存活3—5h,4℃下能存活6d,0℃下存活时间可达9d。精子原液中添加Ringer氏液或Holtferter氏液,精子存活率比原液保存显著降低。在改良的超低温冻存条件下,中国大鲵精子在液氮中保存两周后解冻,精子复苏率可达10%—15%。利用扫描和透射电镜观察冻融前后中国大鲵精子的超微结构,发现受冷冻损伤精子质膜出现膨胀、破裂;精子穿孔器和轴丝显著弯曲,甚至断裂;波动膜明显脱落或膜结构损坏;精子线粒体嵴变形。结果表明,超低温冻存导致部分中国大鲵精子超微结构发生变化而产生冻伤,进而导致精子活力、复苏率下降。研究为建立规范化的中国大鲵精液保存程序和中国大鲵规模化人工繁育提供重要参考。     

前额蚤灰獭亚种幼虫形态的描述

本文对前额蚤灰獭亚种Frontopsylla frontalis baibacina Ji, 1979的幼虫形态进行了描述,并与同属似升额蚤介中亚种和无棘鬃额蚤的幼虫形态作了比较,其结果有共同点也有异点。     

杏愈伤组织的超低温保存

杏茎段在附加１．０ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ和０．１ｍｇ／Ｌ ＢＡ的改良ＭＳ培养基中诱导出愈伤组织,放入１０％ＤＭＳＯ＋０．５ｍｏｌ／Ｌ山梨醇或葡萄糖的冰冻保护剂中,以１Ｃ／ｍｉｎ的降温速度降至－４０℃,停留２ｈ后投入液氮保存,在４０℃水浴中化冻。继代培养８次生长１５－２０ｄ的愈伤组织保存后的相对存活率最高,不同品种基因型保存效果差异很大,保存后的愈伤组织生长量比对照减少,但经过２次继代培养后不再表现差