天然抗氧化剂丹参酮Ⅱ—A对肝细胞脂质过氧化产物与DNA相互作用的影响

［３Ｈ］花生四烯酸标记的肝细胞,经ＦｅＣｌ２－ＤＴＰＡ启动脂质过氧化后,细胞ＤＮＡ出现放射性,并随保温时间增加而逐渐增高,表明在细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ发生相互作用,生成了一种ＤＮＡ加成物,经测定它具有特征荧光光谱,显示较低的增色效应和Ｔｍ值。用高度敏度荧光图象显微镜直接观察发现丹参酮Ⅱ－Ａ经细胞摄取后主要滞留在细胞膜与胞浆中。它能有效地抑制细胞脂质过氧化,减少脂质－ＤＮＡ加成物的产生,并阻止了细胞存活率和Ｏ６甲基鸟嘌呤转移酶活性的降低,其抑制率与ＶｉｔＥ,ＢＨＴ相近,但显著高于ＮａＮ３,甘露醇和ＳＯＤ。上述结果提示丹参酮Ⅱ－Ａ是一种新的有效的细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ相互作用的抑制剂。它对ＤＮＡ的保护作用可能是通过清除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应,抑制ＤＮＡ加成物的生成,从而减少了细胞毒性。     

钙过负荷和丹参酮对线粒体脂质过氧化的影响

用ＥＳＲ自旋捕集技术捕捉到Ｆｅ２＋启动的心肌线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基Ｌ·（ａＮ＝１５．６Ｇ,ａＨ＝２．９７Ｇ）。钙过负荷时,钙离子使线粒体产生的脂类自由基增加,当钙浓度为３０μｍｏｌ／Ｌ·ｍｇＰｒ时,产生的脂类自由基约增加３２％。丹参酮可清除Ｆｅ３＋启动的线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基。当丹参酮浓度为０．８ｍｇ／ｍｇＰｒ时,清除率达到７０％左右。钙过负荷时丹参酮仍能有效清除脂类自由基。另外,还发展了用自旋探针ＣＴＰＯ测量线粒体氧消耗的方法,检测氧消耗所需样品量比Ｃｌａｒｋ电极少几十倍。用此方法测量小鼠心肌线粒体不同状态的氧消耗和呼吸控制率,证明一定浓度的Ｃａ２＋和Ｆｅ２＋影响线粒体的呼吸功能．     

大鼠肝细胞核膜脂质过氧化对核DNA影响的研究

采用大鼠肝脏细胞核为材料,研究了核膜脂质过氧化对核ＤＮＡ的影响。证实核膜脂质过氧化可以引起ＤＮＡ损伤,表现为ＤＮＡ的增色效应、熔解温度、从ＤＮＡ向ＥＢ的能量转移效率降低,圆二色谱发生显著变化。另外受损ＤＮＡ对ＤＮａｓｅⅠ产生明显抗性和琼脂糖凝胶电泳结果提示核膜脂质过氧化引起的ＤＮＡ损伤可能以交联为主,同时利用原子力显微镜（ＡＦＭ）直接观察到了交联ＤＮＡ的生成。各种自由基清除剂对ＤＮＡ损伤保护的差异说明脂类自由基可能在活性氧自由基引起的ＤＮＡ损伤中具有重要作用。     

DNA与红细胞膜脂质过氧化相互作用研究

研究了ＤＮＡ与红细胞膜脂质过氧化产物的相互作用。与无ＤＮＡ的反应体系相比,ＤＮＡ的加入明显增加４４０ｎｍ处的荧光强度,这种效应是由于ＤＮＡ与过氧红细胞膜生成了新的荧光物质,其激发波长３１５ｎｍ,发射波长４１０ｎｍ．维生素Ｅ强烈抑制荧光产物的形成。ＤＮＡ经分离、纯化后用ＥＢ作荧光探针研究表明,ＤＮＡ二级结构发生了改变,ＤＮＡ—ＥＢ复合物荧光光谱,ＤＮＡ—ＥＢ复合物之间的能量转移效率均有明显变化。同时证实ＤＮＡ损伤具有碱基特异性,即主要是鸟嘌呤受到损伤。     

促肝细胞生长素对肝损伤小鼠脂质过氧化的影响

将脱毒甘薯叶节苗基端于布洛芬液浸10min然后扦插,能有效地促使薯苗生根,增加根数和根干重,提高根系活力;并能促使薯苗生长,茎叶干重和腋芽发育成的枝数增加,茎节繁殖系数提高。布洛芬的最适作用浓度为1000mg·L-1。     

脂质过氧化引起的DNA损伤研究进展

脂质过氧化可以引起各种碱基损伤、DNA链断裂和各种荧光产物生成,并对DNA分子鸟嘌呤碱基具有选择性损伤.过渡金属离子可以明显加深脂质过氧化对DNA的损伤程度.多种抗氧化剂、活性氧自由基清除剂对脂质过氧化引起的DNA损伤有一定程度的保护作用.具有致突、致癌作用的8－羟基鸟嘌呤已经观察到．脂质过氧化的致突变、致癌变作用机制引起了人们的极大兴趣．     

亚油酸体系脂质过氧化引起的DNA损伤研究

用含两个双键的不饱和脂肪酸-亚油酸作为模型化合物,分析其过氧化程度,同时检测了由于脂质过氧化而引起的DNA损伤,结果表明:在脂质过氧化过程中,DNA与亚油酸过氧化产物反应生成一种荧光物质、其最大激发波长315nm最大发射波长410nm并随着氧化时间增加而增加,与此同时,双链DNA百分含量明显下降,DNA-溴乙锭复合物荧光显著降低,反映了DNA二级结构受到破坏.上述结果揭示了脂质过氧化产物在自由基引起DNA的损伤中可能起重要作用     

丹参酮对心肌肌质网脂质过氧化过程中脂类自由基的清除作用

应用自旋捕集方法和化学发光方法研究天然抗氧化剂丹参酮（Ｔａｎｓｈｉｎｏｎｅ）对心肌肌质网膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基的清除作用。发现在一定的浓度范围内,丹参酮对脂质过氧化有较好的保护作用,在丹参酮浓度大于１ｍｇ／ｍｇ蛋白时,对脂类自由基清除率可达６０％。丹参酮对肌质网膜脂质过氧化的保护机理可能是通过清除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应,而不是清除氧自由基而防止脂质过氧化的启动。     

脂质体过氧化对DNA的损伤研究

研究了以脂质体为材料的脂质过氧化引起的ＥＮＡ损伤,同时检测了脂质过氧化程度与ＤＮＡ受损情况。结果表明：在脂质体过氧化程度中,ＤＮＡ的增色效应,对核酸酶的敏感程度,ＤＮＡ双链百分含量和ＤＮＡ－溴乙锭复合物的荧光强度随着氧化时间的增加而降低。在四种碱基中,鸟嘌呤损伤最严重。多种自由基清除列实验表明：脂质过氧化所产生的羟基自由基和单线态氧可能是引起ＤＮＡ氧化损伤的重要因素。     

脂质过氧化对细胞衰老的延缓作用（Ⅱ）

本文以传代培养的人胚肺成纤维细胞为研究对象,以Ｆｅ＾２＋／维生素Ｃ为诱发脂质过氧化的体系,研究了脂质过氧化对细胞衰老的影响。结果表明适当低水平的脂质过氧化可以明显改善细胞形态,延缓细胞退变性形态特征的出现;并使细胞存活期延长２－８天。随着细胞传代数的增加,对照组和处理组细胞中超氧物歧化酶活力下降,但处理细胞中ＳＯＤ活力并不高于对照组,说明ＳＯＤ至少在某些情况下对延缓细胞衰老并不起主要作用。     

丹参酮ⅡA对大鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:观察丹参酮Ⅱ A对大鼠移植性肝癌的抑制作用.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA高、低剂量组.各组动物于移植术后12d处死.分离肿瘤测量其体积,realtime RT-PCR法和western blot法检测肿瘤组织中HMGB1、VEGFmRNA和蛋白的表达.结果:丹参酮ⅡA能明显降低肿瘤体积,降低肿瘤组织中HMGB1、VEGFmRNA和蛋白的表达.结论:丹参酮ⅡA能抑制大鼠移植性肝癌的生长,其机制可能与抑制HMGB1、VEGF表达有关.     

丹参酮Ⅱ—A磺酸钠对鼠肝线粒体功能的影响

利用大鼠肝脏线粒体为材料,以琥珀酸为底物,研究了不同浓度的丹参酮Ⅱ－Ａ磺酸钠对线粒体态４、态３呼吸及呼吸控制率,线粒体跨膜电位,线料呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）电子传递及质子转移活性的影响,结果证明丹参酮ⅡＡ－磺酸钠是线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）的有效抑制剂,文中对丹参酮ⅡＡ－磺酸酸钠在心肌缺血再灌注过程中的保护作用的分子机理进行了讨论。     

4—PU和6—BA对萝卜离体子叶衰老的延缓和脂质过氧化的影响

自70年代在植物衰老研究中引入自由基假说后,国内外不少研究表明在叶片衰老过程中确有自由基的参与,并导致脂质过氧化。近年来,许多研究者在植物生长调节物质延缓或加速植物衰老作用机理的研究中也非常重视自由基的作用。Leopold和Kriedemann〔1〕指出激动素有“基于自身氧化的刹车作用”。Leshem等〔2〕和Dhindsa等〔3〕报告细胞分裂素在延缓植物衰老方面的作用与它能清除自由基、阻止自由基的形成有关。李伯林等〔4〕用燕麦叶片为材料,发现6BA和2,4D在植物体内可作为直接和间接的自由基清除剂而延缓植物的衰老。早在50年代中后期就有报…     

丹参酮Ⅱ－A磺酸钠对鼠肝线粒体功能的影响

利用大鼠肝脏线粒体为材料,以琥珀酸为底物,研究了不同浓度的丹参酮Ⅱ－Ａ磺酸钠对线粒体态４、态３呼吸及呼吸控制率,线粒体跨膜电位,线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）电子传递及质子转移活性的影响。结果证明丹参酮ⅡＡ－磺酸钠是线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）的有效抑制剂。文中对丹参酮ⅡＡ－磺酸钠在心肌缺血再灌注过程中的保护作用的分子机理进行了讨论。     

体外循环下牛磺酸对家兔心肌脂质过氧化的影响

采用家兔微型体外循环模型观察牛磺酸对心肌脂质过氧化的影响,研究提示：体外循环下术后心肌组织脂质过氧化物含量明显增高,而牛磺酸组则接近于正常,说明牛磺酸具有抗心肌脂质过氧化损伤作用。     

脱氧核糖核酸对过氧化脂质和脂褐素生成的影响

实验探讨了脱氧核糖核酸（DNA）对小鼠心脏、肝脏和脑组织中的过氧化脂质（LPO）和脂褐素（Lf）生成的影响。结果表明,实验条件下所使用的脱氧核糖核酸可使小鼠体内过氧化脂质的生成明显减少,对脑和肝组织中脂褐素的生成有抑制效果。     

小茴香对肝纤维化大鼠脂质过氧化水平的影响

目的:研究小茴香对肝纤维化大鼠的脂质过氧化水平的影响。方法:取Wister大鼠100只,随机取12只设为正常组,其余采用四氯化碳(CCL4)复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,复制成功后随机分为模型对照组、小茴香组和复方丹参组(n=12);相应药物干预8周后,镜检肝组织形态学改变;全自动生化分析仪检测外周血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平与血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量;生化法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)与血清丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果:HE结果显示:模型组肝脏炎症与脂肪变性明显,经小茴香干预后明显改善。生化检测结果显示:与正常组比较,模型组ALT、AST水平显著升高(P<0.05),TP、ALB含量显著降低(P<0.05),HYP、MDA含量显著增加(P<0.05),而SOD、GSH-PX和CAT活性显著降低(P<0.05);与模型组比较,小茴香组ALT、AST水平显著下降(P<0.05),TP、ALB水平显著升高(P<0.05);HYP、MDA含量显著降低(P<0.05),SOD、GSH-PX和CAT活性显著提高(P<0.05)。结论:小茴香的抗肝纤维化作用可能与调节大鼠脂质过氧化水平有关。     

小茴香对肝纤维化大鼠脂质过氧化水平的影响

目的：研究小茴香对肝纤维化大鼠的脂质过氧化水平的影响。方法：取Wister大鼠100只,随机取12只设为正常组,其余采用四氯化碳（CCL4）复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,复制成功后随机分为模型对照组、小茴香组和复方丹参组（n=12）;相应药物干预8周后,镜检肝组织形态学改变;全自动生化分析仪检测外周血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平与血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量;生化法检测肝组织羟脯氨酸（HYP）与血清丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、过氧化氢酶（CAT）活性。结果：HE结果显示：模型组肝脏炎症与脂肪变性明显,经小茴香干预后明显改善。生化检测结果显示：与正常组比较,模型组ALT、AST水平显著升高（P〈0．05）,TP、ALB含量显著降低（P〈O．05）,HYP、MDA含量显著增加（P〈0．05）,而SOD、GSH—PX和CAT活性显著降低（P〈0．05）;与模型组比较,小茴香组ALT、AST水平显著下降（P〈0．05）,TP、ALB水平显著升高（P〈0．05）;HYP、MDA含量显著降低（P〈0．05）,SOD、GSH—PX和CAT活性显著提高（P〈0．05）。结论：小茴香的抗肝纤维化作用可能与调节大鼠脂质过氧化水平有关。