易致污染的支原体在固体培养基上的形态特征

目的研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成,观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103cfu/m L时,培养至2~3天后可在固体培养基中形成典型的"油煎蛋"状形态,以蔗糖作为碳源培养支原体会导致葡萄糖发酵型支原体(肺炎支原体)不能在固体培养基中形成典型菌落,当使用牛血清代替马血清为支原体提供外源胆固醇时,猪鼻支原体在固体培养基中不能形成典型菌落。结论支原体的不同生长期、菌体浓度、培养基的组成都会使易致污染的支原体在固体培养基上的形态发生变化。     

猪喘气病病原支原体的分离培养

我国有代表性的猪喘气病济南强毒株及III乳适应株,均能用无细胞液体培养基分离传代。接种3天后,培养基的PH从7．5下降到6．9左右,产生轻徽混浊。培养物呈多形态,移种固体培养基能生成菌落。不同代次的培养物均能使健康仔猪发生典型的猪喘气病肺炎。根据培养物生长特征、形态、染色观察及抗青霉素和醋酸铊等特性,确定为支原体;高度稀释(相当于原始接种材料的10-21’)的长期孵育传代(最长89天)培养物能诱发肺炎,从实验感染猪的肺或肺门淋巴结能再分离到相同的支原体,从而确定其为猪喘气病病原体。     

新型隐球菌L型生物学性状的研究

本文制备了新型隐球菌L型高渗培养基。新型隐球菌L型的特征为:革兰氏染色性改变;大小不一;能通过孔径0.8μm的滤器;电镜检查细胞壁有不同程度的缺损。在高渗液体培养基中,新型隐球菌L型缓慢生长、不易回复;在高渗平板上则易回复。稳定、不稳定隐球菌L型的生化反映与其酵母型相似,但稳定L型的同化能力及尿素分解能力减弱。新型隐球菌形成L型后,其形态、培养特性及生化反映发生变异,这在菌种鉴定与临床检验时要注意。     

红色毛癣菌临床分离株的菌落形态和镜下结构特征再分析

目的探讨红色毛癣菌的菌落形态和镜下结构特征以及与感染部位的相关性。方法采用传统培养方法对192株红色毛癣菌进行表型分型,选取其中39株在28℃、30℃、35℃3种温度孵育6d、10d、14d时观察菌落形态和生长速度。结果192株红色毛癣菌共分离出3种表型：绒毛型、沟纹型、粉末型（或颗粒型）。在相同培养基上,28℃、30℃时菌落生长速度无显著差异（P〈0.05）,均快于35℃（P〈0.05）。在相同温度时,菌落在SDA上的生长速度快于PDA培养基。在28℃、30℃时菌落形态比较稳定,在35℃时变异较大。菌落在PDA培养基上产孢丰富,镜下显示有较多的大、小分生孢子,而在SDA培养基上只有少量的小分生孢子,几乎见不到大分生孢子。各种浅部感染均以绒毛型为主,绒毛型在手足癣中占比例最高,沟纹型在体股癣中所占比例较高,粉末型在甲癣中占的比例较高。结论红色毛癣菌的菌落形态与培养基和培养温度有关,其表型和镜下结构与感染部位均有一定的相关性。     

五倍子内生菌的分离与鉴定

目的分离五倍子内生菌,并进行筛选和鉴定。方法分别采用牛肉膏蛋白胨固体、液体培养基,高氏1号培养基,马丁孟加拉红培养基外加4‰的国产硫酸庆大霉素(800万单位)四种培养基对五倍子内生菌进行分离。结果得到5株菌株,经菌落形态显微观察与16S rDNA序列分析鉴定,5株菌株均为革兰阳性菌;A1、A5和B1为杆菌,同属芽胞杆菌属;A3为球菌,微球菌属;A6为球菌,葡萄球菌属;A5与B1同源性最高,达到100%。结论从五倍子中分离得到5株内生细菌,将有利于五倍子的深入开发利用。     

乳酸菌固体制剂计数方法研究

从培养基、稀释剂的角度对乳酸菌固体制剂样品进行计数方法比较。昂立1号○R优菌多颗粒样品中嗜酸乳杆菌在改良MC培养基上培养(72±3)h后菌落形态非常小,很难进行计数,在改良MC培养基中添加0.1%吐温80将会刺激嗜酸乳杆菌的生长,利于计数;采用MRS液体溶解复水10~15 m in、0.1%蛋白胨盐水稀释的计数结果明显高于直接采用生理盐水复水、稀释方法,两者差异有非常显著性。     

培养基成分对口腔福赛类杆菌生长影响的研究

目的比较不同培养基成分对福赛类杆菌ATCC43037生长的影响,寻找一种有效促进福赛类杆菌生长的培养基.方法将福赛类杆菌ATCC430 37 接种到5种不同培养基(包括琼脂板和液体培养基)中,在厌氧培养箱内37℃厌氧培养7 d,观察平板上菌落生长情况,在λ=550 nm处每24 h测定液体培养菌液A值.细菌通过革兰染色和PCR法鉴定.结果1.生长在血平板上的福赛类杆菌ATCC43037菌落形态呈粉红色或白色小斑点状,在以BHI 为基础培养基中添加氯化血红素、维生素K3、N-乙酰胞壁酸的No2血琼脂培养基生长最好,而在无氯化血红素、维生素K3及血的No4琼脂板上不生长.2.福赛类杆菌ATCC43037在以TSB 为基础培养基中添加酵母提取物、植物蛋白胨、氯化血红素、维生素K3、N-乙酰胞壁酸和D TT的No1液体培养基生长最好,培养7 d后A值＞0.8,在缺乏N-乙酰胞壁酸的No5液体培养基中几乎不生长.3.菌落细菌革兰染色为G 梭状杆菌,PCR法鉴定为福赛类杆菌.结论福赛类杆菌在血平板和液体培养基中存在不同的生长特性,N-乙酰胞壁酸是福赛类杆菌在液体培养基中生长最重要的成分,DTT有益于细菌生长.     

名词解释

菌落在固体培养基上,一个单细胞(孢子)经过一定时间培养后,在一局限的地方繁殖成为肉眼可见的细胞群体,称为菌落。因之,可用菌落数来代表活菌(孢子)的数目。不同成分的培养基上,菌落呈现的特征不同;不同的菌在相同成分的培养基上,菌落呈现的特征也各不相同;又由于各种菌在固定的培养基上菌     

莲子草假隔链格孢SF 193固体发酵培养基的筛选及其对空心莲子草的控制效果

【背景】空心莲子草是一种源于南美洲且正在我国不断传播的外来入侵植物。莲子草假隔链格孢是空心莲子草的强致病菌,能引起空心莲子草茎叶发病,抑制空心莲子草生长。【方法】选择以麦麸、大米、玉米芯粉、玉米粉、稻秸秆粉为基料,棉籽壳、稻秕壳和大豆粉为辅料,按照一定质量比配制固体培养基,筛选适合莲子草假隔链格孢SF-193大量生产的有效组分;同时研究培养基含水量和6种金属离子对SF-193菌落生长的影响。【结果】在以大米和大豆粉质量比为3:1和5:1的培养基上SF-193菌落面积最大,其次为大米和棉籽壳质量比为5:1的培养基。在含水量为20%和30%的培养基上SF-193菌落面积显著大于其他培养基。Mg2+和Mn2+对SF-193菌落生长影响较小,Zn2+对SF-193菌落生长具有显著的抑制作用,而SF-193菌落在含Cu2+和Fe3+的培养基上不能生长。田间控草试验表明,固体发酵生产的菌粉对空心莲子草的致病性显著高于液体菌,用量为50g.m-2时,10d后空心莲子草的病情指数达86.1。【结论与意义】利用固体培养基发酵生产的莲子草假隔链格孢对空心莲子草的防除效果显著优于液体发酵。因此,莲子草假隔链格孢SF-193固体发酵菌粉可能在生物防治空心莲子草方面具有重要作用。     

采用低pH值和适量的玉米素、ABA配合恢复褐化的水稻愈伤组织

在建立水稻体细胞悬浮培养体系的实验中,我们观察到当将胚性愈伤组织从固体培养基转入液体分化培养基进行悬浮培养并去掉2.4-D 时,随着培养时间的延长,愈伤组织往往出现褐化现象。与这种情况类似的是,当将悬浮培养的愈伤组织和成熟胚状体转入固体培养基时,也出现严重的褐化现象。这种褐化现象一般认为是不可逆的,伴随着胚性愈伤组织和成熟胚状体的褐化,胚性愈伤组织逐渐丧失分化能力,成熟胚状体则逐渐死亡。     

类胡萝卜素产生菌种的鉴定

于福建红酒酒糟中分离、筛选得到1株编号为B-5的产色素菌株。对该菌株所产色素进行定性分析,结果表明该色素为类胡萝卜素;对菌株进行常规形态和生理生化特性分析,结果表明该菌株为单细胞,呈卵圆形,芽殖;在固体培养基上,菌落呈深红色,菌落表面湿润、粘稠,边缘整齐,易被挑起;在液体培养基中,产生沉淀。无子囊孢子;无假菌丝形成。葡萄糖发酵试验为阴性,硝酸钾试验为阳性,耐高渗试验为阴性,产类淀粉化合物为阴性,37℃生长为阳性。利用26S rDNA D1/D2区域序列分析法对该菌株进行序列比对鉴定,结果表明,该酵母菌的序列与粘性红圆酵母（Rhodotorula mucilaginosa）模式菌株的序列同源性100%,结合该菌株常规形态和生理生化特性,鉴定该菌株为粘性红圆酵母（Rhodotorula mucilaginosa）。     

肺炎支原体液体培养法检测的实验评价

目的比较液体培养法和固体培养法平行检测肺炎支原体结果的一致性;评价液体培养法检测肺炎支原体的可靠性。方法采用液体培养基和固体琼脂培养基平行检测1 648份临床标本的肺炎支原体,比较同一份标本在2种培养基上的检测结果。结果液体培养法阳性296例,阳性率为18%;固体培养法阳性244例,阳性率为14.8%;液体培养法阳性而固体培养法阴性57例;固体培养阳性而液体培养法为阴性5例。2种方法的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺炎支原体快速液体培养法与固体培养有较好的一致性,具有方便、简单、准确且可以用于早期检测等优点,适合临床大批量标本筛查。需结合患者临床症状等排除真菌和耐药菌造成的假阳性。     

食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项

1菌落总数及测定菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数就是指食品检样经过处理     

覆盖液体培养基促进发芽

为了减少微繁殖葡萄（Ｖｉｔｉｓｓｐ．’Ｖａｌｉａｎｔ’）和苹果（Ｍａｌｕｓｐｕｍｉｌａ）所用的时间和劳力,美国克罗拉多州立大学的Ｍ．Ａｌｉ—Ａｈｍａｄ、Ｈ．Ｇ．Ｈｕｇｈｅｓ及其同事比较了将最初培养在固态增殖培养基上的微繁殖体转移到新鲜的固体培养基中和向原来的固体培养基上加入一层液体培养分别获得的微繁殖体。作者报道,加入液体培养基减少了葡萄和苹果培养幼苗基部愈伤组织的形成。同转移到新鲜培养基中相比,覆盖液体培养基的葡萄培养物,微繁殖幼苗增加６７％,苗长增加７３％并且鲜重增加１２５％。覆盖液体培养基…     

三叶橡胶(Hevea brasiliensis)愈伤组织和液体悬浮培养细胞的生长、组织解剖以及形态发育潜力

利用三叶橡胶(Hevea brasiliensis)幼苗的茎作外植体业已分化出愈伤组织培养物,并通过在30℃下用每升含有2毫克2,4-D与0.5毫克激动素的MS培养基进行连续再培养能使它得到长期保存。新分化出的愈伤组织培养物能自然地分化了根。但是,在连续再培养过程则丧失了这种特性,且培养物变得具有异质性(即包含着具有繁殖能力颜色很淡的部位和无繁殖能力颜色较深而紧密的部位)。连续繁殖多次的培养物继续分化了同根部乳管相类似的含有颗粒物质的少数而零散的乳管。这种愈伤组织(O愈伤组织)移植到振荡液体培养基并不能产生具有生长能力的悬浮细胞。但是,经在液体培养基两次移植培养而得到恢复的大细胞团,再移到固体培养基培养即产生非常疏松、色淡、生长迅速的同质性愈伤组织(R愈伤组织),这种愈伤组织在再培养过程中仍然保持它特有的特征。将R愈伤组织再移植培养到振荡液体培养基便产生生长很迅速的细胞悬浮培养液,它可以用同样培养基在3℃下连续地繁殖,像一般愈伤组织培养的作法那样。O与R培养物都需要2,4-D,但两者对浓度的反应有差异。它们在连续繁殖过程中都保持二倍特性;而连续繁殖的细胞悬浮液则含有一定比例的多倍细胞。当细胞悬浮培养液不经再培养而保存几个月之后形成的大细胞团便可成胚状结构。促使这些胚状结构进一步发育成小苗的许多尝试尚未获得成功。     

猪血培养双歧杆菌的初步报告

有关猪血培养肠道菌、化脓球菌、原虫等 ,早在 5 0年代我们已做过报导 ,但利用猪血培养厌氧双歧杆菌 (Bifidobac-terium )尚未见报导。近年来 ,我们研究生产双歧杆菌口服液 ,用猪血做原料已取得良好的效果 ,现介绍如下 :其方法同一般培养基制造 ,根据需要既可做固体培养基也可做成液体培养基 ,因双歧杆菌属于厌氧杆菌 ,故在制作时勿忘加上一半胱氨酸。结果 :经过适当时间培养 ,在液体培养基内 ,双歧杆菌的形态典型 ,有的呈棒状 ,分叉状 ,哑铃状 ,Y、V字型等而且菌体肥大 ,如新培养的菌体内可见 3～ 5个粒状浓染物。另在液体培养基内生长数…     

木霉纤维素酶的诱导形成及其调节 Ⅳ.高产变异株纤维素酶合成调节的变化——酶活提高原因的初步分析

拟康氏木霉纤维素酶高产变异株EA_3-867和N_2-78在合成培养基琼脂平板和马铃薯葡萄糖琼脂平板上菌落明显缩小,生长变慢。但在蛋白胨酵母膏琼脂平板上,小菌落恢复成大菌落,生长速度同野生型菌株一致。EA_3-867和N_2-78在不同液体培养基中纤维素酶活力均显著高于野生型菌株1096和木_3。洗涤菌丝体的诱导测定也证明高产变异株的纤维素酶诱导活性有明显的提高。变异株和野生型菌株洗涤菌丝体诱导形成的纤维素酶组分,从聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱判断,未见明显差异,仅变异株中代表纤维素酶活性的蛋白带显著加深。高产变异株纤维素酶产量的增加是由于菌株对诱导剂敏感性的增加和对降解物阻遏敏感性的减弱。     

表达重组别藻蓝蛋白质粒在工程菌株中的遗传稳定性研究*

将含有表达重组别藻蓝蛋白基因的重组质粒pMal-2X的工程菌株P1分别在含有Amp的LB固体培养基上采用划线法连续传代至100代,其生长速度(在LB培养基中)、菌落形态和抗生素抗性等方面与原始种子库无明显差异;取第10,20,50,100代提取质粒DNA经EcoRⅠ限制性内切酶酶切检查,酶切图谱没有改变。DNA测序未见apc基因变异。原代菌株与传代第10,20,50和100代菌株经诱导培养,其rAPC表达水平、菌体蛋白的SDS-PAGE图谱及重组蛋白的免疫原性均无明显差异。以上结果表明,重组质粒pMal-     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究*

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生速度极快,涂布平板３ｄ后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在ＰＧＰＭ再生培养基上再生率为０．９７～２．０％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养１～２ｄ,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达７７．６％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为１。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生程度极快,涂布平板3d后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在PGPM再生培养基上再生率为0．97－2．0％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养1－2d,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达77．6％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为1。