阿魏蘑多糖理化性质及免疫活性研究*

以阿魏蘑Pleurotus ferulae Lanzi子实体和菌丝体为试验材料,采用水浸法提取阿魏蘑多糖,分别得到子实体粗多糖A和菌丝体粗多糖B。将A经Sevag法去蛋白、透析、CTAB络合、乙醇沉淀、NaCl溶液溶解、透析,得到多糖A1。紫外光谱分析鉴定多糖A1为均一组分。苯酚—硫酸法测得多糖A1糖含量为82.9%。凝胶渗透色谱法测得多糖A1数均分子量Mn=141088,重均分子量Mw=142897。气相色谱分析多糖A1单糖组成及其摩尔比为Xyl∶Gla∶Glc=1∶1.102∶2.899。巨噬细胞吞噬作用试验、迟发型变态反应试验、白细胞介素-2（IL-2）的诱生与检测试验测得粗多糖A、粗多糖B具有免疫活性。     

阿魏蘑液体发酵过程菌体形态变化对产漆酶的影响

本文旨在研究阿魏蘑菌体形态与漆酶产量之间的关系。结果显示,玻璃珠的添加可改变发酵过程中菌体形态,漆酶产量在球状菌体条件下高于丝状、絮状菌丝：直径分布在0.2~0.4 mm范围的菌球对漆酶的合成具有明显的促进作用;适合的葡萄糖、玉米粉和麸皮添加量,对直径在0.2~0.4 mm范围的菌球形成具有重要影响。此外,添加惰性载体同样可以控制菌球的直径分布,但对漆酶的合成无促进作用。     

β-胡萝卜素对阿魏蘑菌体形态及其产漆酶的影响

前期研究发现β-胡萝卜素为阿魏蘑和胶红酵母共培养过程中提高漆酶活性的关键因子。本文研究β-胡萝卜素的最佳添加量、添加时间和消耗情况,以及胶红酵母和β-胡萝卜素对阿魏蘑的形态的影响。结果表明,在阿魏蘑单培养中β-胡萝卜素的最佳添加量为10 mg(0.067%),最优添加时间为48 h,漆酶酶活达到7 083 U/L,为单培养的2.9倍。在形态研究中发现中小型菌球和粗糙型菌球都有利于产漆酶。结果显示通过添加β-胡萝卜素和控制阿魏蘑的菌体形态均可提高漆酶的产量,为漆酶的工业化生产提供了新的尝试和方法。     

IGS2-RFLP、SCoT和ISSR在白灵侧耳遗传多样性分析中的比较研究

应用IGS2-RFLP、SCoT和ISSR标记分析新疆5个采集地点的28个白灵侧耳野生样本的遗传多样性,比较这3种分子标记在白灵侧耳种质资源遗传多样性研究中的效用。结果显示,IGS2-RFLP的3个内切酶、5个SCoT引物、5个ISSR引物分别检测到42、59和77条多态性条带,多态性比率分别为91.3%、92.4%和92.8%。3种标记检测出的有效等位基因数(ne)和位点平均的预期杂合度(Hep)没有显著性差异。表明3种标记都适宜作为遗传学标记对白灵侧耳野生种质进行多样性分析。多态性检测效率最高的标记为ISSR,E=15.4,Ai=23.4,其次为IGS2-RFLP,E=14.0,Ai=22.4,SCoT则为最低,E=11.8,Ai=18.2。3种标记中,SCoT和ISSR标记的聚类结果极其相似,且均能较为准确地反映样本的地理来源,虽然二者的聚类图不完全相同。IGS2-RFLP的标记效率较高,准确性和可重复性最好,可用于菌株标准图谱的制作,更适用于品种权保护中的菌株鉴定鉴别;SCoT和ISSR标记的多态性高,信息量大,评价范围广,则更适用于白灵侧耳种质资源的遗传多样性研究。     

共培养过程中胶红酵母对阿魏蘑产漆酶的影响及其发酵策略优化

共培养技术是提高漆酶产量的一种有效手段,前期培养菌株的方式会影响最终共培养发酵水平。本文以胶红酵母的培养条件为研究对象,探究胶红酵母最适于阿魏蘑进行共培养产漆酶的工艺条件。分别对培养胶红酵母所需的碳源、氮源、装液量、温度和初始pH进行单因素优化实验,并对共培养漆酶的酶活产生显著影响的葡萄糖质量浓度、酵母粉质量浓度、培养温度和初始pH这4个因素进行响应面实验,最终得到胶红酵母的最适培养条件为葡萄糖20 g/L、酵母粉38 g/L、初始pH 10.0、装液量80 mL、培养温度28℃,将培养48 h后的胶红酵母与阿魏蘑进行共培养,得到的最高共培养酶活比对照组提高了50.19%,并且将发酵周期缩短了24 h。本研究结果不仅为共培养产漆酶工艺优化提供了新的研究方向,也为其他共培养体系研究提供了新的参考策略。     

三种香蘑属野生食用菌菌株的培养条件优化

【背景】供试菌株分别是分离自山西省宁武县管涔山的肉色香蘑Lepista irina、斑褶香蘑L. panaeolus和山西省蒲县五鹿山的紫丁香蘑L. nuda 3种野生食用菌的子实体。【目的】获得3种野生食用菌的最佳培养条件。【方法】以菌丝生长速度为指标研究不同碳源、氮源、碳氮比、pH和培养温度等各因素对菌丝生长的影响,根据Box-Benhnken中心组合试验设计原理,采用3因素3水平的响应面法确定使菌丝体达到最快生长速度的最佳培养碳源、氮源和pH。【结果】肉色香蘑在葡萄糖20.9 g/L、土豆196.47 g/L、pH 6.0、培养温度21 °C的条件下,菌丝日均生长速度达到最大,为1.13 mm/d;斑褶香蘑在甘露醇17.4 g/L、酵母膏8.1 g/L、B族维生素0.1 g/L、K2HPO4 2.5 g/L、MgSO4 2.5 g/L、pH 7.9、培养温度25 °C的条件下,菌丝日均生长速度达到最大,为0.73 mm/d;紫丁香蘑在土豆200 g/L、可溶性淀粉20.5 g/L、KNO3 2.1 g/L、K2HPO4 2.5 g/L、MgSO4 2.5 g/L、B族维生素0.1 g/L、pH 7.0、培养温度25 °C的条件下,菌丝日均生长速度达到最大,为2.38 mm/d。【结论】获得了3种香蘑属菌株的最佳培养条件,为后续优质野生食用菌的引种驯化积累了相关数据和资源。     

新疆巴音布鲁克草原白蘑蘑菇圈土壤真菌多样性分析

【背景】新疆巴音布鲁克草原为我国第二大高山草原,草原上生长的白蘑(Tricholoma mongolicum Imai)属于口蘑属(Tricholoma)的一种,可形成典型的蘑菇圈。【目的】了解巴音布鲁克草原白蘑蘑菇圈圈上及其两侧土壤真菌的物种组成和群落结构特点,为研究白蘑蘑菇圈的形成与生长及其子实体的发生提供一定的理论依据。【方法】采用Illumina HiSeq平台高通量测序技术研究白蘑蘑菇圈周围土壤真菌的物种组成丰富度和菌群结构多样性。【结果】测定有效序列经注释得到809个操作分类单元(Optical taxonomic unit,OTU),分为5个门、26个纲、79个目、166个科、232个属;蘑菇圈上土壤真菌的物种丰富度、群落结构多样性以及特异性物种均低于圈外及圈内,蘑菇圈上特有真菌物种为Xylodonnothofagi、Agaricales、Phaeococcomyces、Ochrocladosporium adansoniae、Coniochaeta ligniaria、未知子囊菌、 Tomentella amyloapiculata、 Dothideomycetes、Incertea_sedis_Helotiales。【结论】研究表明白蘑蘑菇圈的形成影响土壤真菌的分布,圈上优势真菌类群对其他真菌类群具有抑制作用,蘑菇圈向外生长可能与微生物群落结构失衡有关。     

野生小豆种质资源植株形态性状多样性分析

对来自中国、日本、韩国、缅甸4国的55份野生型、40份半野生型小豆种质资源植株形态性状的多样性进行分析,结果表明,野生型小豆与半野生型小豆在株高、平均成熟期、子粒颜色、百粒重等性状方面有明显的差别。95份小豆种质资源通过聚类分析,截值为1.488时可划分为5大类群。来源于缅甸和中国的野生型小豆种质各聚为1个类群,韩国和日本的种质混聚为3个类群。缅甸种质具平均成熟期长、茎秆粗、主茎分枝数多、百粒重轻等特点。中国贵州野生型种质植株较高、茎秆较细、单荚粒数较多、平均成熟期较长。日本野生型种质具有丰产特征。日本和韩国的半野生型小豆,平均成熟期较其他类群早、百粒重高、明度指数高。     

新疆阿魏特征显微结构的三维原位无损研究

利用新型第三代高亮度同步辐射光源相衬成像技术,可实现弱吸收(主要含碳、氢、氧和氮等元素)物质材料特征结构的无损三维鉴定。以具有极高药用价值的新疆地产药材——阿魏(Ferula)为研究对象,采用同步辐射高分辨X射线相衬显微CT技术,并结合相位恢复算法,有效解析和评价了新疆阿魏(F.sinkiangensis)的三维特征结构,极大提高了对药材类生物样品的显微结构和密度的分辨能力,从而为新疆阿魏的特征分辨、品质鉴定和真伪识别提供了一种直观可靠的三维可视化新手段。     

新疆伊犁野生阿魏菇菌株的分离鉴定与培养特性

对采自新疆伊犁的两种具有不同形态特征的野生阿魏菇（Pleurotus ferulae）子实体分离的菌株进行鉴定和系统发育分析,并探讨优良菌株的培养特性。结合子实体形态和生境特征,利用rDNA-ITS序列,对伊犁野生阿魏菇菌株YL-A1和YL-A2进行分子鉴定及系统发育分析。对阿魏菇菌株YL-A1生长温度、pH、碳源、氮源和无机盐进行单因素试验,分析各因素对菌丝生长的影响,通过L₉(3⁴正交试验,筛选各因子之间的最优组合。结果表明,野生阿魏菇菌株YL-A1（ITS序列GenBank登录号：MN460317）和YL-A2（ITS序列 GenBank登录号：MN809132）,不仅子实体形态特征有差异,且菌株YL-A1菌丝生长速度和长势优于YL-A2,并相互拮抗。结合生境和形态特征及rDNA ITS序列分析,将二者鉴定为阿魏菇(Pleurotus eryngii var. ferulae)。系统发育分析发现,菌株YL-A1和YL-A2单独聚为一组,与其他阿魏菇菌株有一定的遗传距离。经单因素和正交试验,确定了菌株YL-A1在含葡萄糖20 g/L、蛋白胨4 g/L、KH₂PO₄ 1 g/L,pH 7.5的培养基中,25 ℃培养,菌丝生长状态最佳,确定了优良菌株YL-A1菌丝生长最佳培养条件。为进一步保护利用伊犁野生阿魏菇菌种资源提供参考。     

Genetic diversity of photosynthetic characters in native populations of Triticum dicoccoides

Wild emmer wheat (Triticum dicoccoides Korn) has shown wide genetic diversity for disease resistance and morpho-physiological traits of economic importance. Our objectives were to test for genetic variation (V_G) in photosynthetic characteristics residing within and between native populations sampled from three ecogeographical regions of Israel, and to identify potential sources of high photosynthetic efficiency for future wheat improvement. Accessions sampled in the center of wild emmer distribution (upper Jordan Valley) in a relatively narrow geographical range showed the greatest diversity in CO₂-assimilation rate per unit leaf area (A) or per unit chlorophyll (A/Chl). Genetic variation was absent for internal CO₂ concentration (Ci) and water-use efficiency (WUE) and generally lacking for stomatal conductance (gs). Leaf area, although quite variable, was not a significant cofactor in assessing genetic potential for photosynthesis. Accessions within a given population showed 10-times more variation in A and A/Chl than populations sampled from different locations in a region. Accessions with the highest photosynthetic efficiency were derived from upland steppic populations located in marginal habitats extending southward into Israel. Some accessions having high photosynthetic capacity (A=32 mol m^-2 s^-1) with no significant reduction in leaf size constitute a potentially valuable genetic resource yet untapped for genetic improvement of hexaploid (T. aestivum L.) wheat.Abbreviations LA total leaf area - V_G total genetic variance - PPFD photosynthetic photon flux density - WUE water-use efficiency     

普通野生稻（Oryza rufipogon Griff．）的SSR遗传多样性研究

利用SSR标记对分布在我国7个省的17个居群普通野生稻(Oryza rufipogon Griff．)的种质资源进行研究,结果表明：17个居群普通野生稻的遗传多样性有着显著的差异,从UPGMA聚类结果可以看出普通野生稻的遗传多样性与其生态地理分布有显著的相关性,遗传多样性指数高的地区极有可能是栽培稻的起源中心;用筛选出的7对SSR引物对336份：DNA样品进行扩增,得到60条特异条带,在分子水平上进一步证明普通野生稻的起源为两广地区;本研究也表明SSR是进行遗传资源多样性研究的一种切实有效的研究方法。     

Classification of genetic diversity in Abelmoschus tuberculatus germplasm collection using morphometric data

Abelmoschus tuberculatus Pal & Singh is endemic to India and is the close relative of cultivated okra, A. esculentus. Data on 49 selected accessions of A. tuberculatus were used to study genetic diversity for a range of morphological characters through the use of multi-variate statistics. Epicalyx segments, shape, size and persistence; petal colour and petal blotch; stem and fruit pubescence; pigmentation of various plant parts; days to flowering; plant height; and the fruit yield/plant were the important components of variation and contributed significantly to the total variation in germplasm accessions under study. The accessions could be grouped into four distinct clusters. The grouping pattern, however, did not reflect relationship between geographic origin and genetic diversity. The potential use of the variability in okra improvement programmes is discussed.     

6种毛茛属植物的等位酶变异和亲缘关系分析

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳检测了6种毛良属(Ranunculus Linn．)植物4个酶系统的等位酶谱带变异式样,并将酶谱带的二忿数据进行相关分析和聚类分析,结果表明：有93．94％的等位酶谱带在6个种之间显示出或多或少的变异,只有6．06％的等位酶谱带在6个种中保持恒定。相关分析和聚类分析显示,同种内个体间表现出较大的遗传同质性;而不同种的个体则表现出明显的趋异性。表明6种植物之间遗传分化较明显．并按聚类结果将6个种划分为两个类群．水城毛茛和毛茛为一个类群;扬子毛茛、褐鞘毛茛、钩柱毛茛和棱喙毛茛为一个类群。其中,扬子毛茛和棱喙毛良之间的亲缘关系最近。毛茛和褐鞘毛茛之间的亲缘关系最远。     

感病与抗病圭亚那柱花草遗传多样性的AFLP分析

圭亚那柱花草(Stylosanthes guianensis Swarcz)原产中南美洲及非洲,是一种重要的热带豆科牧草,已在我国华南热带、南亚热带地区种植并利用。由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides(Penz．)Sacc．)引起的炭疽病是柱花草的主要病害。采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术分析了42个圭亚那柱花草品系的遗传多样性,同时对其抗病性进行了接种鉴定。从96个选择性引物对中筛选出较好的4个,分别对42个圭亚那柱花草品系进行扩增,共获得出225条带,其中多态性带215条,平均多态性水平为95．5％,表现出高度的多态性。采用NTSYS-pc软件计算了品系间的遗传相似系数,其变化范围为0.31～0．95。根据非加权成对平均数法(UPGMA)进行聚类分析,建立了42个品系的聚类树系图,以所有品系的平均遗传相似系数0．48为阈值,共分为5类。主成分分析表明：第一主成分和第二主成分对全部品系间遗传变异的贡献率分别为56．04％和6．40％,并建立了品系间相互关系的二维图,各品系在二维图中的分布与UPGMA分类相吻合。抗病性鉴定结果表明：各品系对两种典型的病原菌的抗性有差异,其中抗病品系对两种病原菌的抗病相关系数达到0．904,表明抗病品系对两种病原菌有共同抗性。此外,抗病品系在UPGMA聚类中呈随机分布。这些结果表明,AFLP技术是分析圭亚那柱花草遗传多样性的有效方法。     

SSR标记在毛木耳种质资源遗传多样性研究中的应用

本研究利用基于毛木耳全基因组开发的SSR标记对27份毛木耳菌株（野生14株、栽培13株）的遗传多样性进行分析。首先随机选取3个菌株（2个野生菌株、1个栽培菌株）的DNA为模板,从144对SSR引物中筛选出扩增条带清晰、稳定性强、多态性丰富的引物24对。24对SSR引物共检测到116个多态性SSR片段,每对引物的多态性片段有3-7个,引物平均检测效率为4.83个,Shannon’s遗传多样性指数范围是0.866-1.885,多态性位点比率100%。供试菌株遗传相似系数范围是0.618-0.971,说明毛木耳种质资源具有丰富的遗传多样性。野生菌株与栽培菌株间平均遗传相似系数分别为0.746、0.779,说明毛木耳野生菌株遗传多样性更为丰富。经聚类分析,在遗传相似系数为0.680时,可将供试菌株分为无色（白色）类群Ⅰ和有色（浅黄色到红褐色）类群Ⅱ。遗传相似系数为0.704时,可将供试菌株中栽培菌株和野生菌株明显区分（14株野生菌株均在类群Ⅱ-2中,13株栽培菌株分别在类群Ⅰ和Ⅱ-1中）。本研究表明基于全基因组的SSR标记能从分子水平上揭示各菌株间的遗传差异,丰富毛木耳遗传多样性的研究手段,并为进一步进行毛木耳的品种选育、遗传学研究等提供有力手段。     

合肥市野生地被植物种类构成研究

在野外调查和统计分析的基础上,运用五点随机取样法对合肥市的野生地被资源进行了系统的调查,并根据调查结果,选取发生频率大于30%的野生地被植物作为统计分析的对象。运用Spss10.0软件,对综合值采用组间连接法进行聚类分析,找出合肥市不同类型的野生地被植物的常见种类,并分析其发生特点。结果表明:合肥市野生地被植物种类有119种,涉及43科,105属,其中菊科16种,禾本科10种,蓼科9种,十字花科8种。不同类型的野生地被植物种类构成主要有16种:冬春型野生地被植物4种,夏秋型野生地被植物5种,全光照型野生地被植物4种,蜀山森林生态系统型野生地被植物3种。     

楸树种质生长和叶部性状的遗传多样性

为提高楸树遗传资源的利用效率,本研究对从楸树基因库中选出的53个无性系进行地径、苗高、节间距等12个性状指标进行了遗传多样性分析。研究结果表明,53个楸树无性系间地径、苗高的差异极显著,遗传变异系数分别为18.53%、16.29%,遗传多样性指数分别为1.84、1.79。地径、苗高与叶长、叶柄长、叶片总数、叶面积、皮孔密度呈现极显著的正相关,且叶长、叶柄长、叶片总数、叶面积、皮孔密度的遗传变异系数分别为8.57%、17.74%、18.56%、24.21%和26.91%,遗传多样性指数(Shannon-Weaver)分别为1.91、1.87、1.80、1.80和1.94,具较大变异且受强遗传控制,多样性丰富且分布均匀。来源不同的种质资源差别较大,其中来源于河南地区的种质生长指标最优,来源于山东地区的种质变异系数最高。聚类分析将53个无性系分为5大类,第I类的地径、苗高、叶片总数、皮孔密度均值最高,第Ⅱ类生长最差,第Ⅲ类的节间距、叶长、叶宽、叶柄长、叶面积、叶周长均值最高,第IV类和第V类的叶绿素含量和比叶重均值分别最高。     

太平洋牡蛎养殖与野生群体遗传变异的微卫星研究

应用微卫星标记技术研究5个中国太平洋牡蛎养殖群体和2个日本太平洋牡蛎野生群体的遗传变异。研究中所使用的7个微卫星位点在养殖和野生群体中都显示出了高多态性,平均等位基因数为19.1～29.9,平均期待杂合度为0.916～0.958。养殖群体和野生群体的平均等位基因丰度及观察杂合度没有显著性差异。遗传分化系数及等位基因杂合度分析显示所有的群体间都有显著性差异。构建的NJ树中,7个群体聚为3支,养殖群体和野生群体可以清楚地分开,在养殖群体中又分为南北两支。分配检验中,97%～100%的正确率证明了微卫星标记在群体识别分析中的可行性。本研究结果对太平洋牡蛎管理模式的设计和选择育种具有重要意义。