姜花属种间杂交胚拯救研究

为提高姜花属种间杂交胚挽救中幼胚萌发率,以白姜花×金姜花的胚珠为试材,研究不同胚珠发育时期、不同培养基及低温处理果实对幼胚萌发率的影响.结果表明,白姜花×金姜花胚挽救的适宜培养基是MS+0.1 mg/L BA十0.1 mg/L NAA;接种时期以60 d的幼胚培养效果最佳;低温处理果实3～6 d能有效提高幼胚的萌发率.     

旱地小麦(金沙江一号)×天兰冰草杂种幼胚愈伤组织诱导及植株再生

旱地小麦(金沙江一号)×天兰冰草远缘杂交结实率较高,可达30.5%。但是,由于种子的胚乳发育不良而不能萌发,未获得杂种F_1实生苗,授粉12天后再把幼胚接种于WG附加2,4—D2mg/l、NAA0.5mg、K70.1mg/l培养基中,30—60%的幼胚诱导出愈伤组织。愈伤组织转入WG附加NAA0.5mg/l、KT0.5mg/l、Ad100mg/l、CH500mg/l的分化培养基后逐渐分化出丛生绿苗。这些绿苗经分根培养后移栽成活。正交和反交的杂种F_1再生植株形态呈中间类型,并且都表现了自交不孕等杂种特性。实验还比较了正交和反交的结实率及幼胚培养的愈伤组织诱导率,讨论了细胞质因子对杂种F_1幼胚再生能力的影响。     

小麦远缘杂交幼胚无性系的建立及植株分化能力的长期保持

在小麦远缘杂交中,获得有较高分化能力的杂种幼胚无性系,对研究胚状体的发生发育及细胞系分化能力长期保持的方法都有着十分重要的意义。本研究以普通小麦、缺4D 小麦作母本,簇毛麦、滨麦、山羊草作父本,人工杂交17个组合的幼胚为外植体,在 MS 培养基上进行愈伤组织诱导、继代和分化培养。获得了高频率分化能力的杂种幼胚无性系8个,并能使其继代培养5—6年后,仍能保持较高的分化能力,对胚状体的发生和发育进行了组织切片和扫描电镜观察。     

应用胚挽救技术获得三倍体柑橘植株

以3个柑橘异源四倍体体细胞杂种(即四倍体粗柠檬与哈姆林甜橙体细胞杂种,简称"HR";酸柚与粗柠檬体细胞杂种,简称"SR";墨西哥来檬与伏令夏甜橙体细胞杂种,简称"KV")为父本,分别与二倍体单胚性沙田柚进行有性杂交,在有性胚还没有完全败育以前,通过胚抢救技术进行三倍体植株培养(以四季柚花粉亲本为对照)。结果表明,处理的杂交组合直接成苗率极显著低于对照(P0.01),其中又以沙田柚×HR组合成苗率相对较高,达10.1%;较适合瘪籽沙田柚幼胚离体培养的培养基是MT+GA31.0mg/L+蜂皇浆200mg/L+水解乳蛋白250mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.7%;流式细胞分析仪检测结果显示,本试验成功获得了柑橘三倍体植株。     

百合胚的组织培养和快速繁殖技术

本试验以百合幼胚作为外植体,进行离体胚培养,观察胚的萌发和生长情况,筛选出适合百合种胚萌发、继代、生根的培养基。结果表明,最适合百合离体胚萌发及生长的培养基为MS+BA0.1mg/L+NAA 0.01mg/L;最适合增殖的继代培养基为MS+NAA0.01mg/L+BA0.25mg/L;在培养基1/2MS+NAA0.05mg/L中,绝大部分的幼苗均可正常生根,对移栽后的成活株数进行了调查,移栽成活率可达到90%以上。     

风信子品种间杂交与幼胚离体培养研究

选用5个风信子品种进行花粉生命力测定,对完全双列杂交获得的杂种种子剥胚进行离体培养.试验表明:(1)风信子不同品种花粉萌发率差别较大,其中Fondante的花粉萌发率最高为74.45%,Amsterdam的最低为12.68%,其他3个品种的花粉萌发率介于二者之间.(2)品种间自交杂交亲和力存在一定差异,结实率大于30%的组合从高到低依次为Fondante×Atlantic(61.2%)、Fondante×Fondante(54.0%)、Carnegie×Carnegie(42.6%)、JanBos×JanBos(36.0%)、Carnegie×Atlantic(32.7%)、Atlantic×Fondante(30.0%),组合Atlantic×Amster-dam、Carnegie×JanBos、Amsterdam×Fondante、Amsterdam×JanBos、JanBos×Amsterdam未得到果实,其余组合结实率介于0～30%之间.(3)适宜风信子杂交幼胚离体培养的初代培养基为MS+100 mg/L谷氨酰胺,其次为MS+0.2 mg/LIBA+0.02 mg/L6-BA+100 mg/L谷氨酰胺...     

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。     

百合杂种系间杂交障碍的克服及3种幼胚离体培养方法的比较研究

分别以麝香百合(Longiflorum,L)'White Fox'、亚洲百合(Asiatic,A)'Conneticut King'、东方百合(Oriental,O)'Sorbonne'及喇叭百合(Trumpet,T)'Royal Goden'为亲本,用切割柱头法进行杂交,采用离体培养技术对杂种幼胚进行抢救,并运用基因组原位杂交技术对所得杂种进行鉴定.结果显示,在所选的6个杂交组合中,切割柱头授粉能不同程度地克服除LL×TT之外的5个杂交组合的受精前障碍;胚、胚乳及胚珠3种外植体的离体培养萌发率分别为100%、21.5%和1%,所得植株占所得杂种的比例分别为9.6%、89.9%和0.5%;基因组原位杂交分析显示,所获植株均为真杂种.结果证明,胚、胚乳及胚珠培养是从幼胚获得百合杂种植株的高效途径,且能有效防止伪杂种混杂,胚乳培养是获得百合杂种一代的主要方式.     

花生种间杂种的胚胎营救和植株再生

1　植物名称　花生种间杂种 (Ａｒａｃｈｉｓｈｙ ｐｏｇａｅａ×Ａ .ｃａｒｄｅｎａｓｉｉ)。2　材料类别　取杂交授粉后 30ｄ的幼果 ,自来水冲刷去泥土 ,洗净。以 70 %乙醇浸泡 1ｍｉｎ后在无菌条件下剥离出胚珠。胚珠再以70 %乙醇表面灭菌 1ｍｉｎ ,0 .1 %ＨｇＣｌ2 处理 5ｍｉｎ ,灭菌水洗涤 5次 ,然后进行胚珠和幼胚培养。成苗后切取带腋芽茎段作外植体。3　培养条件　 (1 )胚珠生长培养基 :ＭＳ ＫＴ0 .2ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) 5 %蔗糖 ;(2 )诱导幼胚萌发培养基 :ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 .0 ＢＡ 0 .5 ;(3)腋芽扩繁培养基 :ＭＳ ＢＡ 4…     

菊属种间杂交胚拯救过程成苗途径的初步研究

对菊属不同种植物进行远缘杂交与胚拯救,研究幼胚发育途径。结果表明：影响胚发育途径的关键因素是基因型、胚龄与激素。杂交父母本基因型差异小,合适的胚龄均有利于子房直接萌发及子房先形成愈伤组织而后萌发成苗;培养基中添加KT 2.0 mg.L-1+IAA 2.0 mg.L-1 有利于子房直接萌发成苗, BA 2.0 mg.L-1+NAA 2.0 mg.L-1 有利于先形成愈伤而后萌发成苗。     

丁香（Syringa L.）种间杂交幼胚离体培养研究

采用幼胚离体培养方法克服幼胚败育从而直接获得杂种实生苗,对影响丁香幼胚培养成功的各种因子作了较系统的研究。结果表明,丁香幼胚培养的最适培养基为Monnier;最佳糖浓度为50g·L^-1;幼胚在50-60d胚龄时培养最容易成功;加入适量的椰乳、谷氮酰胺或谷氨酸及活性炭可以促进幼胚的萌发和生长。低浓度（0.01mg·L^-1）BA的加入可以提高幼胚的萌发率;NAA浓度以0.01mg·L^-1为最佳。     

以根为外植体建立大蒜的组织培养体系

以国内4个大蒜栽培品种为材料,建立了以根为外植体的再生体系。将蒜瓣去皮后灭菌消毒,萌发后选取苗龄为5~7 d的无菌苗的根接种到含不同激素配比的培养基中进行愈伤组织诱导,发现MS+2,4-D 1 mg/L+2ip 0.1 mg/L组合愈伤诱导效率最高,平均为56.06%;愈伤组织经过2~3次继代培养,选取胚性愈伤组织置于不同分化培养基上进行培养,2~3个月后可见小芽产生,分化培养基为MS+KT 1 mg/L时,植株再生效率最高,平均达到35.01 %。本研究建立了一种以根为外植体的高效的大蒜愈伤诱导和再生体系,为大蒜遗传转化体系的建立打下良好基础。     

珍珠菠萝组织培养与快速繁殖（简报）

以珍珠菠萝茎段为外植体,酒精和升汞消毒后接种在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上进行不定芽诱导;在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L进行增殖培养;生长培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.2%.培养基中加入3%白砂糖和0.6%卡拉胶,可进行工厂化繁殖.     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发

探讨不同因素对白刺花下胚轴、子叶2种外植体胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生和萌发的影响。以B5和MS为基本培养基,研究2,4-D、6-BA和TDZ对白刺花下胚轴和子叶胚性愈伤组织的诱导;在MS培养基上添加不同浓度2,4-D,研究胚性愈伤组织增殖情况;采用ABA,探究对体细胞胚发生的影响。结果表明:下胚轴比子叶更易诱导胚性愈伤组织,筛选出2种外植最佳的胚性愈伤组织诱导培养基均为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L 6-BA,胚性愈伤组织诱导率分别为77.3%和41.0%。15.0 mg/L ABA、0.2 mg/L 2,4-D和2.0 mg/L 6-BA有利于体细胞胚发生,1/3MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+2.0 g/L活性炭+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基可使体细胞胚萌发率达80%以上,再生植株移栽成活率高达90%。白刺花外植体种类及培养基类型均会影响胚性愈伤组织的诱导,其中下胚轴诱导效果优于子叶;MS培养基较适合启动细胞脱分化形成愈伤组织,2,4-D对胚性愈伤组织的增殖保持有调控作用,ABA有利于体细胞胚的发生。     

人工合成冬性六倍体小麦的研究

以冬性四倍体硬粒小麦(Triticum durum,2n=28,AABB)为母本与粗山羊草(Aegilops tauschii,2n=14,DD)杂交,得到的单倍体幼胚(n=21,ABD)经组织培养拯救,获得的幼苗经染色体加倍而成为合成小麦(AABBDD)。从中鉴定、筛选出冬性的合成小麦。幼胚仅在1/2 MS培养基上培养,成苗率为75.81%;根据幼胚的发育状态,将发育较完善的幼胚直接接种在1/2 MS培养基上,将发育不良的幼胚先接种于1/2 MS+2 mg/L 2,4-D培养基上进一步养育幼胚,之后视幼胚发育状况再将其转入1/2 MS培养基中培养成苗,此方法的成苗率为92.44%,较前者的成苗率提高了16.63%。染色体加倍在冬季塑膜拱棚内用0.05%秋水仙素进行半根法处理,较容易获得健壮苗,并且分蘖多。     

石蒜与萱草远缘杂交育种研究

目的：为培育石蒜属植物新品种（系）提供参考依据。方法：以石蒜属（Lycoris）、朱顶红属（Hippeastrum）、萱草属（Hemerocallis）植物为试材，采用花粉离体培养、田间杂交、胚拯救等方法，研究了石蒜属植物在远缘杂交过程中的生殖隔离。结果：1、在花粉活力测定中，所得最适宜朱顶红花粉萌发的培养基组成为：70 g/L蔗糖+5 mg/L硼酸+0.01 g/L氯化钙+50 g/LPEG-4000；萱草组花粉的最适培养基组成为：100 g/L蔗糖+0.3 mg/L硼酸+0.4 mg/L氯化钙。2、以石蒜属植物作母本，设计8个杂交组合试验，结果表明子房膨大率随杂交组合的不同而呈现差异性，其中与四倍体萱草杂交组合所得平均子房膨大率为59.81%，高于二倍体萱草组（33.12%）。3、胚拯救初期，各组合获得胚珠0～44个，其中鹿葱×萱草‘金娃娃’组合最多，中国石蒜×萱草‘金娃娃’组合最少。胚珠膨大率随杂交组合的不同出现差异，7个杂交组合的胚珠均发生膨大，膨大率在1.79%～96.15%之间。其中鹿葱×’Custard Candy’组合胚珠膨大率较高（96.15%），稻草石蒜×’Cust...     

枇杷属野生植物种胚离体培养和植株再生研究

以枇杷属Eriobotrya植物11个野生种、1个远缘杂交后代材料为试材,采用胚为外植体,在不同植物生长调节剂配比培养条件下,进行胚离体培养和植株再生研究。结果表明,胚培养的最佳培养基配方为MS + 6-BA 1.0 mg·L-1 + KT 1.0 mg·L-1 + NAA 0.1 mg·L-1。在此培养基中,所有试验材料均获得成功,其中栎叶枇杷E. prinoides的萌发率和丛芽率均达100%,有效地建立了枇杷属野生种的胚离体培养及其植株再生体系。     

南高丛蓝莓‘奥尼尔'工厂化组培快繁技术研究

为了建立南高丛蓝莓‘奥尼尔’工厂化组培快繁技术体系,该文以带腋芽的茎段为外植体,研究外植体灭菌、丛生芽诱导、丛生芽增殖培养、瓶内生根以及移栽驯化。结果表明：（1）外植体最佳灭菌方法为10%NaClO处理15 min,污染率降低至14.44%,诱导率达49.38%;同样添加1.5 mg·L^-1ZT,以WPM为基础培养基诱导出的丛生芽明显多于MS。（2）丛生芽增殖的最佳培养基为WPM+NAA 0.1 mg·L^-1 +ZT 1.5 mg·L^-1 ,接种60 d后增殖系数达8.6,长势良好;瓶内生根的最佳处理方式为先用500 mg·L^-1 IBA浸蘸20 s,然后接种于WPM+IBA 0.2 mg·L^-1的生根培养基中,培养90 d后,生根率、有效生根率、生根数量和根长分别达到96.3%、96.3%、12.7条和43.3 mm,且根系较发达、粗壮。（3）生根苗在移栽基质Ⅰ（河沙∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1）的移栽成活率最高,达92.22%。以上说明,外植体经10%NaClO处理15 mi...     

糖、GA3及ABA对印度娃儿藤（Tylophora indica (Burm. F.) Merrill）体细胞胚发生的影响

从印度娃儿藤节间外植体获取愈伤组织,分析了糖、赤霉素（GA₃）及脱落酸（ABA）对愈伤组织形成体细胞的影响。实验证明,含4 μmol/L 2, 4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D）的MS培养基是获得具有成胚功能的愈伤组织的最佳培养基。在含有6 μmol/L激动素（Kn）的MS培养基上,高达69%的愈伤组织分化为体细胞胚,平均单位外植体（每克愈伤组织）产胚25个。在6 μmol/L Kn存在的条件下,分析了蔗糖、葡糖糖对胚产生的影响,不同的糖及不同糖浓度对体细胞胚的发生影响很大。6 μmol/L Kn 与200 mmol/L 蔗糖处理胚胎发生率最大（71%）,单位外植体生成49个胚。然而葡萄糖与Kn、或者葡糖糖、蔗糖与Kn三者加在一起则降低成胚率及产胚数。一定浓度的GA₃ 和 ABA能促进体细胞胚的产生。在含200 mmol/L蔗糖的培养基中加10 μmol/L GA₃胚的生成率为98%,单位外植体产胚51个。在含200 mmol/L蔗糖的培养基中加2 μmol/L ABA能显著增加体细胞胚的量,该培养基上每外植体平均生成44个胚,产率为95％。本研究显示,含200 mmol/L蔗糖的培养基中分别加入6 μmol/L Kn、10 μmol/L GA₃ 或者 2 μmol/L ABA能显著提高印度娃儿藤体细胞胚发生率,而单独的葡萄糖或葡糖糖和蔗糖则有抑制作用。得到的胚均能正常发育并分化为植株。     

以水稻雄性不育系为母本不经幼胚培养获得Oryza sativa×O.officinalis杂种的研究

利用亚洲栽培稻(Oryza sativa L.)的核质互作型和光敏感型雄性不育系为母本,药用野生稻(O.officinalis Wall)为父本进行杂交,首次在未经幼胚培养的条件下得到了杂种种子。杂种F_1生长优势强,分蘖力和发根力等超过双亲,并具有父本的植株散生、高位分蘖、小穗具芒、穗分枝散生、落粒性和感光性强等特性。其酯酶同工酶谱中含有双亲的全部酶带。花粉母细胞中染色体数为2n=24,在减数分裂中期Ⅰ。基本上全部为单价体。杂种自交不孕。本研究结果表明,利用雄性不育系进行异源种间的远缘杂交具有简化杂交过程以便大量配组、增加异源遗传物质导入机会和杂种可靠、便于鉴定等优点。本研究不但对探讨水稻远缘杂交的新途径有一定意义,而且为雄性不育系的利用展开了新的视野。