植物细胞培养物的生长率测定

为了选择测定生物加工工程所需的植物细胞生长动力学的最佳方法,加利福尼亚大学的D.D.Y.Ruy及其同事比较了测定植物悬浮细胞生长率的几种方法.他们比较了利用细胞鲜重、细胞干重、细胞计数、细胞沉降容积、细胞充填容积、蛋白含量、核酸含量、细胞浓度和导电性,测定西洋梨(Pyrus communis)培养细胞生长率的方法, 上述研究者报道,除核酸测定外,试验的各种方法得到的比生长值相同.但他们认为导电性测定法最佳,原因是:(1)无害、无需取样或湿性化学分析;(2)能进行连续的原位或在线监测;(3)测定所需时间短;(4)经济有效;(5)不受培养中问题如细胞增殖、生长形态学或生长密度的影响.     

五、轮状病毒的细胞培养

<正>近10年来发现的与人急性胃肠炎有关的病毒的共同特征之一就是难于在细胞培养或器官培养中生长。这些病毒包括轮状病毒、副轮状病毒、Norwalk病毒群、腺病毒、冠状病毒及其它小圆病毒如星状病毒、萼状病毒等。ECHO病毒和Coxsackie病毒虽较容易分离培养,但它们与急性腹泻关系不大。因此,细胞培养法在腹泻病毒研究方面没有发挥更大的作用。腹泻病毒的分类鉴定主要是靠电镜法。     

用细胞培养分离人轮状病毒

<正>过去许多人试图用细胞培养繁殖高效价的轮状病毒都告失败了。最近,Wyatt等曾将人工适应2型人轮状病毒(Wa株)经既定菌丛的新生小猪传11代后,在非洲绿猴原代细胞培养中得到相当高的效价。本研究中用MA104细胞(一种恒河猴胚肾的细胞系)分离培养,得到三株人轮状病毒。     

人轮状病毒的细胞培养分离

用CV-1细胞从急性腹泻病儿7份粪便标本中直接分离出4株人轮状病毒(HRV),并适应传代14代。感染细胞出现特征性细胞病变,经电镜、ELISA、免疫荧光染色及病毒RNA电泳等试验证实HRV毒株在CV-1细胞中的繁殖及抗原特异性。病毒滴度为10~(6.0)TCID_(60)。分离的4株HRV毒株均为RNA电泳型长型,经CV-1细胞传7～14代后,RNA图型与原粪样相比未见变异。     

少数民族新生儿及婴幼儿中人轮状病毒分子流行病学研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对内蒙古自治区三个不同地理位置的少数民族自治旗及一个城市汉族对照区秋冬季采集的新生儿胎便及婴幼儿急性腹泻便进行轮状病毒ＲＮＡ基因组特点分析。共检测胎便标本１４６份,腹泻便标中１１６份。结果表明：几个少数民族地区流行的轮状病毒均以Ａ组第Ⅱ业组为士,并在一个地区有多种差异电泳型存在。新生儿胎便中可检出轮状病毒并显示了特征性Ａ组轮状病毒ＲＮＡ基因型。胎便小轮状病毒检出率高的地区,腹泻便检出率也相应高,轮状病毒的检出率与民族、地理位置尤明显关系,而与当地的卫生条件及地形有关。阳性标本使用Ａ组单克隆抗体酶标免疫试剂进一步证实。     

分光光度法测定水母雪莲细胞培养物中的总黄酮

建立了测定水母雪莲细胞培养物中的总黄酮含量的分光光度法,该法操作简便,结果准确可靠。     

不数民族新生儿及婴幼儿中人轮状病毒分子流行病学研究

用降丙烯酰胺凝胶电泳技术,对内蒙古自治区三个不同地理位置的少数民族自治旗及一个城市汉族对照区秋冬季采集的新生儿胎便及婴幼儿急性腹泻便进行轮状病毒ＲＮＡ基因组特点分析。共检测胎便标本１４６份,腹泻便标本１１６份。结果表明;几个少数民族地区流行的轮状病毒均以Ａ组Ⅱ亚组为主,并在一个地区有多种差异电泳型存在,新生儿胎便中可检出轮状病毒并显示了特征性Ａ组轮状病毒ＲＮＡ基因型。胎便中轮状病毒检出率高的地区,     

细胞培养物中的逆转录病毒检测

本文用非放射性法测定了K562,SP2/0,L-02,SPC-A-1,SMMC-7721和Hut-102等6个细胞培养液超离心沉淀物逆转录酶的含量,间接证明细胞培养物中逆转录病毒的存在。结果表明,Hut-102细胞为阳性,其它5个细胞系为阴性。     

评价植物悬浮细胞培养物两项测定指标的建立

由于在细胞培养研究中缺乏一些可操作性强的且定量化的细胞状态评价指标,人们对植物细胞状态的有些性状的评价只能停留在定性描述水平,如对悬浮细胞培养物褐化程度的评价仅能作出定性判断。这里我们提出了两项悬浮细胞培养物细胞状态评价指标。     

评价植物悬浮细胞培养物两项测定指标的建立

An experiment on suspending rice cell cultures in sucrose solution and on optical density (OD) value in culture solution at 576 nm wave width was carried out, the result indicates that suspension rate (%) of suspensions, while suspending in 0.76 mol/L sucrose solution for 15 minutes at room temperature, can be employed as an judgment criterion of cell state. Suspending cell suspension in 0.76 mol/L sucrose solution is also a good approach on selecting cells from suspension cell mass, as a result, it is beneficial to establishing cell suspension. The browning of cell suspension is related to the necrosis degree of suspension cells. OD value of cell suspension liquid at 576 nm can be taken as a criterion with which the necrosis degree of cell suspension can be evaluated.     

人参细胞培养物中水溶性多糖的研究——分离,纯化及分子量测定

对于我国的传统珍贵药材人参(Panax ginseng)中的人参多糖的研究报道已有不少,而且已得到了应用。我们曾对人参细胞培养物中水溶性多糖(PCS)的提取、理化性质及其组成和药理进行了初步的研究,结果表明与人参多糖有许多相似之处。本文对 PCS 进行了分离、纯化及分子量测定的研究。将提取获得的 PCS 用 Sevag 法除去其中的蛋白之后,通过 Sephadex G-100柱进行分离,经洗脱,同时以蒽酮比色法鉴定多糖部位,将 PCS 分离得到了 PC_1和 PC_2。     

曼陀罗细胞培养物可清除环境污染

制造炸药和高温超电导体时会导致废液流出.此废液含大量毒性强的Ba~(2+).而要从这种废液中清除Ba~(2+)则是一项非常昂贵的工程,包括硫酸钡沉淀以及沉淀物埋藏等.美国大面积土地均已遭到Ba~(2+)污染.然而,现有清除方法降低Ba~(2+)浓度尚未达到美国联邦部提出     

数学模型预测细胞培养物的生长

商品化的植物细胞培养物要求其生长率可重复,批量之问只能有很小变化。在研究罂粟(Papaversomniferum)细胞培养物的生长动力学时,Furdue大学的W.R.Curtis及同事们观察到,用不同瓶中的培养物接种,其生长率的变化是“惊人的”。 Curtis的小组测定出磷酸盐为限制生长物质,他们开发了一种数学生长模型,该模型可根据细胞的胞内磷含量算出培养物的生长率。实验表明,该模型能够根据种菌的胞内磷含量预测培养物的线性生长特性及依赖种菌的生长变化性。研究者说:该模型提供了“在批量培养中预测和控制生长率的数学基础。培养     

不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究

口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞。原始的初代细胞(P0)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞。将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96~112瓶,细胞核型检查传至P5代的细胞染色体数目与初代细胞一致。细胞培养物均一性提高。P0代与P2代细胞病毒培养物滴度分别在6.2±1.5和6.5±0.5lgCCID50/ml,使用P2代细胞培养病毒,产量增加10~15倍。提高了疫苗生产的可控性和质量,生产规模显著放大,经济效益明显。     

细胞培养物中污染支原体的去除

经小鼠体内、体外加用不同的抗菌素处理及克隆的方法处理细胞污染的支原体,三株细胞经两次、一株细胞经三次处理后,经培养法、ＤＮＡ染色法及ＰＣＲ法检查支原体污染均为阴性,并证明对其抗体分泌没有任何影响,不失为一个理想的去除支原体的方法,从而使有重要应用价值的支原体污染细胞的应用成为可能。     

东北红豆杉细胞培养物PPO活性研究

研究证明, 多酚氟化酶(PPO)与东北红豆杉细胞生长存在密切关系, 利用Vc、NaCl、苯甲酸、亚硫酸钠、柠檬酸、草酸等可有效抑制PPO 的活性, 降低褐化程度, 促进东北红豆杉细胞培养物的生长。而利用硫酸铜、水解酪蛋白、椰乳、乙烯吡咯烷酮等可有效抑制PPO 活性·加重褐化、抑制东北红豆杉细胞培养物的生长。     

新疆紫草细胞培养物的化学成分研究

从新疆紫草[Arnebia euchroma(Royle)Johnst.]的细胞培养物分离到5个萘醌类化合物,据其理化性质和光谱数据,分别鉴定为去氧紫草素(deoxyshikonin,Ⅰ)、β,β-二甲基丙烯酰紫草素(β,β-dimethylacrylshikonin,Ⅱ)、乙酰紫草素(acetylshikonin,Ⅲ)、2,3-二甲基戊烯酰紫草素(teracrylshikonin,Ⅳ)和β-羟基异戊酰紫草素(β-hydroxyisovaleryl-shikonin,Ⅴ)。细胞培养物不含从新疆紫草根中分得的紫草素(shikonin);各成分在细胞培养物中的含量与在新疆紫草根中的含量有很大差异。     

成人腹泻轮状病毒ELISA方法的建立和应用

本文通过特异性试验、阻断试验、交叉试验、敏感度试验和重复性试验,建立了成人腹泻轮状病毒一酶联免疫吸附试验法(ADRV—ELISA)。应用此法检测了全国20多个省区202份病人腹泻标本,检出率为91％。采用本ELISA、核酸电泳、电镜三种方法对48份病人腹泻标本进行了双盲法检测比较,结果三种方法的阳性检出率分别为100％、85.4％、56.25％(P<0.05)。实验结果表明,本ELISA应用于检测成人腹泻轮状病毒(ADRV),具有敏感度高。特异性强等优点。