花生幼叶为外植体的植株再生系统的建立

本文报道利用花生成熟胚幼叶为外植体获得高频植株再生的方法,为花生转基因提供有效的受体系统。通过诱导培养基TDZ、BA、NAA的浓度以及种子萌发时间、继代培养基种类五个因素不同水平的正交试验,筛选出了分化高频发生的最佳组合为：MS培养基中应含有TDZ 1.0 μmol/L、BA 0.4 μmol/L、NAA 5.0 μmol/L,种子萌发4 d,继代培养基为MS0。本研究表明,五因素中诱导培养基TDZ浓度为诱导花生幼叶分化的主要影响因素,其次为继代培养基、种子萌发时间,而诱导培养基中BA和NAA的浓度作用较小。试管苗生根后移栽田间,可正常开花结果。     

吊兰的试管快速繁殖

植物名称:吊兰(Chlorophytum comosum)。材料类别:种子萌发的无菌苗全株及叶片。培养条件:无激素MS培养基用于种子发芽;诱导愈伤组织启动培养基(1)为MS+2,4-D2mg/1;诱导芽分化的培养基(2)为MS+BA2—3+NAA0.1—0.2mg/l,培养温度26—30℃,每天人工辅助光照16小时,光照度800—2400lx。生长及分化情况:取金边吊兰种子,经表面灭     

糜子离体体细胞胚胎发生和植株再生 Ⅱ.各种因素的影响

本试验就各种因素对糜子胚性和非胚性愈伤组织诱导的影响及其植株再生进行了较为详细的研究。结果表明,2,4-D是诱导胚性愈伤组织所必须的;蒸糖浓度、酵母浸出汁和水解乳蛋白的含量、基本培养基组成、外植体来源和黑暗培养等因素也都有不同程度的影响;而且各种因素对胚性愈伤组织的影响比非胚性愈伤组织更大。诱导胚性愈伤组织最适宜的培养基组成是MS+2,4-D(2mg/l)+BA(0.5mg/l)+蔗糖(3%)+YE(0.3%)+LH(1600mg/l)+盐酸硫胺素(0.4mg/l)。两种愈伤组织转移到无或含少量2,4-D的MS培养基上,只能从胚性愈伤组织再生植株。再生植株经移栽生长成熟并结了种子。     

百合胚的组织培养和快速繁殖技术

本试验以百合幼胚作为外植体,进行离体胚培养,观察胚的萌发和生长情况,筛选出适合百合种胚萌发、继代、生根的培养基。结果表明,最适合百合离体胚萌发及生长的培养基为MS+BA0.1mg/L+NAA 0.01mg/L;最适合增殖的继代培养基为MS+NAA0.01mg/L+BA0.25mg/L;在培养基1/2MS+NAA0.05mg/L中,绝大部分的幼苗均可正常生根,对移栽后的成活株数进行了调查,移栽成活率可达到90%以上。     

大花蕙兰茎尖组织培养及其形态建成的研究

以大花蕙兰(Cymbidium grandi,lorium)茎尖为外植体,在改良的Vacin和Went培养基上诱导形成了原球苹,并且在添加有1 mg/1BA的‘Vacin和Went培养基上获得了快速繁殖无性系,将原球茎转移到加有香蕉匀浆汁的Knudson c培养基上,很快长出叶片和根,形成完整的再生植株。较高浓度的BA(1.O mg/1)能促进原球茎的增殖;较低浓度的BA(O.4mg/1)能促进原球茎的分化。形态发生的显微观察表明原球茎来源于体细胞胚,它的发育过程与合子胚十分相似。     

黄花鹤顶兰的组织培养与快速繁殖

1植物名称黄花鹤顶兰[Phaius flavus (B1.) Lindl.]。2材料类别种子。3培养条件种子萌发培养基:(1)MS;(2)MS 100 mL·L~(-1)香蕉汁;(3)1/2MS;(4)1/2MS 100 mL·L~(-1)香蕉汁:(5)VW;(6)VW 100 mL·L~(-1)香蕉汁。原球茎继代增殖培养基:(7)VW NAA 0.2 mg·L~(-1)(单位下同) 100 mL·L~(-1)香蕉汁:(8)VW NAA 0.4 100 mL·L~(-1)香蕉汁;(9)VW 6-BA 0.5 NAA 0.2 100 mL·L~(-1)香蕉汁:(10)VW 6-BA 2.0     

银杏幼嫩茎段培养诱导愈伤组织及其细胞学研究

将银杏幼嫩茎段培养于含NAA和BA的MS和改良MS培养基中获得球型胚。培养基类型对愈伤组织的诱导和分化有明显影响,MS培养基优于DCR培养基。所有的MS和改良MS培养基上有胚性细胞的分化。在含有4mg／L的NAA的MS和改良MS培养基中,有三细胞和四细胞的原胚出现,并在MS 2mg／L NAA 0．1mg／L BA的培养基中观察到球形胚的分化。     

濒危植物紫斑牡丹胚离体培养

以MS为基本培养基 ,添加不同浓度的BA、NAA及其组合 ,对濒危植物紫斑牡丹的胚进行体外培养。实验结果显示在没有添加任何激素的培养基上 ,离体胚生长类似种子萌发时胚的生长模式 ,子叶扩大伸长 ,达到约种子大小时停顿 ,根伸长生长极其显著 ;BA促进子叶膨大生长 ,当BA浓度增大时根生长受到抑制 ;NAA促进愈伤组织形成 ,抑制根生长。 0 .1mg·L- 1BA促进紫斑牡丹胚的胚轴、根生长 ,有利于幼苗形成。     

不同激素对花生离体分化的影响

对TDZ和2,4-D等激素在花生成熟胚外植体分化中的影响进行了研究.结果表明,花生成熟胚3～5 d龄实生苗的幼叶和胚轴在低浓度TDZ的诱导下,可分化产生高频不定芽和少量体细胞胚,转到无激素MS培养基或MS BA 0.5 mg/L NAA 0.4 mg/L的培养基后形成丛生苗.丛生苗分离后转入含1/2 MS(大量元素) IBA 0.4 mg/L的培养基中诱导生根,可形成完整的再生植株.幼叶分化率高于胚轴,但胚轴分化成苗速度快.无菌水浸泡16～24 h的胚轴在5～ 30 mg/L 2,4-D的诱导下,分化产生低频不定芽;而胚叶则产生高频体细胞胚,但畸形较严重.     

贯叶连翘的试管快繁研究

以贯叶连翘的茎节等为外植体 ,进行植株再生和快速繁殖研究。结果表明在BA、NAA、IBA和 2 ,4 -D不同组合的MS或 1/ 2MS培养基上 ,以茎段为外植体的愈伤组织和试管苗易于诱导 ;在 1/ 2MS BA 1～ 1.5 (mg/l) NAA 0 .1～ 0 .5 (mg/l)的培养基中增殖速度快 ,繁殖系数高 ;在 1/ 2MS NAA(IBA) 0 .5～ 1(mg/l)培养基中均能诱导生根。     

甘草的组织培养

植物名称:甘草(Glycyrrhiza uralensis) 材料类别:下胚轴和子叶。种子经常规消毒后接种于MS附加GA1mg/l(单位下同)的培养基进行无菌萌发,然后将无菌苗的下胚轴切成5毫米左右的小段,每片子叶则纵切成二块。培养条件:以MS为基本培养基,诱导愈伤组织和芽的分化附加(1)ZT2;(2)BA2;(3)KT2,ZT2,NAA0.2;(4)BA0.2,NAA2。生根培养基为MS改半加NAA0.05。培养温度为26～28℃,每天光照12小时,光照度1500～2000lx。     

八角莲组织培养研究

以八角莲种子为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,对八角莲进行组织培养研究。结果表明:种子在MS+BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA34.0mg/L培养基上容易萌芽,发芽率为72.4 %;培养基MS+BA10.0mg/L+GA30.5 mg/L可诱导种子幼苗形成丛生芽;继代繁殖在MS+BA(8.0～10 .0)mg/L+GA32 .0mg/L与低浓度BA或无BA的培养基上进行循环培养效果较好;MS+NAA1.0 mg/L+AC0.2g/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率100%。带叶叶柄在MS+BA1.0mg/L+2-ip(0.5～1.0) mg/L+NAA0.02 mg/L培养基上可诱导愈伤及根,直接形成再生植株。生根苗移栽成活率90 %。     

巴西铁树茎段培养与试管繁殖

植物名称:巴西铁树,又叫山德氏龙血树(Dracaena sanderiena)。材料类别:多年生植株基部二年生的侧枝茎段。培养条件:用改良的MS配方为基本培养基。诱导愈伤组织时为 MS+2,4-D1-3mg/l(单位下同)+BA0.5—1.0;分化培养基为MS+BA2—4+NAA0.01—0.2;丛生芽的增殖为MS+BA1—2+NAA0—0.1;生根培养基为0.5MS+NAA0.1—     

铁十字秋海棠试管快速繁殖

试管快速繁殖珍稀观叶植物铁十字秋海棠(Begonia masoniana),初步达到商业性生产的要求。体现在繁殖程序简单,增殖率和出瓶成活率均较高等方面。材料为嫩叶,诱导和分化培养基为MS附加BA2mg/l和NAA0.2mg/l(单位下同),或改良的MS(其中大量元素和糖减半,B_1扩大10倍)附加BA2和IAA0.2。增殖培养基为MS+BA0.5+IAA0.2或N_6+KT1+NAA0.2。壮苗培养基为改良的MS(B_1扩大10倍,附加活性炭0.2％)。     

沙打旺悬浮培养细胞原生质体的体细胞胚胎发生再生植株(英文)

以继代培养5—24代的沙打旺(Astra-galus adsurgens Pall.)胚性悬浮系为材料,从生长4d的细胞培养物中可游离出大量有活力的原生质体。细胞预质壁分离或低温预处理对原生质体得率和活力没有影响,但可提高原生质体培养的植板率。预处理的原生质体培养在NH_4NO_3浓度降至2.5mmol/L,并附加0.5mg/L NAA、1.0mg/L 2,4-D、0.7mg/L BA和0.4mol/L葡萄糖的KM8P培养基中,经持续分裂形成细胞克隆,植板率高达16%—20%。细胞克隆在附加1.0mg/L 2,4-D和0.5mg/L BA的MS培养基中增殖后,转至含0.1mg/L NAA和1.0mg/L BA的MS分化培养基中可形成体细胞胚,平均体细胞胚发生频率约为40%,每个克隆产生20—40个体细胞胚。在无激素的1/2MS培养基中,体细胞胚发育成形态正常和染色体数稳定的小植株。     

孔雀竹芋的组织培养

以孔雀竹芋的蘖芽为材料进行组织培养,获得组培苗,试验表明:蘖芽生长的合适培养基为MS BA3mg/L NAA0.3mg/L,芽增殖培养基为MS BA5mg/L NAA0.3mg/L,生根培养基为MS NAA l.5mg/L。     

金荞麦的组织培养

植物名称:金荞麦(Fagopyrum cymosum)。材料类别:种子无菌苗的下胚轴和子叶柄。培养条件:诱导愈伤组织培养基:(1)MS+2,4-D1mg/l(单位下同)+KT0.25;(2)MS+2,4-D1+BA0.2。分化培养基:(3)MS+NAA0.1+BA2。促进不定芽伸长培养基:(4)MS_0。诱导生根培养基:(5)1/2MS_0;(6)1/2MS+NAA0.1;(7)1/2MS+NAA0.5。培养温度26±2℃,光照度1500—2000 lx,每日照光12小时。     

枸骨的组织培养与快速繁殖

1植物名称枸骨(flex cornuta Lindl.eX Paxt.),别名鸟不宿,猫儿刺. 2材料类别种子. 3培养条件种胚萌发培养基:(1)I/2MS GA,1.0mg·L-1(单位下同);壮苗培养基:(2)MS BA 1.5 NAA0.5;不定芽诱导培养基:(3)MS BA 2.0 NAA 0.1;增殖与继代培养基:(4)MS BA 3.0 KT 0.5 IBA 0.5;(5)MS BA2.0 KT0.5 113A0.5;生根培养基:(6)I/2MS IBA 0.2 NAA 0.2.以上培养基都加入3%蔗糖和0.7%琼脂粉,pH 5.6～5.8,高压锅121℃灭菌15 min.培养温度为(25 2)℃,光照强度为加40～50μmol·m-2·s-1,光照时间为14 h·d-1.     

龙眼花粉植株的诱导

以优良品种“东璧”花粉处于单核期的花药为材料。诱导愈伤组织用MS培养基,附加K1.0 mg/l,2,4-D 2.0 mg/l,活性炭5,000 mg/l,蔗糖5％。分化胚状体在杜鹃培养基补加6BA 0.5mg/l,NAA0.1mg/l,蔗糖3％中取得成功。这些胚状体只有再转入减少了激素和有机氮的杜鹃培养基中才能萌根、发芽,长成正常的龙眼花粉绿苗。第一批完整花粉绿苗是在1980—1981年得到的。随后经根尖压片镜检,多数细胞具有15条染色体,证明它们是来自花粉的单倍体植株。     

胡杨器官和体胚发生方式的植株再生

目的：为以胡杨为亲本的体细胞杂交育种奠定基础。方法：以胡杨苗叶片为外植体,通过器官和体胚两种不同发生方式建立了离体再生体系。结果：附加0．75mg/L BA、0．5mg/L NAA基本培养基及3w暗培养是愈伤组织诱导的最佳条件;附加0．25mg/L BA和0．1mg/L NAA的基本培养基上不定芽的诱导率最高;1／2大量元素的MS培养基附加0．1mg/l NAA、0．05mg／L和1．5％蔗糖对不定芽生根效果最好;诱导并筛选出的胚性愈伤组织在附加了0．5mg/L BA、0．5mg／L NAA的基本培养基上诱导获得大量胚状体,干化处理后大部分能经子叶胚期萌发成苗。结论：外植体的采集周期和培养条件影响胡杨离体叶片的形态发生途径。