高密市2014年人群乙型病毒性肝炎血清流行病学调查

目的了解高密市乙型病毒性肝炎(乙肝)流行现状,为完善乙肝疫苗策略提供依据。方法采用分层多阶段随机抽样方法,抽取高密市1~<5岁、5~<15岁、15~<30岁和30~<60岁常住人口497人进行乙肝血清流行病学调查,采用酶联免疫吸附试验标本进行乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、HBe Ag和抗-HBe)检测。结果共采集血清494份,HBV流行率为12.55%、HBsAg阳性率为1.42%、抗-HBs阳性率为52.02%、抗-HBc阳性率为12.55%,男、女性别差异无统计学意义(P>0.05);5~14岁组HBV流行率和抗-HBc阳性率均最低,且随年龄增长呈现升高趋势。各年龄组间差异均有统计学意义(P<0.01);HBsAg阳性率各年龄组间差异均无统计学意义(P>0.05);抗-HBs阳性率随年龄增长呈下降趋势,各年龄组间差异均有统计学意义(P<0.01);HBV流行率、HBsAg阳性率、抗-HBs阳性率在城乡之间差异均无统计学意义(P>0.05),但抗-HBc阳性率乡镇高于城市(P<0.05);7名HBsAg阳性患者中,15~<30岁组和30~<60岁组HBe Ag阳性各1人;15~<30岁组和30~<30岁组抗-HBe阳性分别为1人和4人。结论高密市为乙肝中度流行区,青少年和成人中HBV流行强度高于儿童,高密市实施以"新生儿Hep B接种"为主的乙肝控制策略取得了显著成效。     

阳江市健康人群乙型肝炎血清流行病学调查

目的了解阳江市健康人群乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)水平,评价乙型肝炎疫苗免疫效果。方法采用整群随机抽样方法,在阳江市辖区内随机抽取20个乡镇的常住健康人群为调查对象。采用电化学发光免疫法定量检测抗-HBs水平,运用SPSS18.0和Excel 2007软件进行数据整理和分析。结果共采集1 054人份血清进行检测,人群中乙肝疫苗接种率为94.88%,抗-HBs阳性率为63.47%、抗-HBs高应答率及GMT分别为29.51%和2 3.47 m IU/m L。乙肝疫苗接种率显示,随着年龄的增长疫苗接种率越低;20岁以下和20岁以上人群疫苗接种率分别为98.35%和54.22%,且男性高于女性;各地区间疫苗接种率差异无统计学意义(χ2=5.99,P=0.11)。抗-HBs阳性率显示,1~14岁儿童抗-HBs阳性率为63.00%。其中,1~岁组儿童最高为87.20%,7~岁组最低为54.56%;江城区抗-HBs阳性率最高(70.61%),阳西县最低(56.60%)。1岁以下儿童的抗-HBs应答率和GMT均最高,分别为61.22%和(91.56±2.15)m IU/m L。5~岁组最低,分别为13.74%和(12.44±1.46)m IU/m L,差异均有显著的统计学意义(χ2=57.31,P=0.00,F=5.77,P=0.00)。结论阳江市健康人群乙肝疫苗接种率高,初步形成免疫屏障。积极开展20岁以下人群的加强免疫和成人的乙肝疫苗的接种工作。     

甘肃省1～59岁人群乙型肝炎病毒感染的血清流行病学调查

为了解甘肃省现阶段乙型肝炎病毒感染的现状,分析乙肝病毒感染血清学指标的变化,采用多阶段整群抽样的方法,抽取5个县区1~59岁人群共2200人进行调查。以ELISA方法对血清标本统一检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)、乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)。结果显示,甘肃省1~59岁调查人群HBsAg阳性率为3.59%,抗-HBs和抗-HBc阳性率分别为49.45%、16.33%;HBV总感染率为27.50%。比1992年HBV总感染率下降了36.48%,HBsAg阳性率下降了45.94%;1~4岁儿童HBsAg阳性率仅为1.13%,比1992年(5.34%)下降78.84%。甘肃省1~59岁人群乙肝病毒感染率下降,抗-HBs阳性率升高,尤其在1~4岁儿童变化更为明显;甘肃省乙肝感染逐步呈现由中高流行转向低流行区的趋势;乙肝疫苗免疫取得显著效果。     

河南省1～74岁人群乙型病毒性肝炎血清流行病学调查

目的了解河南省城乡1～74岁人群乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)血清标志物的流行状况,评价乙型肝炎(hepatitis B)防控效果,为河南省疾病预防控制部门未来制定防治策略提供依据。方法采用多阶段随机抽样方法,在全省随机抽取30个县区中60个居委会/行政村。根据乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)感染率估算预期调查人数为30 300人(实际调查人数32 077人);采用流行病学调查方法,使用ELISA对HBV血清标志物进行检验;采用EPIdate 3.1软件建立数据库,用SPSS 13.0统计软件进行数据的统计分析。结果全省1～74岁人群HBsAg、HBsAb和HBcAb流行率分别为3.26%、46.56%和21.75%。HBsAg流行率1～4岁最低为0.35%,1～24岁人群流行率随年龄增加,不同年龄组差异有统计学意义(χ~2=308.540,P0.05)。HBsAb流行率不同年龄组差异有统计学意义(χ~2=114.887,P0.05)。HBcAb流行率1～4岁组最低为2.22%,不同年龄组差异有统计学意义(χ~2=2 993.071,P0.05)。城市人群HBsAg流行率为2.70%,农村为3.62%,城市低于农村,差异有统计学意义(χ~2=22.404,P0.05));城市人群HBsAb流行率为49.08%,农村为44.98%,城市高于农村,差异有统计学意义(χ~2=55.606,P0.05);城市人群HBcAb流行率为20.21%,农村为23.11%,城市低于农村,差异有统计学意义(χ~2=48.248,P0.05)。男女性别分布,男女HBsAg流行率分别为4.03%、2.64%,男性高于女性,差异有统计学意义(χ~2=17.082,P0.05)。职业情况,农民HBsAg阳性率最高为4.35%,医护人员最低为2.21%。文化程度,小学以下的HBsAg阳性率最高为5.29%,本科及以上学历人员最低为2.04%。结论河南省乙肝防控成就显著,乙肝病毒感染率显著降低,特别是保护了小年龄组人群免受乙肝病毒的危害。保持新生儿乙肝疫苗首针、及时接种率和全程接种率;加大在农村、偏远等重点地区乙肝疫苗接种的防控工作及知识宣传;加强农民、工人等重点人群的及时接种、补种是今后乙肝防控的工作重点。     

丝状病毒出血热的血清流行病学调查研究及现状

丝状病毒(包括马尔堡与埃波拉病毒)被发现已有40余年,对其自然流行病学尚不清楚。综述了该病血清流行病学调查结果,丝状病毒出现的频率,地理生态学分布,及病毒生物学特性,为该病流行因素提供了信息与框架。然而,对病毒宿主,传入人类的起源、地理分布、具体区域等流行生态学有待进一步研究。     

乙型肝炎病毒与乙型肝炎疫苗

乙型肝炎已成为严重威胁人类健康的世界性疾病之一,我国也是高流行区。现在对本病的认识与研究逐渐深入,已取得了很多研究成果。本文仅就乙型肝炎的病原(乙型肝炎病毒)和与疫苗有关的两个问题简述如下: (一)乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)属DNA病毒,该病毒与其相关抗原颗粒在电镜下分三种不同形态:直径为22nm小球型颗粒、直径为22nm长为200nm的管状颗粒和直径为42nm的大球型颗粒(又称Dane颗粒)。一般认为Dane颗粒是完整的病毒。这三种形态病毒颗粒的衣膜均由表面抗原(HBsAg)组成,不含核酸。Dane颗粒衣膜内为27nm的核心,核心部分包括核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)、内源性DNA模板及相应的DNA聚合酶。据研究HBV进入肝细胞浆脱去衣膜,其环形     

2015年广州市越秀区居民乙型肝炎血清流行病学分析

目的了解广州市越秀区居民乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝表面抗体(anti-HBs)水平,为乙型肝炎(简称乙肝)的预防及控制提供参考。方法采用多阶段分层整群随机抽样方法抽取52 521名居民血样,用ELISA检测血清HBsAg和anti-HBs,使用泰勒级数线形法估计率的方差进行统计分析。结果 HBsAg总阳性率6.67%(95%CI:6.45%~6.88%),其中45~<50岁组最高,HBsAg阳性率为11.23%(95%CI:10.11%~12.34%),各年龄组间差异均有统计学意义,呈两头低,中间高的特点;男女性别差异无统计学意义。anti-HBs总阳性率66.95%(95%CI:66.55%~67.36%),其中<5岁组最高,阳性率为85.11%(95%CI:74.93%~95.28%),与其他年龄组间差异均有统计学意义。HBsAg阳性率最低的街道为登峰街(4.17%),最高的为珠光街(9.67%);anti-HBs阳性率最高的街道为登峰街(72.52%),最低的为流花街(62.40%);各街道间HBsAg阳性率、anti-HBs阳性率差异均有统计学意义。结论乙肝疫苗接种取得显著成效,需继续开展以减少免疫空白人群,提高人群免疫水平为主的综合性防控措施。     

预防性及治疗性乙型肝炎疫苗的研究进展

乙型病毒性肝炎(viral hepatitis type B,简称乙肝)是一个严重的世界性公共卫生问题,该疾病在健康人群中发病率极高,同时也在慢性乙肝患者中引起极高的死亡率。乙肝是一种可预防的疾病,用于预防的乙肝疫苗经过三代发展,已有安全、有效的疫苗上市,该疫苗的使用使慢性乙肝患者(包括肝细胞性肝癌患者)的发病率急剧下降。但目前尚无清除乙肝患者体内病毒的特效药物,增强机体免疫反应的治疗性疫苗可能是抗病毒药物的替代品。针对乙肝患者的治疗性疫苗正被广泛研究,包含重组蛋白疫苗、DNA疫苗和脂肽疫苗等。现就国内外预防性及治疗性乙肝疫苗的研究进展作一概述。     

The HBV E genotype discover in Dai nationality in Xishuangbanna, Yunnan Province

To investigate the distribution of Hepatitis B virus (HBV) genotypes among the population of Dai nationality in Xishuangbanna, Yurman Province HBV genotypes of the Serum samples were tested by PCR-RFLP. This is the first time to discover the B+E genotypes in China. This finding provides new information for understanding the distribution of HBV genotype in China and a provides a basis for establishing a Chinese gene bank.     

慢性肝炎中乙型和丙型病毒混合感染的重症化研究

在慢性肝炎中,乙、丙型病毒性肝炎混合感染相当多见,可使肝炎慢性化、重症化,肝组织损伤加重,肝硬化(LC)和肝癌(HCC)发生率增加[1]。本文应用血清学和分子生物学方法对196例肝病患者的血清进行检测,初步探讨了乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)、丙型肝类病毒(Hepatitis C virus,HCV)的复制状况以及两者间的相互作用与预后的关系。1材料和方法1.1病例受检的196例病例均为2004年1月至2005年7月我院住院及门诊病人,男149例,女47例,年龄15~82岁,其中慢性肝炎(CH)患者139例,肝硬化(LC)患者42例,肝癌(HCC)患者15例。所有病例诊断符合…     

慢性肝炎中乙型和丙型病毒混合感染的重症化研究

在慢性肝炎中,乙、丙型病毒性肝炎混合感染相当多见,可使肝炎慢性化、重症化,肝组织损伤加重,肝硬化(LC)和肝癌(HCC)发生率增加[1].本文应用血清学和分子生物学方法对196例肝病患者的血清进行检测,初步探讨了乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)、丙型肝类病毒(Hepatitis C viruS,HCV)的复制状况以及两者间的相互作用与预后的关系.     

应用RNAi文库筛选HBV复制相关基因

深入研究HBV复制机理,筛选参与HBV复制的基因,可能为开发抗乙肝病毒新药提供新 的靶点．本文拟建立一种筛选HBV复制相关基因的方法: RNAi文库感染HepG2.2.15细胞后,利用免疫磁珠收集HBsAg表达降低的细胞,提取DNA,PCR扩增siRNA编码序列,将PCR产物克隆入T-easy载体,随机挑选克隆测序,发现DDB1基因可能参与HBV复制．本试验建立了一种筛选HBV复制相关基因的方法,为大规模全基因组筛选参与HBV复制的基因奠定了基础．     

抗乙肝病毒shRNA表达载体转染条件的优化

目的优化抗乙肝病毒(HBV)短发夹样RN(A short hairpin RNA,shRNA)表达载体转染条件,从而克服过量转染所致细胞大批死亡的弊端,以便更客观地反映RNA干扰抗乙肝病毒的效率、方法,通过脂质体介导,将HBV真核表达载体pHBV1.3与我们以前研究确定为能有效抗乙肝病毒的shRNA表达载体pTZU6-C共同转染肝癌细胞HepG2,将共转染的两种质粒及所需的脂质体设立成不同浓度和比例,以pHBV1.3与不表达shRNA的空载体pTZU6的共转染作为未干扰阴性对照,转染36h后收集细胞,通过Southern杂交来观察乙肝病毒DNA明显复制和显著受抑时,所需pHBV1.3与pTZU6-C的最适剂量和比例,以及相应脂质体的用量;同时,通过Western杂交来观察HBV蛋白表达的变化。结果通过southern杂交,发现当将pHBV1.(3μg):pTZU6-C(μg)固定为6:1,脂质体(μl):质粒(μg)为1:1时,对于100ml培养瓶中90%以上融合的细胞,用3.5μl的脂质体共转染0.5μg pHBV1.3和3μg pTZU6-C,即可检测出HBV DNA的表达,此时,存活细胞总数不受任何影响;随着pHBV1.3量的增多,HBV DNA的表达亦增多;当pHBV1.3增至4μg时,虽然表达量增多,但存活的细胞总数却开始明显减少,存活细胞约为70%～80%;当用8μg时,存活的细胞不足40%～50%,检测水平反而下降。当pHBV1.(3μg):pTZU6-C(μg)为1:1时,即可观察到乙肝病毒DNA表达的明显抑制作用,其抑制率为71%;当两者的比例为1:2时,其抑制率为70%;比例为1:6时,抑制率为84%。Western杂交的结果亦证实,共转染0.5μgpHBV1.3和3μg pTZU6-C,即可检测出HBV蛋白的表达;但转染36h后,尚未能观察到HBV表面抗原(HBsAg)表达明显受抑的情况。结论抗乙肝病毒shRNA表达载体的转染条件需要优化,对于100ml培养瓶中90%以上融合的细胞,用6μl的脂质体共转染2μg pHBV1.3和4μg pTZU6-C,即可观察到明显的HBV表达和显著的RNA干扰抑制效果,本研究结果为下一步针对乙肝病毒不同靶区shRNA表达载体的转染奠定了坚实的基础。     

HBV DNA环化结构在体外的复制表达水平优于HBV线性结构的表达质粒

为了研究乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）DNA环化结构与HBV线性结构的表达质粒在体外复制表达水平的差异,采用3种含有HBV全长DNA的表达质粒与自连环化的HBV DNA分别转染Huh7细胞. 5 d后收集转染处理过的Huh7细胞和细胞上清,从感染细胞中抽提纯化HBV复制中间体进行Southern印迹分析,并将细胞培养上清进行ELISA分析.结果显示,HBV DNA通过环化后转染Huh7细胞,可高效地进行转录和复制表达,且优于质粒转染的效果.证明在细胞中,HBV DNA环状结构的复制表达能力优于HBV线性结构的表达质粒.     

63例慢性乙肝e抗原阴性HBV基因多态性检测结果报告

用地高辛标记引物酶显色法,检测了63例e抗原阴性慢性肝炎HBV基因多态性。结果突变率为53.9%(34/63)。前C/C区1896位突变率最高为49.2%(31/63),1814位38.1%(24/63);BCP区1762位、1764位均为39.7%(25/63),552位突变率为14.3%(9/63)。该检测方法灵敏度高,简便易行。严格控制杂交温度及显色温度是检测操作的关键。     

含乙型肝炎病毒S-PreS1 基因的DNA疫苗与蛋白颗粒疫苗联合免疫可增强免疫应答

为研制新型有效的HBV治疗性疫苗,构建了含PreS1与S融合基因的HBV DNA疫苗,即pVRC-HBSS1 (PreS1 21–47 aa融合在S抗原1–223的羧基端),并制备了CHO表达相同结构的蛋白颗粒亚单位疫苗HBSS1。在Balb/C小鼠中采用不同的DNA免疫方式 (即肌肉注射、皮内注射加电转) 初免3次,蛋白颗粒亚单位疫苗 (不同佐剂) 肌肉注射加强免疫1次,然后我们分析比较了各组疫苗所引起的免疫应答特点。抗体检测结果表明：皮内注射结合电转初免组产生的PreS1与 S特异性抗体水平皆高于肌肉直接注射组。进一步还发现DNA疫苗与蛋白颗粒亚单位疫苗两种疫苗联合应用后S抗原特异的细胞免疫应答 (IFN-γ ELISpot分析) 明显高于DNA疫苗或蛋白颗粒亚单位单独应用,其中皮内注射+电转结合蛋白颗粒亚单位疫苗联合免疫组可产生最强的细胞免疫应答。这些研究为新型HBV 治疗性疫苗的优化设计与合理应用提供了依据。     

Enhanced host immune responses in presence of HCV facilitate HBV clearance in coinfection

Hepatitis B virus (HBV)/Hepatitis C virus (HCV) coinfection is frequently observed because of the common infection routine. Despite the reciprocal inhibition exerted by HBV and HCV genomes, the coinfection of HBV and HCV is associated with more severe forms of liver diseases. However, the complexity of viral interference and underlying pathological mechanism is still unclarified. With the demonstration of absence of direct viral interplay, some in vitro studies suggest the indirect effects of viral-host interaction on viral dominance outcome. Here, we comprehensively investigated the viral replication and host immune responses which might mediate the interference between viruses in HBV/HCV coinfected Huh7-NTCP cells and immunocompetent HCV human receptors transgenic ICR mice. We found that presence of HCV significantly inhibited HBV replication in vitro and in vivo irrespective of the coinfection order, while HBV did not affect HCV replication. Pathological alteration was coincidently reproduced in coinfected mice. In addition to the participation of innate immune response, an involvement of HCV in up-regulating HBV-specific immune responses was described to facilitate HBV clearance. Our systems partially recapitulate HBV/HCV coinfection and unveil the uncharacterized adaptive anti-viral immune responses during coinfection, which renews the knowledge on the nature of indirect viral interaction during HBV/HCV coinfection.     

向下转膜法在乙肝病毒Southern杂交中的应用

目的评价向下转膜法在乙肝病毒(HBV)Southern杂交中的应用效果。方法用带有1.3倍HBV基因的真核表达载体转染HepG2细胞,使其产生瞬时HBV表达,72小时收集细胞并提取细胞总DNA,琼脂糖凝胶电泳后,以向上和向下两种方式转移在尼龙膜上;用化学发光标记和检测试剂盒将乙肝病毒基因片段标记成探针,再与向上和向下转膜后的尼龙膜进行杂交,判断产生明显HBV杂交条带所需的细胞总DNA量,从而验证向下转膜法在乙肝病毒Southern杂交中的应用效果。结果发现向下转膜后,检测HBV表达所需的细胞总DNA量极少,灵敏度高,0.5μg细胞总DNA电泳后转膜,即可检测出HBVDNA的表达,凝胶中仅有8%的DNA残留;而向上转膜所需的总DNA量大,灵敏度低,25μg的细胞总DNA电泳后转膜,仅能检测出弱的条带。结论向下转膜法是一种较好的转膜方式,适于对乙肝病毒的Southern杂交,值得推广应用。