用聚合酶链反应检测T细胞白血病／淋巴瘤中HTLV－I前病毒DNA

用聚合酶链反应检测Ｔ细胞白血病／淋巴瘤中ＨＴＬＶ－Ｉ前病毒ＤＮＡ陈国敏,何士勤,王柠,张永利,曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）关键词聚合酶链反应（ＰＣＲ）,人Ｔ淋巴细胞病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）,前病毒,基因整合目前,国内对人Ｔ淋...     

人嗜T淋巴细胞白血病病毒I型(HTLV-Ⅰ)核心蛋白(p24)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ⅰ）核心蛋白（ｐ２４）基因的克隆及在大肠杆菌中的表达段震峰,滕志平,纪志武,陈国敏,张永利,曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所,北京１０００５２）关键词人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）,聚合酶链反...     

人T细胞白血病病霉Ⅰ型env基因的克隆与表达

本文通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）,从整合有人Ｔ细胞白血病病毒Ⅰ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）的ＭＴ－２细胞株中,扩增出ＨＴＬＶ－Ｉ外膜蛋白（ｅｎｖ）的全基因（１．４５ｋｂ）,并成功地克隆入ｐＵＣ１９载体,构建成ｅｎｖ基因克隆ｅｎｖ／ｐＵＣ１９．利用原核高效表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ,在大肠杆菌中有效地表达了与谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）融合的ｅｎｖ羧基末端抗原的重组蛋白,融合基因的转录由ｔａｃ启动子调控。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明,有一约５２ｋＤ的目的蛋白带,表达量占菌体总蛋白的１０％;ＷｅｓｔｅｒＮｂｌｏｔｔ及ＥＬＩＳＡ结果显示,表达产物能与ＨＴＬＶ－Ｉ多抗血清结合。本研究为研制ＨＴＬＶ－Ｉ的诊断试剂及进一步了解ｅｎｖ的免疫学和生物学性质打下了基础。     

汕头市部分人群中嗜人T细胞I型病毒抗体的检测

汕头市部分人群中嗜人Ｔ细胞Ｉ型病毒抗体的检测杨棉华,陈国敏,庄春兰,余秀葵,曾毅关键词人Ｔ细胞Ｉ型病毒（ＨＴＬＶ－１）,白血病／淋巴瘤,抗体检测直到１９８０年,美国和日本的科学家才分离出第一个人类逆转录病毒ＨＴＬＶ－Ｉ［１,２］,发现ＨＴＬＶ－Ｉ与人...     

福建沿海地区人T淋巴细胞白血病病毒1型膜基因的克隆和系统树分析

人Ｔ淋巴细胞白血病病毒１型（ＨＴＬＶ－１）是最早发现的一种ＲＮＡ肿瘤病毒。利用ＨＴＬＶ－１基因组长末重复区（ＬＴＲ）或膜基因（ｅｍｖ）序列进行系统树分析,可分为Ｃ、Ｊ、ＷＡ、ＣＡ和Ｍ５个亚型。为了解我国ＨＴＬＶ－１流行区毒株的主要基因型别,从福建莆田地区克隆出３株ＨＴＬＶ－１的ｅｎｖ基因。其序列与已知各亚型代表株进行系统树分析,结果表明均为Ｃ亚型。首次证实了中国大陆ＨＴＬＶ－１Ｃ亚型的存在。该地区     

HTLV流行病学,遗传学和检测方法研究进展

ＨＴＬＶ是成人Ｔ细胞白血病和热带痉挛性麻痹症等疾病的致病因子,具有复杂的调控机制。由于所致疾病的危害性,及具有血液传播的特性,受到了广泛的重视。本文仅就ＨＴＬＶ流行病学,遗传学和检测方法方面的最新研究进展作一介绍。     

人类T细胞白血病病毒I型pX基因反式调节和致白血病机理的研究进展

人类Ｔ细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）是成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）的病因。ＨＴＬＶ－Ｉ基因组中的ｐＸ基因区域编码ｐ４０＾ｔａｘ和ｐ２７＾ｒｅｘ蛋白,前者可反式激活病毒的ＬＴＲ和ＩＬ－２Ｒ及ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦβ１等细胞基因,加强转录过程,在白血病发生中发挥重要作用。ｐ２７＾ｒｅｘ蛋白则在转录后水平进行反馈性调节。白血病的发生机理是多因子参加的多步骤过程。     

人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒TAX蛋白对NF—kB转录因子的作用

人类嗜Ｔ细胞白血病Ⅰ型病毒（ＨＴＬＶ－Ⅰ）是成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）的致病因子,其编码的ＴＡＸ蛋白的反式激活在白血病形成中有重要作用。ＮＦ－ｋＢ是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。正常情况下,ＮＦ－ｋＢ因子与抑制性蛋白ＩＫＢ结合,形成复合物存在于胞质中。ＴＡＸ蛋白可与ＩＫＢ激酶γ（ＩＫＫγ）直接结合,而后启动ＴＡＸ对ＩＫＫα和ＩＫＫβ的结合,并使之发生磷酸化。后者使ＩＫＢ蛋白降解,ＮＦ－     

持续性病毒感染免疫应答的群体动力学

本文以数学模式来探讨抗病毒免疫应答、病毒含量以及病毒变异性间的关系。由数学模式表明的结果并与人血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）和人类免疫缺陷病毒Ｉ型（ＨＩＶ－１）感染中杀伤性Ｔ细胞反应和病毒变异性研究的研究资料进行比较,获得较为一致的结果。     

人免疫缺陷病毒I型抗AZT抗药株的体外研究

人免疫缺陷病毒Ⅰ型（ＨＩＶ－１）抗３＇─叠氮─３＇─脱氧胸腺嘧啶（ＡＺＴ）抗药株经体外感染Ｃ８１６６淋巴细胞在高浓度ＡＺＴ条件下筛选获得,并暂命名为ＨＩＶ─１─Ｒ株。该抗药株与ＨＴＬＶ─ⅢＢ株相比,在同一感染复数（Ｍ０１）病毒量感染Ｃ８１６６细胞,经不同浓度的ＡＺＴ处理后,其复制的病毒量和对ＡＺＴ的敏感性有显著的差异,抗药株感染Ｃ８１６６细胞,加ＡＺＴ处理后,分离细胞ＤＮＡ作ＰＣＲ扩增后分析,特异性病毒的ＤＮＡ量比敏感株高１００倍以上,显示其抗药性作用点在病毒逆转录ＤＮＡ前。     

中枢5－羟色胺能系统与下丘脑－垂体应激激素

存在于下丘脑的神经末梢所释放的５－羟色胺（５－ＨＴ）可增加ＣＲＨ和肾素释放因子、垂体前叶ＡＣＴＨ和催乳素（ＰＲＵ、垂体后叶加压素（ＶＰ）和催产素（ＯＴ）的分泌。５－ＨＴ１和／或５－ＨＴ２受体激活介导了这些激素分泌。     

马立克氏病血清Ⅰ型致瘤株病毒感染的早期检测

马立克氏病（MD）是养禽业最重要的疫病之一,一直缺少有效的早期诊断方法。根据血清Ⅰ型马立克氏病毒（MDVⅠ）meq基因的核酸序列设计了一对寡苷酸核引物,分别对MDVR1致瘤株（京－1株）、非致瘤株（MD11／75C株、CV1988株）、MDV2（SB－1株）、HVT（Fv-126株）的核酸进行扩增。结果表明：京－1株扩增到约1.15kb核酸片段,MD11／75C株和CVI988株的扩增产物都与Digoxigenin标记的meq基因探针杂交,说明都是特异性的扩增产物,对MSB1细胞DNA及MDV感染鸡的血液及肝、肾肿瘤等DNA扩增都得到1.15kb条带,将京－1株和CV1988株感染的细胞DNA混合再扩增,同时得到1.15kb和1.0kb的核酸条带,所以根据拉增产物大小可以区别致瘤株京－1株及非致瘤株CV1988株,这表示可从CV1988株病毒免疫鸡体内检测到MDV强毒,适于早期确诊强毒感染。     

中国脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的PCR－RFLP法分析

近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的７７株Ⅰ型野毒株,经ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根据电泳图像所显示的三种酶切条带的数目,可分为１４个类型,而且同一省、自治区内不同地区（如新疆）,或同一地区不同年份（如广东）的毒株也存在着明显差异。但在某些相邻省份如广东省与海南省,９２年流行毒株电泳图像完全一致。说明本法虽不如核酸序列分析精确,但在一定程度上也能反映毒株间的差异,有助于说明流行株的亲疏关系,可用于研究毒株的分子流行病学。     

1989－1994年中国脊髓灰质炎病毒的分子流行病学

１９８９～１９９４年中国发生的脊髓灰质炎流行,疫情开始集中于华东、中南地区,后期趋于南部沿海一带。对近百份来自１８个省、市、自治区脊灰病毒流行期间标本的分子生物学特征分析,发现流行主要由脊灰病毒Ⅰ型野毒株引起,未发现Ⅱ型野毒株,但１９９３年在新疆分离到１株Ⅲ型野毒株。Ⅰ型野毒株中共存在４个基因型病毒,其中ＣＨＮＰ１－Ｒ９１型病毒为这几年流行中新产生的重组病毒,在ＶＰ１／２Ａ区含有一段疫苗株序列,另一段野毒株序列很可能来自ＣＨＮＰ１－ＪＸ８９型病毒。这两个基因型病毒分布在全国大部份地区。病毒核酸的亲缘关系研究还证明,９２～９４年流行在南方沿海一带的脊髓灰质炎,主要由９１年产生的重组病毒引起。此研究揭示了各地区、各基因型病毒与疫情之间的流行病学关系及传播模式。     

对鼻咽癌恶性转化基因Tx表达的初步研究

运用杂交组化及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ法,对中国人鼻咽癌细胞株恶性转化基因Ｔｘ的表达进行了初步研究。结果表明该基因在鼻咽癌细胞株中表达１．３ｋｂｍＲＮＡ,但表达强度较低,在ＨＰＶ阳性或阴性人宫颈癌细胞中均无表达,ＥＢＶ阴性的Ｂ淋巴细胞系及ＨＴＬＶ－１阳性的Ｔ细胞系中为阴性,而在ＥＢＶ阳性的Ｂ９５－８及Ｒａｊｉ细胞中Ｔｘ基因表达强烈,从而提示ＨＰＶ及ＨＴＬＶ－１不增强Ｔｘ的表达水平,而ＥＢＶ可能使Ｔｘ基因活化．这为进一步研究ＥＢＶ与Ｔｘ等瘤基因协同作用提供了新的依据。     

从HIV－Ⅰ中新发现编码含硒蛋白的基因探讨艾滋病化疗新方法

从ＨＩＶ－Ⅰ中新发现编码含硒蛋白的基因探讨艾滋病化疗新方法刘琼,徐辉碧（华中理工大学化学系,武汉４３００７４）关键词　艾滋病,人类免疫缺陷病毒Ⅰ型,硒艾滋病是一种目前尚无有效防治方法的疾病。它是由人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染,并在宿主细胞内大量复制...     

5－羟色胺对大鼠下丘脑脑片弓状核神经元自发电活动的影响

在７４张大鼠下丘脑脑片上,用玻璃微电极记录到弓状核自发放电单位１７６个,其放电形式有三种：慢不规则型（１１９个,６７．６％）;快连续型（４６个,２６．１％）;位相型（１１个,６．３％）。５－ＨＴ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ,３ｍｉｎ）对不同形式放电单位的作用均以抑制为主：对部分慢不规则单位（９／１１９）则表现为先抑制后兴奋的双相性反应,对少数神经元有兴奋作用。１２个被５－ＨＴ抑制的单位,其抑制作用不能被噻庚啶（ＣＨＤ,１０－５ｍｏｌ／Ｌ）阻断,４个被５－ＨＴ抑制的的单位中,其抑制作用可被二甲基麦角新碱（ＭＳＧ１０－６ｍｏｌ／Ｌ）部分或完全阻断。７个被５－ＨＴ抑制的单位,其中４个单位中,５－ＨＴ的抑制作用可被特异性５－ＨＴ１Ａ受体阻断剂Ｐｉｎｄｏｂｉｎｄ－５－ＨＴ１Ａ部分阻断;但另外３个单位的阻断效果不明显。上述结果表明：５－ＨＴ对弓状核不同形式放电单位的作用均以抑制为主,其作用可能是通过５－羟色胺（５－ＨＴ１）受体介导的,部分还可能是通过５－ＨＴ１Ａ受体介导的。     

小鼠白血病病毒致白血病机制的研究进展

小鼠白血病病毒分为两类;（１）急性转化ＭｕＬＶ：Ａｂｅｌｓｏｎ,ＭｕＬＶ 其代表,基因组含有ｖ－ａｂｌ癌基因,编码产生Ｐ１２０＾ｇａｇ－ａｂｌ磷蛋白,诱发小林巴细胞白血病,（２）慢性转化ＭｕＬＶ：极大多数ＭｕＬＶ均属于此类。基因组不携有ｖ－ｏｎｃ癌基因为其特点,Ｍｏｌｏｎｅｙ－ＭｕＬＶ（Ｍ－ＭｕＬＶ）是研究这类ＭｕＬＶ致瘤机制的良好模型。白血病生成中包括原癌基因激活、ＭＣＦ重组体形成、１５号染色体     

树下丘脑视交叉上核突触超微结构的电镜观察

本研究借助免疫电镜和溃变纤维电镜追踪等技术,探索我国南方特产,昼行动物“灵长类原宗”树鼠句（ＴＢＣ）下丘脑视交叉上核（ＳＣＮ）的突触,特别是ＳＣＮ中５－羟色胺（５－ＨＴ）能和视纤维传入的突触联系的超微结构特征,结果表明：ＴＢＣ的ＳＣＮ主要包含不对称性ＧｒａｙⅠ型（ＧＴⅠ）和对称性ＧｒａｙⅡ型（ＧＴⅡ）两种突触类型。其中ＧＴⅠ突触的后膜下颇多呈现“三体一线”的节下小体。５－ＨＴ能末梢在ＴＢＣ的ＳＣＮ（主要在其腹侧）中形成丰富的ＧＴⅠ和ＧＴⅡ突触。还观察到ＳＣＮ中５－ＨＴ能末梢和非５－ＨＴ能轴突构成颇多的轴－轴突触,５－ＨＴ能末梢既可为突触前也可为突触后成分。这在大鼠ＳＣＮ中未见报道,而视纤维传入在ＳＣＮ腹外侧区主要形成ＧＴⅠ突触     

豚鼠腹腔神经节迟慢兴奋性突触后电位与5－HT和P物质的关系

应用细胞内记录,研究了豚鼠腹腔神经节（ＣＧ）细胞非胆碱能迟慢兴奋性突触后电位（ＬＳ－ＥＰＳＰ）与５－羟色胺（５－ＨＴ）及Ｐ物质（ＳＰ）的相互关系。当重复电刺激内脏大神经（ＳＮ）时,有７８．２％的细胞（１６１／２０６）在动作电位发放后出现ＬＳ－ＥＰＳＰ,灌注或压力注射５－ＨＴ或ＳＰ,分别在６８．５％的细胞（１０２／１４９）及５２．１％的细胞（９８／１８８）上引起５－ＨＴ或ＳＰ去极化反应,两者差异非常显著（Ｐ＜０．０１）;大部分具有ＬＳ－ＥＰＳＰ的细胞对５－ＨＴ（７３／８８,８３．０％）或ＳＰ（６８／１１４５９．６％）敏感,而不出现ＬＳ－ＥＰＳＰ的细胞仅有少数对５－ＨＴ（１０／２６,３８．５％）或ＳＰ（１１／３６,３０．６％）敏感,两类细胞的差异非常显著（５－ＨＴ：Ｐ＜０．０００１,ＳＰ：Ｐ＜０．０１）。上述结果支持５－ＨＴ与ＳＰ均作为递质参与ＬＳ－ＥＰＳＰ形成的观点。此外,在１３３个细胞上同时检测了５－ＨＴ与ＳＰ的作用,其中有６６个细胞（４９．６％）对５－ＨＴ及ＳＰ均敏感,提示在ＣＧ细胞,５－ＨＴ与ＳＰ之间可能存在某种机能联系。