竹红菌乙素光敏作用对于小鼠肝癌细胞内游离钙浓度的影响

本文用Quin 2/AM荧光探针作为细胞内部钙离子指示剂,研究了竹红菌乙素光敏损伤后引起小鼠腹水肝癌细胞的钙离子浓度变化。实验结果表明,细胞内的钙离子浓度随着乙素光敏作用增强而上升。并且钙离子浓度的升高与细胞的存活率下降呈正比关系;用数种单线态氧淬灭剂(L-His,NaN_3);羟自由基清除剂(PABGA)观察了乙素光敏过程中产生的活性氧与细胞内的钙离子浓度增加相关。用膜去极化方法研究了细胞在光敏损伤过程中钙离子浓度变化与去极化的关系。     

竹红菌甲素与半胱氨酸作用的ESR研究

本文用ESR方法研究了竹红菌甲素和半胱氨酸在光和暗条件下产生活性氧的过程.我们发现甲素具有氧化还原反应中间载体的作用,即巯基化合物将电子转移给甲素,而甲素在有氧的条件下再将电子转移给氧生成超氧阴离子自由基.光照可以加快这一步骤,使用化学方法定量研究证明激发态甲素与半胱氨酸的反应速率大于基态甲素.除半胱氨酸外,巯基乙醇和还原谷胱甘肽均可以将电子经甲素传给氧,而甲硫氨酸和胱氨酸不具这一能力,这说明巯基在反应中很重要而硫原子不是必需的.     

竹红菌乙素(乙醇胺)修饰物对于鼠肝线粒体光敏损伤研究

竹红菌乙素与乙醇胺进行化学结构的修饰,可以得到红光性能更加优良的新型光敏剂(简称HB-E),为此,我们作了以下几方面的研究:1.对线粒体膜脂质过氧化损伤的光敏作用;2.对线粒体膜巯基蛋白光敏损伤;3.对ATP酶的失活;4.损伤机理的探讨;5.不同光敏剂光敏能力的对比;从以上研究可以看到HB-E光敏作用对于线粒体的损伤十分明显,从损伤的机理角度证明了氧自由基的作用是存在的,对于体系中产生超氧阴离子的来源认为并不是单线态氧的作用,而是HB-E自身产生自由基与氧反应的结果;所以说HB-E光敏作用中存在两种机制即:Ⅰ型和Ⅱ型并存;与其它光敏剂的光敏能力比较中明显大于血卟啉和亚甲兰。     

竹红菌乙素（乙醇胺）修饰物对于鼠肝线粒体光敏损伤研究

竹红菌乙素与乙醇胺进行化学结构的修饰,可以得到红光性能更加优良的新型光敏剂（简称ＨＢ－Ｅ）,为此,我们作了以下几方面的研究：１．对线粒体膜脂质过氧化损伤的光敏作用;２．对线粒体膜巯基蛋白光敏损伤;３．对ＡＴＰ酶的失活;４．损伤机理的探讨;５．不同光敏剂光敏能力的对比;从以上研究可以看到ＨＢ－Ｅ光敏作用对于线粒体的损伤十分明明;从损伤的机理角度证明了氧自由基的作用是存在的;对于体系中产生超氧阴离的来     

竹红菌乙素修饰物（－乙醇胺）对于腹水肝癌细胞光敏损伤的研究

通过分红菌乙素修饰物（－乙醇胺,简称ＨＢ－Ｅ）对小鼠腹水肝癌细胞（ＡＨ）光敏损伤以及ＨＢ－Ｅ被ＡＨ细胞摄取过程的研究。结果表明,ＨＢ－Ｅ在６４０ｎｍ光照的条件下对ＡＨ细胞产生很强的光动力作用;细胞对ＨＢ－Ｅ的摄取速度快（室温下２ｍｉｎ,达到平衡）,在饱和时每个细胞可摄取ＨＢ－Ｅ分子５×１０９个;经多种竹红菌素修饰物光敏能力的比较中ＨＢ－Ｅ光敏作用明显要大于其它的光敏剂;光敏机理的研究中确定了活性氧的作用是存在的。     

竹红菌乙素修饰物（－乙醇胺）对于腹水肝癌细胞光敏损伤的研究

通过竹红菌乙素修饰物（－乙醇胺,简称ＨＢ－Ｅ）对小鼠腹水肝癌细胞光敏损伤以及ＨＢＥ被ＡＨ细胞摄取过程的研究,结果表明,ＨＢ－Ｅ在６４０ｎｍ光照的条件下对ＡＨ细胞产生很强的光动力作用,细胞对ＨＢ－Ｅ的摄取速度快（室温下２ｍｉｎ,达到平衡）在饱和时每个细胞可摄取ＨＢ－Ｅ分子５×１０＾９个;经多种竹红菌素修饰物光敏能力的比较中ＨＢ－Ｅ光敏作用明显要大于其它的光敏剂,光敏机理的研究中确定了活性氧的作用是存     

竹红菌乙素溴化物对HeLa细胞形态结构的光敏损伤

以离体培养的ＨｅＬａ细胞为材料,用激光共聚焦显微镜,多动能图像分析仪,扫描电镜,透射电镜,荧光分光光度计等研究了一种新型的竹红菌乙素修饰物（５—Ｂｒ—ＨＢ）被ＨｅＬａ细胞摄取的时间进程、药物在细胞内的显微定位以及对细胞形态结构的光动力损伤。结果表明：ＨｅＬａ细胞对５—Ｂｒ—ＨＢ摄取在１小时之内细胞内药物浓度随着药液培养时间的增加呈线性增长,３小时后摄取基本达到饱和。ＨｅＬａ细胞在含１０μｍｏｌ／Ｌ５—Ｂｒ一ＨＢ培养基中３７℃温育半小时后,敏化剂主要分布在细胞膜和胞浆中。受光动力损伤的细胞膜丧失连续结构,绒毛丧失,细胞表面出现异形突起。加药并光照５分钟组细胞浆内产生大量空泡,线粒体、内质网等细胞器丧失结构完整性,在较高浓度下甚至出现明显的细胞膜破裂和核膜损伤。光动力敏化对核形态产生明显的损伤作用,表现为Ｎ／Ｃ和ＮＡ减小,ＮＦＦ增大。     

竹红菌光敏作用的初步探讨

用纸片法作为筛选光敏物质及光敏作用的研究方法。结果证实了(1)竹红菌Hypo crella bambusae中含有对革兰氏阳性细菌具光敏活性的成分;(2)从中筛选到一种红色的光敏色素,属苝醌的一个新的衍生物,取名竹红菌甲素(Hypocrellin A简称“甲素”);(3)揭示了“甲素”是对可见光敏感、作用光谱较宽的光动力学(photodynamic)物质。从化合物的类型、光敏特性、治疗方法、治疗对象及其效果看,可以认为甲素是一新型的光化学疗法药物。     

竹红菌乙素对人红细胞Na~+-K~+ATPase和钠通透性光敏损伤的研究

本文用NMR和生化方法研究了竹红菌乙素对人红细胞膜Na~+-K~+ATPase和钠通透性的光敏损伤。结果表明:在通常情况下,可同时观察到乙素对Na~+-K~+ATPase和钠通透性的光敏损伤。比较乙素、甲素、原卟啉和胆红素对上述两项指标的光敏能力,发现乙素对Na~+-K~+ATPase损伤能力与甲素和原卟啉相当,比胆红素大,对钠通透性的损伤大于其它几种敏化剂。实验指出,Na~+-K~+ATPase活力下降比钠通透性增加敏感。在乙素光敏作用时,加入Vit E可基术上保持胞内钠离子浓度不变,但无法使Na~+-K~+ATPase活力不损伤,这表明膜磷脂的结构完整对保持胞内钠浓度比较重要。对照试验指出乙素可使Na~+-K~+ATPase暗失活,这可能是经乙素介导的,由膜还原物质向氧的电子传递生成活性氧自由基攻击靶分子所致。     

Triton X-100对70℃处理后光系统Ⅰ颗粒耗氧速率的影响

比较了70℃10min处理前后和加与不加Triton X-100时光系统Ⅰ颗粒的耗氧速率、荧光光谱和吸收光谱等.70℃处理后光系统Ⅰ颗粒的耗氧速率明显降低,Triton X-100可以恢复其耗氧速率.在Triton X-100存在时,光系统Ⅰ颗粒耗氧速率的急剧上升是光系统Ⅰ核心复合物和捕光色素蛋白复合体Ⅰ分离后产生的单线态氧引起的.     

磷脂酰胆碱和Triton X-100对光系统Ⅱ蛋白二级结构及放氧活性影响的比较

采用傅立叶变换红外光谱技术(FT-IR)和氧电极研究了磷脂酰胆碱和Triton X-100对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构及放氧活性的影响.结果表明,磷脂酰胆碱对光系统Ⅱ膜复合物的蛋白二级结构没有显著的影响,但能引起放氧活性的提高,而且脂酰侧链长度不同,对放氧活性的促进程度也不一样.相比较而言,TX-100对膜脂的扰动却引起蛋白二级结构的明显改变,并能抑致放氧活性.结果说明,完整的膜结构对维持光合膜蛋白的稳定是非常重要的.     

竹红菌乙素对小鼠腹水型肝癌细胞的光敏杀伤作用

研究了竹红菌乙素(以下简称乙素,HB)对小鼠腹水型肝癌细胞(AH)的杀伤作用,并初步解释了其杀伤机理。实验证明乙素对AH细胞杀伤与乙素浓度的平方根成正比。乙素杀伤细胞的能力与竹红菌甲素(以下简称甲素,HA)相等,比血卟啉强,但比原卟啉弱,电镜观察可见:损伤细胞的膜失去连续结构,线粒体,内质网等细胞器变形,最终导致细胞空泡化。此外,细胞变形,表面微绒毛精细结构丧失,也是光敏损伤的主要特征。造成细胞死亡的原因包括~1O,O_2~-和·OH在内的活性氧,而·OH主要由O_2~-转换而来。     

Studies on the cloud point and micellar phases of triton X-100 using 220 MHz proton magnetic resonance techniques

High-resolution proton magnetic resonance techniques at 220 MHz were employed to follow the transformation of Triton X-100 between its micellar and cloud point phases as a function of temperature. The results obtained suggest that while a phase separation occurs rather sharply above the cloud point, the increase in temperature below the cloud point is accompanied by the gradual formation of very large structures suspended in the aqueous phase. The proton magnetic resonance studies show that the separation of phases, which occurs above the cloud point, appears to be accompanied by a fractionation of the polydisperse detergent. In addition, a lowering of the cloud point of Triton X-100 by dipalmitoyl phosphatidylcholine was observed by visual means and the results are reported here.     

Influence of a detergent on the catfish olfactory mucosa

The olfactory mucosa of the catfish (Ictulurus punctatus) has been briefly exposed to various concentrations of the non-ionic detergent Triton X-100. At high concentrations (1–4%) the upper layer of cells constituting the sensory and non-sensory areas of the lamellae is extensively damaged and new receptor cells do not appear in significant number before 2 months after treatment. Respiratory cells regenerate first followed by sustentacular and olfactory receptors. The regenerative process is very similar to that described previously after prolonged contact between the mucosa and ZnSO₄. Low detergent concentrations 0.03 – 0.1% affect only the sensory area. Olfactory and sustentacular microvilli and cilia, are immediately severed by the chemical. Regeneration occurs within the next 4 days. The cellular membranes appear also to be affected. From anatomical, electrophysiological and biochemical studies both in vivo and in vitro, it can be hypothesized that receptors involved in the transduction process are solubilized by the detergent but reappear at a level corresponding to 50–60% of their original activity within 2 h.Proteins, having an amino acid binding effectiveness correlated to the amino acid electrophysiological activities measured in vivo, can be isolated from the solubilized material. Further studies will be necessary to confirm that some of these molecules are involved in the olfactory transduction mechanism.