风信子花被外植体年龄对花器官分化的影响

离体培养风信子(Hyacinthus orientalis L．)不同年龄的花被外植体诱导花器官直接再生的实验表明;1．在MS附加6-BA 2 mg／L,2,4-D 0.1 mg／L的培养基上,年龄V的外植体大量衰老,基本丧失器官再生能力,处于年龄段Ⅱ～Ⅳ的外植体可发生玻璃化反应。2．玻璃化反应的外植体转移至MS附加6-BA 0.2 mg／L、NAA 0.005 mg／L的培养基上继续培养30 d后可再生正常的花被片,表明降低培养基中外源激素浓度能够阻止玻璃化反应继续发生。3．在MS附加6-BA 2 mg／L．2,4-D 0.1 mg／L的培养基上,外植体形态学下部可再生雌蕊状早期结构。平均每块外植体分化雌蕊状早期结构数以年龄Ⅲ的外植体最多。     

诱导风信子再生花芽不断分化花被片的研究

通过外源激素及外植体年龄的控制,诱导风信子再生花芽不断分化花被片已经获得成功。在２５０ｄ的继代培养中平均每个花芽可分化７０多片花被片,最多的可分化１４０多片。对这种花芽不断分化花被片的形态发生过程以及生长发育特点的观察表明,花芽的第１轮器官与风信子野生型花基本相同,查花被,它由花被筒及其上部的裂片－花被片组成。     

外源激素对诱导风信子同一花被外植体不同部位细胞分化花芽的影响

本文研究了不同外源激素组合对诱导同一花被不同部位细胞分化花芽的影响,测定了花被上部、中部、下部切块离体培养前后的内部ＩＡＡ和Ｚ＋ＺＲ含量。结果表明,风信子同一花被不同部位细胞均能分化花芽,当ＭＳ培养基中附加２．０ｍｇ／Ｌ的ｚｅａｔｉｎ或６－ＢＡＰ时,随着外源ＩＡＡ浓度从０升高到１０．０ｍｇ／Ｌ,花芽分化部位由花被下部向上部移动。     

外源激素在诱导风信子花被外植体不同部位细胞再生花芽中的作用

外源激素诱导风信子（Ｈｙａｃｉｎｔｈｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓＬ．）同一发育时期花被外植体不同部位细胞再生花芽的实验表明∶１． 诱导花被外植体细胞再生花芽,外源激素是必需的;２． 仅有细胞分裂素就可以诱导花芽再生,生长素并不是必需的;３． 花被外植体上的不同部位的细胞再生花芽时,需要不同浓度的外源激素． 单独加６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ可以诱导花被下部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ ０．１ ｍ ｇ／Ｌ的组合有利于花被中部的细胞再生花芽;６－ＢＡＰ或玉米素２ ｍ ｇ／Ｌ和２,４－Ｄ １．０ ｍ ｇ／Ｌ的组合能促进花被上部的细胞分化花芽     

激素对风信子花序外植体分化形成小鳞茎的影响

用已长出地面的风信子（Hyacinthus orientalis L．）花序为试验材料。将花序分切成不同的部分,分别接种在附加不同量的NAA及BA的MS琼脂培养基上。在无激素的培养基上,除花序轴切段能形成极小的鳞茎原基以外,其余各种外相体都不能分化形成鳞茎原基。培养基中只加NAA或BA也不易分化生成小鳞茎。培养基中同时加人NAA及BA时,如NAA的用量较BA高得较多时,虽能很快形成愈伤组织,但也不易分化生成小鳞茎。如NAA的量小于BA,则花序不同部分的外植体都可形成大小不等的小鳞茎;但花被、子房较花序轴切片及花柄需要较高的激素用量。     

外源激素对诱导风信子（Hyacinthus orientalis L．）同一花被外植体不同部位细胞分化花芽的影响

本文研究了不同外源激素组合对诱导同一花被不同部位细胞分化花芽的影响．测定了花被上部、中部、下部切块离休培养前后的内部ＩＡＡ和Ｚ＋ＺＲ会量。结果表明,风信子同一花被不同部位细胞均能分化花芽。当ＭＳ培养基中附加２．０ｍｇ／Ｌ的ｚｅａｔｉｎ或６－ＢＡＰ时,随着外源ＩＡＡ浓度从０升高到１０．０ｍｇ／Ｌ,花芽分化部位由花被下部向上部移动。     

激素对风信子花序外植体分化形成小鳞茎的影响

用已长出地面的风信子(Hyacinthus orientalis L.)花序为试验材料。将花序分切成不同的部分,分别接种在附加不同量的NAA及BA的MS琼脂培养基上。在无激素的培养基上,除花序轴切段能形成极小的鳞茎原基以外,其余各种外植体都不能分化形成鳞茎原基。培养基中只加NAA或BA也不易分化生成小鳞茎。培养基中同时加入NAA及BA时,如NAA的用量较BA高得较多时,虽能很快形成愈伤组织,但也不易分化生成小鳞茎。如NAA的量小于BA,则花序不同部分的外植体都可形成大小不等的小鳞茎;但花被、子房较花序轴切片及花柄需要较高的激素用量。多年来,在生产上,风信子(Hyacinthus orientalis L.)是用从鳞茎上生出的小鳞茎,或是将基盘挖掉使鳞片上长出小鳞茎的方法繁殖。近年来,有些人用组织培养的方法,用鳞片或花序切段为外值体研究风信子的繁殖〔1—3〕。因风信子多种植在土中,用鳞片进行组织培养,灭菌较困难:而用长出地面的花序为材料不仅灭菌较容易,此外,原鳞茎还可保存下来,有利于以后的工作。本工作就是研究激素对花序的不同部分的分化形成小鳞茎的影响。     

乙烯前体ACC对番茄叶外植体分化的影响（简报）

在含有5μmol/L IAA,ZT或BA的MS培养基中,添加1.0μmol/L ACC能显著促进番茄叶外植体分化出芽;而在含有5μmol/L IAA的MS培养基中,添加10μmol/L ACC可直接诱导番茄叶外植体分化出大量的根。番茄叶外植体的乙烯释放速率随培养基中ACC浓度提高而增高,培养第2天时为最高,但与IAA的浓度关系不大。     

竹节海棠叶外植体脱分化启动的细胞学观察

竹节海棠叶外植体接种于MS+6-BA1ppm+NAA0.1ppm培养基上。外植体脱分化启动过程中,表皮及叶肉细胞主要以劈裂的无丝分裂方式进行分裂:最初核延伸为纺锤形,核仁大而明显,使整个核的轮廓呈“眼”状;随着核的中部出现裂缝,核断开成为两部分,稍后,由原来的母细胞形成两个子细胞。由于核分裂前向细胞中央移动的距离及断裂时断裂面的不同,从而造成细胞团内细胞大小悬殊及分裂面严重混乱的不等分裂现象。文中对栅栏组织细胞脱分化启动后重复进行无丝分裂形成梯状细胞团的现象也进行了讨论。     

植物激素对苧麻茎、叶外植体器官分化的影响

我们曾简单报道过苧麻茎、叶外植体诱导出完整植株的初步结果。为进一步完善苧麻组织培养技术,最近研究了七种植物激素不同浓度和各种组合及一些内外因素对茎、叶外植体器官分化的影响,并对器官分化过程中过氧化物酶同工酶谱作了初步分析。     

Induction of Continuous Tepal Differentiation from in Vitro Regenerated Flower Buds of Hyacinthus orientalis

Continuous differentiation of tepals was successively induced from regenerated flower buds in Hyacinthus orientalis L. cv. White Pearl by controlling the exogenous hormones and explant ages. In 250 days of subculture, each flower bud differentiated an average of more than 70 tepals, with a maximum of over 140 tepals. Studies on the morphogenesis and characteristics of growth and development of the flower buds indicate that the first whorled organ of the flower bud was perianth which consisted of perianth tube and tepals grown at the top of the perianth tube, which is the same as the flower bud of the wild type in H. orentalis. The second and third whorls of the flower bud, which should be stamen and pistil in the wild type, but remained as the tepals in the regenerated flower bud. Growth of the regenerated flower bud was faster in the first several months of culture, then slowed down gradually with time. After 150 days in culture the flower bud growth and organ differentiation became very slow. Other than the tepal differentiation the regenerated flower buds also differentiated at random positions some small flower buds that also differentiated the tepals only. Histological observation revealed that the origin of the regenerated flower buds was jointly participated by some cells in the epidermal and subepidermal layers at the inner surface of the perianth explant, and the inner small flower buds were originated from the meristem which was formed by the transformation of the parenchyma at the base of the very young tepal. The authors also compared and discussed the similarities and differences of the phenotypes between the regenerated flower bud in Hyacinthus and agamous flower in Arabidopsis, from which, they have hypothesized on the role of the hormones in the promotion and termination of the gene expressions by an order of development in plant.     

风信子花器官中HAP2基因的分离与表达研究(英文)

在离体条件下,以风信子花被片为外植体,通过控制激素的浓度可诱导花被片、雄蕊或胚珠的再生。近年来,在拟南芥和金鱼草等模式植物中已经分离出了许多控制花器官发育的同源异形基因,如AG,AP1,AP2,AP3等,其中AP2在控制花萼和花瓣形成过程中起重要作用,因此本文从风信子中分离AP2的同源基因,并对它在风信子再生系统中的表达进行了分析。根据AP2同源基因功能域的保守序列设计一对简并引物：5'-TGGGA（A/G）TC（G/T/C）CA（C/T）AT（C/T）TGGA-3'和5'-TCCCA(AGC)(CT)(GT)(AG)CC(AG) CA(CT)TT(AG)TG-3', 以再生的花被片为材料进行RT-PCR,扩增出大小约300bp的片段,序列分析表明该片段的氨基酸序列与AP2同源性高达89%。进而,利用5’和3’Race PCR,得到全长的cDNA。该基因命名为HAP2,GenBank登记号为AF134116,该基因全长1597bp,编码368个氨基酸(Fig.1）。与AP2相比,HAP2也含有10个氨基酸长的碱性功能域,其中KKSR为核定位信号。此外,HAP2也含有两个序列重复的68个氨基酸长的功能域（HAP2-R1,HAP2-R2）,HAP2-R1也含有能形成(-螺旋结构的核心区域,且与AP2-R1中的核心序列100%同源,而HAP2-R2中的核心区域与AP2-R2相比, 缺少9个氨基酸(Fig.2）。RT-PCR结合Southern 杂交结果表明(Fig.3）,HAP     

Effects of Temperature on Induction of Regenerative Stamens in vitro Culture,Microsporogenesis and Pollen Development in Hyacinthus orientalis L.

In order to culture the regenerated stamens of hyacinth in vitro to maturity, the effects of temperature on regeneration of stamens, microsporogenesis and pollen development were studied. Results showed: the proper temperature for stamen regeneration was 25℃. The temperature going down gradually was advantageous to the microsporogenesis and pollen development. The most suitable temperatures for differentiation of microsporocyte, meiotic division and pollen first mitosis were 20–25℃, 20℃ and 10℃ respectively. Under such temperature condition, it was possible to culture the regenerated stamens to maturity, and pollen grains in the stamens had the higher germination frequency. On the contrary, unsuitable temperature condition will make microsporogenesis and pollen development stop at certain development stage, it will finally result in pollen abortion.     

风信子中抗青霉素内生菌的分离、筛选和活性检测

通过用初筛培养基培养,从风信子叶子中分离出一种抗青霉素的内生菌,进行离体培养和抑菌活性检测。结果表明所筛选的菌株的发酵产物对细菌和真菌均有一定的抑菌活性。其中发酵液提取物对枯草芽孢杆菌有一定的抑菌活性,对苹果干腐病原菌和烟草赤星病原菌的抑菌率分别是94.8%和93.8%,而菌体内的活性物对蜡状芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌都有较高的活性,对苹果干腐病原菌、烟草赤星病原菌和苹果轮纹病原菌的抑菌率都在80%以上。     

风信子HoMADS2基因的克隆及表达分析

利用同源克隆策略,从风信子中分离出一个MADS box基因,命名为HoMADS2。序列比较分析表明,HoMADS2与B类MADS box蛋白具有较高的同源性。分子进化树分析显示,HoMADS2与PI家族类聚在一起。同时,在HoMADS2的Kbox和C末端区域均具有PI家族的特征序列。以上序列分析结果表明,HOMADS2可能是尸,的一个同源基因。RNA分子杂交结果显示,HoMADS2在四轮花器官中均表达,其表达模式不同于双子叶植物中尸,同源基因。利用风信子离体花器官再生系统研究表明,HoMADS2在再生花芽中的表达不同于HoMADS1和HAG1,该基因在再生花芽发育过程中组成型表达,不受外源细胞分裂素和生长素的影响。     

风信子品种间杂交与幼胚离体培养研究

选用5个风信子品种进行花粉生命力测定,对完全双列杂交获得的杂种种子剥胚进行离体培养.试验表明:(1)风信子不同品种花粉萌发率差别较大,其中Fondante的花粉萌发率最高为74.45%,Amsterdam的最低为12.68%,其他3个品种的花粉萌发率介于二者之间.(2)品种间自交杂交亲和力存在一定差异,结实率大于30%的组合从高到低依次为Fondante×Atlantic(61.2%)、Fondante×Fondante(54.0%)、Carnegie×Carnegie(42.6%)、JanBos×JanBos(36.0%)、Carnegie×Atlantic(32.7%)、Atlantic×Fondante(30.0%),组合Atlantic×Amster-dam、Carnegie×JanBos、Amsterdam×Fondante、Amsterdam×JanBos、JanBos×Amsterdam未得到果实,其余组合结实率介于0～30%之间.(3)适宜风信子杂交幼胚离体培养的初代培养基为MS+100 mg/L谷氨酰胺,其次为MS+0.2 mg/LIBA+0.02 mg/L6-BA+100 mg/L谷氨酰胺...