光周期对四眼斑水龟繁殖影响

为探讨光周期对四眼斑水龟(Sacalia quadriocellata)繁殖的影响,于2008年10月至2009年9月对其进行光周期实验.将39只成体分成短光照组、长光照组和对照组,每个组别中样本量均为7♀、66.每月用超声波技术对雌性个体进行卵泡数量、大小的检测,并用X光投射法确定硬壳卵数;每半月对雄性进行录像观察.结果表明:三个实验组卵泡数量和卵泡大小表现出明显的周期性,原始卵泡从8月份开始生长发育,卵泡数量在11月份最多,尺寸在12月份也达到最大值;光周期对雌性卵泡数量和卵泡大小的发育有影响,短光照组检测到的总卵泡数高于长光照组和对照组,其中短光照组卵泡数与对照组卵泡数差异显著(P＜0.05),长光照组卵泡尺寸相对于另外2个实验组显著变小(P＜0.01);光周期对雌性产卵数和雄性发情强度无影响(P＞0.05).光周期对四眼斑水龟雌雄个体性腺发育的作用不同,缩短光照对雌性繁殖有促进作用,延长光照对雄性发情强度在特定阶段具有一定促进作用.     

四眼斑水龟之谜

头背面两对环中套环、色彩绚丽的斑纹,像四只直直盯着你的眼睛,这是一种奇妙的龟,而它本身甚至羞涩得从不让人家看见它进食,就是这样的龟,生活在海南……     

四眼斑水龟雌性生殖器官组织结构的季节变化

应用石蜡常规切片,HE染色,分别在3月（春季）、8月（夏季）、10月（秋季）、1月（冬季）,对24只四眼斑水龟雌性生殖器官组织结构变化进行研究,结果表明：四眼斑水龟雌性生殖器官的形态和结构存在季节性的变化,8月卵泡开始发育,卵巢增重,子宫腺增多;10月卵巢增重达最大,卵泡发育成熟开始排卵,随后形成黄体,进入排卵期。翌年的1～3月卵巢重量减轻,输卵管管腔增大,腺体增多,子宫肌层不断增厚,进入产卵期。     

四眼斑水龟在海南岛的地理分布调查

采用查阅文献、走访调查和野外调查三种方法相结合,对四眼斑水龟在海南岛的地理分布进行了调查。对18个市县的103个乡镇进行了走访调查;野外调查中采用系统抽样法和笼捕法,对黎母山、尖峰岭、霸王岭、南茂岭、万俄岭和文教河上游6个研究点进行了调查。结果表明：1）四眼斑水龟分布于海南岛中部和西南部山区以及丘陵地区,除了海口、文昌、临高、定安和澄迈5个市县没有分布外,其它13个市县均有分布,其中8个市县为本次调查的分布新记录;2）四眼斑水龟栖息于海拔170～640m的山区溪流环境,而在平原、台地、滩涂地区以及比较大的江河、水库和湖泊沿右分布。     

四眼斑水龟个体大小和体形的两性异形

研究龟鳖的两性异形对理解形态适应具有重要意义。通过测量41只(21♀,20♂)成体四眼斑水龟(Sacalia quadriocellata)的20个形态特征指标,研究四眼斑水龟个体大小和体形的两性异形。结果表明:除头长、头宽、尾长和尾长肛前段长外,四眼斑水龟其他的形态特征均与背甲长呈正相关。雌性的背甲长、腹甲长、腹甲中线长、腹甲曲线长显著大于雄性;雄性的头长、头宽、后肢长、尾长和尾长肛前段长显著大于雌性;雌雄两性的体重、体周长、前肢长、腹甲宽、肛盾切口长、肛盾切口宽以及除背甲长外的所有背甲形态特征指标均无显著差异。研究结果表明,四眼斑水龟存在个体大小和体形两性异形。     

海南岛黎母山四眼斑水龟对春季生境的选择性

2004年3—4月,在海南岛黎母山采用系统抽样法对四眼斑水龟春季生境选择进行了初步研究。在海拔170～1170m设196个研究样点,共1392个笼捕日。其中在海拔170～470m的26个布笼点共捕获四眼斑水龟36只,而在海拔470～1170m未捕获到四眼斑水龟。采用Kruskal Wallis检验,对海拔500m以下四眼斑水龟利用样地(n=26)和海拔500m以上的对照样地(n=26)的生态因子差异显著性进行检验。结果表明,两类样地的海拔、植被类型、植被盖度、落叶厚度、土壤类型、坡度、水面宽、水深、水面流速、基底类型、露石率、食物丰度、干扰距离13个生态因子差异均显著,仅石洞数目差异不显著。说明海拔500m以上和以下的环境差异较大。主成分分析结果表明,影响四眼斑水龟生境选择的主要生态因子依次为海拔、干扰距离、植被盖度、土壤类型、水深和落叶厚度。而植被类型、食物丰度、露石率、基底、石洞数目、坡度、水面宽和水面流速8个生态因子的影响不明显。保护好近河岸植被和提高当地群众对龟类的保护意识对四眼斑水龟的保护十分重要。     

海南岛黎母山四眼斑水龟种群密度与空间分布格局

2004年3～7月,采用系统抽样法在海南岛黎母山对四眼斑水龟（Sacalia quadriocellata）种群密度与空间分布进行了调查,采用Cassie指数、David＆Moore指数、Morisita指数和Lloyd指数测定了四眼斑水龟种群空间分布格局。结果表明,（1）四眼斑水龟种群分布于海拔170～470m范围内,在垂直梯度上呈现不连续的分布状态;（2）在海拔170～470m范围内种群相对密度为0．011～0．050只／笼捕日;（3）种群空间分布呈现聚集分布格局;（4）资源的空间分布特点和人为干扰可能对四眼斑水龟种群密度及空间分布格局有重要影响。     

四眼斑水龟低温胁迫条件下体重与形态特征的初步研究

在海南的正常温度下,四眼斑水龟(Sacalia quadriocellata)在人工饲养环境中无冬眠现象,也未观察到繁殖行为。为研究冬眠对四眼斑水龟繁殖的影响,于2004年12月~2005年2月对其进行低温胁迫实验。选取29只成体四眼斑水龟分成2组,实验组9♀5♂共14只进行低温处理,在8·46±1·61℃干燥环境中保持32天;对照组10♀5♂共15只在正常条件下饲养。结果表明:低温胁迫后,实验组平均体重减小8·68±2·45%,雌雄差异不显著;雄性个体背甲宽从8·55±0·26cm减小到8·46±0·22cm,差异显著(P<0·05);雌性个体背甲长从12·97±0·80cm减小到12·94±0·81cm,差异显著(P<0·05);雌雄四眼斑水龟甲壳表面积相对低温胁迫前均减小;对照组龟养殖于常温下,甲壳无显著变化,两组龟体重变化量差异极显著(P<0·01)。影响失重率主要因素是胁迫时间,环境温度对失重呈显著线性正相关(r=0·811,P<0·05);形态特征的变化可能与繁殖机制、代谢有关。     

四眼斑水龟血浆生殖激素季节性变化

为了进一步探讨四眼斑水龟(Sacalia quadriocellata)的繁殖生理周期和生殖激素分泌特征,使用放射免疫分析测定法(RIA)分别测定了8月(夏季)、10月(秋季)、1月(冬季)、3月(春季)四眼斑水龟血浆中卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(IJH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)五种生殖激素的含量.结果显示,四眼斑水龟生殖激素分泌呈现较明显的周期性,激素水平与环境温度的变化有关;雄性T含量夏季开始升高,秋季达到高峰,与精子的发生和成熟同步;雌性T水平升高促进其接受雄性爬胯,且作为雌激素合成的前体物质,间接作用于雌激素的合成;排卵会出现LH峰,E2含量排卵前几个月开始增长,刺激肝生成卵黄;排卵期间P含量较高,可能在排卵过程中发挥作用.     

外来物种红耳龟的卵泡发育研究

2011年10月至2012年9月期间,于海南岛万泉河琼海段的沙洲岛开展外来物种红耳龟野外繁殖生态研究。通过笼捕等方法获得54个红耳龟样本,所有样本采用超声波技术检测其卵泡数量和大小。结果显示红耳龟的卵泡在9月开始生长发育,次年6月达到最大(16.6 mm±3.9 mm,n=39),随后逐渐减小,各月卵泡直径平均值大于9.0 mm(6.0³3.7 mm,n=426);卵泡数量于1月开始增加,3月份达到最多(45±4,n=4),随后逐渐减少。推测研究区域内的红耳龟年繁殖频次为2.48窝/年。     

四眼斑龟的泄殖系统解剖

对8只成体四眼斑龟(Sacalia quadriocllata)的泄殖系统进行解剖,结果表明：同一个体的左右肾的体积和重量无明显差异;膀胱呈Y型,体积小;左右各有一个副膀胱作为呼吸辅助器官。同一个体的左、右侧性腺大小和重量存在显著差异;在繁殖季节性腺有一定的变化,交配期精巢的重量可增加2倍;产卵期卵巢的卵球数增加。     

四眼斑龟消化、呼吸系统的解剖

解剖测量了 8只成年四眼斑龟的消化系统和呼吸系统 ,结果表明 :消化管总长 ( 6 0 4 3± 99.2 )mm ,为背甲长的 3 75～ 5 77倍。舌不能伸缩 ;食管扩展性强 ;胃呈囊状 ,被肝叶覆盖 ;小肠较长 ,为消化的主要场所 ,约占消化道总长的 4 8% ;盲肠不发达。肝较大 ,重约 ( 14 12± 8 2 4 )g ,分左、中、右三叶 ,占体重的 6 %左右 ,绿色胆囊位于右叶小肝内 ;胰腺长条形 ,分布于十二指肠肠系膜内。肺长囊形 ,内壁有复杂的间隔 ,把内腔分隔成蜂窝状小室 ,紧贴在背甲的内表面 ,位于肩带和腰带之间 ;气管较长 ,由 6 5～ 85个软骨环连接而成 ;支气管较短 ,由 30～ 4 0个软骨环连接而成     

四眼斑龟的血细胞形态及血液检验分析

研究了四眼斑龟(Sacaliaquadriocellata)的血细胞形态学特征,对不同季节四眼斑龟血细胞数量和形态大小进行分析,结果表明,在繁殖期红细胞数为(4650±564)×1010L,是非繁殖期(2324±216)×1010L的两倍(P<001,n=8);白细胞数为(243±036)×1010L,与非繁殖期的没有显著差异。血细胞形态随季节而变化,温度升高,血细胞体积增大,且凝血时间缩短。     

Comparative cytochemistry of the developing ovarian follicles of the dog,rabbit, and mouse: Origin of the zona pellucida

The reactivity of the glycoproteins of ovarian follicles of the dog, rabbit, and mouse were compared, using the Alcian blue (pH 0.5) and Alcian yellow (pH 2.5) technique at the light-microscope level and the periodic acid-chromic acid-silver methenamine technique at the electron-microscope level. In paraffin sections, the rabbit and mouse show the appearance of both zona pellucida and follicular fluid in the earliest growing follicles. In the dog, there is a sequence of development with the follicular fluid appearing late, after much of the zona has been secreted. The zona and follicular fluid are highly sulfated in all animals. Zonae pellucidae of atresia appear to lose all traces of sulfation and become highly acidic. At the electronmicroscope level, oocytes contain little if any reactive glycoprotein material which can be related to zona pellucida formation. The initial appearance of the zona material occurs between follicle cell membranes extending outwards and away from the oocyte. Follicle cells of all species consistently contain a variety of reactive Golgi bodies and granules, with exocytotic vesicles, suggesting active synthesis and secretion of zona material. Our observations suggest that in the early stages of oogenesis, the follicular epithelium is responsible for at least part of the synthesis of the zona pellucida. It is possible therefore that both the oocyte and its follicle cells participate, probably on the sequential basis, in the synthesis of the mammalian zona pellucida.     

绍鸭卵巢卵泡发育相关新EST的分离与表达

采用银染mRNA差异显示方法从绍鸭卵巢等级卵泡中分离并筛选到 3个差异表达序列标签 (ExpressedSequenceTags ,ESTs)SXDF0 2 0 1(2 71bp)、SXDF0 2 0 2 (2 0 0bp)和SXDF0 2 0 3(173bp) ,通过测序和BLAST检索 ,发现SXDF0 2 0 1与GenBank中登录的所有物种的所有序列均无同源性 ,是在绍鸭卵巢卵泡发现的新EST ,现已登录GenBank(GenBank登录号 :CB0 72 6 2 9) ,而SXDF0 2 0 2和SXDF0 2 0 3则分别与GenBank公布的鸡的EST和肌胃肌球蛋白重链高度同源。用 5′ RACE将SXDF0 2 0 1延伸至 5 4 4bp ,经过BLAST再次检索 ,仍然未发现中度同源序列采用相对定量RT PCR方法进一步研究SXDF0 2 0 1和SXDF0 2 0 2在绍鸭组织中的时空特异性表达 ,发现这两个EST在产蛋高峰期绍兴鸭的下丘脑、垂体、肌肉、肝脏、脂肪等组织都有表达 ;SXDF0 2 0 1在 30日龄卵巢的表达水平显著高于 6 0 (P <0 0 5 )和 90 (P =0 0 15 )日龄 ;而SXDF0 2 0 2在卵巢发育的不同阶段的表达水平没有变化 ;SXDF0 2 0 1在卵巢卵泡颗粒层中的表达总体高于膜层 ,SXDF0 2 0 2在颗粒层中的表达F3 >F5>Fw(P <0 0 1) ,而在F1卵泡降至最低 (P <0 0 1) ,膜层中以Fw 卵泡表达水平最高 (P <0 0 1)。