大鼠膀胱初级传入纤维向中枢的定位投射──CB－HRP跨神经节追踪研究

本文用大鼠１７只，将ＣＢ－ＨＲＰ注入一例膀胱壁内，ＴＭＢ法反应，明暗视野对照观察。结果：１）标记的初级传入神经元在脊神经节的分布节段为Ｔ１２－Ｓ２节，以注射侧为主。最集中的节段是Ｌ６－Ｓ１，其标记细胞数占标记细胞总数５２．５％，并集中分布在节内的背远侧端，有较明确的局部定位；２）初级传入神经元的中枢突进入脊髓后，其大部分纤维（外侧径束）终于网状核和中间外侧核形成终末区。小部分纤维（内侧径束）进入中央管背外侧区和灰质后连合形成终末区。灰质后连合被一横行的白质带分为背、腹两部，外侧径束分布在腹部并可越过中线，内侧径束分布在背部。     

大鼠脊神经节内交感神经支配的荧光组织化学与HRP示踪观察

本研究应用乙醛酸诱发儿茶酚胺（ＣＡ）荧光技术观察大鼠肾上腺素（ＮＡ）能神经在脊神经节内的分布;并应用ＨＲＰ顺、逆行追踪技术对脊神经节内ＮＡ能神经纤维的起源及其与脊神经节神经元的关系进行了探讨。荧光组织化学观察发现、有些神经节神经元胞体周围分布有带膨体的ＮＡ能神经末梢;有的紧密围绕脊神经节细胞——卫星细胞复合体。颈上交感神经节内注射霍乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ（ＣＢ┐ＨＲＰ）,在同侧Ｃ３～６节段脊神经节内可见标记的点状纤维末梢紧邻于节细胞旁。Ｔ１１～Ｌ２节段脊神经节内注射ＨＲＰ后,在同侧椎旁交感链（Ｔ９～Ｌ１）内可见标记的交感节后神经元胞体。上述实验结果表明,交感节后神经元发出节后纤维可直接到达脊神经节内,与节细胞发生接触。本研究提示、交感神经在脊神经节水平可能参与躯体初级传入信息的调制     

鸣禽欧椋鸟带状核的传出投射—PHAL顺行示踪法研究

本实验应用顺行神经示踪物ＰＨＡＬ对鸣禽欧椋鸟（Ｓｔｕｒｎｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）带状核（Ｔｎ）的传出投射作了定位研究。Ｔｎ核的传出投射经背腹两条路线：（１）从Ｔｎ核背部进入端脑的ＰＨＡＬ标记纤维,分别终止在新纹状体内侧,隔内侧核（ＳＭ）,侧室腔外侧带和额上层腹侧带;（２）另一组标记纤维从Ｔｎ核腹侧直接向丘脑投射,在下丘脑腹内侧核（ＶＭＮ）和外侧核（ＬＨｙ）分别获得大量ＰＨＡＬ免疫反应纤维的终末标记。结果提示：Ｔｎ核可能为鸟类旁听觉神经通路的一个组成部分。     

大鼠杏仁基底外侧核腹侧部向杏仁中央核的纤维投射──HRP逆行示踪结合免疫组织化学法研究

本实验采用ＨＲＰ逆行示踪结合免疫组织化学方法,对大鼠杏仁底基底外侧核腹侧部向中央杏仁核的纤维投射特征及其化学特性进行了研究。一侧杏仁中央核（Ｃｅ）内注射ＨＲＰ后,于双侧杏仁基底外侧核腹侧部（ＢＬＶ）观察到大量ＨＲＰ标记神经元,以对侧为主;在杏仁基底外侧核前（ＢＬＡ）、后（ＢＬＰ）部及梨状皮质内侧部（ＰＣＭ）第Ⅱ、Ⅲ层仅观察到少量ＨＲＰ标记神经元。当注射范围局限于杏仁中央核内侧部（ＣｅＭ）,ＢＬＶ的标记神经元相对多．当注射范围局限于杏仁中央核外侧部（ＣｅＬ）,ＢＬＶ的标记神经元相对少。将有ＨＲＰ标记神经元的切片分别与生长抑素（ＳＯＭ）、脑啡呔（ＥＮＫ）、Ｐ物质（ＳＰ）抗血清按ＡＢＣ法完成免疫组织化学反应,结果在ＢＬＶ、ＰＣＭ第Ⅱ、Ⅲ层观察到ＨＲＰ－ＳＯＭ免疫阳性双标记神经元,但未发现ＨＲＰ－ＳＰ、ＨＲＰ－ＥＮＫ免疫阳性双标记神经元;在ＢＬＡ和ＢＬＰ未发现ＨＲＰ－ＳＯＭ、ＨＲＰ－ＥＮＫ、ＨＲＰ－ＳＰ免疫阳性双标记神经元。本文着重讨论了ＢＬＶ与内脏功能活动的关系,认为ＢＬＶ不同于ＢＬＡ与ＢＬＰ,它参与“内脏环路”。此外,还分析了ＰＣＭ投射到Ｃｅ的神经元的功能学意义。     

大鼠膀胱及其牵涉区的初级传入神经起源

目的：在确定大鼠膀胱痛牵涉区的基础上,明确膀胱及其牵涉区的初级传入神经的起源。方法：经静脉注入Evans Blne,观察染料渗出和皮肤部位;将CB－HRP分别注入膀胱壁内或牵拉区皮下,观察和计数阳性标记细胞出现的部位及数目。结果：深蓝色的染料渗漏斑仅出现在耻骨联合附近皮区,膀胱的CB－HRP阳性标记神经元胞体主要集中在L－L3和L6、S1节段背根神经节（DRG）中,牵涉区的则主要分布在L2、L3节段DRG。结论：大鼠的膀胱痛牵涉区主要位于耻骨联合附近的皮肤,膀胱的初级传入神经起源广泛,而牵涉区的初级传入神经起源局限,二者在L2、L3节段DRG有一定的重叠分布。     

大鼠直肠肽能神经的支配与起源——HRP与免疫细胞化学法联合研究

用HRP追踪法与免疫细胞化学法观察了大鼠直肠内P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）和血管活性肠肽（VIP）三种肽能神经的支配与来源。结果显示：（1）直肠GCRP和VIP肽能神经起源于盆丛副交感神经节（PSG）。（2）直肠感觉神经纤维来自骶2－4节段双侧背根神经节（S2－4－DRG）SP能或CGRP能神经元。（3）感觉神经元的中枢突进入骶髓2－3节段后角并形成较粗大的外侧束,其中大部分传入纤维经后角外侧缘走行,终止于侧角区中间外侧核交感神经元胞体周围。其余部分传入纤维延伸到骶髓2－3节段灰质第Ⅱ、Ⅲ层和灰质后连合核（中央自主神经核）,进入中间外侧核的传入纤维与后连合核也有联系。上述结果提示,支配直肠的VIP能神经元参与了直肠肌运动的调节;SP和CGRP能神经元可能与直肠的运动、感觉调节有关。     

兔杏仁体向皮层听区的直接投射及其比较生理学意义

刺激杏仁外侧核或基底核,可在兔听区皮层观察到诱发电位,诱发电位分布在ＷｏｏｌｓｅｙＡＩ、ＡⅡ区及溴鼻沟后缘听区皮层（ＡＣＢＲＳ区）,以ＡＣＢＲＳ区反应为最大。诱发反应的潜伏期最短为２毫秒,表明杏仁向听皮层的投射可能是单突触的。形态学工作揭示,兔主要听区ＡＣＢＲＳ区电泳辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）,杏仁外侧核及基底核都观察到逆行标记细胞,标记细胞数量以杏仁外侧核为多;ＷｏｏｌｓｅｙＡⅠ、ＡⅡ区电泳ＨＲＰ     

树下丘脑视交叉上核突触超微结构的电镜观察

本研究借助免疫电镜和溃变纤维电镜追踪等技术,探索我国南方特产,昼行动物“灵长类原宗”树鼠句（ＴＢＣ）下丘脑视交叉上核（ＳＣＮ）的突触,特别是ＳＣＮ中５－羟色胺（５－ＨＴ）能和视纤维传入的突触联系的超微结构特征,结果表明：ＴＢＣ的ＳＣＮ主要包含不对称性ＧｒａｙⅠ型（ＧＴⅠ）和对称性ＧｒａｙⅡ型（ＧＴⅡ）两种突触类型。其中ＧＴⅠ突触的后膜下颇多呈现“三体一线”的节下小体。５－ＨＴ能末梢在ＴＢＣ的ＳＣＮ（主要在其腹侧）中形成丰富的ＧＴⅠ和ＧＴⅡ突触。还观察到ＳＣＮ中５－ＨＴ能末梢和非５－ＨＴ能轴突构成颇多的轴－轴突触,５－ＨＴ能末梢既可为突触前也可为突触后成分。这在大鼠ＳＣＮ中未见报道,而视纤维传入在ＳＣＮ腹外侧区主要形成ＧＴⅠ突触     

鸽丘脑听觉中继核团传出神经投射的研究

应用神经示踪物生物素标记的葡聚糖对环鸽丘脑听觉中继核团的传出神经投射进行了研究。结果发现：（１）丘脑卵圆核的传出纤维投射至端脑新纹状体内侧的Ｌ２听区;（２）卵圆核壳的传出纤维投射至Ｌ１、Ｌ３和部分Ｌ２听区,在Ｌ区周围亦存在许多标记终末;（３）尾侧卵圆核壳的传出投射参与了卵圆核壳的形成并发出二束纤维分别投射至下丘脑腹内侧核和端脑新纹状体Ｌ区外侧的旁听区。本实验结果首次揭示在鸟类丘脑听中继核团、端脑新     

家兔肠系膜上神经节注射HRP后脊神经节内标记细胞的节段分布

将ＨＲＰ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，辣根过氧化物酶）注入７只家兔肠系膜上神经节内，观察逆行标记神经元胞体在脊神经节内的节段性分布。结果显示，标记细胞见于双侧Ｔ５（胸５）－Ｌ３（腰３）脊神经节内，较集中地分布于Ｔ８－Ｔ１２节段，高峰在Ｔ９和Ｔ１０。两侧脊神经节内的标记细胞数及节段分布模式无显著差异。标记细胞散布于脊神经节各部，大都是５０μｍ以下的中，小型细胞。研究结果揭示了肠系膜     

细胞松驰素B促微丝解聚对DNA合成的作用

利用微丝（ｍｉｃｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ,ＭＦ）解聚药物细胞松驰素Ｂ（ｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ,ＣＢ）处理Ｇ_０期小鼠Ｃ_３Ｈ_（１０）Ｔ_（１／２）成纤维细胞,对Ｇ_０至Ｓ期ＤＮＡ合成,胸腺嘧啶核苷激酶（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ,ＴＫ）活性、ＴＫ基因表达、钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察,Ｇ_０期细胞经３ｍｇ／ＬＣＢ处理２ｈ,促ＭＦ解聚增强了血清对Ｓ期细胞ＴＫ活性、ＴＫ基因表达和ＤＮＡ合成的刺激作用,并促进细胞提前进入Ｓ期．血清刺激Ｇ_０期细胞进入晚Ｇ_１期和Ｓ期时,ＣａＭ水平明显升高,而ＣＢ预处理则使ＣａＭ含量进一步增加,特别是ＣＢ处理促使Ｓ期ＣａＭ增加向核内转移．ＣＢ处理明显增强血清对ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达的刺激作用,而ＰＫＣ抑制剂Ｈ_７则抑制ＣＢ处理对这些基因转录的刺激作用,说明ＣＢ使Ｇ_０期细胞ＭＦ解聚刺激ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的转录活性与ＰＫＣ的作用有关．结果表明Ｇ_０至Ｓ期早期ＭＦ的重组可促进细胞进入Ｓ期,增强ＤＮＡ合成．     

大鼠延髓至下丘脑腹内侧核的儿茶酚胺能投射神经元在胃伤害性刺激后的Fos表达

本实验用ＨＲＰ注入下丘脑腹内侧核结合逆行追踪与抗ＦＯＳ蛋白和抗酪氨酸羟化酶（ＴＨ）抗血清双重免疫细胞化学相结合的三重标记方法,对大鼠孤束核和延髓腹外侧区至下丘脑腹内侧核的儿茶酚胺能投射神经元在胃伤害性刺激后的ｃ－ｆｏｓ表达进行了观察。本文发现孤束核和延髓腹外侧区有七种不同的标记细胞：ＨＲＰ、Ｆｏｓ、ＴＨ单标细胞Ｆｏｓ／ＨＲＰ、Ｆｏｓ／ＴＨ、ＨＲＰ／ＴＨ双标细胞和Ｆｏｓ／ＨＲＰ／ＴＨ三标细胞。上述七种标记细胞主要分布在延髓中段和尾段孤束核的内侧亚核和延髓腹外侧区以及两者之间的网状结构。ＨＲＰ标记细胞以注射侧为主,对侧有少量分布。本文结果证明,大鼠孤束核、延髓腹外侧区和网状结构内儿茶酚胺能神经元有些至下丘脑腹内侧核的投射,其中一部分儿茶酚胺能神经元参与了胃伤害性刺激的传导和调控。     

2，5－己二酮对大鼠视束纤维和视上丘细胞电生理特性的影响

应用复合动作电位记录技术研究了２,５－己二酮对大鼠视束大纤维（Ｔ１）和中纤维（Ｔ２）以及视上丘（ＳＣ）Ｃ２细胞电生理特性的影响。结果表明：２,５－己二酮使视束Ｔ１和Ｔ２轴突的传导速度降低,反应波形的幅度下降、上升时间延长、宽度增加、基强度减小。从Ｔ２到Ｃ２的突触延搁增加,Ｔ２和Ｃ２的恢复功能曲线有明显的超常兴奋性,相对不应期减小。２,５－己二酮对Ｔ２和Ｃ２细胞的电生理特性有选择性影响。     

大鼠下丘脑内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法观察了大白鼠下丘脑内一氧化氮合酶（ＮＤＳ）阳性神经元的分布及形态特征。结果显示：在视上核、室旁核的大细胞部、环状核、穹窿周核、下丘脑外侧区、下丘脑腹内侧核、下丘脑背内侧核、乳头体区大部分核团均可见一氧化氮合酶阳性神经元聚集成团。在视前内侧区、视前外侧区、下丘脑前区、下丘脑背侧区、下丘脑后区、室周核、室旁核小细胞部及穹窿内可见散在的一氧化氮合酶阳性神经元。室周核内可见呈阳性反应的接触脑脊液神经元的胞体及突起。一氧化氮合酶阳性神经元大多可见突起,有的突起上可见１～２级分支,并可见膨体。下丘脑大部分区域内可见阳性神经纤维。弓状核内可见许多弧形纤维连于第三脑室室管膜和正中隆起。     

中华白海豚的解剖学和C_6、T_8、Lc_2的组织学研究

对１头雌成体中华白海豚的脊髓从宏观到微观研究其形态结构。光镜观察标本取自Ｃ６、Ｔ８和Ｌｃ２,冰切２０～４０μｍ,硫堇及镀银两法染色。脊髓式为Ｃ８Ｔ１２Ｌ１０Ｃａ４（或Ｌｃ１４）。脊髓长占体长的２７４８％,脊髓重占脑重的３８８％。蛛网膜小梁异常发达呈薄丝绵状,软脊膜携血管随沟、裂内陷入脊髓实质。灰、白质具不规则血管周隙,含淋巴细胞及脑脊液。神经细胞与微血管浸于脑脊液中,故神经细胞为ＣＳＦ－ＣＮ。根据Ｒｅｘｅｄ的细胞构筑原则,可将Ｃ６、Ｔ８、Ｌｃ２灰质分为１０层,并对每层及其相关神经核关系作了描述。在上述３节白质侧索、背索和腹索中均发现特殊细胞群,即：颈外侧核、胸外侧核和腰尾外侧核;背索核和腹索中的弥散性细胞。     

汉滩病毒S基因及其5‘端真核表达载体的构建及在细胞中的表达

体外研究汉滩病毒（ＨＴＮＶ）Ｓ基因及其５'端表达的意义,为核蛋　白Ｔ细胞表位的研究奠定基础。设计２套引物,用ＰＣＲ方法从ＰＢＶ２２０－Ｓ２２原核质粒中扩增出Ｓ　基因全读码框（３７－１３２６ｂｐ）及Ｓ基因５'端（３７－５０１ｂｐ）,用ＴＡ克隆将其克隆入ｐｃＤＮＡ３．１／Ｖ５－Ｈｉｓ－ＴＯＰＯ载体中,成功构建ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ及ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ－Ｎ真核表达载体,并通过脂质体转　染至Ｖｅｒｏ细胞中,进行了瞬时表达。间接免疫荧光成功检测到ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ及ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ－Ｎ在Ｖｅｒｏ细胞中的表达。ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ及ｐｃＤＮＡ３．１－Ｓ－Ｎ真核表达载体有较高的转染效率,目　的基因能在宿主细胞中表达,有利于研究ＨＴＮＶ－Ｓ基因在Ｔ细胞表位研究中的意义。     

神经束路电镜追踪中影响HRP—TMB反应产物因素的分析

采用ＨＲＰ－ＴＭＢ－ＳＴ法,对小鼠延髓下橄榄核下端外侧风状核细胞的ＨＲＰ－ＴＭＢ反应产物影响因素分析表明：（１）较高的ＰＨ值是反应产物消失的关键因素;０．２ｍｏｌ／ＬＰＢ,ＰＨ５．０－６．０对ＨＲＰ－ＴＭＢ反应灵敏度、反应产物的稳定性组织超微结构的保存是适宜的;当ＰＨ值相同时,缓冲液浓度不同,反应产物消失的程度和程度也不相同。（２）酒精有稳定反应产物的作用。（３）反应前的预浸、灌注液的成分、浓度和     

P物质在谷氨酸兴奋外侧下丘脑—穹窿周围区引起的升压反…

Ｐ物质（ＳＰ）能神经元及其轴突末和受体广泛分布于很多心血管中枢。外侧下丘脑含ＳＰ能神经元,外侧下丘脑投射的升压区内又存在ＳＰ能纤维及ＳＰ受体;因此本工作检验ＳＰ在外侧下丘脑升压反应中的作用。实验显示：（１）Ｌ－谷氨酸兴奋外侧下天脑的穹窿周围区（ＬＨ／ＰＦ）或将ＳＰ分别注入各ＬＨ投射区,蓝斑（ＬＣ）、臂旁核（ＮＰＢ）或 导不管周围灰质（ＰＡＧ）均引起升压反应;（２）「Ｄ－Ｐｒｏ＾２,Ｄ－Ｐｈｅ＾７,     

细胞松弛素B促微丝解聚对DNA合成的作用

利用微丝（ＭＦ）解聚药物细胞松弛素Ｂ（ＣＢ）处理Ｇ０期小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２成纤维细胞,对Ｇ０至Ｓ期ＤＮＡ合成,胸腺嘧啶核苷激酶（ＴＫ）活性、ＴＫ基因表达、钙调素（ＣａＭ）水平和一些细胞周期早期基因的表达进行了观察。Ｇ０期细胞经３ｍｇ／ＬＣＢ处理２ｈ,促ＭＦ解聚增强了血清对Ｓ期细胞ＴＫ活性、ＴＫ基因表达和ＤＮＡ合成的刺激作用,并促进细胞提前进入Ｓ期。血清刺激Ｇ０期细胞进入晚Ｇ１期和Ｓ期时,ＣａＭ     

中缝大核在刺激视上核镇痛中的作用

运用核团灌流液的放免测定和高压液相色谱法以及核团内注射拮抗剂,观察了化学刺激下丘脑视上核（ＳＯＮ）对中缝大核（ＮＲＭ）灌流液内催产素（ＯＴ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）含量的影响以及ＮＲＭ内注射ＡＶＰ、５－ＨＴ或ＯＴ受体拮抗剂对痛阈（ＰＴ）的影响。结果表明：ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）１０μｇ后动物痛阈明显升高,ＮＲＭ灌流液中ＯＴ和５－ＨＴ的含量明显高于对照组水平,ＡＶＰ的含量仅有一过性增加。ＮＲＭ内注射ｏＴ或５－ＨＴ拮抗剂可逆转化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛作用;而ＡＶＰ的Ｖ＿(１／２)受体拮抗剂也轻度抑制这种镇痛作用,但Ｖ＿１拮抗剂对此作用无影响。以上结果提示：在刺激ＳＯＮ镇痛中,ＯＴ起着重要作用,Ｌ－Ｇｌｕ刺激ＳＯＮ的ＯＴ细胞释放ＯＴ,作用于ＮＲＭ细胞的ＯＴ受体和Ｖ＿２受体而产生镇痛作用,５－ＨＴ在此过程中也发挥重要作用。