共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
应用免疫组织化学SP法检测了90 例大肠癌组织中CD15、溶菌酶(LZM) 和p53 的表达。结果显示大肠癌中CD15、LZM 和p53 表达阳性率分别为83.3% 、70.0% 和57.8% 。CD15 表达与大肠癌的组织类型和LZM 表达无关。LZM 和p53 表达与大肠癌组织类型有关(P< 0.05)。p53 表达与CD15 和LZM 表达相关(P< 0.001)。CD15、LZM 和p53表达均与大肠癌的浸润和转移相关(P< 0.05)。本文揭示CD15、LZM和p53在大肠癌的发生发展、浸润和转移过程中具有独立或相互影响作用, 其相互作用机制有待深入研究。因此认为联合检测CD15、LZM 和p53表达状况, 是判断大肠癌分化程度、浸润、转移和预测预后的良好指标。同时也为利用不同基因变化研究大肠癌的发病机制、探讨治疗和预防提供一种新途径。 相似文献
2.
应用ABC免疫组化技术在H.E染色组织切片上行广泛的相关肿瘤抗原标记,并选用4种脱色剂探讨不同脱色剂对相关肿瘤抗原保存的影响。结果表明:与常规免疫组化反应相比采用1%盐酸酒精脱色效果最为理想。该技术使有用组织材料不足时,回顾性肿瘤抗原标记检测成为可能,对深入应用免疫组化技术具有实用价值。 相似文献
3.
P16蛋白和CyclinD1是两种常用的抗细胞周期调控因子抗体,P16是多种肿瘤抑制基因的表达产物,CyclinD1是一种癌基因产物,在肿瘤病理学研究中选用P16和CyclinD1等作为相反的抗体是十分有意义的[1]。为提高这两种抗体在石蜡包埋切片中的阳性检出率,我们在实验操作中同时应用了微波抗原修复法和微波胰蛋白酶消化法,获得了较为满意的结果,现报道如下:1 材料和方法11 材料:选取本科手术切除大肠腺癌标本存档蜡块40例,每例均切6张4μm切片备用,切片裱于涂有防脱片剂的干净载玻片上。1… 相似文献
4.
用PCR方法扩增人丙型肝炎病毒(HCV)C抗原部分基因片段,将其克隆到一种新的表达载体PQE中构成重组质粒PQE-Core短,转化大肠杆菌M15株。含PQE-Core重组质粒的工程菌株以2YT中37℃下培养加入IPTG诱导7小时,经15%SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白质,证明工程菌合成了大量改造的HCV Corenhj r 相似文献
5.
周韧 《中国组织化学与细胞化学杂志》1996,(3)
本文报道了一种新颖的抗原信号增强方法在免疫组织化学中的应用。该方法的特点是利用生物素标记的酪氨(BT)结合到HRP的催化位点上来达到增强信号的目的。本研究以冰冻切片及石蜡切片中ABC法为对照,结合微波和蛋白酶消化预处理,采用BT法检测了人扁桃体石蜡切片标本中淋巴细胞IgD的表达。结果表明该方法检测敏感性高,当一抗稀释至1:5000时仍能测得IgD的表达,与对照的ABC法相比,检测敏感性成百倍地提高。该方法能将原先只能用于冰冻切片的单抗IgD应用于石蜡切片中。本文还对该方法的可能机制进行了探讨。本研究提示BT法在病理检验和医学研究中有良好的应用前景。 相似文献
6.
哺乳类细胞中周期蛋白依赖激酶抑制因子 总被引:5,自引:0,他引:5
近两年,人们相继发现了一组能结合性抑制周期蛋白依赖激酶(CDKs)活性的蛋白因子──CDK抑制因子(CKIs)。它们分别是:p21、p16、p15、p27和CDIl。p21和p27有一定同源性,能抑制多种CDKs的活性;p16和p15则同源性更高,能特异地与CDK4、CDK6结合;CD11的结合特异性还有待进一步的研究。p21的表达受p53的正调控;TGF-β则上调p15的表达以及p27的抑制活性。以上表明CKls不仅是CDKs活性的调控者,而且还是抑癌因子与细胞周期调控之间的直接联系者。 相似文献
7.
不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中P53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨P53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对P53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测P53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示P53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体P53 DO - 7和LSAB试剂盒为DAK… 相似文献
8.
本实验用人重组r-干扰素(rhu-IFN)作用HEP-2细胞后HLA-DR抗原和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的检测来探讨r-干扰素对HEP-2细胞HLA-DR抗原表达诱导作用及体外抗增殖活性。用单克隆抗体CR3/43(抗HLA-DR)和Ki-67(抗PCNA)。以链霉素一生物素技术(LSAB)检测HEP-2细胞HLA-DR抗原和PCNA表达,结果显示:r-IEN诱导HLA-DR抗原和抑制PCNA表达其强弱与r-IFN剂量有关。资料提示:r-IFN不仅对HEP-2细胞有细胞毒作用,同时能调节其细胞膜特性,因而在喉癌的治疗中是有效的。 相似文献
9.
本文采用Ca~2+指示剂的分光光谱法测定巨噬细胞(Mφ)内Ca~2+浓度([Ca~2+]i)、APAAP桥联酶标法检测Mφ膜上Ⅰa抗原的表达,研究肌醇磷脂代谢中第二信使分子甘油二酯(DG)在去甲肾上腺素(NE)促进MφⅠa表达效应中的作用,以进一步探讨NE效应的跨膜信息传递机制。结果表明:蛋白激酶C(PKC)抑制剂4αPDD(25μg/ml)虽不影响NE(10 ̄-8mol/L)升高Mφ[Ca ̄2+]i的效应,却显著减弱了NE促进MφⅠa抗原表达的效应;而PKC激动剂PMA(10nmol/L)本身促进MφⅠa抗原表达的作用不明显,也不能进一步增强NE促进MφⅠa抗原表达的效应。结果提示:DG激活的PKC系统也参与了NE促进MφⅠa抗原表达的信息传递过程,并与另一第二信使分子肌醇-1,4,5-三磷酸(IP_3)介导的Ca ̄2+途径协同发挥作用。 相似文献
10.
反义寡聚脱氧核苷酸(ODN)衍生物抑制乙肝病毒抗原表达的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为比较针对中不同基因的ODN硫代衍生物阻断乙型肝炎病毒(HBV)的抗原表达,合成了与核心蛋白编码基因起始码上游序列,多聚酶蛋白编码基因起码上游及内部序列3.5kbRNA3'端起始负链DNA合成序列互补的寡聚脱氧核苷酸硫代衍生物,分别在HBV短暂表达和稳定表达细胞培养系统中观察其抑制HBV抗原表达的作用。结果发现,当培养液中ODN浓度为20μmol/LJF ,四种ODN均能抑HepG2.2.15细胞 相似文献
11.
免疫性不育病人的血清(IPS)能100%地抑制人体外受精.用该血清筛选人睾丸cDNA基因表达文库,发现了一种新的睾丸特异抗原(称作C2).通过DNA顺序研究,并与基因库中的有关同源性基因数据进行比较,证实C2是一个新的特异蛋白.C2基因仅与睾丸组织的mRNA杂交.该克隆在大肠杆菌中所表达的融合蛋白能够被3个不同的不育病人血清识别.利用嵌套缺失和Western印迹的方法研究其抗原决定簇定位,发现B细胞抗原决定簇在羧基端29个氨基酸范围内.用GCG软件分析该抗原的氨基酸的亲水性和疏水性以及其存在于蛋白表面的可能性,确定其中的15个氨基酸为抗原决定簇所必需,并合成了多肽 相似文献
12.
基因工程重组嵌合抗原作为丙型肝炎诊断试剂的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
利用基因工程重组技术获得了三种嵌合抗原,两种为丙型肝炎病毒(HCV)结构区核壳蛋白C22和NS3非结构区C33c双表位的嵌合抗原B1和B2,另一种是既具有上述两段优势抗原,还包括NS4非结构区C100多表位的嵌合抗原C25。在大肠杆菌水解酶阴性B株菌中表达的产物,经SDS-PAGE分析,B1,B2和C25嵌合抗原分子量分别为43,53和70kD,抗原蛋白表达量分别各占电泳蛋白条带的40%,10%和 相似文献
13.
人类疱疹病毒6型感染细胞免疫学特性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用间接免疫荧光法、APAAP法及MTT法,研究了人类疱疹病毒6型(HHV6)中国南京地方株CN5感染细胞病毒抗原表达的形态学和动力学特征、CD抗原表达阳性细胞百分率的变化及PHA诱导的细胞增殖反应的改变。结果显示,CN5感染脐血单个核细胞(CBMCs)后8~12h即可在细胞内检出病毒抗原,至接种后48h,病毒抗原阳性细胞可达36%;CN5感染CBMCs和成人外周血单个核细胞(PBMCs)后可引起两者CD3阳性细胞减少、CD4阳性细胞增多,而对CD2、CD8、CD45RA阳性细胞百分率未见明显影响;CN5感染细胞裂解液对PHA诱导的PBMCs增殖反应具有抑制作用,这种抑制作用与该裂解液的蛋白浓度之间呈一剂量依赖关系,且可被HHV6抗血清所逆转。 相似文献
14.
日本血吸虫26kD抗原基因在BCG中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
研究了外源基因日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)在卡介苗(bacilusCalmete-Guerin,BCG)、耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)和大肠杆菌(E.coli)中的表达.运用重组DNA和聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,以表达Sj26GST的E.colipGEX衍生质粒为模板,经PCR得到编码Sj26GST的全长cDNA片段.将其按正确的阅读框顺序,克隆到人结核杆菌热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70的启动子下游,再将HSP70启动子和Sj26GST基因一起亚克隆到E.coli-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,得到E.coli-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG-Sj26.pBCG-Sj26电转化入BCG和M.smegmatismc2155中表达Sj26GST抗原,所表达的天然重组Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDS-PAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带.其表达量分别占BCG和M.smegmatis菌体总蛋白的15%和10%.可见,Sj26GST基因能在BCG中高效表达. 相似文献
15.
16.
将马铃薯Y病毒普通系(PVY0)的外壳蛋白基因克隆到表达质粒pMALc2中,构建这一基因在大肠杆菌中的表达载体pMALc2PVY0CP。SDSPAGE及Westernbloting检测结果表明,这一表达栽体在E.coliDH5α中经IPTG诱导可表达分子量为71.8kDa的特异性融合蛋白。以amyloseresin亲合柱层析纯化这一融合蛋白为抗原,免疫家兔制备了效价为1∶1024的特异性抗血清。用该抗血清可通过对流免疫电泳、免疫双扩散及Westernbloting对PVY进行检测 相似文献
17.
目的:多梳基因家族的Bmi.1被认为是一种癌基因,在多种肿瘤组织中均有表达。本研究主要是检测Bmi-1基因在胃癌组织中的表达及探讨其临床意义。方法:应用RT—PCR和Westernblotting方法检测45例胃癌中Bmi-1基因的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性。结果:Bmi-1基因阳性表达率在胃癌中为88.9%(40/45),癌旁组织为17.7%(8/45),差异有显著性(P〈0.05);Bmi-1基因阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关(P〈0.05)。结论:Bmi-1基因在胃癌中高表达,与胃癌的疾病进展密切相关,检测Bmi-1的表达可作为胃癌生物学行为的一项评估指标。 相似文献
18.
19.
MAPK对胰岛素介导的人血管平滑肌细胞PKCα的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:在胰岛素的干预下,观察MAPK反义寡核苷酸(ODNs)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及PKCα表达的影响。方法:3HTdR掺入法检测VSMC增殖,逆转录PCR、免疫组织化学法检测PKCα表达。结果:反义ODNs 处理的细胞可显著抑制胰岛素诱导的VSMC的DNA合成,ODNs 的上述作用与降低VSMC内PKCα基因表达有关。结论:胰岛素刺激人VSMC增殖可被MAPK反义寡核苷酸所抑制,可能存在有关胰岛素PKCMAPK激活途径 相似文献
20.
应用基因重组技术,把编码EB病毒早期蛋白的BCRF1基因重组于真核表达载体pSG5中,并使该基因在乳地鼠肾(BHK)传代细胞中获得良好表达,表达率为0.5%。血清学实验证实,鼻咽癌、类风湿性关节炎病人和正常人血清中均不同程度地含有IgG/BCRF1抗体,抗体阳性率分别为92%、86%和77%,几何平均滴度(GMT)分别是1:16.35、1:14.72和1:10.15。两组病人和正常人血清中IgA/BCRF1抗体阳性率和滴度之间有较大差别,它们的阳性率分别是74%、71%和12%,GMT分别是1:12.32,1:10.56和1:2.35。还证实,鼻咽癌和类风湿性关节炎病人血清中IgA/BCRF1和IgA/EA(早期抗原)抗体阳性率和滴度间有很好的相关性,此为首次报导。重组表达质粒pSG5-BCRF1的构建和表达为进一步研究BCRF1基因在病毒感染和肿瘤免疫中的作用创造了条件。本文就质粒的构建和3组血清中IgA/BCRF1、IgA/BCRF1、IgA/EA和IgG/BCRF1抗体间的关系和有关问题进行了讨论。 相似文献