肉毒毒素及其在国内外临床上的应用

1989年12月美国食品药品管理局(FDA)批准注射用A型肉毒毒素(BOTOX)作为新药上市,是世界上第1个用于临床的微生物毒素.此后,英国(Dysport)、中国(衡力,BTXA)同类产品相继问世,成为当今国际三大知名品牌.昔日闻而生畏的毒素,今日变为治病良药,既是观念上的突破和更新,也开创了微生物毒素用于临床治疗的先河.     

精氨酸修饰成纤维细胞生长因子21及修饰后蛋白体内稳定性和糖代谢调节作用的研究

成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor21,FGF21)是2000年发现的一个不依赖胰岛素调节血糖的细胞因子,有望成为治疗糖尿病的候选药物.但是,野生型FGF21由于半衰期较短,在体内不稳定,从而影响其成药性.为提高FGF21的稳定性,本实验在FGF21的C端添加了2个精氨酸(arginine,Arg),命名为FGF21-2A,用Compute pI/Mw软件计算之后,等电点(isoelectric point,pI)从5.43上升到5.84,随后进行了蛋白质的表达、分离纯化、体内稳定性及糖代谢调节作用的研究.诱导表达后菌液的SDS-PAGE图经BandScan5.0分析后显示FGF21-2A的表达量相对于野生型FGF21提高了10.6%.家兔体内半衰期检测实验结果显示FGF21-2A的半衰期显著延长.GOD-POD法检测HepG2肝癌细胞葡萄糖吸收实验、糖尿病小鼠降血糖实验和肝糖原检测实验的结果证明,FGF21-2A的降糖效果得到了增强,并且持续时间相对于野生型FGF21显著延长.Real-time PCR结果发现,长期注射FGF21-2A显著提高了糖尿病小鼠肝脏内葡萄糖转运蛋白(GLUT)1和葡萄糖激酶(GK)mRNA的表达量,降低了葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)的mRNA表达量,表明FGF21-2A调节糖代谢的机制与野生型FGF21一致.综上所述,精氨酸修饰的FGF21其蛋白质稳定性提高,进而增加了对血糖的调控效果,有望成为新型糖尿病药物.     

pET3c-FGF2K18S/S69C突变体的构建及表达条件优化

构建和表达人FGF2K18S/S69C 突变体,并筛选最佳的表达条件.对GenBank数据库FGF2序列进行分析后,发现了位于第18位和第69位的氨基酸定向突变之后,能够增加FGF2稳定性.基因合成FGF2K18S/S69C突变体,与载体pET3c连接后转化至大肠杆菌BL21中,用乳糖诱导,以蛋白质表达量为指标,考察诱...     

从默克的FGF18看FGF产业化

<正>资料显示,著名世界制药公司默克(Merck)的重组人FGF18已经进入临床研究阶段,主要用于成人关节软骨损伤。FGF18是一个由207个氨基酸组成的高度保守蛋白,在结构上,FGF18和FGF8、FGF17相似,为同一亚家族成员,具有70%～80%的氨基酸序列同源性。FGF18是一种骨骼的周期调节剂,有研究进一步证实,如果缺少FGF18,在成骨过程中会出现颅骨骨     

成纤维细胞生长因子在骨修复中的作用和应用

成纤维细胞生长因子 ( FGF)是一类与肝素有高亲和性的多聚肽 ,最初根据它能刺激成纤维细胞再生而命名。现已发现有 1 8个成员 ,即 FGF1- FGF18。目前研究得最多的是 FGF1和 FGF2 。根据它们等电点 ( PI)的不同 ,FGF1又称为酸性成纤维细胞生长因子 ( a FGF,PI为 5 .6) ,FGF2 又称为碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF,PI为 9.6) ,它们均通过自分泌和 /或旁分泌途径在组织修复中发挥重要作用。成纤维细胞生长因子受体 ( FGFR)属于免疫球蛋白超家族成员 ,目前已确定了 4种由独立基因编码的人 FGFR。它们是一种跨膜蛋白质 ,分为细…     

饲养层FGF2表达量对猕猴胚胎干细胞自我更新及多能性的影响

用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2 RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作任何处理的对照组(f5).5组MESF的FGF2表达量相对值为f1:f2:f3:f4:f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化.用这砦细胞作为饲养层长期培养(10代)猕猴胚胎干细胞(RhESC),结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的RhESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达下调.5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),说明RhESC的多能性没有受到影响,但表达量有差异,f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达.结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基凶的表达,还对RhESC的自我更新有一定的作用.     

aFGF对人脐静脉内皮细胞TPK、PKC活性及Ca2+浓度的影响

为了观察酸性成纤维细胞生长因子 ( acidic fibroblast growth factor,a FGF)与人脐静脉内皮细胞 ( human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径 ,探讨 a FGF导致细胞增殖的机理 ,经 Scatchard曲线分析人脐静脉内皮细胞膜受体性质 .以不同浓度的 a FGF处理人脐静脉内皮细胞 ,利用 [γ- 3 2 P]ATP参入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶 ( tyrosine protein kinase,TPK)及蛋白激酶 C( protein kinase C,PKC)的活性 ;用 Fura-2 /AM为荧光指示剂测定 [Ca2 ]i.结果显示 :Scatchard曲线证明 a FGF与 HUVEC膜受体特异结合呈一条曲线 ,即受体为一种结合位点 ,Kd 为 3.6× 1 0 -10～ 9.6× 1 0 -10 mol/L,每个细胞受体数为2 70 90 .随着 a FGF浓度增加 ,TPK及 PKC活性随之升高 .当 a FGF浓度为 1 .1 2 mg/L时 ,a FGF处理组的 TPK活性是对照组的 3倍 ;膜 PKC活性是对照组 3.4倍 ,胞浆 PKC活性是对照组的 1 .87倍 .胞浆 [Ca2 ]是对照组的 3倍 .结果指出 :该细胞中 a FGF受体具有 TPK活性 .TPK激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化级联反应 ,而使 PKC活性及 [Ca2 ]i 升高 ,即 PKC和 Ca2 为 TPK的下游信号分子 ,进一步促进基因表达增加 ,导致细胞增殖 .     

FGF21类似物治疗动脉粥样硬化机制研究进展

动脉粥样硬化是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要诱因,近年来发病率越来越高,严重威胁着人类生命健康。脂质代谢障碍是动脉粥样硬化的病理基础。成纤维细胞生长因子21(FGF21)是FGF家族的一种内分泌因子,它能够增加葡萄糖的摄取,调节脂质代谢,并使代谢活跃的器官（如肝脏和脂肪组织）中胰岛素反应敏感。FGF21水平与动脉粥样硬化的发生率和严重程度密切相关。然而,FGF21原型在血浆的半衰期短、体外易聚集,严重限制了其临床应用。近年来,对FGF21类似物的研究取得了突破性进展。综述了FGF21的生理作用,并讨论了基于FGF21类似物治疗动脉粥样硬化的主要突破和局限性,为FGF21蛋白类新药的开发提供了理论依据。     

aFGF对人脐静脉内皮细胞TPK、PKC活性及Ca~(2+)浓度的影响

为了观察酸性成纤维细胞生长因子 ( acidic fibroblast growth factor,a FGF)与人脐静脉内皮细胞 ( human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径 ,探讨 a FGF导致细胞增殖的机理 ,经 Scatchard曲线分析人脐静脉内皮细胞膜受体性质 .以不同浓度的 a FGF处理人脐静脉内皮细胞 ,利用 [γ- 3 2 P]ATP参入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶 ( tyrosine protein kinase,TPK)及蛋白激酶 C( protein kinase C,PKC)的活性 ;用 Fura-2 /AM为荧光指示剂测定 [Ca2 + ]i.结果显示 :Scatchard曲线证明 a FGF与 HUVEC膜受体特异结合呈一条曲线 ,即受体为一种结合位点 ,Kd 为 3.6× 1 0 -10～ 9.6× 1 0 -10 mol/L,每个细胞受体数为2 70 90 .随着 a FGF浓度增加 ,TPK及 PKC活性随之升高 .当 a FGF浓度为 1 .1 2 mg/L时 ,a FGF处理组的 TPK活性是对照组的 3倍 ;膜 PKC活性是对照组 3.4倍 ,胞浆 PKC活性是对照组的 1 .87倍 .胞浆 [Ca2 + ]是对照组的 3倍 .结果指出 :该细胞中 a FGF受体具有 TPK活性 .TPK激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化级联反应 ,而使 PKC活性及 [Ca2 + ]i 升高 ,即 PKC和 Ca2 + 为 TPK的下游信号分子 ,进一步促进基因表达增加 ,导致细胞增殖 .     

褪黑素对绒山羊皮肤FGF5等绒毛生长相关基因的影响

目的:旨在分析埋植褪黑素后对绒山羊皮肤绒毛生长相关基因表达的影响,进而探讨褪黑素促绒毛生长的机理。方法:以内蒙古白绒山羊为研究对象,选取体况相近的4月龄母羔羊10只,按试验要求随机分为2组,处理组按照2mg/kg BW(体重)的剂量每两个月耳后皮下埋植褪黑素,对照组不埋植,试验时间为1年。实验开始后每月采集绒山羊体侧皮肤和毛样,利用荧光定量PCR技术检测9个绒毛生长相关基因的表达变化。结果:(1)埋植褪黑素后各个基因的平均表达水平都有所上调,其中显著上调FGF5(P<0.0001),而对β-catenin、MSX-2、Wnt10b、BMP2、BMPRIB、NTRK3、Delta1、hairless等无显著影响(P>0.05);(2)埋植褪黑素明显提高了FGF5与hairless的相关性,并且使FGF5与β-catenin、NTRK3的相关性由负相关变成正相关,与Wnt10b的相关性降低,FGF5与其余4个基因的相关性变化不大。结论:结果提示,褪黑素上调绒山羊皮肤FGF的表达,影响FGF5与hairless、β-catenin、NTRK3之间的相关性;山羊中FGF5基因对被毛表型的作用与其他动物不同;褪黑素对复杂组织和单个细胞的作用不同;MAPK信号通路是受褪黑素影响最大的一个信号途径。推测褪黑素可能通过调节绒山羊皮肤中RORα来发挥作用,影响FGF5与hairless、β-catenin、NTRK3和Wnt10b等的相关性,同时抑制MSX2和BMP2的功能,进而促进绒毛的生长。     

血管内皮细胞通过诱导ERG表达促进前列腺癌耐药

目的:探讨血管内皮细胞对前列腺癌细胞耐药能力的影响,并进一步研究血管内皮细胞作用于前列腺癌细胞的可能的分子机制。方法:1.利用Transwell小室构建共培养体系,通过CCK-8和Annexin V-FITC/PI检测细胞耐药的能力并通过蛋白印迹法(WB)检测凋亡相关分子的表达;2.利用聚合酶链式反应(PCR)及WB检测共培养后前列腺癌细胞中成红细胞病毒E26致癌物(ERG)的表达情况;利用酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选出共培养组与非共培养组细胞上清之间有差异的细胞因子,并通过WB检测各个细胞因子与ERG的关系,确定影响ERG表达最明显的细胞因子。结果:1.前列腺癌细胞与血管内皮细胞共培养后,前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性增加,细胞凋亡减少;2.共培养后前列腺癌细胞ERG的表达增高;血管内皮细胞分泌的成纤维细胞生长因子2(FGF2)在共培养后有明显增加,FGF2可以促进前列腺癌ERG的表达,并且这种病效应会被FGF2的抑制剂所逆转。结论:血管内皮细胞分泌的FGF2可促进前列腺癌细胞ERG的表达,促进前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性。     

成纤维细胞生长因子的结构与功能研究进展

成纤维细胞生长因子(FGF)是一种重要的多肽生长因子,它可分为酸性(aFGF)和碱性(bFGF)两类.这两类 FGF 在结构与功能的许多方面相似而又有所不同,特别是在肝素结合力以及肝素依赖性上的差异,引起人们的研究兴趣.文中从 FGF 功能区研究,肝素作用机理和结构特征等方面概述了 FGF 结构与功能关系的研究进展.FGF 结构与功能关系的阐明,不仅有助于揭示生物大分子的活性调节机理,也有助于推动 FGF 临床应用研究的开展.     

血清成纤维细胞生长因子2、21、23与妊娠期糖尿病患者新生儿结局的关系

摘要 目的：探讨血清成纤维细胞生长因子2（FGF2）、成纤维细胞生长因子21（FGF21）、成纤维细胞生长因子23（FGF23）与妊娠期糖尿病（GDM）患者新生儿结局的关系。方法：选取2021年1月～2022年12月期间于我院产检的妊娠24～28周孕妇147例,均进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）,根据OGTT结果分为GDM组（n=86）和非GDM组（n=61）。其中GDM组根据新生儿结局分为不良组（n=21）和良好组（n=65）。对比非GDM组、GDM组的血清FGF2、FGF21、FGF23水平及新生儿结局情况。对比不良组和良好组的血清FGF2、FGF21、FGF23水平。单因素及多因素Logistic回归分析影响GDM患者新生儿结局的影响因素。结果：GDM组的血清FGF2、FGF21、FGF23水平均高于非GDM组（P<0.05）。GDM组的不良新生儿结局总发生率高于非GDM组（P<0.05）。不良组的血清FGF2、FGF21、FGF23水平均高于良好组（P<0.05）。单因素分析显示,GDM患者不良新生儿结局与年龄、孕前体质量指数（BMI）、分娩前BMI、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2hPG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）有关（P<0.05）。多因素分析结果显示,年龄偏高、FPG偏高、孕前BMI偏高、2hPG偏高、分娩前BMI偏高、HOMA-IR偏高、FGF2偏高、FINS偏高、FGF21偏高、FGF23偏高均是GDM患者不良新生儿结局的危险因素（P<0.05）。结论：GDM患者血清FGF2、FGF21、FGF23水平升高,其与年龄、孕前BMI、分娩前BMI、FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR偏高均是导致GDM患者不良新生儿结局的危险因素。     

成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进照

成纤维细胞生长因子(FGF)有许多重要的生理功能,并与肿瘤的形成有关.为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)相互作用的机制,人们对FGF和RGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究,定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区,提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型,在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽类抑制剂,为寻找新一代抗癌药物打下了理论基础.     

日本建成世界最大的人类基因库

《日本经济新闻》2 0 0 4年4月16日报道:日本经济产业省15日宣布,日本建成了世界上最大的人类基因数据库。该库收录了3至4万个人类基因中的约2 .1万个。该库数据精确,将有助于研究人类疾病,开发新药,进行生命科学的基础研究。从16日开始,该数据库将在因特网上无偿公开,与全世界     

川芎嗪、丹参和地塞米松对大鼠肺气肿碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达的影响

采用免疫细胞化学及原位杂交方法观察川芎嗪、丹参和地塞米松对木瓜蛋白酶所致大鼠肺气肿形成中肺组织碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF) m RNA表达和肺泡 型上皮细胞增殖细胞核抗原 (PCNA )表达的影响。 Wistar大鼠随机分为正常对照、肺气肿 7天、 15天、 30天、川芎嗪、丹参和地塞米松治疗组 ,共 7个组。用一次气管内注入木瓜蛋白酶复制大鼠肺气肿模型 ,取肺组织作 b FGF m RNA原位杂交 ,分离肺泡 型上皮细胞作 PCNA免疫组织化学染色 ,用图像分析定量。结果显示注药后第 7天大鼠肺组织 b FGF m RNA表达至高峰 ,第 15天后表达逐渐减少 ,川芎嗪、丹参和地塞米松治疗 30天组 b FGF m RNA表达减少 ,但仍高于正常对照组 (P<0 .0 1)。肺泡 型上皮细胞 PCNA表达与肺组织 b FGFm RNA表达呈正相关 (r=0 .78,P<0 .0 1)。川芎嗪治疗组 PCNA表达明显降低 ,但仍高于正常对照组。结果表明川芎嗪在肺气肿发病过程中有一定治疗作用     

初探糖尿病的致病机制

不同程度的2－型糖尿病患者约占世界人口的5％。这种病的一个显著特征是胰腺b－细胞不能对胰岛素需求的增加做出响应。b－细胞缺陷的分子基础不很清楚,影响了对正确治疗方法的研究。纤维原细胞生长因子FGF信号作用与许多器官的发育有关,其中也包括胰脏。Nature杂志2000年12月6814期第864页报道：Hart等人研究发现,缺失其中一种FGF主导受体的实验鼠会患糖尿病。但是,FGF信号作用是否真的与人类糖尿病有关仍然有待研究,尽管homeobox基因IpfPdx1的突变与老鼠和人类的糖尿病都有关系。FGF受体的表达需要该基因。初探糖尿病的致…     

新药研究国家重点实验室

新药研究国家重点实验室(State Key Laboratory of Drug Research)是中国科学院上海药物研究所利用世界银行<重点学科发展项目>贷款建设的实验室.在利用贷款建设的134个实验室中,经过世界银行专家的考察论证,新药研究国家重点实验室等7个实验室被遴选为示范实验室.实验室从1990年起运行,1995年通过国家验收;1996年在43个生命科学重点实验室的国家评估中名列第14名;2001年在56个生命科学重点实验室的国家评估中进入前6名,成为优秀实验室.     

成纤维细胞生长因子21:参与代谢调节的细胞因子

成纤维细胞生长因子21(FGF21)作为新近发现的内源性调节物质代谢因子,可由人体两大内分泌器官肝脏及骨骼肌分泌,其在调节代谢性疾病方面的生理作用近年来被医学界密切关注.大量研究发现FGF21可增加能量消耗、降低血浆与肝脏甘油三脂及低密度脂蛋白水平;调节葡萄糖代谢,发挥增强脂肪细胞摄取葡萄糖能力、降低血糖及抑制胰高血糖素分泌的作用.在临床2型糖尿病及非酒精性脂肪肝患者血浆中FGF21水平与对照组的显著差异具有统计学意义,且在控制其它因素后,其与病情的预后显著相关.而对于心血管病患者,FGF21可能通过其各项生理作用,拮抗心肌细胞凋亡及增强心肌抗氧化能力,一定程度上延缓心血管疾病的发生发展,但FGF21上述调节代谢相关性疾病的生理作用机制及途径目前尚不完全明确.本文简述FGF21的生物学特性及在代谢性疾病中的研究进展.     

中国房山世界地质公园发展史

中国房山世界地质公园是北京市房山区周口店、石花洞、圣莲山、百花山-白草畔、上方山-云居寺、十渡与河北省涞水县野三坡和涞源县白石山联合组成的地质公园,共有8个园区,其中的周口店园区是"地质公园概念"诞生地.2006年9月18日,在英国北爱尔兰首府贝尔法斯特召开的第2届世界地质公园大会上,批准了"中国房山世界地质公园",在...