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缺乏有效的丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养系统是目前研究HCV侵入细胞及其装配机制的主要障碍之一。作者利用其构建的展示HCV包膜糖蛋白E1E2的假型病毒颗粒(HCVpp)对细胞表面CD81和人清道夫受体SR—B1等共受体在HCV侵入细胞中的作用进行了探讨。 相似文献
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丙型肝炎病毒高变区基因变异特点初探 总被引:1,自引:0,他引:1
对两例HCVRNA持续阳性者分三个时间点随访五年,测定了HCV的高变区基因序列,每个时间点平均测定28个克隆,总共测定了168个克隆。研究发现HCV高变区基因变异有五个明显特点:(1)变异程度大,高变区至少有89%的核苷酸位点都可能发生变异;(2)变异形式多样,除常见的替代突变外,缺失突变(缺失1、2或3个核苷酸)的克隆数占总克隆数的22.5%;(3)优势克隆明显,即有若干个克隆高变区的核苷酸和氨基酸序列相同;(4)类似株现象严重;(5)变异幅度大。该研究说明HCV高变区基因变异具有高度复杂多样性。 相似文献
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将丙型肝炎病毒高变区1(HVR1)模拟表位融合基因插入原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,经亲和层析和凝胶过滤层析获得HCVHVR1模拟表位融合蛋白。用Westernblot和ELISA检测融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合情况。皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗HCV抗体水平及其与天然HCV高变区1合成肽的交叉反应。结果表明融合蛋白能与HCV抗体阳性血清特异结合,融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合频率为71.6%(25/35)。融合蛋白免疫小鼠后能有效诱导免疫应答,其诱生的特异性抗体最高滴度达104(免疫后第8周),且该抗体能同2条天然HCVHVR1合成肽发生交叉反应。本研究提示,HCV复合HVR1模拟表位融合蛋白在丙型肝炎疫苗的研发中可能具有潜在应用价值。 相似文献
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丙型肝炎病毒复合高变区1模拟表位蛋白的免疫原性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
将丙型肝炎病毒高变区1(HVR1)模拟表位融合基因插入原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,经亲和层析和凝胶过滤层析获得HCV HVR1模拟表位融合蛋白.用Western blot和ELISA检测融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合情况.皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗HCV抗体水平及其与天然HCV高变区1合成肽的交叉反应.结果表明融合蛋白能与HCV抗体阳性血清特异结合,融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合频率为71.6%(25/35).融合蛋白免疫小鼠后能有效诱导免疫应答,其诱生的特异性抗体最高滴度达104(免疫后第8周),且该抗体能同2条天然HCV HVR1合成肽发生交叉反应.本研究提示,HCV复合HVR1模拟表位融合蛋白在丙型肝炎疫苗的研发中可能具有潜在应用价值. 相似文献
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丙型肝炎病毒 (HapatitisCVirus,缩写为HCV) ,它是肝炎病毒家族的重要成员之一 ,是输血后引起病毒性非甲非乙肝炎的重要病系 ,没有最有效的治疗方法 ,70 %以上的感染者将发展成慢性感染 ,部分将发展成肝硬化或肝细胞癌 ,危害极大。据WHO报告 ,丙肝病毒已感染了 1 7亿人 ,是艾滋病毒 (HIV)的 4倍 ,估计不止这个数字 ;我国感染“丙肝”的约在 4 ,0 0 0万以上 (2 0 0 3)。“丙肝”的临床症状与“甲肝”、“乙肝”相似 ,HCV系一种线型RNA病毒 ,RNA约 9,5 0 0碱基长 ,它应与瘟病毒群、黄病毒群归为一科即黄病毒科 ,其形态尚未肯定 ,可以… 相似文献
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本文综述了近年来对丙型肝炎病毒(HCV)颗粒的研究进展。在HCV感染引起的肝炎组织标本、血液标本及培养细胞中,普通透射电镜下发现有病毒颗粒的存在。核内颗粒直径为20 ̄27nm;胞质内颗粒的大小报道各异,其结构包括核心和外壳两部分,核心平均直径40nm。这种颗粒的特性尚未被阐明。近年在HCV感染的培养细胞及黑猩猩HCV肝炎模型中免疫电镜检查证明这种颗粒有病毒抗原性,但在人们HCV肝炎肝组织中这种颗料 相似文献
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丙型肝炎病毒(HCV)是近年来新确定的非甲非乙型肝炎的主要致病因子。感染HCV可导致急,慢性肝炎,并可发展为肝硬化和肝癌。目前,丙型肝炎的治疗主要采用干扰素,但对相当一部分的病例效果不明显。近年来,随着分子生物学技术的迅速发展,关于HCV的分子病毒学研究取得了重大进展。HCV病毒基因组为单链正股RNA分子,长约9.5kb,有一个开放阅读框架,编码一条约由3010个氨基酸组成的蛋白前体,蛋白前体可加 相似文献
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<正>1989年,美国Chiron公司在世界上率先克隆了引起非甲非乙型肝炎的丙型肝炎病毒(HCV)的基因片段,并由此开发了C100-3抗体检测系统。1990年,冈本等人发现HCV结构基因中含有5'非编码区(5'noncoding region),从而使HCV的基因组成、分子生物学活性及免疫化学方面的抗原决定基等研究迅速进展,从临床及基础研究两方面逐渐搞清楚了其全貌。本文仅简述用PCR法诊断HCV基因组的过程。 相似文献
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本文综述了丙型肝炎病毒的分类学地位,基因组结构,病毒蛋白质,实验室诊断,及传播方式和致病性等内容。强调了丙型肝炎病毒是第一个通过分子生物学发现和鉴定的病毒。 相似文献
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我国丙型肝炎病毒囊膜蛋白E2高变区1的序列特征 总被引:3,自引:0,他引:3
对23例国内献血员、血透析及肝炎病人血清用反转录巢式PCR技术扩增了HCVRNA囊膜蛋白2基因的cDNA片段,并进行了序列测定。结果表明23例病人HCVE2/NS1N末端的核苷酸及氨基酸序列呈现多样性,高变区1(HVR1)位于核苷酸第1459~1559位,氨基酸第384~410位;我国HCV株HVR127个氨基酸中有15个位置氨基酸相对稳定,氨基酸组成与分布均与Sekiya报道的166个HCV株的不同。结果提示,研究我国HCV株HVR1的序列特征有助于HCV的流行病学研究,对研制适用于我国的抗体诊断试剂盒及进行疫苗研究均有重要的意义。 相似文献
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丙型肝炎病毒高变区1模拟表位的交叉反应性分析 总被引:3,自引:0,他引:3
研究丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)高变区1(Hypervariable region 1,HVR1)抗原表位的交叉反应性,获取高反应性的抗原表位.设计并合成5种HVR1模拟表位基因,构建编码HVR1模拟表位的表达载体,表达并纯化表位蛋白.ELISA法检测表位蛋白与35份HCV抗体阳性血清的交叉反应性.包装HCV假病毒(HCV pseudotype particles,HCVpp),评价表位蛋白免疫BALB/c鼠血清在假病毒感染Huh7.5细胞中的作用.结果表明,表达纯化的5种表位蛋白(P1、P2、P5、P6、P8)均可与HCV抗体阳性血清反应,阳性反应率分别为54.3%(P1)、62.9%(P2)、80%(P5)、68.6%(P6)、54.3%(P8).表位蛋白P6、P8免疫BALB/c鼠血清对HCV假病毒感染Huh7.5细胞具明显的抑制作用.结果提示,选取的HVR1模拟表位在HCV感染免疫与疫苗研制中可能具有潜在的价值. 相似文献
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丙型肝炎病毒(HCV)是经血源传播的一类肝炎病毒。1989年美国Chiron公司Choo等率先将HCV cDNA克隆成功,使HCV成为第一个利用分子生物学技术而发现的病毒。近两年来,HCV研究的进展十分迅速,已成为病毒性肝炎研究领域中的一个热点。本文就HCV分子生物学的研究进展作一综述。 相似文献
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丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白E2所含的3个高变区(HVR1/2/3)是HCV基因组中变异程度最高的部分,参与病毒识别、黏附和入侵等过程。了解HVR的特点、变异规律及其生物学意义,不仅有利于阐明HCV持续感染及耐药机制,还可为未来HCV疫苗和新型治疗药物的设计提供理论依据。 相似文献
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丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白基因是HCV基因组中变异最大的部位,包膜蛋白的糖基化作用与其分子量大小及抗原性强弱有关,HCV包膜糖蛋白分子上可能具有中和表位,但其抗原性易变异的特点给疫苗研制带来一定困难。 相似文献
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近年来在多聚酶链反应(PCR)定性检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA的基础上建立了数种HCV的定量检测方法。随着HCV RNA定量试验的开展,对HCV病毒血症水平的消长规律获得了较为深刻的认识,并在临床实践中逐步得到了推广应用。本文就此方面的研究进展作了简要综述。 相似文献
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随着性传播疾病(STD)的流行,丙型肝炎病毒(HCV)性传播感染日益受到重视。本文综合分析HCV性传播感染流行病学调查研究的不同观点,旨在提醒人们对HCV性传播感染的警惕。 相似文献
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丙型肝炎病毒准种血清学检测技术的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立一种以血清学为基础的丙型肝炎病毒(HCV)准种检测技术。方法:自20份HCV血清中各挑选30个克隆进行测序比较,分析HCV准种的复杂程度;以HCV准种代表性抗原组合制备免疫芯片,用血清学检测技术分析上述20份HCV血清中的准种变异程度;比较两种方法之间的检出灵敏度和相关性。结果:测序法检出灵敏度为70.0%,血清学检测法检出灵敏度为95.0%,后者显著高于前者(P0.05);两种方法检测结果的相关性为74.7%(P0.01)。结论:血清学检测技术操作简单,且能够反映丙型肝炎患者的HCV准种变异程度,适于临床推广。 相似文献