溴氨酸降解菌株的分离和特性*

从化工厂污泥中分离到 4个对蒽醌染料中间体溴氨酸有显著降解和脱色作用的菌株。经鉴定 ,4株菌均为假单胞菌属 (Pseudomonassp )。脱色效果最好的N1菌株能以溴氨酸为唯一碳源生长 ,其脱色效果受温度和 pH影响较大 ,最佳生长条件是 30℃ ,pH7 2。     

高效降解甲醛菌株的分离鉴定及其特性

首先对新分离的、能高效降解甲醛的两菌株A1和A2在形态学特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析等方面进行了系统研究; 随后通过测定在液体培养过程中甲醛浓度的变化, 确定新分离菌株A1、A2降解溶液中甲醛的性能; 最后利用菌株A1、A2分别进行生物填料塔的挂膜实验, 确定其对甲醛气体的净化性能。结果表明: 菌株A1属于假单胞菌属(Pseudomonas), 菌株A2为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas); 当甲醛初始浓度<1 200 mg/L时,菌株A1、A2都能完全降解溶液中的甲醛, 当甲醛浓度增高至1 600 mg/L时, 菌株A1在48 h后的甲醛降解率为50%, 菌株A2在104 h后的甲醛降解率为74.3%; 菌株A1、A2对甲醛气体的净化效率均能达到99%以上, 菌株A1的甲醛生化去除量能达到26.4 mg/(L?h), 菌株A2的甲醛生化去除量可达20.6 mg/(L?h)。     

氯氰菊酯降解菌GF31的分离鉴定及其降解特性

从受污染的土壤中分离得到1株以氯氰菊酯为唯一碳源生长的降解菌GF31, 通过形态观察、16S rDNA基因序列分析、生理生化实验, 鉴定该菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。菌株GF31降解氯氰菊酯的最佳pH值为7.0, 接种量为10%, 对浓度高达300 mg/L的菊酯仍可保持较高的降解活性。外加氮源对菌株的降解效能影响显著, 有机氮比无机氮更有利于农药降解。当以0.5 g/L蛋白胨作为氮源时, 降解速率明显提高, 对100 mg/L氯氰菊酯降解的平均速率为13.64 mg/(L·d), 是以硫酸铵为氮源时的2倍。初步分析认为降解产物及碱性pH环境对菌株的生长及活性具有一定的抑制作用。     

单甲脒降解菌的分离筛选

从土壤、水体和受单甲脒长期污染的样品中通过富集培养,从中分离筛选到一株单甲脒耐性较高的ＤＲ－８菌株。该菌株在牛肉汁培养基中对单甲脒的耐性可达１２５０ｍｇ／Ｌ,而在无机盐培养基中的耐性则为５００ｍｇ／Ｌ。该菌株可以利用单甲脒作为唯一氮源,但是不能以单甲脒作为碳源和能源而生长。降解单甲脒的最适温度为３７℃,最适ｐＨ为７．０,其完整细胞悬液对５５０ｍｇ／Ｌ左右单甲脒的降解率最高可达６４．８２％。经鉴定该菌株为门多萨假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｍｅｎｄｏｃｉｎａＤＲ－８）。     

聚乙烯醇降解酶产生菌的分离和发酵条件

从工厂废水中分离到一株高效降解聚乙烯醇(PVA)的细菌D8株,四天能将培养基中0.5％的PVA(500,1700)完全降解,经鉴定为假单胞菌属类产碱假单胞菌(Pseudoraonospseudoalcaligenes)。对菌株的发酵条件进行了研究,结果表明,最适培养基成份为(％)：PVA1．5,(NH4),SO4 0．1,K2HPO4 0．24,KH2PO4 0．04, MgSO4·7H2O 0.035,NaCl 0.01,FeSO4 0.001,酵母膏0.15;起始pH 7.5;通气量在250ml三角瓶装30ml培养基为最逢,于30℃,160r／rain的旋转摇床振荡培养72h产酶活力最高。     

黄曲霉毒素B1降解菌的分离鉴定及其降解特性

【目的】黄曲霉毒素是一类强毒、致癌的真菌次级代谢产物。本文旨在筛选出能高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的细菌。【方法】以AFB1结构类似物香豆素为惟一碳源进行AFB1降解菌株初筛,得到的活性菌株的培养液分别与AFB1标准品(2.5μg/mL)共同作用,以AFB1降解率为指标进行复筛。对降解活性最好的菌株通过形态、生理生化特性以及16S rRNA序列分析进行初步鉴定;并对细胞浓度、pH、温度、金属离子等对菌株降解活性的影响进行考察。【结果】初筛获得了10株在香豆素培养基上生长良好的细菌,复筛发现这些菌均具有良好的AFB1降解活性,其中从金毛羚牛粪便中筛选出的菌株F4降解活性最好,去除AFB1能力达到90.03%。根据F4菌株16S rRNA序列同源性分析,结合形态、生理生化特性,初步确定菌株F4为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。F4的降解活性与细胞浓度呈正相关。当pH 7.0,35℃,菌细胞作用72 h后毒素降解率达到82.91%。Mg2+可增强F4的降解活性,降解率提高7.68%,而Cu2+可抑制其降解活性,降解率降低51.1%。【结论】筛选到能高效降解AFB1的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)F4,F4降解毒素的活性物质主要存在于菌体细胞,其作用受到温度、pH等的影响,可能是一种胞内酶。     

多环芳烃降解菌X20的鉴定及降解特性

从多环芳烃降解高效的混合菌群中分离筛选到1株多环芳烃降解菌X20,经形态观察和16SrRNA序列分析,属于假单胞菌(Pseudomonas sp.)。采用室内摇瓶培养的方法,研究了该菌在不同环境条件下对菲和芘的降解。结果表明:弱碱环境有利于菌株X20对菲和芘的降解,最适pH为8.0;葡萄糖对菲芘降解率的影响呈抛物线变化,当葡萄糖浓度为0.2%时,X20对菲和芘的降解达到最高;X20对菲和芘的降解率随其初始浓度的上升而降低,菲和芘在初始浓度为10、20和40mg.L-1时的7d降解率分别为56.3%、39.25%、29.75%和41.8%、29.55%、23.50%,芘对X20降解的抑制强度高于菲。本研究结果将为构建高效的多环芳烃降解菌群,提高多环芳烃原位污染土壤的生物修复效果奠定基础。     

氯嘧磺隆降解菌株LW-3的分离及生物学特性研究

从长期受氯嘧磺隆污染的土壤中分离到一株氯嘧磺隆高效降解菌株,命名为LW-3,菌株LW-3可以氯嘧磺隆为唯一氮源生长,接种量为2%时,50 mg/L氯嘧磺隆经过7 d,降解率达70%～80%.生理生化实验和16S rDNA序列同源性分析,将菌株LW-3归属于假单胞茵属(Pseudomonas sp.);菌株的适宜降解条件为;温度30℃～35℃,pH 6.5～7.2,pH对菌株LW-3降解氯嘧磺隆有明显地影响.     

柴油高效降解菌株筛选及降解特性研究

采用梯度富集培养、稀释涂布从受石油污染的样品中,分离得到柴油降解菌株10株,其中菌株YR2柴油降解率最高,在含柴油1%(w/v)的无机盐液体培养基中培养7 d,降解率达到92.8%,在2%、4%、5%的柴油浓度下降解率分别为60.8%、53.5%、41.0%。综合菌株形态特征观察、生理生化特性分析和16S rDNA序列比对,菌株YR2应为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。菌株YR2具有较好的细胞表面疏水性、乳化性能和排油性能。薄层层析结果表明菌株YR2分泌糖脂类表面活性剂。菌株YR2具有高效的柴油降解能力,有望应用于柴油污染的微生物修复。     

假单胞菌诱导筛选菌株PhA苯酚降解动力学及SDS对其影响

为提高苯酚降解速率,由假单胞菌(Pseudonomonas．sp)诱导筛选得到了一株能以苯酚为唯一碳源生长的新菌株Pha,并使其苯酚选择压力从400mg／L逐步提高到了700mg／L。且Pha菌株降解苯酚过程符合一级反应动力学方程。使用十二烷基磺酸钠(SDS)作为增溶剂来促进降解时,发现在SDS浓度为50～150mg／L时,降解苯酚的速率随SDS浓度增加而提高。SDS在低浓度时对其生长影响很小,但浓度达到300mg／L时,对其生长开始有了明显的抑制作用。结果标明PhA菌株有着较高的苯酚耐受浓度,SDS可以显著的提高苯酚的降解速率。SDS的理论最佳投放量为150mg／L。     

阿特拉津降解菌株的分离和鉴定

从农药厂废水中分离到6株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌,即假单胞菌（Pseudomonas spp,.)AD1,AD2和AD6,土壤杆菌（Agrobacterium sp.)AD4,黄单胞菌（Xanthomonas sp.)AD5,欧氏菌（Erwinia sp.)AD7,AD1菌株能使无机盐培养基中的0．3g/L阿特拉津在72h内降解99．9％,当以AD1,AD2,AD4,AD5,AD6和AD7菌株的总DNA为模板进行PCR扩增时,除AD2菌株以外,均得到了与献报道的假单胞菌ADP菌株的阿特拉津氯水解酶基因（atzA)同源的PCR产物。     

苯酚降解菌的筛选及其降解特性的初步研究

从某印染厂下水道的污泥中分离到一株能高效降解苯酚的菌株ph₁₆,经初步鉴定为微球菌属 (Micrococcussp )。该菌株最高可耐受 1.5g L左右的苯酚 ,对苯酚降解最适条件为pH7.0 ,温度 35℃ ,苯酚浓度为1.0g/L ,时间为 36h,降解率可达 99.6 %。试验还表明Hg⁺ 、Co²⁺ 、Ag²⁺ 等重金属离子对该菌株降解苯酚能力有不同程度的抑制作用。并对其降解动力学作了初步探讨。     

类产碱假单胞菌杀虫物质的分离纯化和鉴定

类产碱假单胞菌是一株昆虫病原菌,该菌对草地蝗虫、竹蝗等具有良好的致死作用,经鉴定,该菌对蝗虫具有毒杀作用的物质为其代谢分泌到胞外的一种蛋白质。类产碱假单胞菌培养物经硫酸按沉淀,SephadexG-100凝胶过滤及DEAE-SephadexA-50阴离子交换柱层析,纯化获得的杀虫蛋白只含一种亚基,分子量25100,等电点5．16,含17种氨基酸,其中谷氨酸含量最高,胱氨酸含量最低,最大吸收峰为278．3nm。     

产棕榈油酸酵母菌的分离和鉴定

1992年分离到一株高产棕榈油酸的酵母菌。该菌株产油脂量为菌体干重的32.06％,棕榈油酸占油脂总量的52.14％,经初步鉴定认为是一株酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae。     

脂肪酶产生菌的选育及产酶条件的优化

A lipase-producing bacterium strain was isolated from soil and was identified as Pseudomonas sp.. Its lipase yield was improved 2.25-fold by combined beatment of UV irradiation and NTG. The lipase fermentation condition for the mutant strain was optimized with Plackett-Burman design and Response Surface Analysis(RSA), and the formula of the optimum medium suitable for industrial scale fermentation was thereby established. A maximum yield of 87.5 U/ ml was obtained.     

牙鲆肠道乳酸菌的分离和鉴定

目的：根据微生态学原理,从健康牙鲆的肠道固有菌群中分离乳酸菌。方法：需氧与厌氧培养法。结果：两种方法获得了不同的结果,用LBS（pH6.5）直接分离,从19株分离菌中只获得6株乳酸菌,其中1株P15为乳杆菌;而用LBS（pH5.4）和SL(pH5.4）先富集后分离得到了许多单一的乳杆菌菌落。对所分离的乳杆菌进行生化鉴定,均符合该菌的生化特征。牛津杯抑菌试验显示,乳酸菌对弧菌均有抑制作用,其中乳杆菌P15在pH6.8和pH7.5生长良好,并对弧菌有强力的抑制作用;而在pH8.0和pH8.5时该菌生长不良且无抑菌活性。     

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因启动子的分离和鉴定

用启动子探针型载体pFR109从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总DNA中克隆到多个启动子片段,它们在大肠杆菌中均能启动β-半乳糖苷酶基因的表达。对其中Y8片段的进一步分析结果表明:该片段不仅来自酿酒酵母基因组,而且是以多拷贝的形式存在。当Y8片段再次转入供体酵母时,它仍能启动β-半乳糖苷酶基因表达,但经次克隆去掉Y8片段5′端部分顺序后,它就失去了启动子的功能。     

ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF MYELIN-RELATED MEMBRANES

Abstract— Myelin related membrane fractions from rat brain and spinal cord were isolated from material normally discarded during standard myelin isolation procedures. A fraction which floated on 0.32 M-sucrose (F) and the material released after subjecting the myelin fraction to osmotic shock at two stages in the purification (W₁ and W₂) were characterized. These fractions were subjected to subfractionation on three step discontinuous sucrose gradients. Morphologically, the heavier subfrac-tions of W₁ and W₂ were shown to consist mainly of single membranes and vesicles. Sodium dodecyl sulphate (SDS) polyacrylamide gel electrophoresis showed that, relative to myelin, proteolipid and basic protein were reduced in all subfractions, while the high molecular weight proteins were increased. The specific activity of 2′,3′-cyclic nucleotide 3′-phosphohydrolase (CNP) was up to 2-fold higher than that of myelin in the heavier subfractions of W₁ and W₂. The major myelin-associated glycoprotein was also increased in these subfractions as determined by periodic acid-Schiff staining. Differential centrifugation of the initial tissue homogenate to remove microsomes prior to myelin isolation gave rise to W₁ and W₂ subfractions with a CNP specific activity 3–4 times that of myelin. The high molecular weight proteins and glycoproteins were enriched in these microsome-depleted subfractions, but were qualitatively similar to those of myelin. Some of the membranes in these fractions may be derived from the continuum between the plasma membrane of the oligodendrocyte and compact myelin. Fraction F consisted of small membrane fragments and many vesicles, and was particularly deficient in proteolipid. The specific activity of CNP in fraction F was about the same as myelin, while the major myelin associated glycoprotein could not be detected. Fraction F from normal CNS tissue appears to be similar to the floating fractions previously isolated in larger amounts from pathological brain undergoing edematous demyelination.     

三株解烃菌的分离鉴定和菌种保藏

我们从油田土样中分离得到三株解烃菌。它们是C20—11能利用樟脑,D36—3能利用十六烷,T3能利用苯甲酸和萘。菌株经鉴定,C20—11为粪产碱菌(Alcaligenes faecalls),D36—3为节杆菌(Arthrobacter sp.),T_3为乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcaceticus)。