脂氧合酶对黄瓜叶片光合电子传递活性的影响

黄瓜（Ｃｕｃｕｍ ｉｓｓａｔｉｖｕｓＬ．）叶片的光合作用与电子传递活性随叶片衰老而降低,脂氧合酶（Ｌｏｘ）活性则相应增高。大豆Ｌｏｘ－１ 抑制黄瓜子叶分离的叶绿体ＰＳⅡ电子传递活性,没食子酸丙酯（ＰＧ）或槲皮酮（ＰＦ）能消除这种抑制作用。二氯苯二甲脲（ＤＣＭＵ）或２,３－二溴百里香醌（ＤＢＭＩＢ）存在时,大豆Ｌｏｘ－１ 对ＰＳⅡ电子传递活性有抑制作用,加入ＰＧ 使活性恢复到接近原有水平。二苯卡巴肼（ＤＰＣ）对经Ｌｏｘ－１ 处理的叶绿体ＰＳⅡ电子传递活性有明显恢复作用。Ｌｏｘ－１ 使Ｃｈｌａ室温荧光Ｆｍ 降低,ＤＰＣ则能轻微恢复Ｆｍ 。可见,ＰＳⅡ氧化侧、Ｑ与ＰＱ 位点都对Ｌｏｘ－１ 的作用敏感。Ｌｏｘ－１ 对叶绿体色素的漂白作用,以及活性氧对ＰＳⅡ电子传递活性的抑制,可能是Ｌｏｘ 影响光合膜功能的重要原因之一     

紫细菌RS601DCPIPH2→MV电子传递的研究

紫色非硫细菌菌株Ｒｂ．ｓｐｈｅｒｏｉｄｅｓ６０１（ＲＳ６０１）的载色体具有典型的Ｒｂ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ光谱特性。在光照和以ＤＣＰＩＰＨ２为电子供体条件下,ＲＳ６０１载色体能够串联呼吸电子传递链而耗氧或还原ＭＶ而构成ＤＣＰＩＰＨ２→ＭＶ的非循环电子传递链。电子传递抑制剂ＯＰ抑制ＤＣＰＩＰＨ２→ＭＶ电子传递活性,其中Ｉ５０为１．０ｍｍｏｌ／Ｌ;抗霉素Ａ对该电子递影响较小,不存在Ｉ５０。ＬＤＨＸ,     

脓青素对光抑制条件下菠菜叶绿体的保护作用

在有氧条件下,脓青素可以缓解强光对菠菜叶绿体电子传递的抑制作用。加入解联剂尼日利亚菌素消除跨膜质子梯度会加剧叶绿体的光抑制,但脓青素的保护作用并不消失。脓青素对光系统Ⅰ与光系统Ⅱ均表现出保护作用,但对ＰＳⅡ的保护在光抑制初期较明显;在厌氧条件下,脓青素加剧叶绿体的光抑制,引起ＤＣＩＰ光还原与水到ｐ－ＢＱ电子传递活力的降低。推测脓青素可能通过促进细胞色素ｂ５５９介导的ＰＳⅡ循环电子传递,减轻了叶绿体的光抑制。     

三唑酮对黄瓜子叶抗氧化酶活力的影响

黄瓜子叶衰老过程中超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和抗坏血酸－过氧化物酶（ＡＳＡ－ＰＯＤ）活性降低,而过氧化物酶（ＰＯＤ）活性升高。２０ｍｇ／Ｌ三唑酮右明显提高ＳＯＤ,ＡＳＡ－ＰＯＤ,ＣＡＴ活性,抑制ＰＯＤ活性升高。膜脂过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量在叶片衰老过程中提高,三唑酮可降低ＭＤＡ含量。表明三唑酮减轻脂氧化程度,延缓了叶片的衰老。     

脓青素对光抑制条件下菠菜叶绿体的保护作用

在有氧条件下,脓青素可以缓解强光对菠菜叶绿体电子传递的抑制作用,加入解联剂尼日利亚菌素消除跨膜质子梯度会加剧叶绿体的光抑制,但脓青素的保护作用并不消失。脓青素对光系统Ｉ与光系统Ⅱ均表现出保护作用,在厌氧条件下ＰＳⅡ的保护在光抑制初期较明显,在厌氧条件下,脓青素加剧叶绿体的光抑制,引起ＤＣＩＰ光还原与水到ｐ－ＢＱ电子活力的降低,推测脓青素可能通过促进细胞色素ｂ５５９介导的ＰＳⅡ循环电子传递,减轻了叶     

血管平滑肌细胞增殖与Cdk抑制蛋白p27的表达

ｐ２７蛋白是细胞周期素依赖性激酶（Ｃｄｋ）抑制蛋白家族中的一种,主要对外部促进或抑制细胞增殖的信号起反应。本研究应用流式细胞仪（ＦＣＭ）双标记的方法观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）、血管加压素（ＡＶＰ）和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）细胞周期百分比和ｐ２７蛋白表达量的影响。静止状态培养的ＶＳＭＣｓ加入ＡｎｇⅡ,ＡＶＰ,ＰＤＧＦＢＢ后,在不同时间收集细胞,用碘化丙啶（ＰＩ）标记细胞ＤＮＡ,以确定细胞所处的周期。用ｐ２７蛋白的单抗和标记了ＦＩＴＣ的二抗标记细胞,通过流式细胞仪测定被激发出的荧光量来确定细胞ｐ２７蛋白表达的相对量。结果显示,ＡｎｇⅡ刺激ＶＳＭＣｓ增生,其蛋白含量增加了４３６％（Ｐ＜００１）,但不抑制ｐ２７蛋白的表达;ＡＶＰ可轻度抑制ｐ２７的表达,有轻度促进ＶＳＭＣｓ增殖和增生的作用（Ｐ＜００５）;ＰＤＧＦ明显抑制ｐ２７的表达,引起细胞增殖。本研究结果提示,ｐ２７蛋白抑制ＶＳＭＣｓ通过Ｇ１期进入Ｓ期,是抑制ＶＳＭＣｓ增殖的重要调节因子。     

黄瓜幼苗子叶在低温下的光抑制及其恢复

用ＰＡＭ脉冲调制荧光仪测定叶绿素荧光的变化研究了黄瓜幼苗子叶在ＰＦＤ为５０和１００μｍｏｌｍ＾－２Ｓ＾－１,温度为４、７、１０、１５℃下 挑抑制及其恢复。结果表明,黄瓜幼苗子叶Ｆｖ／Ｆｍ随着温度的下降和ＰＦＤ的增加而下降,并且增加等量的ＰＦＤ在４℃下比在１０℃下引起更大的Ｆｖ／Ｆｍ下降。在黑暗条件下光抑制有轻微恢复,但完全发电和需光照,且恢复起始时的光照十分重要。     

风干叶片及其叶绿体的光合活性

以荧光诱导动力学、低温荧光发射光谱及希尔反应活性测定为手段,研究了小麦、大豆等高等植物风干叶片（相对含水量（１．５±０．２）％）及其叶绿体的光合活性。暗中风干并保存的叶片照光时仍能进行电荷分离、ＱＡ还原及至少包含ＱＡ－→ＱＢ在内的次级电子传递,其复水后的叶绿体具有光推动的光系统Ｉ电子传递活性（ＤＣＩＰＨ２→ＭＶ）和包含光解水放氧能力在内的光系统ＩＩ电子传递活性（Ｈ２Ｏ→ＤＭＢＱ）,但没有全光合链（Ｈ２Ｏ→ＭＶ）的电子传递活性。光系统ＩＩ核心天线的７７Ｋ荧光峰位（６８６ｎｍ和６９４ｎｍ）不受脱水的影响,而光系统Ｉ外周天线ＬＨＣＩ的７７Ｋ荧光峰位对脱水十分敏感,叶片风干过程中从７３９ｎｍ移到７２６ｎｍ。这些结果表明,光合作用器中越靠近反应中心核心的组分的组织结构越紧密有序,其结构和功能越少受快速水胁迫的影响;在整个光合电子链中,受快速水胁迫影响最大的部位在两个光系统之间,这个部位的电子传递被风干处理不可逆地阻断。     

低温锻炼对小麦类囊体膜脂膜蛋的影响

比较两种不同抗寒性小麦品种在低温锻炼前后类囊体膜脂及共脂肪酸成分、光系统Ⅱ捕光叶绿素ａ／ｂ蛋白复合体（ＬＨＣⅡ）及类囊体吸收光谱,低温荧光发射光谱,发现经低温锻炼后：（１）抗寒与不抗寒小麦类囊体脂酰甘油（ＰＧ）的反式六碳－烯酸含量均明显降低;抗寒品种小麦的单半乳糖基甘油二酯（ＭＧＤＧ）／双半乳糖基甘油二酯（ＤＧＤＧ）比值明显降低,而不抗寒品种变化不明显。（２）抗寒品种小麦类脂／叶绿素比值明显增高。     

低温锻炼对小麦类囊体膜脂膜蛋白的影响

比较两种不同抗寒性小麦品种在低温锻炼前后类囊体膜脂及其脂肪酸成分、光系统Ⅱ捕光叶绿素ａ／ｂ 蛋白复合体（ＬＨＣⅡ）及类囊体吸收光谱,低温荧光发射光谱,发现经低温锻炼后：（１）抗寒与不抗寒品种小麦类囊体磷脂酰甘油（ＰＧ）的反式十六碳－烯酸含量均明显降低;抗寒品种小麦的单半乳糖基甘油二酯（ＭＧＤＧ）／双半乳糖基甘油二酯（ＤＧＤＧ）比值明显降低,而不抗寒品种变化不明显。（２）抗寒品种小麦类脂／叶绿素比值明显增高。（３）两品种小麦类囊体膜ＬＨＣⅡ寡聚体含量均降低,而单体含量均增加。（４）两品种小麦类囊体膜吸收四阶导数光谱Ａ６８３／Ａ６５２比值均升高。（５）不抗寒品种小麦低温荧光发射光谱Ｆ６８５／Ｆ７３８比值上升,而抗寒品种没有变化。我们认为,在低温锻炼过程中膜流动性增大可能是植物抗寒性增强的重要原因,此外,ＭＧＤＧ 含量降低对低温下膜双层的稳定性可能起重要作用     

光氧化作用引起几种亚热带木本植物膜损伤和PSⅡ失活

亚热带自然林的上层乔木和林下灌木盆栽幼苗的叶圆片,在弱光或强光下以甲基紫精（ＭＶ） 溶液处理,引起叶绿素降解和膜对电解质的渗漏。提高ＭＶ浓度和延长处理时间加剧色素的降解和膜的损伤。同样条件下膜的损伤快于叶绿素的氧化漂白程度。经强光和ＭＶ的短期（１ ｈ）光氧化作用后,所用几种试验植物的Ｆｖ／ Ｆｍ ,ΦＰＳⅡ,ｑＰ,ΔＡ５０５ 和ΔＡ３２０ 皆有不同程度的降低,而ｑＮ,ＫＤ 和Ｆｏ 升高,表明光氧化作用导致ＰＳⅡ失活,参与稳态电荷分离的开放ＰＳⅡ中心数目减少,ＰＳⅡ原初光化学效率和非环式电子传递效率下降。部分激发能通过非光化学荧光猝灭形式耗散,但ΔＡ５０５ 在光氧化下降低与ｑＮ 上升不一致。林下灌木九节（Ｐｓｙｃｈｏｔｒｉａ ｒｕｂｒａ Ｐｏｉｒ．） 、罗伞（Ａｒｄｉｓｉａ ｑｕｉｎｑｕｅｇｏｎａ Ｂｌ．）对光氧化作用较上层树种荷树（Ｓｃｈｉｍａ ｓｕｐｅｒｂａ Ｇａｒｄｎ．ｅｔ Ｃｈａｍｐ．） 、黧蒴（Ｃａｓｔａｎｏｐｓｉｓｆｉｓｓａ （Ｃｈａｍｐ．ｅｘ Ｂｅｎｔｈ．） Ｒｅｎｄ．ｅｔＷｉｌｓ．）和红车（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ ｒｅｈｄｅｒｉａｎｕｍ Ｍｅｒｒ．ｅｔＰｅｒｒｙ）敏感     

膜脂的物理状态对G_s激活AC的影响

用生物膜的拆离与重建方法将从牛脑皮层膜中纯化的激活型ＧＴＰ结合蛋白（Ｇｓ）和腺苷酸环化酶（ＡＣ）在含有不同极性头部或不同脂肪酸侧链的磷脂组成的脂质体上重建形成脂酶体,测定脂酶体中ＡＣ的基础活力及Ｇｓ激活ＡＣ的活力。实验结果表明,磷脂影响ＡＣ的基础活力和Ｇｓ激活ＡＣ活力的顺序依次为：ＰＥ＞ＰＳ＞ＰＣ;含不同脂肪酸侧链的混合磷脂对Ｇｓ的激活活力的影响大于含单一脂肪酸侧链的纯磷脂,如ＰＥＤＰＰＥ,ＰＳＤＰＰＳ,ＰＣＤＰＰＣ。含不同脂肪酸侧链的磷脂影响Ｇｓ的活力的顺序为ＤＬＰＣ＞ＤＭＰＣ＞ＤＰＰＣ。用反映磷脂分子的堆积程度的荧光探剂ＭＣ５４０和脂双层的流动性变化的ＤＰＨ以及专一性标记蛋白质巯基（－ＳＨ）基团的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ的测定结果表明,不同磷脂影响Ｇｓ的活力的差异主要是由于脂质物理状态的不同所致。     

转WMV—2CP基因黄瓜植株的再生

以黄瓜无菌苗子叶切段为外植体,通过叶盘转移化法与根瘤农杆菌进行共培养建立了黄瓜的转其因系统。农杆菌菌株为ＬＢＡ４４０４,内含双元载体ｐＢＰＭＷＭＶ。该质粒载体带有一个ｎｐｔ－Ⅱ基因（筛选具有卡那霉素抗性的植株）和一个ＷＭＶ－２ＣＰ基因。抗卡那霉素（Ｋａｎ＾ｒ）的黄瓜植株经ＤＮＡ分子点杂交、ＰＣＲ检测以及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ证实,外源的ＷＭＶ－２ＣＰ基因确实已导人瓜细胞且能稳定地遗传到子一代。     

莲子在光下萌发过程中叶绿体色素蛋白质复合体及光化活性的变化

实验研究了莲种子（ＮｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａＧａｅｒｔｎ．）在光下萌发过程中叶绿体色素蛋白复合体、多肽组成以及ＰＳⅡ光化活性的变化。结果表明,萌发到第６天的莲胚芽叶绿体,在ＳＤＳＰＡＧＥ凝胶柱中只分出两条色素带,分别为捕光叶绿素蛋白复合体（ＬＨＣⅡ）和自由色素（ＦＰ）。萌发到第８天的莲叶绿体可分出ＣＰⅠ,ＬＨＣⅡ１、ＬＨＣⅡ和ＦＰ。仍未检测到ＰＳⅡ反应中心复合物。多肽分析表明：未萌发和萌发到第２天的叶绿体中３０ｋＤ多肽的含量显著,尽管２７ｋＤ多肽在未见光时已开始合成,但其含量很少。随着照光时间增长,３０ｋＤ多肽含量逐渐减少,２７ｋＤ多肽的含量逐渐增多,到第１２天时超过３０ｋＤ多肽的含量。电子传递速率和室温荧光诱导动力学的测定表明：ＰＳⅡ光化活性在莲子萌发到第７天时才开始出现,并随萌发时间增加而升高,与此同时Ｃｈｌａ／ｂ比值由低到高达到正常值。莲子在光下萌发过程中其叶绿体膜成分及膜功能的变化与它的超微结构的变化相符合。结果再次证明,莲胚芽叶绿体在光下的发育具有与其它高等植物所不同的独特途径,这为莲在被子植物系统发育中占有独特地位的看法提供了依据。     

集胞藻Synechocystis sp.PCC6803利用葡萄生长与光合能量转？…

用ＰＡＭ叶绿素荧光仪测定了饥饿细胞、光自养细胞和混合营养细胞的叶绿素荧光,并对３种类型细胞的荧光参数：ＰＳⅡ实际光化学效率ψⅡ和还原型质醌Ｑ＾－Ａ进行了比较。用双重转盘磷光机测定了光自养细胞和混合营养细胞的毫秒延迟发光。根据叶绿纱荧光动力学分析和毫秒延迟发光的结果及光合电子传递抑制剂３,４－二氯苯基二甲脲（ＤＣＭＵ）、溴百里香醌（ＤＢＭＩＢ）对集胞藻６８０３（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ ｓｐ．ＰＣ     

光抑制条件下水稻籼粳亚种及其正反交F1杂种的PSⅡ光化学效率和CO2？…

测定了水稻不同正反交组合的ＰＳⅡ电子传递活性、Ｄ１蛋白量、叶绿素ａ荧光、净光合速率（ＰＮ）、光呼吸速率（ＰＲ）、ＲｕＢＰＣａｓｅ／Ｏａｓｅ活性,并对ＲｕＢＰＣａｓｅ进行了动力学分析。结果表明：光抑制条件下粳亚种中Ｄ１蛋白净降解少,ＰＳⅡ电子传递活性和光化学效率高,表现耐光抑制,而籼亚种则相反,籼、粳正反交Ｆ１的上述指标介于双亲值之间且偏向其母本。进一步观察它们的ＣＯ２交换特点,所有基因型水稻ＰＲ保     

不同光质对黄瓜叶片光合特性的影响

将黄瓜（ Ｃｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．） 幼苗培养在相同辐照度（２０ μｍｏｌ·ｍ － ２·ｓ－１） 的白光、红光和蓝光下,研究了光质对黄瓜叶片的光合作用特性的影响。实验结果表明,生长在白光下的叶片,其叶绿素（Ｃｈｌ）含量分别比红光和蓝光下高７ ％ 和２２４％ ,在蓝光下的含量最低。生长在红光下的黄瓜叶片有较低的Ｃｈｌａ／ｂ 比值和较高的Ｃｈｌ ｂ 含量。低温（７７ Ｋ）荧光发射光谱和Ｃｈｌａ 荧光动力学诱导的实验结果表明,红光下的叶片具有较高的光系统Ⅱ（ＰＳⅡ） 活性和较低的光系统Ⅰ（ＰＳⅠ）活性,蓝光下的叶片具有较低的ＰＳⅡ活性和较高的ＰＳⅠ活性。红光下叶片的放Ｏ２ 速率比白光下叶片的放Ｏ２ 速率高４４９％ ,而蓝光下的叶片放Ｏ２ 速率略低于白光下的。表明光质对调节黄瓜叶片ＰＳⅠ和ＰＳⅡ的发育和光合活性以及光合放Ｏ２ 速率具有重要作用。     

PSI颗粒中LHPC－I含量与类囊体膜状态的关系

菠菜叶绿体经低渗ＫＣｌ或１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ溶液处理后,再用毛地黄苷法提取ＰＳＩ颗粒,前者ｃｈｌａ／ｂ高于后者。而ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒的耗氧活力极强,低温荧光发射具很强的Ｆ６８０。ＳＤＳ－凝胶电泳谱带也表明ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒具较浓的２０～２４ｋｄ谱带。凡此都说明ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒的ＬＨＰＣ～Ｉ含量远超过ＫＣＩ－ＰＳＩ颗粒的。而叶绿体经ＭｇＣｌ２、ＫＣｌ、ＥＤＴＡ溶液处理后,基粒类囊体膜垛叠的情况不同,它们的ｃｈｌａ／ｂ比值依次下降。说明ＰＳＩ颗粒中ＬＨＰＣ－Ｉ含量与提取时类囊体膜垛叠状态有关。     

PSI颗粒中LHPC—I含量与类囊体膜状态的关系

菠菜叶绿体经低渗ＫＣＬ或１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ溶液处理后,再用毛地黄苷法提取ＰＳＩ颗粒,前者ｃｈｌ ａ／ｂ高于后者。而ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒的耗氧活力极强,低温荧光发射具很强的Ｆ６８０。ＳＤＳ－凝胶电脉谱带也表明ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒具较浓的２０－２４ｋｄ谱带。凡此都说明ＥＤＴＡ－ＰＳＩ颗粒的ＬＨＰＣ－Ｉ含量远超过ＫＣＬ－ＰＳＩ颗粒的。而叶绿体经ＭｇＣｌ２、ＫＣｌ、ＥＤＴＡ溶液处理后,基粒类囊体膜垛叠     

文摘

010 112绿色荧光蛋白与黄瓜花叶病毒运动蛋白融合基因的构建及在大肠杆菌中的表达 [中 ]/李睿… / /农业生物技术学报 .-2 0 0 1,9(1) .- 19～ 2 2采用重组 -ＰＣＲ方法 ,扩增获得绿色荧光蛋白 (ＧＦＰ)与黄瓜花叶病毒运动蛋白 (ＣＭＶＭＰ)融合基因 ,将其克隆到ｐＫＥＮ上 ,构建了该融合基因的原核表达载体 ｐＫＥＮＧ -Ｍ。ＳＤＳ -ＰＡＥＧ及免疫印迹分析显示 ,5 7ｋＤ的融合蛋白基因在大肠杆菌ＤＨ5ａ中正确表达。激光共聚焦显微镜分析表明 ,在 488ｎｍ光激发下 ,菌体呈亮绿色 ,表明融合蛋白保持绿色荧光特性。实验结果为进一步研究ＣＭ…