缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

目的：探讨缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：制备缺血预处理（IP）和缺血再灌注损伤（I／R）模型,采用末端标记技术（TUNEL）检测心细胞凋亡,应用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax的蛋白表达,结果：缺血再灌注组心肌细胞凋亡率明显比正常对照组高（P＜0．05）,而缺血预处理组心肌细胞凋亡率明显比缺血再灌注组低（P＜0．05）,缺血再灌注组Bcl-2表达阳性细胞率明显比正常组低（P＜0．05）,而缺血预处理组Bcl-2表达阳性细胞率明显较缺血再灌注组高（P＜0．05）。缺血再灌注组Bax表达阳性细胞率明显较正常组高,而缺血预处理组Bax表达阳性细胞率明显较缺血再灌注组低（P＜0．05）。结论：缺血再灌注可诱导心肌细胞凋亡,缺血预处理可减少心肌细胞凋亡,Bcl-2和Bax的蛋白表达在心肌凋亡发生中起重要作用,缺血预处理可上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达。     

心宁片对糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤的保护作用和机制研究

目的:研究心宁片对糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法:腹腔注射STZ加高脂高糖饲料喂养诱导二型糖尿病小鼠模型,随机分为假手术组、模型组及心宁片高、中、低剂量组(心宁片10、20和30 mg·kg~(-1)),每组10只。在此基础上,制作心肌缺血再灌注模型。测定小鼠体内血糖和血脂水平,测定缺血再灌注后心肌酶(LDH和CK-MB)、心梗面积以及AMPK磷酸化水平。结果:心宁片能够有效的控制糖尿病小鼠体内血糖和血脂水平,减轻胰岛素抵抗情况。心宁片能够减轻缺血再灌注引起的心肌梗死,降低LDH和CK-MB水平,减少MDA水平。同时,还发现心宁片能够促进AMPK蛋白磷酸化。采用AMPK特异性抑制剂Compound C抑制AMPK后,LDH水平显著升高,心宁片的心肌保护作用减弱。结论:心宁片能够保护糖尿病合并缺血再灌注损伤,其机制可能是通过AMPK信号通路。     

后适应缺血时间窗的选择对小鼠心肌再灌注损伤的影响

目的 探讨后适应对小鼠心肌再灌注损伤的影响以及不同缺血时间窗的后适应心脏保护作用的差异 .方法 96只成年C57/BL小鼠随机分为缺血时间30、45 min和60 min的三组,每组又分为后适应和缺血再灌注两种处理.通过开胸结扎左冠状动脉造成急性心肌梗死 ,在完全再灌注早期给予反复短暂再通/闭塞的缺血后适应.采用Evans blue和TTC染色的方法确定缺血心肌和梗死心肌面积,并测定血清的心肌酶含量、心肌超氧化物歧化酶 (SOD) 活性与丙二醛 (MDA) 水平以及血流动力学指标.结果 缺血30 min后适应组、缺血45 min后适应组心肌梗死面积分别比相同缺血时间的再灌注对照组减少53.1%和31.2%,差异均具有统计学意义(P<0.01),缺血后适应可明显降低血清心肌酶、提高心肌SOD的活性以及改善血流动力学的恶化;缺血60 min后适应组梗死心肌面积无明显降低, 差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠心肌处于轻中度水平的缺血损伤,在恢复冠脉血流的早期施行缺血后适应可以有效地减少心肌再灌注损伤,但随着缺血时间的延长,心肌保护作用就明显减弱或消失.     

青藤碱抗大鼠肝脏缺血/再灌注损伤作用的机制探讨

目的:观察青藤碱时大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响,探讨其保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤作用的机制.方法:通过建立大鼠全肝缺血再灌注损伤模型,应用硝酸酶还原法测定肝脏缺血再灌注后60min血清NO水平变化;测定再灌注60 min后肝组织内MDA和SOD含量变化;再灌注60min取肝组织完成肝组织显微结构的观察.结果:肝脏缺血再灌注损伤后血清NO水平降低;青藤碱能提高再灌注后血清NO水平,且能改善肝脏缺血再灌注损伤的微循环,减轻肝细胞内超微结构的损害程度.结论:青藤碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其主要作用机制是清除氧自由基和改善微循环.     

巯甲丙脯酸降低缺血再灌注心律失常的发生率

本工作用放射免疫法、荧光组织化学等方法探讨心肌儿茶酚胺和前列环素在大鼠缺血再灌注心律失律失常发生中的作用。结扎左冠状动脉造成局部心肌缺血然后再灌注。在缺血再灌注组,缺血再灌注引起的心室纤颤发生率为７８％;在巯甲丙脯酸组,巯甲丙脯酸预处理可使缺血再灌注心室纤颤发生率下降了６５．５％;与缺血再灌注组相比,巯甲丙脯酸组的心肌儿茶酚胺含量、心肌６－酮－ＰＧＦ１ａ（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）的含量明显升高（     

Losartan和人参对实验性大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡影响的比较研究

目的　研究Losartan和人参对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响 ,比较Losartan和人参对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用。方法　结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支 ,建立大鼠缺血再灌注动物模型 ,采用末端标记原位细胞凋亡法检测心肌细胞凋亡 ,并利用光学显微镜进行细胞计数。结果　单纯缺血 再灌注组心肌细胞凋亡数较假手术组明显增多(37 5± 9 2 2 /视野vs 0 18± 0 0 91/视野 ,P <0 0 5 ) ,Losartan组和人参组心肌细胞凋亡数分别为 6 5 0± 3 5 9/视野和 8 74± 3 5 1/视野 ,较单纯缺血 再灌注组明显减少 (P <0 0 5 ) ,Losartan和人参两组间无明显区别 (P >0 0 5 )。结论　缺血再灌注可引起明显的心肌细胞凋亡 ,Losartan和人参对缺血再灌注心肌损伤具有相似的保护作用 ,均可明显减少缺血再灌注心肌细胞凋亡。     

大鼠心肌缺血再灌注模型构建的改良

目的改良大鼠心肌缺血再灌注模型的构建方法,增强实用性。方法32只SD雄性大鼠随机分为四组（A组：伪手术组;B组：缺血组;C组：缺血30 min再灌注组;D组：缺血60 min再灌注组）。缺血过程在人工机械通气条件下完成,术前术中监测心电图变化,模型成功72 h后抽血进行心肌酶谱分析,并观察左室压变化。结果造模成功率为91%。B、C、D组各心肌酶含量明显高于A组（P〈0.05）,C、D组低于B组（P〈0.05）。B、C、D组左室压值低于A组（P〈0.05）,C、D组高于B组（P〈0.05）。结论改进后的模型制备方法简便易行,成功率高,评价指标符合临床应用。     

调控性细胞死亡在肾脏缺血再灌注损伤中的研究进展

肾脏上皮细胞死亡是肾脏缺血再灌注损伤引起的一种明显的病理现象,而最新研究发现调控性细胞死亡在肾脏缺血再灌注损伤中发挥着重要作用。本文就程序性坏死、铁死亡和细胞焦亡等调控性细胞死亡的相关通路、调节剂和相互作用以及在肾脏缺血再灌注损伤中的作用进行综述,以期对肾脏缺血再灌注损伤的预防和治疗提供理论基础。     

缺血预处理对缺血/再灌注离体心脏的保护作用

目的：探讨连续多次短暂缺血预处理对缺血/再灌注损伤心肌的保护作用及机制。方法：采用大鼠离体心脏Lan-gendorff灌流模型,观察缺血预处理对心肌缺血/再灌注后不同时间点冠脉流出液中AST、CPK、UDH及冠脉流量,心肌组织中SOD、LPO以及再灌注性心律失常的影响。结果：缺血预处理可以减少缺血/再灌注损伤的心肌冠脉流出液中AST、CPK、LDH的含量,提高心肌SOD活性,降低LPO水平,并且抑制再灌注性心律失常的发生,提高再灌注期间的冠脉流量。结论：缺血预处理对心肌缺血/再灌注损伤具有一定保护作用。     

GLP-1及其受体激动剂在缺血再灌注损伤中的研究进展

GLP-1受体激动剂是一种新型的降糖药物,具有有效降低糖化血红蛋白、减轻体重和避免低血糖的发生等特点,目前在2型糖尿病的临床治疗中应用越来越广泛.近年来,许多临床前和人体生理研究已经证明GLP-1受体激动剂对多种组织器官的缺血再灌注损伤具有保护作用.本文主要就GLP-1及其在心、脑、肾脏及肝脏等重要脏器缺血再灌注损伤中...     

缺血预处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响

目的：研究缺血参处理对缺血再灌注后兔脊髓磷酸腺苷代谢的影响。方法：往置入腹主动脉的Swan-Ganz导管气囊内注气造成兔腰髓缺血模型。将实验兔分为假手术组、缺血组和预处理组。应用反相高效液相色谱方法（reverse phase HPLC),对缺血再灌注后不同时间点腰髓组织中磷酸腺苷（ATP、ADP、AMP）的含量进行检测。结果：和假手术组相比,缺血组兔再灌后各时间点腰髓组织ATP含量有明显下降（P＜0．01）。与缺血组相应时间点相比,预处理组兔再灌注后腰髓组织ATP含量明显提高（P＜0．01）。结论：缺血预处理显著提高缺血再灌注后兔脊髓组织ATP含量,这可能是缺血预处理对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用的机制之一。     

RNA干扰NF-κB p65对缺血再灌注损伤鼠肺NF-κB和TNF-α的影响

为了研究RNA干扰NF-κBp65对鼠肺缺血再灌注损伤肺组织中NF-κB、TNF-α表达的影响,并探讨减轻鼠肺损伤的保护机制。本研究构建了体外靶向NF-κBp65的短发夹RNA (short hairpin RNA, shRNA)重组表达载体,并采用QPCR检测NF-κBp65的沉默结果。供试的16只SD大鼠随机分为4组:假手术组4只、缺血再灌注+生理盐水组4只,缺血再灌注+NF-κBp65 sh RNA组4只,缺血再灌注+空载组4只,假手术组无缺血再灌注损伤,开胸游离左肺门180 min,缺血再灌注+生理盐水组左肺门阻断前术前24 h给予生理盐水处理,开胸游离左肺门,左肺缺血60 min,再灌注120 min,缺血再灌注+NF-κBp65 shRNA组左肺门阻断前术前24 h滴鼻给予NF-κB shRNA腺病毒(1×1010pfu, 100μL/只),开胸游离左肺门,左肺缺血60 min,再灌注120 min,缺血再灌注+空载组左肺门阻断前术前24 h滴鼻给予空载shRNA腺病毒(1×10~(10)pfu, 100μL/只),开胸游离左肺门,左肺缺血60 min,再灌注120 min。实验结束后每组分别留取左肺组织,留取左肺上叶肺组织测定肺湿/干重比(W/D),部分肺组织光镜下观察病理变化,ELISA法测量NF-κB和TNF-α的表达含量。研究结果表明:成功构建重组NF-κBp65载体,并获得稳定转染的NF-κBp65 shRNA细胞,与转染空载体的阴性对照组(negative control, NC)比较,NF-κBp65 sh RNA能明显使NF-κBp65基因沉默(p0.05),肺组织NF-κB、TNF-α的表达量及W/D值与假手术组比较,缺血再灌注+生理盐水组和缺血再灌注+空载组有明显升高(p0.05);而与缺血再和灌注+生理盐水组和缺血再灌注+空载组比较,缺血再灌注+NF-κBp65 shRNA组明显降低(p0.05),病理学检查表明:假手术组肺组织无明显的炎症损伤;缺血再灌注+NF-κBp65 shRNA组肺炎性损伤较缺血再灌注+生理盐水组和缺血再灌注+空载组明显减轻。本研究结果初步说明,RNA干扰NF-κBp65能明显减轻早期肺移植损伤,其机制可能与抑制NF-κB和TNF-α的表达从而减轻肺组织炎症损伤有关。     

胰岛素对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响

目的：观察胰岛素对大鼠肠缺血再灌注后小肠组织损伤的影响。方法：雄性SD大鼠40只随机分为4组,每组10只,手术对照组、单纯缺血组、再灌注组、胰岛素干预组。于30min缺血和120min再灌注后,进行组织病理学和生化检测。结果：（1）单纯缺血组肠粘膜损害较手术对照组明显升高（P〈0.01）,超氧化物歧化酶（SOD）活性无明显变化;（2）再灌注组SOD活性明显降低,与手术对照组和单纯缺血组相比较差异均有显著性（P〈0.01）;（3）胰岛素组SOD活性与再灌注组相比有明显改善（P〈0.01）。结论：肠缺血可以引起肠粘膜损伤,再灌注则可加重这种损伤,胰岛素可以减轻再灌注损伤。     

胰岛素对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响

目的:观察胰岛素对大鼠肠缺血再灌注后小肠组织损伤的影响。方法:雄性SD大鼠40只随机分为4组,每组10只,手术对照组、单纯缺血组、再灌注组、胰岛素干预组。于30min缺血和120min再灌注后,进行组织病理学和生化检测。结果:(1)单纯缺血组肠粘膜损害较手术对照组明显升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显变化;(2)再灌注组SOD活性明显降低,与手术对照组和单纯缺血组相比较差异均有显著性(P<0.01);(3)胰岛素组SOD活性与再灌注组相比有明显改善(P<0.01)。结论:肠缺血可以引起肠粘膜损伤,再灌注则可加重这种损伤,胰岛素可以减轻再灌注损伤。     

心肌缺血预处理对I/R心肌细胞NO表达的影响

目的:研究心肌缺血预处理时NO变化,并探讨引起变化的原因及意义.方法:选择SD大鼠,随机分成假手术组(CON组),预处理组(IP组),缺血/再灌注组(I/R组).以手术套管法造成左冠状动脉主干缺血及再灌注,损伤后取心脏测量NO、NOS和cGMP水平.结果:IP组较I/R组NO、NOS和cGMP明显增高(P＜0.05).结论:NO参与心肌缺血预处理的保护作用,其含量增高是由NOS活性增强引起的,保护作用是通过cGMP中介的.     

缺血再灌注对小鼠肠神经丛nNOS 和iNOS表达的影响

目的观察缺血再灌注后小鼠回肠神经型一氧化氮合酶(neuron alnitric oxide synthase,nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase,iNOS)的表达,探讨肠缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的发生机制。方法采用小鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型,根据不同再灌注时间对小鼠随机分1d组、3d组、5d组、7d组、对照组和假手术组,用SP法检测小鼠回肠nNOS和iNOS的表达情况。结果与对照组和假手术组相比较,nNOS在再灌注1d后开始在肌间神经丛持续高表达(P<0.01);而iNOS在再灌注3d后开始在肌间神经丛持续高表达(P<0.05)。结论nNOS和iNOS在肠缺血再灌注后的表达增强,提示一氧化氮及一氧化氮合酶与肠神经节细胞在缺血再灌注中的损伤有着密切关系。     

大蒜素对全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡的影响

目的:观察大蒜素对全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡的影响。方法:采用大鼠全脑缺血/再灌注模型;应用DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流式细胞仪检测海马神经元凋亡情况。结果:缺血/再灌注大鼠海马DNA电泳呈现细胞凋亡特有的"梯状条带",大蒜素预处理组未出现"梯状条带";透射电镜观察到缺血/再灌注海马部分神经元超微结构呈现明显的凋亡特征,大蒜素预处理可改善神经元超微结构;缺血/再灌注海马神经元凋亡率较假手术组明显增加,大蒜素预处理可明显降低缺血/再灌注大鼠海马神经元凋亡率。结论:大蒜素可抑制全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡。     

脊髓分级缺血再灌注损伤模型的建立与病理学评价

目的建立兔脊髓分级缺血再灌注损伤模型和探讨受伤脊髓病理变化可能机制。方法采用肾下腹主动脉阻断法,分别阻断腹主动脉30min、45min和60min后开放,再灌注48h观察神经功能变化以及病理学评价脊髓缺血再灌注损伤程度。结果脊髓缺血时间越长,后肢运动功能损害越明显。伤后2天发现受损脊髓出血、水肿、变性坏死,明显的白细胞浸润以及I-κBα、NF-κBp65、ICAM-l表达增加,脊髓灰质的病理损害严重。再灌注脊髓病理损伤程度依次为缺血60min组>缺血45min组>缺血30min组>假手术组。结论该模型是一种较好的脊髓缺血再灌注损伤模型,阻断肾下腹主动脉血流30min、45min、60min后开放可以较好地反应轻、中、重不同程度缺血再灌注损伤脊髓的病理变化特点。     

红花注射液在断指再植术后应用的临床疗效分析

目的：探讨红花注射液对断指再植术后缺血再灌注损伤治疗的临床疗效。方法：2009年8月至2011年02月选取我院就诊患者中完全离断断指186病例200指,随机分为缺血再灌注损伤组、对照组,分别记录抗缺血在灌注损伤组和对照组血管痉挛、血管栓塞、指体坏死发生的例数。选取部分患者测定血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）在灌注前后的变化,并进行统计学分析。结果：对照组断指存活率86%,抗缺血再灌注损伤组断指存活率95%。抗缺血再灌注损伤组与对照组断指再植术后血管痉挛、血管栓塞、断指坏死发生率差异具有显著性差异（P〈0.05）。断指再指术后红花注射液能减少MDA的产生,提高SOD的活性,抗缺血再灌注损伤组再灌注后24h及1周的血液中MDA和SOD含量与对照组相比有显著性差异（P〈0.05）。结论：红花注射液能减轻断指再指术后缺血再灌注损伤,减少术后并发症的发生,提高了断指再植的成功率,疗效确切,无明显不良反应。     

红花注射液在断指再植术后应用的临床疗效分析

目的:探讨红花注射液对断指再植术后缺血再灌注损伤治疗的临床疗效。方法:2009年8月至2011年02月选取我院就诊患者中完全离断断指186病例200指,随机分为缺血再灌注损伤组、对照组,分别记录抗缺血在灌注损伤组和对照组血管痉挛、血管栓塞、指体坏死发生的例数。选取部分患者测定血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)在灌注前后的变化,并进行统计学分析。结果:对照组断指存活率86%,抗缺血再灌注损伤组断指存活率95%。抗缺血再灌注损伤组与对照组断指再植术后血管痉挛、血管栓塞、断指坏死发生率差异具有显著性差异(P<0.05)。断指再指术后红花注射液能减少MDA的产生,提高SOD的活性,抗缺血再灌注损伤组再灌注后24h及1周的血液中MDA和SOD含量与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:红花注射液能减轻断指再指术后缺血再灌注损伤,减少术后并发症的发生,提高了断指再植的成功率,疗效确切,无明显不良反应。