苔藓植物DNA提取方法研究

提取高质量的 DNA是对苔藓植物遗传多样性进行研究的基础。该文以苔藓植物为试材 ,用 5种方法 ,即快速提取法、改良 CTAB法、CTAB法、SDS法及高盐法 (第一种为自行设计 ,第二种是对原有方法的改进 )对苔藓植物 DNA提取方法进行了比较研究。结果表明 ,快速提取法和改良 CTAB法是 2种适合于苔藓植物 DNA提取的方法。这 2种方法提取的 DNA浓度和纯度均比较高 ,凝胶电泳显示无明显降解现象 ,适宜作为 PCR扩增的模板 ,并成功地进行了 RAPD扩增。     

梨花柱S-RNase对花粉管超微结构的影响

采用光学显微镜和透射电子显微镜研究了离体条件下不同品种梨花柱S—RNase对异花(亲和)及自花(不亲和)花粉萌发和花粉管生长及其超微结构的影响。结果表明,花柱S—RNase抑制不亲和花粉的萌发和花粉管的生长,对亲和花粉的萌发和花粉管的生长基本没有影响。花粉生长初期,亲和及不亲和花粉管超微结构相似;但培养24h以后,亲和花粉管中充满细胞质和细胞器,而不亲和花粉管中只有靠近花粉管前端有少量细胞质,细胞壁增厚,细胞壁与细胞质之间有一层胼胝质和电子透明区间隔。     

快速提取大葱细胞DNA的方法

经匀浆－差速离心－裂解－纯化等骤,可获得纯度较高的胸质DNA,DNA产率1－2ug/g^-1(FW).此法比传统的方法用材少,对仪器的要求不高,成本低,提取时间短,每人每天提取24个样品,适合大量样品分析。     

供RAPD用高梁模板DNA的提取方法

植物总ＤＮＡ的提取方法一般多采用Ｄｏｙｌｅ等（１９９０年）的ＣＴＡＢ法进行操作。但由于试材不同及操作过程一些细节问题的处理不当，有时结果总是不尽人意，如断裂严重出现弥散及纯度不够等问题。本文以高粱为试材，在多次试验的基础上，摸索出一种适于ＲＡＰＤ用的...     

榉属植物总DNA提取方法研究

榉属植物体内酚类、多糖等次生物质含量较高, 严重影响从中提取总DNA 的产量和质量。针对这一问题探索出一种适合榉属植物总DNA 的提取方法, 并对提取的总DNA 进行了纯度和浓度的鉴定。结果表明此方法可有效去除次生物质对DNA 的干扰, 样品DNA 的质量和纯度较高, 可用于随机引物RAPD 扩增和随后的各种遗传学分析。     

丝状真菌组织DNA的提取

用CTAB法直接从丝状真菌的新鲜菌丝中提取DNA,并将所提取DNA进行随机引物多态性扩增(RAPD),得到了较清晰的扩增图谱,证明该法为提取真菌DNA以用于分子生物学研究的一种有效方法。     

适于RAPD分析的真菌DNA提取方法

报道一种高纯度、高分子量真菌基因组DNA的快速小量提取方法。该法制备的DNA降解少,分子量均在48.5kb以上;纯度高,所有样品的A260/280都在1.7-2.0之间;产率也很高,一般从500mg干菌丝可稳定获得530μg的DNA。所获得的DNA适用于RAPD分析。     

太白红杉3种不同材料总DNA的提取

高质量DNA的获得是进行各项遗传操作的基础,提取DNA的方法、材料因不同的植物而异。我们用改良的CTAB法,对太白红杉的3种不同材料的基因组总DNA进行了提取,均成功获得了适于RAPD分析的总DNA。结果表明,提取太白红杉DNA并对其进行研究,幼苗是较佳材料,愈伤组织也是较好的可试材料,而针叶则相对较差。     

大血藤DNA提取及RAPD研究初探

以浙江天台山大血藤为材料,对其DNA提取和RAPD分子标记方法进行了研究。结果表明:所采用的经改进的SDS提取法可获得高质量的大血藤DNA,分子量大于23kb,可满足RPAD扩增;用15个不同的随机引物对所提取的12个个体的大血藤DNA进行了RAPD分子标记分析,其中14个引物扩增产物具有多态性。建立了大血藤DNA提取和RAPD标记的分析程序,为RAPD分析应用于大血藤遗传多样性研究打下了良好的基础。     

广东野百合DNA提取和RAPD条件的优化

以野百合(Lilium brownii)新鲜叶片、硅胶干燥叶片及鳞片为材料,研究了DNA的提取方法,并对影响随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行了优化。建立了野百合RAPD的优化反应体系及程序,即在20μl反应体系中,含20 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2 、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.3μmol/L随机引物S1519;扩增程序为:94℃预变性5 min,然后94℃30 s,38℃50 s,72℃1 min,35个循环,最后72℃延伸10 min,4℃保存。     

Isolating plant genomic DNA without liquid nitrogen

DNA was isolated from leaves of 10 plant species (Cuminum cyminum, Vigna aconitifolia, Pennisetum typhoides, Tecoma stans, Lycium barbarum, Anogeissus acuminata, Tecomella undulata, Zizyphus mauritiana, Phoenix dactylifera, andEruca sativa) and a fungus (Fusarium oxysporum) using the CTAB method. Three fixing solutions (alcohol, alcohol and chloroform, alcohol and EDTA) were used to produce high molecular weight DNA (>40 kb). DNA quality and quantity was comparable for the 3 fixing solutions and liquid nitrogen grinding. Adding chloroform or EDTA to fixing solutions offered no advantage over absolute alcohol. Isolated DNA was suitable for RAPD analysis, restriction digestion, and cloning. This method does not require liquid nitrogen for fixation, grinding, or storage at −80°C, making it advantagenous over other common protocols.     

DNA提取方法对一串红不同部位DNA提取的比较

本文以一串红的叶片、茎段、花为材料,分别采用高盐低pH法、十二烷基硫酸钠(SDS)法、改良十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法、核DNA法和十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)区室法等5种不同方法对其进行了基因组DNA提取效果的比较分析.结果表明,除用高盐低pH法在一串红花中未提取出DNA外,其它均可提取出DNA,都能进行RAPD扩增.5种方法在一串红DNA提取中,提取效果由高到低依次为:核DNA法、改良CTAB法、SDS法、CTAB区室法、高盐低pH法;3个部位提取结果显示:叶片较容易得到高质量的DNA,茎段次之,花最差.     

应用CTAB法对砂梨品种DNA提取效果的研究

为了获得质量较好的DNA,我们采用CTAB法对11个砂梨品种的叶片DNA提取情况进行了研究,发现参试样品中一些样品的蛋白质含量较多,而另外一些样品的多糖、酚类物质含量较高。对于蛋。白质含量较多的这类材料,适当增加24：1的处理次数能够使蛋白质沉淀下来;对于多糖、酚类物质含量较高的材料,用5mol／L的NaCl和3mol／L的NaAc等处理能够有效的降低多糖含量。另外,对研磨样品的加入量和PVP的加入时间进行了对比,最后用双酶切、电脉检测等不同的分析方法对所得到的DNA提取物的浓度和纯度进行检测,发现加入样品量在0．3g左右、在研磨后的粗提液中加入PVP,所得到的DNA质量较好.     

蔓茎堇菜基因组DNA 3种提取方法的比较研究

以SDS作为解离剂,采用常规SDS法、改进的SDS法及SDS高盐低pH法分离提取蔓茎堇菜基因组DNA.比较3种方法的提取效果,结果表明：常规SDS法DNA得率高但完整性及纯度较差;改进的SDS法DNA质量好但得率相对较低;只有SDS高盐低pH法是最为理想的提取方法,不同组织提取的DNA相对分子质量均大于48 kb,260 nm/280 nm光密度比值在1.7～1.9之间,产率为479.0～543.9μg/g,所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切,并适于进行RAPD分析.     

沙梨8个栽培品种的DNA指纹鉴定

利用RAPD标记技术,对8个沙梨(Pyrus pyrifolia)主栽品种进行RAPD分析。结果显示,从33个10碱基随机引物中筛选出了2个多态性高的引物S2075和S1296,扩增位点分别为11个和10个,以此为基础建立了8个品种的DNA指纹图谱;根据这2个引物中任何一个的扩增图谱均可以将这8个品种区分。研究结果为沙梨品种的区别与鉴定提供了一种有效方法。     

One-step isolation of plant DNA suitable for PCR amplification

We report a one-step extraction technique for the isolation of plant DNA, DNA suitable for amplification by PCR can be produced from leaf material smaller than 0.3 mm² in less than 20 min, with no tube changes. The method was tested on several plant specA00AK020ies. The described method was found to extract DNA that could be amplified without any further purification or treatment. The isolated DNA was amplified using a universal chloroplast primer set. The method was validated by comparing size of PCR products generated by the novel method to PCR products generated using standard DNA isolation techniques.     

RAPD法对罗曼蛋鸡基因组DNA多态性分析初报

利用RAPD（随机扩增多态DNA）方法,选用37种10bp的随机引物,对罗曼蛋鸡基因组DNA进行多态性分析,发现其中两种引物（OPS－08,OPY－06）在三代7个品系中都能扩增出多条带并且反映其基因组DNA的多态性,可用于检测出不同品系间的差异,并且这两种引物的碱基序列有80％是对应互补的。     

金秋梨和新高梨的分子遗传学对比分析

金秋梨和新高梨的形态性状、生物学性状以及酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶酶谱均产生了变化。利用异源DNA探针—小麦rDNA克隆pTA71,与四种核酸内切酶PstⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ及BglⅡ酶切消化的金秋梨和新高梨叶片总DNA杂交,结果表明,pTA71-PstⅠ和pTA71-BamHⅠ二种探针—酶组合可在金秋梨和新高梨中检测到RFLP差异。