无菌检查的意外污染探讨

无菌检查法系指检查药物与敷料、器械是否无菌的一种方法。各国药典对无菌试验的具体操作 ,如所用的方法、培养基、培养时间、结果判断等均作了详细的规定。但未见到为了防止操作中的意外污染 ,应选用的仪器、设备和使用方法的规定。中国药典规定 :“无菌检查的全过程应严格遵守无菌操作 ,防止微生物的污染”。目前 ,我国无菌检查一般都在无菌室或超净工作台上操作 ,但国内的做法在检查过程中仍存在着较大意外污染的可能性 ;如样品容器外壁消毒不当 ,折颈时玻璃屑掉入 ,样品转移 ,滤膜过滤、淋法、滤膜转移等操作以及取样的针头或吸管均有意…     

在细胞培养无菌操作中试用火焰消毒无菌连接器

火焰消毒无菌连接器在细胞培养无菌操作中经试用证明完全符合设计要求。它适用于各种无菌管道的断开与连接的无菌操作,对其中的工作流体毫无影响。特别适用于多尘多菌地区及野外作业。它可能发展成为一种完全脱离无菌室与超净台的新的管道化无菌操作技术系统。     

浅谈食品微生物检验中无菌操作技术

随着生活水平的提高,人们对于食品安全卫生标准的需求越来越高。为了能够准确、客观的反应食品的安全卫生质量,必须在食品采样、食品取样以及检验等环节进行全面的食品微生物无菌检验,否者就是去的食品检验的根本意义。接下来,本文将结合笔者多年相关工作经验,简要论述食品微生物检验中无菌操作技术。     

可见异物检查中注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备方法的考察

文章主要是对于可见异物检查中注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备方法的考察。在实验过程中,主要采用光散射可见异物检测仪考察水的处理、注射器与西林瓶的清洗与无菌原料药的称量方法。最后,能够得到以下结论：注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备过程中的多个环节均有引入外来异物的风险,需要建立科学可行的样品制备与验证方法。     

微生物学试验中无菌观念培养的尝试

微生物学是一门注重实践与应用的严谨的科学,而实验是微生物学中至关重要的一环,良好的无菌观念和无菌操作技术是微生物学试验最终成功的基础,因此教师在教学过程中必须高度重视对学生无菌观念的培养。本文在此理论基础上,对微生物学试验中无菌观念的培养进行了简要探讨。     

盐酸莫西沙星氯化钠注射液无菌检查验证方法研究

目的:通过三家不同企业生产的盐酸莫西沙星氯化钠注射液无菌检查方法研究,建立合适的方法为该药品的无菌检查方法。方法:采用薄膜过滤-中和剂法,通过无菌验证试验确定所用无菌检查方法的有效性。结果:建立了该品种的无菌检查方法为薄膜过滤-中和剂法。结论:通过验证试验,确保该药品无菌检查方法的可行,并保证结果可靠,对其他厂家生产的盐酸莫西沙星氯化钠注射液的无菌检查提供依据。     

曲克芦丁注射液无菌检查法方法学研究

目的:验证曲克芦丁注射液无菌检查方法,确认曲克芦丁注射液在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性被充分消除到可以忽略不计。以保证检验结果的准确、可靠及检验方法的专属性。方法:按照《中国药典》2010年版二部附录ⅪH无菌检查法进行方法学验证试验。结果:与对照组比较,含供试品的各滤筒中试验菌均生长良好,并与各对照组中相应的菌落生长情况相似,供试品对照组、阴性对照组均无菌生长。由此说明,在此检验条件和检验量下,供试品不存在抑制微生物生长的因素。因此,可照此检查法和检查条件进行曲克芦丁注射液的无菌检查。三批供试品无菌检查符合规定。结论:经方法学验证,采用薄膜过滤法进行曲克芦丁注射液的无菌检查,可有效检测样品无菌情况,为控制产品质量提供检测依据。     

间苯三酚注射液无菌检查法研究

目的:建立间苯三酚注射液无菌检查法。方法:薄膜过滤法。结果:按薄膜过滤法,用100mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,以金黄色葡萄球菌为阳性菌,可以进行无菌检查。结论:本方法可用于间苯三酚注射液无菌检查。     

加替沙星注射液无菌检查方法的验证

目的:建立加替沙星注射液无菌检查方法。方法:根据《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法验证试验指导原则,采用薄膜过滤法和添加硫酸锰中和剂去除加替沙星抑菌活性的实验方法和条件进行了验证,建立了加替沙星注射液无菌检查的方法。结果:采用薄膜过滤法用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行冲洗,每桶5×100mL的冲洗量,每桶(100mL)培养基中加入硫酸锰溶液可去除加替沙星对各菌株的抑菌作用。结论:加替沙星注射液的无菌检查可采用上述方法。     

醒脑静注射液无菌检查方法的验证

目的:验证醒脑静注射液无菌检查法。方法:采用《中华人民共和国药典》2005年版二部附录无菌检查项下的直接接种法。结果:供试品管无菌生长,6株阳性菌生长良好。结论:经方法学验证,醒脑静注射液无菌检查法准确可靠。     

强化五种意识 提升微生物学实验教学效果

微生物学实验是高校生物技术等专业实践教学的必需环节。提出了实验教学过程中注意强化学生的主动参与意识、无菌操作意识、独立发现问题和解决问题的意识、创新意识以及绿色环保意识。文章对上述问题进行了观察、思考,商讨了解决方法和强化措施。     

薄膜过滤法在A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗无菌检查中的应用

采用薄膜过滤法对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法进行验证.结果表明,薄膜过滤法具有取样量大,操作简便,污染几率小,能确保检验结果的准确性、有效性和重现性,该方法适用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法.     

无菌大鼠培育中无菌检测影响因素分析

目的对无菌大鼠进行无菌检测,分析其微生物污染的多种影响因素。方法通过采集无菌隔离器内环境、无菌大鼠及其粪便等标本,选用合适的培养基在不同的条件下对其进行培养,并于第7天和第14天转种于血平皿,以此来判断无菌动物的无菌状态,并分析出现微生物污染的影响因素。结果在被检的163例标本中,检出阳性13例,且各平行样检测结果一致。经复检确认,阳性结果中有10例是动物自身带菌,3例是培养基污染。结论本检测中所采用的培养基和方法准确可靠。检查用培养基质量、培养时间、标本处理等因素都可能影响无菌检测结果。     

流式细胞技术在接触镜护理液无菌检查中的应用研究

应用流式细胞技术(flow cytometry method,FCM)进行接触镜护理液快速无菌检查,并与《中国药典》2015年版1101无菌检查法进行比较,研究结果显示流式细胞技术的检测检出限均100 CFU。当污染量在1～109CFU范围时,可直接得出含菌量,检出时间比常规方法缩短40%～70%。由此可见,流式细胞技术用于接触镜护理液无菌检查可有效缩短检出时间,可作为法定检查法的有效补充。     

无菌猕猴桃种子采集方法研究

无菌的猕猴桃种子是猕猴桃胚乳培养、实生苗微嫁接等技术的基础材料,利用消毒剂灭菌是常用的无菌种子采集手段,应用最广泛的消毒剂为升汞(mercuric chloride)和次氯酸钠(NaClO)。为了避免使用消毒剂,该研究提出了一种新的无菌猕猴桃种子采集方法——无菌搅拌法,同时为探索其准确性和应用性,比较了0.2%升汞灭菌20 min、10%次氯酸钠灭菌20 min、无菌搅拌法三种方式采集无菌猕猴桃种子的效果,并对种子萌发和幼苗形成的影响进行了研究。结果表明:无菌搅拌法、0.2%升汞灭菌20 min是稳定有效的无菌猕猴桃采集方式,10%次氯酸钠灭菌20 min的采集效果不稳定;在相同的时间内,无菌搅拌法的种子发芽率最高,为89.90%,但发芽势较低,均可正常成苗; 10%次氯酸钠灭菌20 min的发芽率次之,与无菌搅拌法的种子无显著差异,发芽势和成苗率最高,分别为47.47%和67.86%,且有打破猕猴桃种子休眠的作用,整体作用类似于赤霉素(GA_3)浸种的效果; 0.2%升汞灭菌20 min对猕猴桃种子的萌发有抑制作用,各项指标均显著低于无菌搅拌法种子,且生长缓慢。此外,无菌搅拌法是物理处理,对种子、操作人员、环境均无害。这证实了无菌搅拌法的实用性和优势,发现了次氯酸钠在打破猕猴桃种子休眠方面的作用,为其它同类型果实的无菌种子采集提供了参考。     

用气体过滤膜容器培养在非无菌条件下移植的苗获得成功

香川大学农学部园艺学讲座园艺种苗学研究室教授田中道男等开发了用气体滤膜的植物组织培养容器“Culture Pack”,并证实在非无菌条件下与在无菌条件下移植的苗生长发育相同。 使用“Culture Pack”,使二氧化碳在容器内充分过滤,苗可以进行光合成,培养基中不添加糖,苗也能生长发育。因此即使混入霉和微生物等污染,因培养基中不含糖几乎不能繁殖,对苗的生长发育没有不良影响。在无菌操作台灭菌条件下也可以进行移植作业,所以可省力并降低成本。田中等在7月21日到23日京都市召开的第13届植物组织培养学会大会上发表了此项研究成果。     

蜡样芽孢杆菌引发的食物中毒食品中克含菌量的观察

近年来国内不少报道认为:蜡样芽孢杆菌能引起食物中毒,其中毒食品的含菌量必须达到10~6/克方可确定;与我们所进行的实验观察较有出入。现将几年来较典型的7起蜡样芽孢杆菌食物中毒的活菌计数结果报告如下:以无菌操作将中毒食品25克绞碎,并用无菌生理盐水稀释成10~(-1)～10~(-5)/克的乳悬液,取0.1毫     

食品微生物采集的几点因素初探

样品的采集是微生物检验的重要组成部分,用于检验的样品数量和状况具有重要意义。这对取样人员和制样人员提出了很高的专业要求,既要保证样品的代表性和一致性,又要保证整个微生物检验过程在无菌操作的条件下进行。微生物检验样品的采集大致分为取样、包装密封、标志、样品的运输、接收、保存几个环节。     

实验室感染的预防(续二)

<正> 五、排气保护橱 这种装置也称为“微生物学安全橱”、“接种罩”或简称为“罩”。在美国则称为“生物学安全橱”。我们不赞成“安全橱”这个词,因为它意味着任何时候都能提供安全工作的条件(错觉)。事实上不可能;如果安装欠妥,维修不善或使用不当,则不可能完全“安全”。使用“排气保护橱”这词较为正确。这表明了它的基本功能:控制并排除在某种实验室驿作过程中释放出的气溶胶和空气传播性传染微粒,以及保护实验室工作人员免于由吸入而可能导致的感染。 这种排气保护橱起不了向工作面输送过滤空气装置的作用;它的设计在于保护无菌操作者(如膜滤空气无菌橱)。而应把它视为无菌操作橱。     

西洋参的组织培养

植物名称:西洋参(Panax quinquefolium)。材料类别:生理裂口种子内的胚在培养基上长成无菌苗后,将无菌苗的子叶和胚轴切成3mm见方的小块作培养材料。培养条件:培养种胚无菌苗是用1/2 MS培养基(MS的大量元素减半,其它成份不变)。诱导子叶,胚轴出胚状体用MS作基本培养基,每升附加NAA