脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效及对门静脉血流动力学的影响

目的:观察脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效及对门静脉血流动力学的影响。方法:选取30例失代偿期肝硬化患者,用负收集法分离提取脐带血干细胞,经股动脉穿刺插管,从肝固有动脉缓慢注入。同时选择20例失代偿期肝硬化患者,分别于治疗前,治疗后1周、1个月、3个月、6个月观察肝功能、凝血指标、AFP、CT肝脏容积、门静脉血流动力学等指标。结果:干细胞治疗组与对照组同期比较:白蛋白治疗后4、12、24周明显改善,PT治疗后12、24周降低;AFP治疗后4、12、24周升高;两组患者治疗前后门静脉血流动力学参数变化差异无统计学意义;肝脏体积治疗组与对照组同期比较,肝脏体积有增大趋势但差异无统计学意义;治疗组1例第10周确诊为原发性肝细胞癌,与对照组比较差异无统计学意义。结论:脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化可以改善肝脏的合成功能,促进肝组织再生,有新生血管重建情况发生,未发现门静脉血流动力参数的改变。     

局部晚期鼻咽癌患者外周血VEGF检测及意义

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelium growth factor,VEGF)在局部晚期鼻咽癌患者外周血中的表达相,探讨VEGF与局部晚期鼻咽癌预后的关系,研究是否能预测局部晚期鼻咽癌患者的预后,或作为局部鼻咽癌治疗的靶分子,为寻找局部晚期鼻咽癌放化疗疗效的分子生物学评价指标提供依据。方法:选择57例局部晚期鼻咽癌患者,收集外周血标本,酶联免疫吸附实验(enzym-linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中VEGF蛋白水平。结合临床病理特征和随访资料进行分析。结果:(1)局部晚期鼻咽癌患者外周血VEGF表达水平均与复发率、远处转移率有关(P0.05)。(2)局部晚期鼻咽癌患者外周血VEGF的表达水平与性别和年龄无关(P0.05)。(3)局部晚期鼻咽癌患者外周血VEGF的表达水平与生存率有关(P0.05)。结论:局部晚期鼻咽癌患者外周血中VEGF的表达水平对复发率、远处转移率和生存率有影响,提示VEGF在局部晚期鼻咽癌的侵袭转移中可能起协同作用;VEGF检测对筛选较高鼻咽癌转移风险的患者可能有更大的临床价值。     

甲2巨球蛋白制剂对正常人外周血淋巴细胞周期的影响

采用外周血淋巴细胞姐妹染色单体差别法(SCE)检测技术,研究甲_2巨球蛋白制剂α_2M对人外周血淋巴细胞周期的影响,在人外周血淋巴细胞培养中加入α_2M制剂浓度在≤0.5mg/ml培养液时,第一次细胞周期(M_1)、第二次细胞周期(M_2)、第三次细胞周期(M_3)、细胞增殖速度指数(PRI)改变不大。在加入的α_2M制剂浓度(?)1.0 mg/ml培养液时,M_1百分数增加(r=0.977,P<0.001)、M_2百分数也随α_2M浓度递增而增高(r=0.956,P<0.001)而M_3百分数则随α_2M浓度递增而减少(r=-0.979,P<0.001)、细胞增殖速度指数则随α_2M浓度递增而减少(r=-0.983,P<0.01),表明在人外周血淋巴细胞离体培养时,当每毫升培养液中α_2M浓度等于或大于1mg时,细胞分裂周期延缓。讨论了它的意义和可能作用的环节。     

LIM蛋白KyoT2与人类紧密连接蛋白2的相互作用

KyoT是一种LIM结构域蛋白,是以RBP－J为诱饵蛋白通过酵母双杂交系统得到的新分子,KyoT2可以抑制RBP－J介导的转录,以KyoT2为诱饵蛋白,通过酵母双杂交筛选得到了人类紧密连接蛋白2（ZO－2）,的一种新的剪接体ZO－2－i3,序列分析表明,新的剪接体有19个外显子,与已发表序列比较,见ZO－2－i3分子的激酶后区发生了改变,为排除酵母双杂交实验的假阳性,实验首先在酵母中验证KyoT2与ZO－2-i3的体外直接相互作用并得到阳性结果,进而在大肠杆菌中原核表达纯化带有His标签的KyoT2蛋白,使用抗His标签的抗体,通过GST pull-down assay验证KyoT2与ZO－2－i3的体外直接相互作用,也获得阳性结果,并通过酵母实验初步确定了其作用位点,即KyoT2通过LIM2结构域与ZO－2-i3相互作用,本实验验证了KyoT2与Z－2－i3的相互作用,并初步确定其相互作用位点,对探讨KyoT的功能具有重要意义。     

β-联蛋白促进大鼠外周血间充质干细胞存活及扩增

本研究旨在探讨β-联蛋白在促进外周血间充质干细胞（PBMSCs）的存活和扩增中的作用。采取SD大鼠外周血,分离培养得到PBMSCs,随机将细胞分3组：未处理组（CON）、β-联蛋白激动剂组（WAY-262611,WAY)和β-联蛋白抑制剂组（XAV-939,XAV）。体外培养90 d,观察各组细胞增生和凋亡情况。应用Western 印迹和ELISA方法观察细胞衰老标记性蛋白质p16和p21表达情况,以及β-联蛋白信号通路分子表达情况。外周血经过3代培养,可获得纯度较高的PBMSCs,体外培养40 d即发生衰老和凋亡,但WAY-262611可延长细胞存活时间至90 d以上,增加其体外增殖率1.08倍（P<0.05）,明显提高细胞增殖能力（P<0.05）;使WAY组p21和p16蛋白含量较CON组减少72.1%和68.4%（两者均P<0.05）,较XAV组减低92.9%和93.3%（两者均P<0.05）。与CON组比较,WAY组衰老细胞数减少61.4%（P<0.05）,而XAV组则增加53.3%（P<0.05）;WAY组细胞凋亡率减少50.2%（P<0.05）,而XAV组细胞凋亡率增加35.7%（P<0.05）;WAY组β-联蛋白表达水平增加2.2倍（P<0.05）,而XAV组则降低77.7%（P<0.05）。WAY-262611可升高WAY组β-联蛋白磷酸化水平（包括p-Ser552 和p-Ser675）97%和79%（两者均P<0.05）,升高抗凋亡蛋白质Bcl2表达水平1.39倍（P<0.05）,降低凋亡蛋白Bax和胱天蛋白酶3表达67.6%和83.3%（两者均P<0.05）;而XAV-939则降低Bcl2蛋白表达水平69.1%（P<0.05）,升高Bax和胱天蛋白酶3表达水平1.27倍和1.02倍（两者均P<0.05）。β-联蛋白可能是影响MSCs存活和增殖的重要信号途径。这些发现可能有助于提高用于组织工程的PB-MSCs的体外生产。     

上呼吸道病毒感染患者外周血中白介素-Ⅱ活性的检测

考察了上呼吸道病毒感染患者和正常人外周血白介素 Ⅱ (IL 2 )活性的变化情况。应用噻唑蓝比色法检测外周血IL 2的活性。结果显示 ,实验组 (4 9例 )IL 2的活性为 31.3± 0 .5 4 ,对照组 (4 2例 )的IL 2的活性为 6 4 .4± 0 .16。上呼吸道病毒感染患者外周血中的IL 2与正常人比较活性降低 ,存在显著性差异(P <0 .0 1)。     

脐血干细胞移植治疗缺血性心脏病的临床疗效及安全性分析

目的:探讨脐血干细胞移植治疗缺血性心脏病(IHD)的临床效果和安全性。方法:选择2011年1月至2013年1月在我院接受治疗的IHD患者130例。随机分为观察组和对照组,各65例。其中对照组应用常规药物治疗,观察组应用脐血干细胞移植方法进行治疗。观察对比两组患者治疗前以及治疗后3个月的左室舒张末容量(LVEDV)、右室舒张末容量(RVEDV)、左室射血分数(LVEF)及治疗后临床疗效及生活质量改善状况。结果:观察组治疗后显效率和总有效率为49.23%,90.77%,显著高于对照组的30.77%,70.77%,差异均有统计学意义(均P0.05)。两组在治疗前LVEDV、RVEDV以及LVEF比较无差异。在治疗后观察组这三个指标得到明显改善,其中LVEDV和RVEDV减小、LVEF提高均较对照组显著,差异均有统计学意义(均P0.05)。观察组在治疗后身体功能、运动限制和总体健康评分均高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:应用脐血干细胞移植治疗IHD效果好,能显著改善心功能,提高生活质量,安全性高,值得临床使用。     

人脐血干细胞对兔后肢动脉球囊损伤后内膜增殖和内皮功能的影响

目的探讨人脐血干细胞(HUCBSC)移植对兔后肢动脉球囊损伤后动脉局部内膜增殖和内皮功能的影响。方法新西兰大白兔24只,随机分为正常对照组(A组,8只)、球囊损伤组(B组,8只)及球囊损伤加干细胞移植组(C组,8只)。三组均于全麻下分离兔右侧股动脉;B、C两组均应用3 mm×40 mm球囊扩张股动脉,每次3 min,共3次,并牵拉球囊,形成局部内膜损伤;C组球囊扩张后,以2.5×105的HUCBSC数移植到损伤血管局部,A、B组注入等量的磷酸盐缓冲液(PBS)。术前和术后28 d采用放射免疫法和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定血浆内皮素-1(ET-1)及血清一氧化氮(NO)水平,并取股动脉采用苏木素-伊红染色(H-E)测定血管内膜面积及内膜面积与中膜面积比值。采用方差分析和配对t检验进行统计分析。结果术后28 d,B组和C组均可见损伤血管内弹力膜多处断裂,有不同程度的内膜增生,C组内膜面积[(0.231±0.033)mm2]及内膜面积与中膜面积比值(0.967±0.193)明显低于B组[(0.589±0.038)mm2,2.365±0.376;t=19.632,P<0.01,t=9.405,P<0.01],但明显高于A组(正常对照组)。术后28 d,A、B、C三组静脉血浆ET-1水平分别为(79.91±7.36)ng/L,(131.51±12.88)ng/L,(103.98±11.13)ng/L,B组明显高于A组(t=8.014,P<0.01),C组也明显高于A组(t=4.329,P<0.01),但明显低于B组(t=4.634,P<0.01)。静脉血清NO水平分别为(120.33±9.02)μmol/L,(48.01±6.20)μmol/L,(102.76±9.73)μmol/L,B组明显低于A组(t=18.914,P<0.01),C组也明显低于A组(t=3.901,P<0.01),但明显高于B组(t=14.083,P<0.01)。结论 HUCBSC血管局部移植可抑制兔后肢动脉球囊损伤后受损血管新生内膜的增殖,促进损伤血管内皮功能的恢复。     

C2H2型锌指蛋白对成体干细胞分化的调控作用

识别和监测干细胞更新和分化的影响要素对制定和实施相关疾病再生疗法至关重要。成体干细胞分化过程中存在许多调控因子,其中锌指蛋白家族的调控作用近年来受到了较多的关注,特别是C2H2型锌指蛋白。C2H2型锌指蛋白是锌指蛋白家族中成员最多的一类转录因子,在转录和翻译水平上调控基因的表达参与多种生物学活动。本文重点概述了各类结构域的C2H2型锌指蛋白通过不同信号通路及调控机制对成体干细胞分化的作用,以期为该家族新成员的功能探索及干细胞治疗技术提供新思路和见解。     

FL对脐血造血细胞长期液体培养的影响

用脐血进行干细胞移植有许多优点,但有一个主要的缺点是可获得的细胞数量有限,因此脐血干细胞的体外扩增对于其临床应用具有重要意义。考察了Ｆｌｔ－３配体（ＦＬ）和干细胞因子（ＳＣＦ）,白介素３（ＩＬ－３）,ＩＬ－６,粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）,粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的组合对脐血细胞扩增和分化的影响,培养４２ｄ,总细胞最多扩增了３８５．３０±１６３．５１倍（ＦＬ＋ＳＣＦ＋Ｇ－ＣＳ     

Regulation of human umbilical cord blood-derived multi-potent stem cells by autogenic osteoclast-based niche-like structure

Stem cell niches provide the micro-environment for the development of stem cells. Under our culturing regimen, a kind of osteoclast-centralized structure supports the proliferation of MSCs, derived from human cord blood, once they reside on osteoclasts. MSCs in this structure expressed Oct4 which is a marker of embryonic stem cells. Floating daughter cells of MSCs colony showed abilities to differentiate into osteocyte, adipocyte, and neuronal progenitor cells. Compared with the easy senescence of MSCs without this niche-like structure in vitro, these results suggested that osteoclasts might play an important role the development and maintenance of Umbilical cord blood (UCB)-derived MSCs and might provide a means to expand UCB-MSCs in vitro, more easily, through a stem cell niche-like structure.     

脐带血干细胞移植治疗非恶性血液病进展

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是治愈多种非恶性病的有效方法。脐带血干细胞（UCB）具有免疫原性低、人类白细胞抗原不合耐受性好、移植物抗宿主反应发生率低以及获取相对快捷等特点,可作为非恶性血液疾病患者allo-HSCT的来源。本文简要综述脐血干细胞移植在原发性免疫缺陷病、遗传性骨髓衰竭、遗传代谢病以及自身免疫性疾病等非恶性血液疾病的治疗效果。     

亲缘供者外周血红细胞参数对造血干细胞采集影响的经验分析

目的探讨亲缘供者外周血红细胞参数对COBE Spectra血细胞分离机的自动外周血干细胞采集程序（AutoPBSC程序）与单个核细胞采集程序（MNC程序）的影响及经验分析。 方法选取河北燕达陆道培医院2019年6月至2021年2月小红细胞亲缘供者31例45次采集为小红细胞组,选取同期非小红细胞亲缘供者51例60次采集为非小红细胞组,分别应用AutoPBSC程序和MNC程序,比较两组采集情况及采集产品相关指标。采用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验分析2组计量资料的差异。 结果与小红细胞AutoPBSC程序组比较,小红细胞MNC程序组血小板（PLT）降低率[（25.88±15.83）﹪比（36.64±10.22）﹪]、采集效率[32.65﹪（23.60﹪,73.82﹪）比63.74﹪ （59.83﹪,68.55﹪）]、采集物体积[（158.83±34.39）比（222.91±63.9）mL]、MNC总数[（218.04±117.57）×10⁸/L比（350.24±127.64）×10⁸/L]、CD34⁺细胞总数[113.83×10⁶/L （79.25×10⁶/L,154.10×10⁶/L）比233.26×10⁶/L （177.18×10⁶/L,392.51×10⁶/L）]、MNC计数[（4.04±2.61）×10⁸/kg比（5.54±2.22）×10⁸/ kg]、CD34⁺计数[1.84×10⁶/kg （1.16×10⁶/kg,4.41×10⁶/kg）比3.64×10⁶/kg （2.49×10⁶/kg,6.37×10⁶/kg）]均升高,差异有统计学意义（P < 0.05）;与非小红细胞AutoPBSC程序组比较,非小红细胞组MNC程序组采集物体积[（162.83±51.74）比（242.56±43.25）mL]升高,差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论对造血干细胞移植供者红细胞体积偏小时,应用MNC程序采集外周血造血干细胞,比应用AutoPBSC程序更有优势。     

脐带血移植的应用进展及脐带血库建设

脐带血(umbilical cord blood)作为公认的造血干细胞重要来源之一,已经被广泛地用于治疗儿童和成人的良恶性血液系统疾病以及中枢神经系统疾病、实体瘤、缺血性下肢血管病和组织再生等。相对于骨髓移植和外周血来源的造血干细胞移植,脐带血移植(UCBT)在细胞收集使用、干细胞增殖能力以及移植物抗宿主反应等方面都具有明显的优势。目前的数据显示,因为HLA配型等原因而无法进行骨髓移植的患者应该尽早进行UCBT。此外,UCBT的增多促进了脐带血库的快速建设。本文针对UCBT和脐带血库的最新进展进行了综述。     

Human umbilical cord blood cells improve cardiac function after myocardial infarction

Human umbilical cord blood (UCB) contains an abundance of immature stem/progenitor cells and has been clinically used as an alternative to bone marrow transplantation. In addition, cord blood can be obtained non-invasively, in contrast to invasive bone marrow aspiration. We investigated the potential of human UCB CD34(+) cells to improve cardiac function following myocardial infarction. Myocardial infarction was induced in Wistar rats by ligation of the left coronary artery. Either 2x10(5) human UCB CD34(+) cells or equivalent cell-free medium was injected into the injured myocardium of the rats following induction of myocardial infarction. CD34(+) cell transplantation significantly improved ventricular function as compared to the control group. Immunofluorescence staining for human CD34, CD45, and PECAM-1 revealed surviving cells in the myocardium. Our findings suggest that transplanted human cells survived and improved cardiac function following myocardial infarction. These results may show the usefulness of UCB CD34(+) cells for myocardial infarction.     

脐血干细胞与创面修复

脐血干细胞是一类具有多向分化潜能的原始祖细胞,具备自我更新和增殖的能力,在特定条件诱导下可以分化为不同细胞,逐渐作为临床组织工程的来源细胞。近年来随着对脐血干细胞的不断研究,发现其在创面修复中具有明显的优势,成为创面临床治疗的一条新途径。本文从脐血干细胞的生物学特性、采集与冻存、体外扩增等方面对创面修复的研究进行综述。     

脐血干细胞与创面修复

脐血干细胞是一类具有多向分化潜能的原始祖细胞,具备自我更新和增殖的能力,在特定条件诱导下可以分化为不同细胞,逐渐作为临床组织工程的来源细胞。近年来随着对脐血干细胞的不断研究,发现其在创面修复中具有明显的优势,成为创面临床治疗的一条新途径。本文从脐血干细胞的生物学特性、采集与冻存、体外扩增等方面对创面修复的研究进行综述。     

影响脐带血采集质量的相关性因素分析

目的回顾性分析影响脐带血采集质量的母婴因素和采集处理因素。 方法记录389份脐带血的采集量、母亲年龄、孕龄、新生儿体重、分娩方式、新生儿性别、胎次及脐带血采集至计数间隔以及采集方式。用KX-21型全自动血液分析仪进行细胞计数并计算有核细胞总数（TNC）。采用Pearson相关和Spearman秩相关进行相关性分析,采用t检验、Mann-Whitney U检验、方差分析及Kruskal-Wallis H检验进行分组比较,分析影响脐带血采集量和TNC的相关因素。? 结果脐带血采集量与TNC显著相关（r = 0.723,P < 0.001）,脐带血采集量大于80 ml时的TNC显著高于低体积者。在母婴因素中,母亲年龄与采集量及TNC差异均无统计学意义;孕龄与采集量负相关（r = -0.119,P = 0.019）,而与TNC正相关（r = 0.138,P = 0.007）,足月儿脐带血的TNC显著高于早产儿（P = 0.038）;婴儿出生体重与采集量及TNC均正相关（r = 0.236,P < 0.001;r = 0.275,P < 0.001）,体重较大婴儿脐带血的采集量和TNC均显著高于体重较小者（P?< 0.001）;剖宫产的脐带血采集量虽高于阴道分娩（P < 0.001）,但其TNC不及阴道分娩;男婴与女婴在脐带血采集量和TNC之间无显著差异。在采集处理因素中,脐带血采集至计数的时间间隔与采集量及TNC均无显著相关。 结论为提高脐带血的保存质量,应侧重选择胎儿体重较大、经阴道分娩的产妇作为脐带血供者,实验室应首先处理采集量较大的脐带血。