红褐斑腿蝗卵黄蛋白的分离纯化及性质分析

用蒸馏水沉淀法、凝胶过滤、蛋白质电泳等方法提取纯化了红褐斑腿蝗Catantops pinguis (Stål)的卵黄蛋白,并对其性质进行了分析。电泳结合不同的染色方法证明红褐斑腿蝗的卵黄蛋白为一种糖脂复合蛋白,其分子量约为548 kD,由7个亚基组成,亚基分子量分别为147.3,100.2,95.9,59.6,53.6,49.0和42.2 kD。卵黄蛋白经高效液相色谱分析检测到17种氨基酸和NH₃峰,其中谷氨酸（Glu）百分含量最高,达13.46%,天冬氨酸（Asp）、亮氨酸（Leu）、半胱氨酸（Cys）、精氨酸（Arg）含量比较高,脯氨酸（Pro）、组氨酸（His）、赖氨酸（Lys）含量较低。     

成熟前后蟾蜍卵母细胞质膜、透明带和卵黄膜蛋白质组份的比较分析

手工分离激素体外诱发成熟的中华大蟾蜍长足卵母细胞质膜和卵黄膜,以及未经激素处理的卵母细胞质膜和透明带,通过SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,进行膜蛋白质组份比较分析。考马斯蓝染色显示:未经激素处理的卵母细胞,其质膜主要有六条蛋白带子,分子量范围为25K—250K道尔顿;透明带有四条主要蛋白质带,分子量范围为43K—250K道尔顿。激素作用后的成熟卵球质膜蛋白质组份与处理前相同;由透明带衍生形成的卵黄膜,显著增加一种分子量为20K道尔顿的蛋白质组份。卵母细胞膜表面的碘(~(125)I)化反应和电泳分析结果清楚地表明,不论透明带还是质膜,它们的不同分子量蛋白质带都能强烈地标记上~(125)I;去膜卵球部分的蛋白质成份,没有测出任何~(125)I标记峰。证明以上分析的蛋白质组份确是存在于膜的表面。     

水稻谷蛋白是类似于豆球蛋白的蛋白质

水稻是我国的主要粮食作物,它的蛋白质含量为5—14%。在水稻种子蛋白质中,谷蛋白占80%,球蛋白占10%,醇溶蛋白占5%,清蛋白占5%。据报道,水稻种子清蛋白主要由分子量16800的亚基组成,球蛋白由10种不同分子量的亚基通过疏水交互作用相结合,谷蛋白由分子量38000、25000和16000三种亚基通过双硫键相结合:但是,Yamagata(1982)和作者(1983、1984、1986)的研究表明:水稻种子谷蛋白主要由分子量     

韭菜细胞溶质超氧化物歧化酶的纯化和性质

经硫酸按沉淀、SephadexG－200凝胶过滤和DEAE－Sephacel层析3个步骤,将韭菜细胞溶质SOD纯化到均一程度。从500g叶片中得到2·4mm酶,酶比活力达13000U／mm蛋白。鉴定该酶是Cu·Zn—SOD。测得酶分子量约为30900道尔顿,亚基分子量约为15900道尔顿,N一末端氨基酸为丙氨酸。该酶在紫外与可见光区吸收峰分别在260urn和680urn。实验表明该酶热稳定性良好。     

褐飞虱卵黄蛋白的分离及其生化特性

电泳结合不同染色方法证实, 褐飞虱Nilaparvata lugens (Stål)卵黄蛋白为一种糖脂结合蛋白,其分子量约为314 kD,由148 kD、124.5 kD和39.6 kD 3个亚基组成。免疫反应证明,卵黄蛋白只存在于生育期的雌性褐飞虱成虫体内。褐飞虱卵黄蛋白具有种的特异性,其免疫血清与白背飞虱的卵黄蛋白无交叉反应。     

甲型流感病毒内膜蛋白的分离提纯

甲型流感病毒内膜蛋白(MP)是该病毒分子量最小(21000—28000道尔顿);含量最丰富(占病毒蛋白总量33—50％)的一种非糖多肽,具有型特征,每个病毒颗粒大约有3000个分子的MP,等电点为pH 4.6,用电     

龟纹瓢虫卵黄蛋白的分子特性及发生动态

研究了龟纹瓢虫Propylea japonica (Thunberg) 卵黄蛋白的基本特性以及卵黄发生过程中卵黄蛋白的动态变化。PAGE和SDS-PAGE实验表明,龟纹瓢虫卵黄蛋白分子量为294.81±40.70 kD,并由分子量分别为144.68±0.03 kD和51.23±0.27 kD的两种亚基组成。对卵黄蛋白的氨基酸组成和含量分析发现,其必需氨基酸总量占57.48％,略高于非必需氨基酸,其中谷氨酸（Glu）含量最高,为15.26％;色氨酸（Trp）和蛋氨酸（Met）含量较低,分别为0.50％和0.11％。采用间接竞争ELISA法,系统测定了龟纹瓢虫成虫期脂肪体、血淋巴和卵巢中卵黄蛋白的动态变化,结果表明：脂肪体是卵黄原蛋白合成的场所,卵黄原蛋白的合成始于羽化后第2天;脂肪体、血淋巴和卵巢中卵黄原蛋白的滴度在羽化后第4天开始迅速上升,至成虫期的第8天左右达到高峰期。     

小体鲟卵黄蛋白生化特性及合成途径的研究

使用葡聚糖凝胶（Sephadex G-200）从小体鲟鱼卵粗提液中,提纯卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin, Lv )和卵黄高磷蛋白(Phosvitin, Pv)。卵黄脂磷蛋白（含糖、磷和脂,等电点7.50）具有雌性特异性, 分子量为144 kD,由97.4 kD和30 kD的大小2个亚基组成。卵黄高磷蛋白（含糖、磷,等电点8.30）其分子量为66 kD,其具有两个亚基,分子量分别为47.6 kD、16.8 kD。制备卵黄脂磷蛋白兔抗血清,采用免疫组化方法对不同年龄小体鲟的肝脏、肠、卵（Ⅱ-Ⅴ期卵巢）及血涂片,进行免疫组织化学定位研究。小体鲟卵巢发育到 Ⅳ期前,卵黄蛋白主要靠卵母细胞自身合成,这个时期内源性合成卵黄蛋白;当卵巢发育到 Ⅳ期,卵母细胞自身不合成卵黄蛋白,主要是通过肝脏合成卵黄蛋白原,通过血液循环运送到卵巢,被卵母细胞吸收后,裂解为卵黄蛋白,这个时期外源性合成卵黄蛋白。     

一种小麦高、低分子量麦谷蛋白亚基的提取方法

用7.5%的异丙醇和0.3 mol/L的NaI去除醇溶蛋白和其他单体蛋白, 以二硫苏糖醇(DTT)为强还原剂, 以4-乙烯基吡啶 (VP)保护巯基, 防止其重新氧化。在25%的异丙醇和0.04 mol/L的Tris-HCl (pH=8.0)缓冲液中提取小麦总麦谷蛋白亚基、在4%浓缩胶和13%分离胶的不连续分离体系中进行SDS-PAGE电泳, 结果表明, 该方法不仅能有效去除醇溶蛋白和其他蛋白对麦谷蛋白亚基电泳的影响, 且高分子量麦谷蛋白亚基 (HMW-GS) 和低分子量麦谷蛋白亚基 (LMW-GS)的提取分离一步完成, 更重要的是, 利用该方法提取出的HMW-GS和LMW-GS在电泳分析中, 具有高的分辨率, 可以有效区分各电泳谱带, 为进一步研究奠定了基础。     

海洋游仆虫细胞核染色质组分和组蛋白的初步研究

收集海洋游仆虫(Euplotes vannus)的细胞,制备其染色质。稀酸抽提染色质得到的组蛋白经聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、等电点聚焦和氨基酸分析等方法测定,其核染色质中组蛋白占核总蛋白的69.6％;DNA:RNA:组蛋白:非组蛋白为1∶0.022∶1.1∶0.047。染色质的全组蛋白由16种氨基酸组成,碱性氨基酸与酸性氨基酸之比为1.06∶1,是一种弱碱性蛋白质。等电点为pH8.1—9.15,分子量为10,500—22,000道尔顿。     

海水养殖真鲷弧菌病病原菌外毒素的理化特性

对最小弧菌Vm Pm毒素的分子量、分子结构及氨基酸组分进行了测定 ,同时还研究了温度、酸碱度及胰酶等因子对该毒素生物学活性的影响。研究结果表明 ,该毒素为单一的多肽 ,不具备典型的细菌毒素A、B亚基结构 ,分子量为 30 4 5 6kD ;毒素蛋白含天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸及半胱氨酸等 15种氨基酸 ,其中天冬氨酸的含量最多 ,半胱氨酸的含量最少 ,酸性氨基酸含量为 2 6 6 % ,碱性氨基酸含量为 14 4 % ,疏水性氨基酸含量为 33 4 % ;毒素活性的最适pH为 6— 8,对胰酶有抗性 ;不耐热 ,10 0℃下作用 1min ,其毒性完全消失 ,而在 5 6℃下 ,毒素完全失去活性需要 4 0min。     

蜡质芽孢杆菌超氧化物歧化酶的理化性质研究

本文对从蜡质芽孢杆菌发酵菌体中纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ进行了理化性质研究,测定结果表明：在２７℃,ｐＨ６８,光照强度为４０００Ｌｕｘ条件下,光照２０分钟为酶活性测定的最佳条件;经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得其亚基分子量为１７,７８３道尔顿;等电聚焦电泳表明：Ｆｅ－ＳＯＤ的等电点（ＰＩ）大约为６５左右;经ＤＮＳ法分析Ｎ－末端氨基酸为谷氨酸（Ｇｌｕ）;其氨基酸的组成中酸性氨基酸的含量大于碱性氨基酸的含量,表明此酶为酸性蛋白。     

河蚌C-反应蛋白的分离纯化及其性质研究

用合成的CDPC-Sepharose-6B亲和层析吸附剂一步提纯河蚌C-反应蛋白(CRP)。纯化的CRP在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦电泳鉴定时均显示为一条区带。其等电点(pI)为5.2,分子量约为310,000道尔顿,由六个亚基组成,亚基分子量约为51,000道尔顿。在280nm处的消光系数E_(1cm)~(1mg)/ml=1.2。河蚌CRP与C_多糖(CPS)发生的沉淀反应是钙依赖性的。本文对河蚌CRP的氨基酸组成及其它性质也作了研究。     

拟环纹豹蛛Pardosa pseudoannulata卵黄蛋白的分离纯化及性质

用蒸馏水沉淀法、Sephacryl S-300 High Resolution Hiprep 26/60葡聚糖凝胶层析、蛋白质电泳的方法提取和纯化了拟环纹豹蛛Pardosa pseudoannulata的卵黄蛋白,并对其性质进行了分析。用蒸馏水沉淀法能得到卵黄蛋白粗提液,将得到的卵黄蛋白粗提液用Sephacryl S-300 High Resolution Hiprep 26/60凝胶柱过滤,可以得到纯化的卵黄蛋白。电泳结合不同的染色方法证明拟环纹豹蛛卵黄蛋白是一种糖脂复合蛋白,它由2个亚基组成,亚基的相对分子质量分别为80.1 k D和57.4 k D。     

不同品种水稻种子贮藏蛋白质组分的差异

水稻是我国的主要粮食作物,它的蛋白质含量为6—14%。在水稻种子蛋白质中,谷蛋白占80%,球蛋白占10%,醇溶蛋白占5%,清蛋白占5%。据研究,水稻种子清蛋自主要由分子量16800的亚基组成,球蛋白由10种不同分子量的亚基通过疏水交互作用相结合,谷蛋白由分子量38000、25000和16000三种亚基通过双硫键相结合。但是,不同品种水稻种子贮藏蛋白质组分有何差异?研究报道的很少。本文简要报道不同品种水稻种子(籼稻和粳稻)贮藏蛋白质组分的差异,为     

白芸豆球蛋白的提取及其氨基酸组成研究北大核心CSCD

本文研究了白芸豆球蛋白的提取工艺、分子量和氨基酸组成。结果表明,白芸豆球蛋白最佳提取工艺为NaCl浓度2.5 g/100 mL,料液比1∶22(g/mL),提取温度55℃,提取时间5 h,在此条件下的球蛋白提取率为31.46%;用60%的硫酸铵,在4℃下盐析1 h,球蛋白的盐析得率为73.55%;球蛋白的SDS-PAGE电泳图谱中有6条蛋白亚基条带,其相对分子质量分别为97.52、47.35、33.84、29.62、26.28和21.99 ku,其中有5条与白芸豆分离蛋白的亚基条带相吻合;球蛋白的氨基酸组成种类齐全,必需氨基酸含量接近FAO/WHO推荐模式,是一种优质植物蛋白质资源。     

白芸豆球蛋白的提取及其氨基酸组成研究

本文研究了白芸豆球蛋白的提取工艺、分子量和氨基酸组成。结果表明,白芸豆球蛋白最佳提取工艺为NaCl浓度2.5 g/100 mL,料液比1∶22(g/mL),提取温度55℃,提取时间5 h,在此条件下的球蛋白提取率为31.46%;用60%的硫酸铵,在4℃下盐析1 h,球蛋白的盐析得率为73.55%;球蛋白的SDS-PAGE电泳图谱中有6条蛋白亚基条带,其相对分子质量分别为97.52、47.35、33.84、29.62、26.28和21.99 ku,其中有5条与白芸豆分离蛋白的亚基条带相吻合;球蛋白的氨基酸组成种类齐全,必需氨基酸含量接近FAO/WHO推荐模式,是一种优质植物蛋白质资源。     

中国明对虾卵黄蛋白的部分生化性质

对中国明对虾卵黄蛋白的部分生化性质进行了研究,中国明对虾的卵黄蛋白是一种脂糖类胡萝卜素蛋白,含磷5.56‰,等电点为4.5～5.0,总分子量为409 ku,具有5个亚基,其分子量分别为202 ku、171 ku、105 ku、80ku以及73 ku,含有一个二硫键.     

红螯螯虾感光器中Gq蛋白的鉴定及光波长对其含量的影响

用蛋白质常规提取方法分别提取红螯螯虾复眼视网膜的可溶性和膜结合蛋白质,用SDS-PAGE和免疫印迹法进行G蛋白的分离和鉴定;在经光、暗适应及红、绿、蓝、黄4种波长光照处理后,对其感光器中G蛋白分别进行SDS-PAGE分析.暗适应、自然光及4种波长光适应的感光器可溶性蛋白、膜结合蛋白条带数量和分子量大小基本相同,在42?kD处都出现一条清晰的蛋白条带.兔抗Gαq-11多克隆抗体能识别这一蛋白条带.表明红螯螯虾感光器中存在可溶性和膜结合Gq蛋白α亚基,分子量为42?kD.在不同光照条件下感光器中可溶性和膜结合Gqα亚基的含量有差异.可溶性Gqα蛋白占总蛋白的百分含量依次为:日光(7.71%)>黄光(7.32%)>红光(7.06%)>暗适应(6.94%)>蓝光(6.46%)>绿光(5.74%);除暗适应与红光之间差异不显著外,红光与黄光差异显著,其余差异极显著.而膜结合Gqα亚基的百分含量则相反,依次为:绿光(13.94%)>蓝光(10.56%)>暗适应(10.25%)>红光(10.14%)>黄光(9.76%)>日光(9.44%);除暗适应与红光差异不显著外,红光与黄光差异显著,其余差异极显著.推测红螯螯虾感光器中Gq蛋白的激活与光照刺激的波长有关,其感光器对不同波长光刺激的敏感度有差别.     

施氏鲟卵黄蛋白原及其相关蛋白的研究

采用凝胶柱层析、聚丙烯凝胶电泳、免疫印迹（Western blotting）和免疫扩散等方法对施氏鲟卵黄蛋白原（Vi-tellogenin,Vg）及其相关蛋白（Yolk protein,YP）进行了研究。结果表明,施氏鲟血清Vg是一种糖脂磷蛋白,其相对分子量为410kD,由分子量为205kD的两个同源亚基组成。Vg的3种相关蛋白YP1、YP2和YP3。其中YP1相对分子量为370kD,是一种糖脂磷蛋白,由相对分子量为97kD和33kD的两个亚基构成。YP2是一种相对分子量为144kD的磷脂蛋白,由相对分子量为94kD和45kD的2个亚基构成。YP3为相对分子量为66kD的磷蛋白,由相对分子量为30kD的同源亚基构成。