一个门静脉血管海绵样变治疗的新方法--门静脉人工血管置换

目的：探索手术治疗门静脉血管海绵样变的新方法。方法：采用单纯门静脉人工血管置换,即不做分流、断流术,并保存脾脏治疗门静脉血管海绵样变的患者2例。结果：2例患者的术后肝功能及门静脉内血液流速恢复正常,脾脏逐渐缩小。结论：门静脉人工血管置换是治疗肝前性门静脉血管海绵样变的安全、可行的新方法。     

门静脉海绵样变大鼠门静脉氧化应激损伤的研究

目的:考察门静脉海绵样变性(CTPV,Cavernous transformation of portal vein)大鼠体内氧化应激的状态以及氧化应激对门静脉结构的影响。方法:采用门脉部分结扎法复制CTPV大鼠动物模型;通过测定门静脉内血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力来分析机体抗氧化能力,测定丙二醛(MDA)含量分析机体氧化能力;门静脉HE染色观察门静脉病理变化。结果:Sham组大鼠门静脉造影显示门静脉通畅,无曲张与扩张;门静脉病理学检查显示门静脉管腔无增大、内皮细胞光滑、中膜平滑肌层无增厚、外膜完整。CTPV组大鼠门静脉造影显示门静脉周围侧支循环形成,门静脉病理检查显示多个管腔大小不一、外形不规则血管腔,管腔之间为较狭窄的纤维性间隔,其内可见脂肪细胞、散在的淋巴细胞及肥大细胞等,门静脉管腔增大、血管内膜受损、内皮细胞脱落、中膜平滑肌增厚和血栓形成。与Sham组大鼠比较,CTPV组大鼠SOD、GSH-Px活性降低(93.79+8.87μU/L Vs103.05+8.07μU/L,P<0.05,157.44+26.46U/ml Vs709.09+83.21U/ml,P<0...     

内镜套扎治疗门静脉海绵样变性食道静脉曲张破裂出血的疗效分析

目的:探讨内镜下曲张静脉套扎术(EVE)治疗门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血的疗效.方法:回顾性分析了2004年3月～2007年8月,我院采用内镜下曲张静脉套扎术治疗15例门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血的临床资料.结果:15例患者经EVL治疗均能有效控制出血,其急诊止血率达93.3%;经1-3次EVL治疗后曲张静脉基本消失,消失率达86.7%;随访6个月～4.1年,一年期静脉曲张复发率为38.5%,两年期静脉曲张复发率为33.3%,三年期静脉曲张复发率为25%,四年期静脉曲张复发率为0.在整个随访期中有8例患者自第一次EVL术后食管曲张静脉基本消失从未复发.结论:EVL治疗门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血是一种安全有效、简单易行的方法,可以起到急诊止血、消除曲张静脉和预防再出血的作用.     

血管生成素样蛋白3的研究进展

血管生成素样蛋白3（angiopoietin—like protein 3,angptl 3）是血管生成素和血管生成素样蛋白家族成员,因其与该家族成员有共同的结构特征而得名,即氨基端与分泌相关的信号肽,介导同源寡聚体形成的螺旋样结构域,一段短的连接肽和羧基端介导配体活性的纤维蛋白原样结构域。Angptl 3是一种分泌蛋白,其mRNA主要在人、鼠的肝脏表达。目前研究表明angptl 3的生物学效应表现在两方面：调节血管生成和脂质代谢。它对血管生成的诱导作用较弱,而对脂质代谢的调节作用较显著,因而在心血管病领域受到极大关注。本文将就angptl 3的研究进展做一综述。     

红藻条斑紫菜变藻蓝蛋晶体结构的分子置换法研究

以蓝藻钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)变藻蓝蛋白(APC-SP)的晶体结构为搜索模型,运用AMoRe程序,对红藻条斑紫菜(Porphyra yezoensis)变藻蓝蛋白(APC-PY)的晶体结构进行了分子置换法研究.APC-PY晶体(晶型3)属R32空间群,晶胞参数为a=b=10.53 nm,c=18.94 nm,α=β=90°,γ=120°.在单位晶胞的每个结晶学不对称单位中含一个αβ单体.在获得交叉函数解的基础上,进行了平移函数搜索,给出了Cc值和R因子分别为67%和36.1%的最佳平移解.所得分子置换法的结果被用于APC-PY初始结构模型的构建和结构精化,经一系列2Fo-Fc OMIT图的综合验证分析,进一步证实了所得分子置换法解的正确性.     

下调血管生成素样蛋白7表达对血管紧张素Ⅱ介导的血管平滑肌细胞炎症反应的影响

目的探讨RNA干扰血管生成素样蛋白7 （Angptl7）基因对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）炎症因子的影响及其作用机制。 方法体外培养人VSMC,分为常规F12K培养基培养（对照）和1 μg/mL AngII培养24 h。VSMC用AngⅡ（1 μg/mL）处理24 h后,采用siRNA-Angptl7和阴性对照siRNA-NC在Lipofectamine 2000介导下转染VSMC。RT-qPCR检测mRNA表达水平;Griess反应测定一氧化氮（NO）含量;蛋白免疫印记法检测相关蛋白的改变;酶联免疫吸附法检测VSMC中炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）和IL-6水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,两组间比较采用独立样本t检验。 结果与对照比较,1 μg/mL AngⅡ处理可促进VSMC中Angptl7 mRNA （0.97±0.06比3.05±0.21）和蛋白表达（1.01±0.12比1.61±0.14）,亦可促进VSMC中IL-1β[（45.21±8.10）比（126.17±11.77） pg/mL]、IL-6[（50.50±7.51）比（108.50±9.51）pg/mL]和TNF-α的表达[（60.77±9.58）比（185.67±17.35）pg/mL],差异有统计学意义（P均< 0.01）。与对照和转染siRNA-NC相比,转染siRNA-Angptl7下调Angptl7蛋白表达（0.99±0.12,0.98±0.12比0.44±0.14,P < 0.01）。与AngⅡ干预组相比,siRNA-Angptl7降低AngⅡ介导的VSMC炎症反应相关蛋白TNF-α、IL-6和IL-1β的表达,核因子κB （NF-κB）/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）/环氧化酶2 （COX-2）信号通路相关蛋白NF-κB、iNOS和COX-2表达及NO含量亦降低,差异有统计学意义（P均< 0.01）。与siRNA-NC相比,siRNA-Angptl7组AngⅡ诱导的VSMC炎症反应相关蛋白TNF-α （0.99±0.13比0.51±0.12）、IL-6 （1.00±0.12比0.38±0.05）和IL-1β的表达（0.99±0.14比0.48±0.11）,NF-κB （1.00±0.10比0.42±0.08）、iNOS （1.02±0.12比0.42±0.10）和COX-2表达（1.00±0.11比0.52±0.12）均降低,NO含量[（54.78±2.76）比（18.08±3.61）μmol/L]亦降低,差异有统计学意义（P均< 0.01）。 结论AngⅡ可通过Angptl7促进VSMC炎症反应,下调Angptl7蛋白表达可以抑制VSMC的炎症反应,其作用机制可能与抑制NF-κB/iNOS-COX-2信号通路有关。     

院前明胶海绵栓塞治疗肾血管损伤的动物研究

目的：探讨在新型综合手术救治方舱中明胶海绵栓塞治疗肾血管损伤的可行性和疗效。方法：在新型综合手术救治方舱中构建3例动物肾腹（背）干动脉损伤模型、3例肾段动脉损伤模型,先用1mm×1mm×1mm明胶海绵颗粒对损伤血管进行栓塞治疗,若未能止血,改用2mm×2mm×2mm颗粒栓塞,观察栓塞后15分钟、1月后的肾动脉造影,栓塞后1月的组织病理表现。结果：3例肾段动脉和1例肾腹干动脉使用1mm×1mm×1mm明胶海绵颗粒一次栓塞成功;1例肾腹干动脉和1例肾背干动脉用1mm×1mm×1mm颗粒栓塞未能完全止血,改用2mm×2mm×2mm颗粒栓塞成功。6例动物术后生命体征平稳,全部存活,一个月后造影复查见栓塞动脉来再通,但其余分支动脉血供得到保留。大体标本观栓塞侧肾明显缩小,来见脓腔和脓性分泌物,病理切片示栓塞后局部肾组织有不同范围缺血性梗死。结论：野战方舱中明胶海绵栓塞治疗出血效果明确,对于一般肾血管损伤定位准确,止血迅速、彻底,有良好的可行性和疗效。     

兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的诱导分化

目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进兔骨髓基质干细胞向血管内皮样细胞的定向诱导分化,为血管化组织工程骨研究提供实验基础.方法:采集2周龄兔后肢长骨骨髓,用全骨骨髓贴壁法进行原代培养,将获得的第2代骨髓基质干细胞以1× 105/mL密度接种于内皮细胞条件培养基(含10 μg/L VEGF,10 μg/L bFGF,10％胎牛血清的DMEM/F12培养液)进行体外诱导培养,对诱导2周的细胞进行细胞形态观察和表型、功能鉴定.结果:经血管内皮细胞条件培养基诱导2周后的细胞呈扁平形,多边形,表达血管内皮细胞特异性标志CD31、VWF因子,细胞具有吞噬DiI-Ac-LDL和摄取FITC-UEA-1的功能,诱导的细胞可在BD基质胶内形成管腔样结构.结论:血管内皮细胞生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可以成功诱导兔骨髓基质干细胞为血管内皮样细胞,有希望作为组织工程骨的血管化的种子细胞.     

小分子RNA表达载体构建的新方法——MicroRNA前体PCR置换法

MicroRNA(miRNA)基因的终产物是进化上高度保守的、具有基因表达调控功能的非编码小分子RNA。miRNA的特征性发卡环前体(pre-miRNAs)在体内经数步加工后,与AGO蛋白构成沉默复合体(RISC)以行使其功能。如将已知pre-miRNAs上的miRNA成熟链和互补链(miRNA*)分别置换为有待研究的小分子RNA,并构建表达载体转化植株,利用转化株内源的miRNA成熟加工体系,可以产生预设的小分子RNA。利用已知拟南芥miRNA前体为模板,使用替换PCR的方法,人工构建了gso8-ap-miRNA-pBI121表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥,多数T1代植株表现出提早开花的突变表型。该方法是一种简便、高效的构建小分子RNA表达载体的方法。     

选择性贲门周围血管离断术治疗门静脉高压症的临床价值

目的：探讨选择性断流术与传统断流术在门静脉高压症手术治疗中的疗效。方法：分析我院从2007 年10 月至2013 年10 月行传统断流术52 例患者与行选择性断流术的34例患者的临床资料,对两组进行回顾性对比分析。结果：选择性断流术术后近 期脾窝积液、发热以及随访期间再出血、门静脉高压性胃病(portal hypertensive gastropathy,PHG)发生率明显减低(P<0.05),食管胃 底静脉曲张程度明显减轻（P<0.05）,肝性脑病发生率未增加(P>0.05)。结论：选择性断流术可以明显改善断流术后再出血和PHG 发病率高的问题,降低术后并发症的发生,近期疗效显著。但术后6-12 月,食管旁静脉均基本闭塞,远期疗效还有待于进一步研 究。     

Surgical Strategy for Hepatocellular Carcinoma Patients with Portal/Hepatic Vein Tumor Thrombosis

Background

Portal/hepatic vein tumor thrombosis (PVTT/HVTT) in hepatocellular carcinoma (HCC) is a sign of advanced stage disease and is associated with poor prognosis. This study investigated the surgical outcomes of patients with HCC and PVTT/HVTT to determine the most appropriate surgical treatment strategy for these patients.

Materials and Methods

The study population included 77 HCC patients from January 2004 to June 2009 who underwent hepatectomy in our department and were diagnosed with PVTT/HVTT based on pathological examination. The patients were divided into two groups: in group 1, PVTT/HVTT was located in the hepatic resection area and removed with the tumor en bloc (38 cases); in group 2, PVTT/HVTT was beyond the resection line and removed by suction or thrombectomy (39 cases). Concerning the factor of surgical margins, the patients were further divided into four subgroups: group 1A: patients in group 1 with surgical margins ≤1 cm (28 cases); group 1B: patients in group 1 with surgical margins >1 cm (9 cases); group 2A: patients in group 2 with surgical margins ≤1 cm (28 cases); and group 2B: patients in group 2 with surgical margins >1 cm (9 cases).

Results

Most of the characteristics of groups 1 and 2 were similar. Patients in group 2 had significantly higher median blood loss (p=0.002) and higher blood transfusion rate (p=0.002) during the operation, which were not considered prognostic factors (p=0.323 and 0.571, respectively). The median overall survival (OS) duration in group 1 was significantly longer than that in group 2 (14.3 vs. 10.4 months, p=0.047). The median OS durations in groups 1A, 1B, 2A, and 2B were 14.3, 42.7, 7.5, and 18.0 months, respectively, which were significantly different(p=0.018).

Conclusions

When PVTT/HVTT is located in the hepatic resection area and removed with the tumor en bloc, the median OS duration is longer. Based on this finding, widening the surgical margins when technically possible may increase OS.     

Gas in the Portal Vein: A Report of Two Cases

Gas in the portal venous system was detected on plain roentgenograms of the abdomen in two women aged 61 and 72 years, respectively. Both patients had intestinal necrosis, due in one instance to a small bowel volvulus around a mesenteric band, and in the second instance to occlusion of the celiac axis, superior and inferior mesenteric arteries. In the first patient, the portal venous gas was detected before surgery, and in the second case the gas was observed at laparotomy and was visualized on radiographs of the abdomen taken shortly after death. Both patients died. Portal venous gas can be distinguished radiologically from air in the bile ducts by its characteristic slender branching gas pattern in the periphery of the liver substance. The presence of portal gas in the adult indicates intestinal necrosis in the majority of cases and should lead to early operative intervention.     

豚鼠颈内静脉置管模型的构建

目的构建豚鼠颈内静脉置管模型,解决豚鼠静脉多次、大剂量给药问题。方法 10只豚鼠麻醉后均在显微镜下切开颈内静脉,置入医用PE导管,术后7d每日换药并向导管内注射1mL肝素化的生理盐水(50U/mL),观察有无堵管、脱落现象以及伤口有无红肿、渗液,术后第7d抽取静脉血行血常规及"C"反应蛋白检查。结果①术后观察7d,10只豚鼠存活8只,2只豚鼠于第4d死亡,每日观察无脱管及堵管现象。②术后第1d2只豚鼠伤口有明显渗出,略肿胀,第2d渗出减轻,无肿胀,此后至第7d伤口无渗出及肿胀出现;③术前与术后7d血常规主要指标与"C"反应蛋白均无明显差异。结论成功构建豚鼠颈内静脉置管模型,可满足静脉多次、大剂量给药的需要。     

一项小鼠采血新技术——颌下静脉丛采血法

目的介绍小鼠颌下静脉丛采血方法。方法选用2月龄昆明小鼠,固定小鼠后,将采血注射针头刺入颌下静脉丛血管取血。结果单人操作约1 min内可完成小鼠颌下静脉丛采血,采血量达到0.3-0.5 mL。结论此方法无需麻醉、创伤小、采血量大并可重复采血,是一种简便、安全、快速、采血量多的采血方法。     

喷雾:一种简便的拟南芥转化方法

目的：建立一种改良的且操作更为简便可行的拟南芥转化方法。方法：用含有OD600等于0．8的农杆菌,5%蔗糖和0. 2 ml/L表面活性剂Silwet L-77的MS液体培养基喷洒正在发育的花器官即可实现基因转化。植物生长到高约4cm时进行转化,此时植物具有大量的花和极少数的果荚,可以得到比较高的转化效率。喷洒溶液后将植物用保鲜膜等材料包裹起来以保持湿度,可有利于转化。结果：得到了365棵转化植株,转化效率和花器官浸泡法的基本一致。结论：这种方法可适用于多种生态型的拟南芥植物转化,并且方便大规模的拟南芥植物的转化,便于人们快速获得带有T-DNA标记的植株或基因遗传互补工作的顺利开展。