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相似文献
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1.
应用细胞培养、3H-TdR和3H-Leucine掺入方法,观察血小板生长因子BB(Platelet-derivedGrowthFactorBB)对体外培养兔肺动脉平滑肌细胞DNA和蛋白质合成的影响。结果表明:(1)当PDGF-BB浓度为10ng/ml时,3H-TdR掺入值已较对照组显著增高(6262.5±412.9vs833.5±124.0,P<0.05);当PDGF-BB浓度为20ng/ml时,3H-Leucine掺入值亦较对照线显著增高(10212.8±638.3vs7340.3±1197.9,P<0.05)。(2)PDGF-BB浓度在5-25ng/ml范围内,3H-TdR,3H-Leucine掺入值与剂量直线相关(rDNA=0.97,rprot=0.90P<0.05)。说明PDGF-BB刺激体外培养兔肺动脉平滑肌细胞DNA和蛋白质合成。  相似文献   

2.
通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机  相似文献   

3.
对普通小麦(TriticumaestivumL.)基因组(AABBDD)最可能的供体-T.uratrtuThum.(AA)、T.monoccumvar.boeoticum(Boiss.)MK(AA)、AegilopsspeltoidesTausch.和Ae.tauschii(Coss.(DD)的核糖体RNA基因ITS区进行了PCR扩增和克隆,并测定了ITS1和ITS2的DNA序列,讨论和纠正了前人  相似文献   

4.
中国大陆若干群体的黑果蝇的线粒体DNA多态性研究   总被引:13,自引:2,他引:11  
本文研究了果蝇D.virilis种群D.virilis线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)的多态性。用9种限制性内切酶XbaⅠ,EcoRⅠ,PstⅠ,HindⅢ,BglⅡ,SacⅠ,ScaⅠ,EcoRV和PuvⅡ,对青岛、南京、上海、宁波与泉州5个D.virilis群体的mtDNA进行了限制性片段长度多态性(restrictionfragmentslengthpolymorphism,RFLP)的研究。在5群体中,发现5种不同的酶切图谱,它们彼此之间的遗传差异π为0.46%-1.76%,群体内遗传差异πij为0.00%-0.33%,群体间的差异dxy,为0.00%-0.82%。分布于中国大陆的D.virilis的群体间遗传差异在总遗传差异中所占比例γst值为24.62%。我们发现,D.virilis的栖息环境对mtDNA的遗传变异有十分明显的影响,而不同地理纬度的群体之间其遗传距离并无倾群(cline)表现。  相似文献   

5.
中国对虾cDNA文库的构建   总被引:26,自引:0,他引:26  
中国对虾cDNA文库的构建CONSTRUCTIONOFcDNALIBRARYOFSHRIMPPENAEUSCHINENSIS(CRUSTACEA,DECAPODA)关键词中国对虾cDNA文库构建KeywordsPenaeuschinensis,cDN...  相似文献   

6.
安西荒漠植物群落和优势种的分布与环境的关系   总被引:6,自引:0,他引:6  
应用排序(DCA)和回归分析方法对安西砾石戈壁荒漠植物群落及优势种的分布与环境的关系进行了研究。结果表明,该区群落的盖度(C)和密度(D)均与年降水量(R)有密切关系,而群落的种类丰富度(N)则与土壤含盐量(S)相关,其回归关系式为:C=0.051968163e0.040786821R(R=0.95,P<0.01),D=0.27147913e0.052741829R(R=0.96,P<0.01),N=13.7748-6.477303lg1000S(R=0.83,P<0.01)。即:年降水量是决定戈壁荒漠植物群落盖度和密度的主要因素,土壤含盐量则与群落种类丰富度的关系尤为突出。优势种的抗旱性顺序是:红砂(Reaumuriasongorica((Pal.)Maxim.)>泡泡刺(NitrariasphaerocarpaMaxim.)>黑柴(SympegmaregeliBge.)>珍珠(SalsolapaserinaBge.)>膜果麻黄(EphedraprzewalskiStapf.),而耐盐性顺序是:珍珠>红砂>黑柴>泡泡刺>膜果麻黄  相似文献   

7.
从力复霉素SV产生菌--地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis mediterranei)U32的硝酸盐同化基因簇的上游克隆了一个2.6kb的EcoRI-XhoI DNA片段并测定其序列。序列分析表明,该DNA片段编码两个完整的开放阅读框架(ORF),ORF2的起始密码子GTG与ORF1的终止密码子TGA在TG处重叠。ORF1编码一个含224个氨基酸的多肽,它同放线菌中典型的应答调节蛋白包  相似文献   

8.
孤生受体COUP-TF和nur77的功能及其作用机理仍未阐明.以DNA瞬时转染和测定氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性,以及凝胶阻抑测定,分析COUP-TF和nur77的相互作用对视黄酸应答元件(RAREs)的影响.实验表明,COUP-TF通过降低RAREs的基础活性,来增强RARE对视黄酸(RA)的敏感性,而nur77则拮抗COUP-TF的作用.nur77能够加强不同RAREs的转录活性,并且与RA的诱导无关.结果证实,nur77通过与COUP-TF的直接作用而对RAREs产生影响,从而抑制COUP-TF与RAREs结合和COUP-TF的转录活性  相似文献   

9.
利用PCR技术并进行DNA序列测定,从人脑cDNA库中扩增得到人豆蔻酰CoA蛋白N端豆蔻酰转移酶的编码基因,构建其在T7启动子控制下的成熟型和His6融合型的表达质粒pMF-hNMT3和pMFHT-hNMT2。转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达研究。SDS-PAGE分析结果显示,在37℃条件下表达的各种重组hNMR几乎全是不溶性产物,但在较低温度条件下表达的His6-hNMR绝大  相似文献   

10.
对青藏高原高山冰缘地区毛茛科3种特有植物的核型进行了分析。它们的核型公式(K)、染色体相对长度组成(C.R.L.)和核型不对称系数(As.K%)分别为:青藏金莲花Troliuspumilusvar.tanguticus:K(2n)=6m+8sm(2SAT)+2st,C.R.L.=4L+4M2+4M1+4S,As.K%=63.57,核型属2B型;甘青乌头Aconitumtanguticum为K(2n)=6m+10sm,C.R.L.=4L+8M1+4S,As.K%=62.54,2B型;单花翠雀花Delphiniumcandelabrumvar.monanthum为K(2n)=6m+8sm+2st,C.R.L.=4L+4M2+4M1+6S,As.K%=64.34,属3B型。经同相关近缘种核型资料比较,青藏金莲花核型不对称性和进化程度比金莲花T.chinensis低;甘青乌头的核型不对称性和进化程度在其近缘类群(乌头组Sect.Aconitum)已报道的种之内最低;单花翠雀花核型不对称性和进化水平比翠雀组(Sect.Delphinastrum)已报道的展毛翠雀花D.kamaoensevar.glabrescens、  相似文献   

11.
凉水国家自然保护区天然红松林遗传变异的RAPD分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
采用随机扩增多态DNA(random amplified polymorphicDNA RAPD)技术,研究了凉水国家自然保护区天然红松林的遗传变异水平及其分布规律。16个10bp长度的随机引物在8个实验样地内72个个体中共检测了96个位点,其中55个是多态位点。在种水平上,红松的多态位点比率为P=58.51%;Nei’s遗传变异指数为H=0.2868;Shannon’s指数为I=0.3654,所  相似文献   

12.
鸡减蛋综合征病毒(EDSV—76)基因组E1区结构特点分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
金奇  李茂祥 《病毒学报》1998,14(3):253-256
EDSV-76病毒中国株AA-2经常规方法提取其病毒DNA后,建立了限制性内切酶PstI水解片段的全基因文库。对其中PstI-G片段和PstI-A片段的正反链进行序列测定,获得EDSV E1区(0-8.8m.u)的核苷酸序列。经分析,EDSV E1区具有与其他腺病毒E1区类似的结构。以大于60个氨基酸残基为标准,EDSV E1区共有7个开放读码框架(ORF),其中R1、R2、ElbsT和E1b1T  相似文献   

13.
利用微丝(microfilament,MF)解聚药物细胞松驰素B(cytochalasinB,CB)处理G_0期小鼠C_3H_(10)T_(1/2)成纤维细胞,对G_0至S期DNA合成,胸腺嘧啶核苷激酶(thymidinekinase,TK)活性、TK基因表达、钙调素(calmodulin,CaM)水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察,G_0期细胞经3mg/LCB处理2h,促MF解聚增强了血清对S期细胞TK活性、TK基因表达和DNA合成的刺激作用,并促进细胞提前进入S期.血清刺激G_0期细胞进入晚G_1期和S期时,CaM水平明显升高,而CB预处理则使CaM含量进一步增加,特别是CB处理促使S期CaM增加向核内转移.CB处理明显增强血清对c-jun、c-fos和c-myc基因表达的刺激作用,而PKC抑制剂H_7则抑制CB处理对这些基因转录的刺激作用,说明CB使G_0期细胞MF解聚刺激c-jun、c-fos和c-myc的转录活性与PKC的作用有关.结果表明G_0至S期早期MF的重组可促进细胞进入S期,增强DNA合成.  相似文献   

14.
巴马小型猪群体遗传结构的随机扩增多态DNA分析   总被引:2,自引:4,他引:2  
目的分析巴马小型猪的群体遗传结构。方法应用经过筛选的 31条引物对巴马小型猪个体基因组DNA进行RAPD扩增,利用从internet网上下载的软件RAPD istance Package ver-sion1.04软件对实验结果进行分析,计算不同个体间的相似系数。结果经RAPD反应,共扩增出275条带,其中多态性带85条,多态性带频率在0~66.7%之间,平均为27.7%。不同个体猪拥有的RAPD条带具有差异,但拥有相同条带个体猪比率较高。该群体猪的相似系数(F)为0.928(0.78~0.97),平均等位基因频率(q)为0.732,最低平均杂合率(H)为0.286。结论巴马小型猪个体具有较好的遗传一致性和遗传稳定性。  相似文献   

15.
用浸泡法得到了(E160A)天花粉蛋白(trichosanthin, TCS),(E160D)TCS与Ade 和(E160A)TCS与FMP复合物的晶体.在Mar Research 面探测器系统上分别收集了0.20 nm ,0.19nm 和0.205 nm 分辨率的X 射线衍射数据,数据处理用Mar Scale 程序系统完成.用同晶差值Fourier法解析了(E160A)TCS-Ade,(E160D)TCS-Ade 和(E160A)TCS-FMP的晶体结构,结构修正利用X-PLOR程序,修正结果,晶体学R因子分别为0.166,0.176,0.179.键长和键角的RMS偏差分别为0.0010 nm 和2.503°,0.0013 nm 和2.665°,0.0012 nm 和2.676°.在这三个结构中均未见到Glu189侧链方向的改变.Ade 或FMP仍结合在N-糖苷酶活性口袋之中,它夹在Tyr70和Tyr111两个侧链环之间,与Tyr70环近乎平行.这一结果表明:TCS中的Glu160分别突变成Ala 和Asp,仍能与AMP发生N-糖苷酶反应,但是活性降低了一些.可见Glu160对TCS与AMP的作用是重要的,但不是必要的.  相似文献   

16.
人GM—CSF cDNA的克隆和在大肠杆菌中的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
从诱导的人胚肺细胞HFL株中提取总RNA.经RT-PCR反应获取了人GM-CSFcDNA,DNA序列测定表明其顺序与文献报道完全一致。为了获得高效表达,应用PCR改造了人GM-CSF的cDNA5’端核苷酸序列,并将改造的人GM-CSF基因插入含T7启动子的质粒pET-11d构建成表达质粒pETC-5,将此质粒转化大肠杆菌株BL21(DE3)得到表达菌株BLEC4。表达菌株用0.5mol/LIPTG诱导2小时后,产生大量重组蛋白并形成包涵体。SDS—PAGE电泳图谱扫描结果表明,rhGM-CSF产量占菌体总蛋白量的16%。ELISA和TF-1细胞培养测定表明,初步纯化和复性的rhGM-CSF具有天然的hGM-CSF生物活性。  相似文献   

17.
通过组织培养从普通小麦(TriticumaestivumL.)与八倍体小黑麦(×TriticosecaleWitmack)杂种F0幼胚再生植株后代中获得2个代换系930498、930483和1个附加系930029。以黑麦(SecalecerealeL.)基因组DNA为探针,采用荧光原位杂交(FISH)证实了黑麦染色体的存在。在有丝分裂中期,经FISH处理的黑麦染色体为黄绿色,明显区别于红色的小麦染色体。染色体配对、C分带、麦谷蛋白电泳分析,证明两个代换系为1D/1R代换,附加的也是黑麦1R染色体  相似文献   

18.
3种小麦细胞质雄性不育系及其杂种线粒体DNA的RFLP分析   总被引:9,自引:2,他引:7  
对细胞质分别来源于提莫菲维(T.timotheevii),粘果山羊草(Ae.kotschyi),偏凸山羊草(Ae.venyricosa)的3种普通小麦的雄性不育系,相应保持系和恢复系及其上的mtDNA用12个线粒体基因探针进行了RFLP分析,结果为:⑴T、K、V型不育系的mtDNA在组织结构上存在显著差异;⑵T、K、V不育系的mtDNA与共同的保持系间显著不同,失测mtDNA与小麦cms有关;⑶在  相似文献   

19.
CD40配体(CD40L)是TNF超家族成员,表达于人活化的CD4^+T细胞表面,与存在于B细胞、抗原递呈细胞表面的相就受体CD40分子相互作用,促发并调节机体的体液免疫和细胞免疫应答。用PCR法从CD40L全长cDNA质粒中扩增CD40L胞外段编码cDNA,即可溶性CD40L(sCD40L)编码cDNA,并克隆入pSK质粒;cDNA序列经测序证实后与pPICZαA质粒重组构建成pPICZαA-s  相似文献   

20.
DetectionandAnalysisofanEstrous-associatedOviductalGlycoproteinDNAFragmentfromPrimatesbyPCR¥CHENQing-xuan(陈清轩);ClaytonE.Walto...  相似文献   

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