用调光开关自制电泳仪电源

利用台灯调光开关与整流电桥的电原理特性,将两者相接自制成电泳仪电源,把交流电压改变为直流电压进行电泳。用自制电泳仪电源进行琼脂糖凝胶电泳能分离出DNA Mark,进行纸电泳能分离出氨基酸,实验证明自制电泳仪电源可行。而且自制电泳仪电源具有价格低廉,取材方便,操作简单等特性,适于在中学实验教学推广。为新课标在“血红蛋白的提取和分离”课题中提出的了解电泳法提供了实验理论基础。     

即将问世的新型电泳系统——Phast System

Pharmacia AB将于今年五月份把他们研制四年之久的新型电泳仪-Phast System-投放市场.它是在现有的基本理论基础上,对操作程序作了重大改革后研制而成的.仪器包括两大部件,即电泳控制仪(Sepera-tion and Control Unit)和染色仪(Development Unit),配有高效电泳凝胶(High Performance Phast Gel)和电极条(Electrode Strips).可用于现有的各种电泳技术,特点是快速、高效和重复性好.电泳仪是系统的核心,由电泳室,操作台,显示板和电源组成,靠微处理机按照编好的程序控制与监测电泳和染色过程.可通过操作台上的热敏件输入9个不同的电泳方法及9个不同的染色方法.三恒电源的最大输出电压为1—2,000V;电流为0.1—25.0mA;功     

多发性骨髓瘤患者实验室指标分析及在临床诊断中的意义

目的探讨血清蛋白电泳、免疫固定电泳(IFE)及免疫球蛋白(Ig)定量实验的检测在临床诊断多发性骨髓瘤(MM)中的意义。方法对我院2011年1月~2015年10月收治的95例多发性骨髓瘤患者采用法国Serbia全自动毛细管电泳仪及琼脂糖电泳仪进行血清蛋白电泳和免疫固定电泳检测,采用西门子BN-Ⅱ特定蛋白仪对血清免疫球蛋白定量进行检测。结果 95例MM患者中,血清蛋白电泳检出M蛋白者81例,占85.3%。血清免疫固定电泳技术均检出M蛋白的存在,检出率为100%;分型结果:IgG型比例最高,其次为IgA型和轻链型,IgM型最少见。血清免疫球蛋白定量检测,95例MM患者中,相应类型的Ig水平明显升高,其余免疫球蛋白水平正常或降低。结论血清蛋白电泳、免疫固定电泳及免疫球蛋白定量等相关实验室检查,对提高MM的确诊率有重要的价值。     

水稻叶片蛋白质快速双向电泳分析的新方法

介绍了利用PhastSystem全自动快速电泳仪进行水稻叶片蛋白质双向电泳的方法。此方法具有快速(电泳全过程仅需3.5h),操作简单和成本低廉的特点,同时具有良好的重复性和高分辨率。     

山茶叶片可溶性蛋白双向电泳技术的建立

建立了山茶低温诱导蛋白研究中叶片蛋白双向电泳技术体系.采用固相pH胶条在IPGphor TM等电聚焦系统上进行等电聚焦,在Ettan TM Dalt Ⅱ高通量电泳仪上进行SDS-PAGE电泳,以银染法染色,得到了分离效果良好的蛋白质双向电泳图谱.讨论了蛋白沉降方法、蛋白提取液的组成及其他技术环节对蛋白图谱的影响.     

自动化激光散射外差电泳术

在经典电泳法中,电泳技术分成大分子电泳及显微(细胞)电泳两大类,实验装置及观察方法都有区别。而自动化激光外差电泳术却可用同一装置完成上述两类测量,除能同时测量扩散系数外,还可能完成反应动力学方面的测量。自动化激光散射外差电泳术是由激光散射外差探测术及电泳术组合而成的。70年代初期Ware及Uzgiris以略为不同的方法独立发表了实验及理论研究。按经典分类法,Ware是从大分子电泳开始,而Uzgiris则是从显微电泳开始,并已用于蛋白质、胶体、细胞学及免疫学研究。最近,Malher等报告了结构略为不同的类似装置。     

薄膜电泳

电泳方法是对生物组成成份的分离、分析不可缺少的技术。近年来相继出现了薄膜电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳,等电聚焦等新的电泳技术。应用有支持物的电泳技术,不仅能鉴别和分析构成生物体的成份和生物大分子,同时对细胞的分离和纯化方面的应用也不断有发展。由于薄膜电泳所用的装置和用具可以自己制做,加上操作简便迅速,因而这样的电泳方法就成为生化研究中的常规重要技术之一。这种用支持物的电泳也叫区带电泳。薄膜电泳主要是用纤维素薄膜     

建立PCR-CE-RFLP方法快速诊断女性生殖道的细菌感染

目的建立PCR-CE-RFLP方法直接检测女性生殖道感染标本中的细菌,为临床提供快速、准确的诊断依据。方法利用细菌16SrRNA集保守性和变异性于一体的特点,合成1对通用引物,其上游5’端用5＇-FAM标记。将8株已知菌和38例临床诊断为生殖道炎症的标本及其培养物进行PCR扩增,扩增产物经限制性内切酶HaeⅢ消化,经毛细管电泳（CE）通过限制性片断长度多态性分析（RFLP）来鉴定不同病原菌。结果（1）已知菌株PCR扩增阳性率为75％（6／8）、生殖道感染标本的PCR扩增阳性率为79％（30／38）,毛细管电泳阳性率两者均为100％。（2）已知菌株PER扩增产物的5’端HaeⅢ完全酶切片段的毛细管电泳结果,与电子克隆产物的酶切片段基本一致。（3）用传统培养检测法在生殖道能检出的常见致病菌,实验用PCR-CE-RFLP法同样也能检出。（4）实验还发现数种传统培养法未检出的细菌。结论PCR-CE-RFLP法比传统的细菌培养法具有快速、准确、灵敏的优点,比传统方法缩短20h,可用于临床标本的直接鉴定。     

16S DNA用于结核性胸膜炎的快速诊断

目的建立聚合酶链反应—毛细管电泳（PCR-CE）的方法直接检测结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌,以达到快速诊断结核性胸膜炎的目的。方法在大连市结核病医院收集2006年11月至2007年2月结核性胸膜炎患者的胸水120份,所有标本都经过结核分枝杆菌抗酸染色镜检和结合菌培养,其中115份为阴性标本,5份为阳性标本。利用16S DNA集保守性和变异性于一体的特点,设计合成通用引物G1：5′-FAM-GGC GGACGG GTG AGTAA-3′,G2：5′-ROX-GGA CTG CTG CCTCCC GTA G-3′,然后将标本进行DNA提取并进行PCR扩增,扩增产物用限制性内切酶HaeⅢ消化,用毛细管电泳来检测结核分枝杆菌。结果115份阴性标本中检测出结核分枝杆菌的有19份,未检测出结核分枝杆菌的有96份,其阳性率为16.52%;5份阳性标本中检测出结核分枝杆菌的有5份,阳性率为100%。结论PCR-CE方法检测结核分枝杆菌具有快速、准确、灵敏的特点,可用于结核性胸膜炎的快速诊断。     

滇金丝猴和菲氏叶猴血红蛋白及几种同功酶的比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对滇金丝猴和菲氏叶猴血红蛋白和几种同功酶在相同电泳条件下进行了分析和比较。 电泳:采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(8.9×0.5cm),T=6.5％;聚丙烯酰胺凝胶板电泳(14×13cm),T=7.2％,pH8.3的Tris—Glycine缓冲液;北京六一仪器厂DYY—Ⅲ型电泳仪;电流3mA/管、2mA/cm~2;电流时间3h(圆盘),5h(板)。染色参考Davidson et al.(1965)、Tashion et al.(1971)、Mikio Kuboki(1978)、牛满江、童弟周(1978)等的方法并略加修改。     

可同时作10块聚丙烯酰胺凝胶平板电泳的潜水式电泳槽

用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致。因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳。Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂。我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意。电泳槽结构见图1。电极板是将电解用高     

可同时作10块聚丙烯酰胺凝胶平板电泳的潜水式电泳槽

用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致.因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳.Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂. 我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意. 电泳槽结构见图1.电极板是将电解用高     

毛细管电泳非放射分析蛋白质和多肽磷酸化

本文建立了运用毛细管电泳同时非放射分析蛋白质或多肽中的各种Ｏ－磷酸化氨基酸方法。将蛋白或多肽部分水解成自由氨基酸,然后衍生为ＰＴＨ－氨基酸,再用毛细管电泳仪分离分析ＰＴＨ－磷酸化氨基酸。在２５至２５０ｐｍｏｌ／μｌ浓度范围内,３种Ｏ－磷酸化氨基酸的浓度对其衍生物ＵＶ吸光值的线性相关系数均大于０．９９２。方法均在ｆｍｏｌ水平。运用该方法对３个模型磷酸化肽及天然的磷酸化蛋白β－酪蛋白和卵黄高磷蛋白的磷     

南昌地区婴幼儿腹泻轮状病毒核酸电泳分析

应用核酸凝胶电泳法对49份婴幼儿急性腹泻粪便标本进行了分析研究。试验结果表明,其中34份呈现轮状病毒核酸电泳型。包括长型和短型两个亚群。在长型中有两种不同的电泳图型,并且对轮状病毒的实验诊断与电镜检测做了比较,结果证实二者的敏感性和特异性相似,而核酸电泳法具有更多的优点,便于推广应用。     

聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离血红蛋白的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,借助圆盘电泳仪的简易装置,对正常血红蛋白及异常血红蛋白(Hb)等进行了分析,获得满意效果。一、方法 1.凝胶制备 40％聚丙烯酰胺液(丙烯酰胺38.4克及甲叉双丙烯酰胺1.6克溶于蒸馏水至100毫升)1份,20％两性载体(Ampholine,国产、pH4—10)0.5份,蒸馏水3份,0.25％过硫酸铵液(临用前配制)2份,混匀,立即分装于内径4毫米,长9厘米的玻管中,胶长6厘米,日光灯下聚胶(约2小时),待胶聚合后,加样     

用双相电泳技术分析棉酚对大鼠成熟精子蛋白质组成的影响

本文首次将双相电泳(等电聚焦和SDS电泳)技术应用于对棉酚作用机理的研究。实验结果表明,棉酚能够改变大鼠成熟精子的蛋白质组成;同时也证明,双相电泳这一技术对棉酚的研究是有效的。     

新生大鼠顶盖脑组织提取液的生化分析——Phast System电脑快速电泳

本文用Phast System电脑快速电泳仪,对新生大鼠顶盖提取液进行了分离和自动染色。结果:(1)20％自然PAGE显现25条蛋白带;(2)经微浓缩器10、30处理后的SDSPAGE显现19条;(3)10—15％梯度自然PAGE显现30条;(4)IEF 3—9电泳显现52条,其中约85％是酸性蛋白质。顶盖提取液中蛋白的分子量主要介于14KD和100KD之间。此外,对自动染色作了比较。     

一种垂直板凝胶电泳装置的简便胶封技术

垂直板凝胶电泳技术,在生物学和医学研究中使用日益普遍。然而,与水平电泳相比,由装置的垂直状态产生的液面高差,在制板电泳过程中易出现胶液或电极液渗漏,导致电泳失败。因此,发展一项简便可靠的防漏技术实有必要。本文介绍一种以聚丙烯酰胺凝胶(PAG)作为防漏介质的垂直板电泳装置和胶封技术,使用效果满意。一、电泳装置由上、下电泳槽(图1)和凝胶板模(图2)二部分组成。电泳槽用有机玻璃制作。下槽是一只上口敞开的     

用ELISA法和核酸电泳法检测牛轮状病毒

本文用ELISA、核酸电泳法检测腹泻病牛粪便标本。21例中检出轮状病毒抗原有4例为阳性,占19.05%。ELISA法与核酸电泳法结果相符,前者被认为是最值得推广的方法。本研究在江西省首次证明了引起牛腹泻的牛轮状病毒的存在,为防治牛腹泻病采取有效手段提供了病原学依据。     

交变脉冲电场凝胶电泳分离染色体DNA分子

交变脉冲电场凝胶电泳是一种可用来分离染色体大分子DNA的新的凝胶电泳方法。通过交替采用两个不同方向的不均匀电场,使DNA分子在挤过凝胶筛孔时不断改变方向,从而获得大分子DNA的高分辨率电泳。本文报道用自行设计的交变电场电泳仪进行脉冲电场凝胶电泳分离酵母染色体DNA,可分成11个条带。用自身连接的lDNA作为分子量标准物,可分出14个条带。