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1.
PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
β榄香烯吗素(PIC-BE)是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物.采用人红白血病的多药耐药性(MDR)细胞株K562/ADM作为实验模型,观察PIC-BE对K562/ADM细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,并进而研究其对该细胞MDR的可能影响.结果显示:(1)K562/ADM细胞对ADM具有明显的抗性,与K562细胞相比,抗性倍数约为40倍,而两者对PIC-BE的IC50接近,无显著差异;(2)PIC-BE(10.0~30.0μg/ml)对K562/ADM细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性;(3)低毒剂量PIC-BE(10.0μg/ml)与ADM(4.0μg/ml)联合应用,可显著增强ADM对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用,升高细胞内ADM的浓度,降低该细胞对ADM的IC50,使该细胞对ADM的抗性有数倍逆转.上述结果提示,PIC-BE不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂,而且也是一种有效的MDR逆转剂 相似文献
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将细胞表面粘附分子CD44S的cDNA反向插入到真核细胞表达载体pMAMneo-CAT和MMTV-LTR启动子下游,构成CD44S的反义RNA载体.将其用电击法导入CD44+的人黑色素瘤细胞系HMM239,转录出的反义RNA能不同程度地抑制HMM239表面CD44的表达.CD44的表达被抑制后,瘤细胞与透明质酸的结合力下降,细胞的体外生长速率不受影响.将其接种裸鼠皮下,发现其致瘤性明显降低 相似文献
3.
化学修饰对反义寡核苷酸稳定性及抗流感病毒活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨 A S O D N 化学修饰形式与 A S O D N 稳定性,体外细胞毒性以及抗流感病毒活性之间的关系,合成了 7 种不同化学修饰形式的 A S O D N:硫代 A S O D N 及其 3′端分别磷酸化和胆固醇修饰;3′与 5′端硫代,中间为天然结构的混合骨架 A S O D N;天然结构 A S O D N 及其 3′端分别磷酸化和胆固醇修饰等.测定了 7 种修饰体在小鼠血清, M D C K 细胞裂解液,含 2% 胎牛血清的 D M E M培养液以及水中的稳定性,体外细胞毒性和在细胞水平抗流感病毒活性.结果表明,混合骨架 A S O D N,硫代 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆固醇的修饰形式在小鼠血清, M D C K 细胞裂解液与含2% 胎牛血清的 D M E M 培养液中稳定性相对较高,作用 24~48 h 仅混合骨架 A S O D N 与硫代 A S O D N 发生部分降解;天然结构 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆固醇修饰体在 24 h 内大部分降解.所有 A S O D N 修饰体在水中具有很高稳定性,48 h 内未见降解作用.7 种 A S O D N 修饰形式在 M D C K 细胞中未表现明显的细胞毒性.硫代 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆 相似文献
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DMSO对人胃腺癌MGC80—3细胞的诱导分化作用 总被引:5,自引:0,他引:5
用光镜、电镜和生化分析方法研究DMSO在体外对MGC80-3细胞的作用,不同浓度DMSO对MGC80-3细胞有不同的生长抑制作用。1.5%DMSO是本研究较适合的浓度。1.5%DMSO处理7天后细胞生长率、分裂指数、克隆形成率和Con-A凝集率分别下降35.15%、18%、90%和55.8%。处理后,癌细胞膜的碱性磷酸酶(不存在于正常人胃粘膜)比活性下降了90%,接种裸鼠致瘤率亦下降75%。处理后 相似文献
5.
大鼠新鲜分离DRG神经元胞体膜谷氨酸受体亚型及其分布 总被引:1,自引:0,他引:1
本文目的是研究DRG神经元膜谷氨酸受体亚型的分布及其共存情况。实验在DRG分离细胞上应用膜片带技术记录NMDA-,KA-和QA/AMPA-激活电流。在受检的37个细胞中70.3%的细胞对NMDA敏感;18.9%的细胞对KA敏感;56.8%的细胞对QA敏感。其分布的情况是:单独存在一种受体的细胞为15个;二种受体共存的细胞为13个;三种受体共存的细胞为4个.另外有4个细胞三种受体均无。 相似文献
6.
含CD自杀基因腺病毒载体的构建及其应用 总被引:6,自引:0,他引:6
构建了含CMV启动子、大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(cd)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMVCD)。经Southern杂交和RT-PCR鉴定证实,cd基因已克隆进入AdCMVCD,并在受染细胞中表达。经氯化铯密度梯度离心法纯化的病毒滴度达1×1015pfu/L。经100m.o.i.的AdCMVCD感染的HeLa和C6细胞株在100μmol/L5FC处理后,细胞存活率<20%。同时也观察到AdCMVCD/5FC系统有很强的旁杀伤效应,将3.3%的AdCMVCD受染细胞与96.7%的野生型细胞混合,经50μmol/L5FC处理后,>60%的细胞被杀死。AdCMVCD/5FC系统的建立为肿瘤基因治疗的研究提供了新的手段。 相似文献
7.
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放 总被引:2,自引:0,他引:2
有表达GDNF的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的MN9D细胞并经神经毒素MPP+处理.感染36h分别收获细胞及其培养基,用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量.结果显示,经GDNF重组腺病毒感染的MN9D细胞内及其培养基中的多巴胺水平分别增加50.7%和53.5%.给予神经毒素MPP+损伤后,细胞内多巴胺含量降低53.5%,但同时给予GDNF腺病毒则可抑制这种降低,并使多巴胺水平增加141.3%.以上结果提示GDNF腺病毒可提高细胞内的多巴胺水平并促进其释放,同时还具有对抗神经毒素MPP+损伤作用,表明GDNF重组腺病毒用于帕金森氏病基因治疗具有良好的前景. 相似文献
8.
由MDR1基因过度表达所引起的肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,是导致化疗失败的主要原因之一.针对MDR1中一段包含转录启始位点、翻译启始位点和转录正调控区的序列,设计了反义RNA并将其克隆到逆转录病毒载体pLXSN上.用脂质体包裹载体导入MDR1高表达的耐药细胞KBv200中,在反义RNA转染的细胞中,MDR1在mRNA和蛋白水平的表达都有下降,细胞内药物的浓度有所提高,对长春新碱、阿霉素的耐药性分别下降了65%和47%.实验结果表明,反义RNA对MDR1的表达有抑制作用,从而使肿瘤细胞内的药物浓度升高,其耐药程度下降. 相似文献
9.
本实验以人卵巢癌细胞株(COC1)为模型,观察诱导分化剂二甲亚砜(DMSO)与维甲酸(RA)对该细胞生长增殖、DNA合成和转化生长因子β1(TGFβ1)在细胞内表达的影响。结果显示:DMSO与RA对人卵巢细胞COC1生长有明显的抑制作用,生长曲线表明作用5天后其生长抑制率分别为62.7%和42.1%;3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入实验说明DMSO组与RA组的单位时间计数率(CPM)明显低于对照组(P<0.01)。用药3天后百分掺入抑制率分别为60.4%与37.9%,表明DMSO与RA抑制COC1细胞的DNA合成;免疫细胞化学反应表明,DMSO或RA处理5天后,对照组细胞TGFβ1表达为阳性,定位于胞浆,而处理组细胞TGFβ1呈阴性或弱阳性反应。以上结果提示DMSO和RA对人卵巢癌细胞有一定的诱导分化作用。 相似文献
10.
细胞粘附分子(CAM)可介导细胞间及细胞与间质之间的相互作用并传导信息,参与机体胚胎发育、免疫调节、炎症反应、组织修复及肿瘤转移等生理和病理过程。细胞间粘附分子1(ICAM1)是主要的CAM分子之一,可表达于活化的细胞,内皮细胞等。人膜是母体与胚胎滋养层直接接触的特殊组织、已发现蜕膜细胞在着床过程中参与了局部免疫耐受的形成,但对着床期ICAM1在蜕膜细胞表达的动态研究鲜见报道。本研究采用免疫荧光、多参数流式细胞术,分别从整体和局部角度、着床过程中外周血淋巴细胞(PBLC)及子宫内膜/蜕膜(EC/DC)细胞ICAM1的不同表达特点进行了动态观察和对比性分析。结果发现,ICAM1在着床期PBLC及EC/DC中的表达均存在明显的动态变化(Tab.1;Figs.1&2)。ICAM1在PBLC中的表达于妊娠第一天(D1)即开始降低,D2降至最低;与此不同,ICAM1在EC/DC中的表达于D2开始降低,D4降至最低,D5开始恢复,但尚未恢复到对照水平。结果表明,ICAM1在蜕膜局部的表达调节方式不同于外周血;ICAM1表达阳性的外周血,淋巴细胞和蜕膜细胞均代表着活化的功能性细胞,这些细胞表面ICAM 相似文献
11.
低分子量硫酸葡聚糖对小鼠造血干细胞动员作用的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
给小鼠静脉注射低分子量(<10 ̄4u)硫酸葡聚糖(DS)15mg/kg后外周血中白细胞、单个核细胞(mononuclearcek,MNC)、CFU-GM、BFU-E和CFU-Mix产率等指标出现时相性变化。给药后1h开始升高,2h达到高峰、分别为药前值的2.2、2.6、3.8、4.4和3.0倍,7h时趋向正常。给药后2h上述各类细胞在外周血中的含量随着DS的剂量增加而增加。白细胞、MNC计数在DS180mg/kg时达到峰值,均为对照组的4倍。240mg/k8时未见明显增加。不同剂量DS对各系祖细胞均有不同程度的动员作用,DS剂量15-30mg/kg效果最好,每升血中CFU-GM、BFU-E、CFU-Mix的数量分别相当于对照组的5.0、11.9和8.8倍。其峰值出现时间与白细胞、MNC不同,表明DS对不同类型细胞的作用机制也不尽一致。经口给小鼠投以DS240和48omg/kg后,未见外周血中白细胞、MNC计数有显著性升高,提示对造血干细胞没有动员作用。 相似文献
12.
氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关. 相似文献
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应用免疫组织化学SP方法,检测了肌源性调节蛋白MyoDl和肌球蛋白m yosin 在38例横纹肌肉瘤(RMS) 中的表达。结果显示MyoDl阳性表达主要定位于RMS瘤细胞的胞核中; m yosin 的阳性表达定位于RMS瘤细胞的胞浆中, 二者的表达阳性率分别为65.8% 和55.3% 。在RMS不同病理分型中MyoDl和m yosin 的阳性表达均无显著性差异。但RMS分化程度低,MyoDl阳性表达增强,m yosin 阳性表达下降。Myo-Dl在Ⅲ级(低分化) 中的表达阳性率显著高于Ⅰ级(高分化)、Ⅱ级(中等分化) 中的表达阳性率(P< 0.05,P< 0.05)。m yosin 在Ⅰ级中的阳性率显著高Ⅲ级中的表达阳性率(P< 0.05)。本文认为, MyoDl表达增高、m yosin 表达下降,不仅是RMS生物学行为的重要特征,也为改进低分化RMS的病理诊断和RMS早期诊断提供了有益的思路。 相似文献
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动脉平滑肌细胞(SMC)是动脉粥样硬化(AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要。脂蛋白和氧化修饰型脂蛋白对SMC增殖的影响以及SMC增殖与原癌基因异常表达的关系是当前AS发病机制研究的热点之一。我们在建立人主动脉SMC体外培养方法的基础上,观察了LDL,VLDL及HDL和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMCfos,myc,erb-B原癌基因转录表达的影响。结果表明:①HDL对SMCfos,myc基因表达无影响;②LDL和VLDL有使这些基因表达增加的趋势,但与对照比较差异不显著(P>0.05);③OX-VLDL,OX-VLDL和OX-HDL有使SMCfos,myc基因表达显著增强的作用(P<0.01),且其作用较相应的天然脂蛋白大(P<0.01).上述结果说明:LDL,VLDL,OX-LDL,OX-VLDL和0X-HDL的致AS作用可能与刺激SMCfos和myc癌基因表达增加有关。 相似文献
15.
诱导超氧阴离子(O2·)的产生是电离辐射损伤细胞和组织的重要机制之一。超氧化物歧化酶MnSOD和CuZnSOD是细胞内清除O2·的主要抗氧化酶。本研究将MnSOD和CuZnSODcDNA真核表达载体分别导入CHO细胞,以稳定表达这两种酶的CHO细胞系为细胞模型,通过分析细胞形态学、线粒体功能和受照射细胞D0值变化比较研究了MnSOD和CuZnSOD对细胞辐射敏感性的影响。结果表明,MnSOD表达的增强能明显降低细胞的辐射敏感性,同时维持线粒体的正常代谢功能,而CuZnSOD则不能。由此提示MnSOD和CuZnSOD对细胞的辐射敏感性存在着不同的调控机制。 相似文献
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报道了内皮素A型受体反义寡聚核苷酸(ODNs)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及内皮素受体基因表达的影响.~3H-TdR参入结果显示,内皮素A型受体反义ODNs处理细胞可显著抑制内皮素诱导的VSMC的DNA合成,反转录-PCR及受体结合实验结果表明,ODNs的上述作用与降低VSMC内皮素A型受体基因表达活性有关. 相似文献
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N-糖链合成抑制剂对NIH3T3细胞粘附作用和整合蛋白表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
研究了N-糖链合成抑制剂——Deoxymannojirimycin(DMM)和衣霉素(TM)对NIH3T3细胞粘附作用和细胞表面α5β1整合蛋白含量的影响.研究结果发现甘露糖苷酶Ⅰ抑制剂-DMM处理NIH3T3细胞后,3H-甘露糖(3H-Man)参入NIH3T3细胞较对照细胞增加一倍,多天线复杂型糖链增加18%,而细胞表面α5β1整合蛋白与纤连蛋白粘附能力却下降17%,但对膜整合蛋白α5和β1亚基表达量无明显影响,提示不成熟的糖链对整合蛋白参与的细胞粘附功能有一定影响,但不影响糖蛋白运输及整合到膜上.十四糖二磷酸长萜醇合成抑制剂——TM为0.5μg/ml时,N-糖链合成显著抑制,3H-Man参入减少了52%,细胞粘附能力下降了37%,细胞表面膜整合蛋白α5亚基下降了22%,而β1亚基无明显变化,提示TM的脱糖基化作用可引起α5亚基转运至细胞膜表面下降,以至影响了细胞的粘附能力.此外,脱糖整合蛋白与纤连蛋白(fibronectin,Fn)的结合力下降也是原因之一. 相似文献
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钙调素对细胞周期的调节 总被引:6,自引:0,他引:6
RC3细胞是一种用真核表达载体P^cam转染NIH3T3细胞建成的可调钙调素(Calmodulin,CaM)高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松(Dexamethasome,DXM)作用下,RC3细胞可高表达CaM.CaM拮抗剂三氟拉嗪(trifluoprazine,TFP)则使G1期细胞增加,S期细胞减少。高表达CaM使细胞分裂指数提高,G2期细胞减少,有丝分裂前期细胞 相似文献
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电离辐射能诱发超氧阴离子自由基(O-2·)的产生,同时也是细胞凋亡发生的诱因之一。锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种存在于真核细胞线粒体、具有清除O-2·作用的抗氧化酶。为探讨MnSOD在辐射诱发细胞凋亡中的作用,采用基因转染技术分别将有义和反义MnSODcDNA真核表达载体直接导入CHO细胞,并用此细胞模型研究了MnSOD对X射线诱发细胞凋亡的调控。结果发现,稳定表达有义MnSOD的细胞克隆能明显抑制8GyX射线诱发的细胞凋亡,而表达反义MnSOD的细胞克隆对X射线诱发的细胞凋亡更加敏感,进一步的研究发现,线粒体膜电位的改变可能是MnSOD调控细胞凋亡的机制之一。 相似文献
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碳离子诱导的DNA双链断裂 总被引:8,自引:2,他引:6
DNA双链断裂(DSBs)是电离辐射诱导的最重要的原发损伤,研究DSBs有利于揭示细胞辐射敏感性的机理。用倒转脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描进行DNA定量研究75MeV/u12C6+对小鼠B16黑色素瘤细胞DSBs的诱导,结果表明:DSBs产额约为0.74DSBs/100Mbp/Gy;DNA片段分布在两个区域。大片段区分子量约为1.4Mbp~3.2Mbp,分子量小于1.2Mbp的为小片段区;并且随着剂量的增加,大片段区DNA含量逐渐下降,而小片段区的DNA含量显著增加。表明B16DNA分子上可能存在对重离子较为敏感的位点。 相似文献