结核杆菌的基因诊断技术进展

结核病于８０年代后期出现世界范围内的回升,并与艾滋病相互促进发病,快速,灵敏,准确地诊断结核病势在必行,采用基因诊断技术可以满足这项要求,本对结核杆菌基因诊断的序列,技术和方法进行综述。     

PCR法快速检测临床标本中结核杆菌DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测临床标本（脑脊液、胸水、腹水、血、痰液）中的结核杆菌ＤＮＡ,特异性扩增片段１２３ｂｐ,为结核杆菌的特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因。ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性达１０ｆｇＤＮＡ。临床标本的ＰＣＲ检测阳性率（２３．３％）明显高于抗酸染色涂片（２．９％）和细菌培养（５．７％）的阳性率（Ｐ〈０．０５）。通过设立对照系统及对扩增产物酶切分析,表明该法无假阴性结果（特异     

人型结核杆菌全染色体DNA探针鉴别结核杆菌和其安分枝杆菌

The dot-blots containing DNA isolated from nonmycobacterial and mycobacterial microorganisms were hybridized with 32P-labeled M. tuberculosis whole chromosomal DNA at the various temperatures. The probe did not cross-hybridize to DNA of nonmycobacterial microorganisms (E. coli, Plasmid pUC19, Nocardia asteriodes), nor with DNA from all mycobacteria tested except M. bovis BCG under the higher temperature conditions. Microorganisms could also be directly spotted and lysed on nitrocellulose filters and used for hybridization thus making this technique suitable for clinical diagnosis.     

聚合酶链式反应检测结核杆菌的研究

以人型结核杆菌基因组DNA为模板,合成二段引物各20个碱基进行聚合酶链式反应(PCR)。经琼脂糖凝胶电泳证实,获得一条245bp扩增带。PCR检测的敏感性染色体基因组DNA为1pg,菌悬液为13个活菌／ml。在特异性试验中,人型结核杆趋,牛型结核杆菌、BCG可见此扩增带。被试的其它14种扰酸菌以及变铅青链霉菌、大肠杆菌质粒Puc19、星状诺卡氏菌、红球菌均未见该扩增带。54例肺结核痰标本3种方法检查的阳性率分别为：萋尼氏抗酸染色16．7％,培养法14．8％,PCR 37．0％。前2种检查方法分别与PCR比较,经统计学处理均有显著性差异(P<0．01)。12例非结核性肺部疾患痰标本抗酸染色和PCR均为阴性。结果表明,PCR技术是快速、敏感、特异诊断结核病的方法。     

结核杆菌的药物外排泵

外排泵基因过度表达促使细胞内的药物转移到细胞外,胞内药物浓度下降,致使药物临床疗效降低或无效。外排泵上有多个与识别底物结构无关的阴离子凹穴(底物结合位点),通过静电引力非特异性结合各种含阳离子的药物,在能量协助下将药物排到细胞外,进而导致细菌抗药性的产生。研究表明,结核杆菌基因组中存在外排泵基因,但仅分离到几个有功效的外排泵。本文就相关研究进展进行综述。     

结核杆菌DNA疫苗研究近况

当今结核病成为一种严重的传染性疾病,现正在研究新型DNA疫苗以取代BCG。目前研究以Antigen85,hsp65,以及结核杆菌培养过滤液中的分泌蛋白ESAT－6和MPT－64编码基因要建的DNA疫苗中取得一定进展,并与BCG联合使用,会大大加强免疫效果,联合疫苗是未来结核菌DNA疫苗的研究方向。     

结核杆菌蛋白质组学研究进展

结核病是对人类威胁最大的传染病之一,尽管牛型结核分枝杆菌疫苗（BCG）和各种抗结核药物在全球范围内得到了广泛应用,但近年来,随着人口流动及密度的增高,结核杆菌多重耐药菌株及同人体免疫缺陷病毒（HIV）双重感染的出现,结核病已在发达国家和发展中国家呈再度肆虐态势。     

肠原发性非何杰金淋巴瘤与结核杆菌感染

目的 探讨肠原发性非何杰金淋巴瘤（PINHL）与结核杆菌感染的关系。方法 采用聚合酶链反应（PCR）技术对20例手术切除的PINHL的瘤组织的瘤旁粘膜组织进行结核杆菌DNA（TB－DNA）检测,同时回顾临床资料,结果 20％的PINHL瘤组织和30％的瘤旁粘膜组织中检出了TB－DNA,且发现TB－DNA阳性病例多是B细胞性PINHL,发病部位多靠近回盲部。结论 结核杆菌感染与PINHL之间可能存在特殊相关性。     

抗菌肽体外对结核杆菌的作用初探

将结核杆菌接种于含抗菌肽的苏通氏培养基中 ,在接种后不同时间内取样接种于罗氏培养基上 ,观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况 ,初步探讨了抗菌肽 (CecropinB)对结核杆菌标准株H3 7RV的作用。结果显示 ,接种 10天后在罗氏培养基上结核杆菌对抗菌肽敏感。说明在体外培养中 ,抗菌肽有一定的抗结核杆菌的作用     

恶性肿瘤组织中结核杆菌DNA的检测

目的　探讨结核杆菌感染与恶性肿瘤的关系。方法　采用多聚酶链反应（ＰＣＲ） 技术检测两种恶性肿瘤组织中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ ＤＮＡ） 。结果４１ 例恶性肿瘤组织中检出ＴＢ－ ＤＮＡ 阳性患者８ 例,占１９．５ ％ ,且ＴＢ－ＤＮＡ 阳性患者肿瘤发病部位基本与结核病的好发部位一致。结论 结核杆菌感染可能与一些恶性肿瘤存在特殊相关性。     

PCR 扩增人型结核杆菌 DNA 及结核杆菌属 DNA 探针的制备

用多聚酶链反应(PCR)方法扩增人型、牛型结核杆菌基因组 DNA,获得特异的158 bpDNA 片段,而从另外十三种分枝杆菌未见到特异的扩增产物.回收158 bpDNA 片段作探针,它除与人型、牛型结核杆菌有特异的杂交信号外,与金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及一些分枝杆菌皆没有杂交反应.结果表明,PCR 可用于检测结核杆菌基因组 DNA,扩增产物158 bp DNA 片段可作为探针用于检测人型、牛型结核杆菌并鉴别结核杆菌与其它分枝杆菌.     

结核病

介绍结核病国内外流行情况,指出近年来疫情上升的原因主要是耐药菌病例增多、艾滋病病毒感染流行。简述了结核病的临床及防治。目前治仍结核病的有效疗法是规范督导下的短程化疗     

γδT细胞在结核杆菌免疫应答中的作用

γδＴ细胞是新近发现的一类独特的细胞群体,它在免疫应答中的作用及其作用机制引起的人们的关注。在γδＴ细胞的多种刺激物中,结核杆菌能够非常有效地活化γδＴ细胞。本文介绍近年来γδＴ细胞识别的结核杆菌抗原成分、作为效应细胞的作用、结核杆菌活化的γδＴ亚群（即Ｖγ２／Ｖδ２亚群）,以及结核病患者体内的γδＴ细胞变化等方面研究进展。     

结核病研究进展

本文扼要地阐述了结核病的研究新近进展,包括流行病学,病理学和动物模型,与结核病发病机理有关的细胞和分子,细胞因子与保护力和肉芽肿形成的关系,菌苗和免疫疗法以及结核病研究展望。     

恶生肿瘤组织中结核杆菌DNA的检测

目的 探讨结核杆菌感染与恶性肿瘤的关系。方法 采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测两种恶性肿瘤组织中结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）。结果４１例恶性肿瘤组织中检出ＴＢ－ＤＮＡ阳性患者８例,占１９．５％,且ＴＢ－ＤＮＡ阳性患者肿瘤发病部位基本与结核病的好发部位一致。结论 结核杆菌感染可能与一些恶性肿瘤存在在特殊相关性。     

用赖氨酸和泛酸营养缺陷型的结核分枝杆菌减毒株预防结核病

随着人类免疫缺陷病毒（HIV）与结核分枝杆菌（简称结核杆菌）共感染的情况日趋严重,急需一种安全有效的疫苗。在BCG比结核杆菌缺少的100多个开放阅读框架（ORF）中,有一些已被证明是具有保护作用的ORF,而这些缺失的区域可能编码潜在的抗原决定簇,因此结核杆菌减毒疫苗可能具有更高的免疫原性。