大鼠内毒素血症不同时期血CGRP和背根神经节CGRP mRNA水平的变化

本文采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法测定大鼠内毒素血症不同时期胸腰段背根神经节降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）ｍＲＮＡ水平的改变,结合血浆ＣＧＲＰ水平的改变,以期全面了解大鼠内毒不血症不同时期ＣＧＲＰ释放与合成的变化。结果显示：注射内毒素（５ｍｇ／ｋｇ）后３０ｍｉｎ时,大鼠血浆ＣＧＲＰ开始增高,而背根神经节ＣＧＲＰ ｍＲＮＡ水平无明显变化;注射内毒素后３ｈ时,血浆ＣＧＲＰ及背根神经节ＣＧＲＰ     

坐骨神经结扎后大鼠背根神经节和脊髓CGRP表达的变化

目的研究大鼠坐骨神经结扎后降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)表达变化。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1、3、5、7、14、21和28d(n=8),免疫荧光(双标法)和免疫组织化学(SABC法)观察术后不同时间点CGRP和NGF在坐骨神经、背根神经节(dorsalrootganglion,DRG)和脊髓的表达变化,Westernblot结合图像分析技术对不同时间的变化进行定量测定。结果术后1d结扎远端坐骨神经内NGF大量堆积,持续到28d仍高于正常。结扎后7dDRG内CGRP阳性细胞百分率减少,持续到28d仍低于正常;结扎后14d脊髓后角CGRP下降,28d仍低于正常,各时间点脊髓前角CGRP表达未见明显变化。结论神经结扎可导致DRG和脊髓后角的CGRP表达下调,可能与靶源性的NGF来源减少有关。     

内毒素对离体大鼠肠系膜动脉降钙素基因相关肽（CGRP）释放的作用

我们以前的工作表明,动物内毒素血症和失血性休克以及人的败血症时血浆ＣＧＲＰ含量明显增多,它的主要来源之一是血管。本实验的目的是探讨是否内毒素可直接使离体大鼠肠系膜动脉床含ＣＧＲＰ的外周神经释放ＣＧＲＰ增加。结果显示内毒素（１０－１００μｐ／ｍｌ）灌流引起ＣＧＲＰ时间和剂量依赖性的释放,内毒素（５０μｐ／ｍｌ）灌注后１０－１５ｍｉｎ时,ＣＧＲＰ释放达高峰,该时释放量为基础状态时的２０倍。经反相高压液相分析证明,ＣＧＲＰ免疫活性的峰位与人工合成大鼠ＣＧＲＰ标准品的峰位吻合。以辣椒素（感觉神经选择性毒剂）预灌流或钌红（钙致细胞内钙池释放阻断剂）均可使上述内毒素引起的ＣＧＲＰ释放分别抑制９０％和６５％。在灌流液无钙时内毒素致ＣＧＲＰ释放的作用被抑制８０％。以上结果提示：内毒素可直接引起ＣＧＲＰ从大鼠肠系膜动脉床释放,来源主要为辣椒素敏感的感觉神经。释放依赖于细胞外钙离子的存在以及Ｃａ~（２＋）进入神经细胞后引起的对钌红敏感的细胞内钙池Ｃａ~（２＋）动员。     

慢性激活MrgC受体上调CGRP表达的nNOS机制

目的：检查持续应用BAMS-22对体外组织培养感觉神经节合成钙调素基因相关肽（cGRP）的影响。方法：将体外培养的大鼠三叉神经节和背根神经节经BAM8—22和L-NAME处理后,用酶联免疫法测定CGRP的表达含量变化。结果：与对照组相比,连续4天给予SNSR的选择性激动剂BAM8-22,CGRP的合成会增加。联合给予BAM8—22和NOS的非选择性抑制剂L-NAME,CGRP的表达随不同剂量的L-NAME引起不同程度的上调。结论：持续激活SNSR能使感觉神经节合成CGRP增多,是在体动物慢性激活SNSR后吗啡镇痛作用降低的细胞学机制。     

慢性激活MrgC 受体上调CGRP表达的nNOS机制*

摘要目的：检查持续应用BAM8-22 对体外组织培养感觉神经节合成钙调素基因相关肽(CGRP)的影响。方法：将体外培养的大鼠 三叉神经节和背根神经节经BAM8-22 和L-NAME 处理后,用酶联免疫法测定CGRP 的表达含量变化。结果：与对照组相比,连 续4 天给予SNSR 的选择性激动剂BAM8-22,CGRP 的合成会增加。联合给予BAM8-22 和NOS 的非选择性抑制剂L-NAME, CGRP的表达随不同剂量的L-NAME 引起不同程度的上调。结论：持续激活SNSR 能使感觉神经节合成CGRP增多,是在体动物 慢性激活SNSR 后吗啡镇痛作用降低的细胞学机制。     

豚鼠胆囊内CGRP免疫反应阳性神经纤维的分布特点

应用免疫组织化学ＡＢＣ法，研究了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）免疫反应阳性神经纤维在豚鼠胆囊内的分布及分布特点。结果表明：胆囊内有较丰富的ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经纤维，它们多呈念珠状膨大，在血管壁内及血管周围区域数量较多。胆囊颈部和胆囊管ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经纤维的分布多于胆囊底部和体部。提示ＣＧＲＰ对胆囊的功能有调节作用。     

福尔马林致痛对大鼠降钙素基因相关肽的影响

目的:研究福尔马林致痛后大鼠脊髓和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的时空变化规律,为探讨CGRP在伤害性信息传递中的机制和作用提供实验依据。方法:选取健康成年正常SD大鼠54只随机分为生理盐水对照组和福尔马林实验组;实验组为右侧足底皮下给予0.1 mL 5%福尔马林后,分别存活15 min、30min、1 h、3 h、6 h、12h、24h和72h(n=6),免疫组化结合图像分析技术观测CGRP在脊髓腰段及L4~6DRG的表达变化。结果:正常DRG、脊髓前角和后角内CGRP有一定的基础表达。福尔马林致痛后3 h DRG的CGRP表达上升,12 h~24 h达峰值,72 h基本降低到正常;福尔马林致痛后6 h脊髓后角CGRP的表达上调,24 h达到高峰,72 h降低至正常;脊髓前角CGRP未见明显变化。结论:福尔马林致痛引起DRG和脊髓的CGRP的表达呈现一定的时空模式,可能是其参与伤害性信息传递的机制之一。     

恒河猴肺内CGRP及CGRP mRNA免疫组织化学和原位杂交的研究

本实验采用免疫组织化学ＡＢＣ－ＧＤＮ法和地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术,研究了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）及其ｍＲＮＡ在恒河猴内的表达。结果显示ＣＧＲＰ分布于恒河猴肺内各级支气管粘膜上皮的神经内分泌细胞（ＮＥＣ）和神经上皮样小体（ＮＥＢ）中。ＣＧＲＰ杂交阳性细胞的分布与免疫组织化学的结果相同。ＣＧＲＰ ｍＲＮＡ杂交信号均匀分布于整个细胞质,而ＣＧＲＰ免疫反应物仅在神经内分泌细胞的基部更明显,说     

CGRP和NPY 在大鼠股骨闭合骨折愈合不同阶段的变化及意义

目的:探讨交感神经分泌的神经肽Y(NPY)和感觉神经分泌的钙基因相关肽(CGRP)在体内骨折愈合的不同阶段的变化及意义。方法:选择6-8月龄的雄性大鼠,建立大鼠的股骨闭合骨折模型,术后2、4、8、12周取材。进行扫描电镜,免疫组织荧光染色和血清Elisa检测。结果:1骨折愈合不同时期感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY都有表达,且其含量有先增加后减少的趋势,并在骨折后8周含量达到最高。2骨折愈合不同阶段的大鼠血清感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY均呈上升趋势,差异有统计学意义(P0.05),且NPY的含量比CGRP的含量高。骨折后2-4周,CGRP含量增加较快;骨折后4-8周NPY含量增加较快。结论:骨折愈合的不同阶段,感觉神经肽类物质CGRP和交感神经肽类物质NPY含量先升后降,对不同阶段的骨形成及骨吸收产生影响。     

肾血管性高血压大鼠模型中ET1和CGRP的变化

目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）及血浆内皮素（ET1）在高血压病中的作用。方法选用正常血压大鼠42只,随机分对照组、手术组、假手术组,分别观察血压值、CGRP及ET1值。结果手术组与正常组比较血压明显高于正常对照组（P〈0．01）,假手术组与正常对照组比较,血压无明显变化（P〉0．05）;手术组与对照组比较CGRP显著升高（P〈0．01）;假手术组与正常对照组比较,CGRP未见升高（P〉0．05）。手术组与对照组比较ET1无明显变化（P〉0．05）。结论CGRP在肾血管性高血压的发生发展中具有保护作用。ET1与CGRP是心血管系统中的一对拮抗因子,与CGRP的作用相反,ET1有较强的缩血管作用,从而导致血压升高。     

前角运动神经元向脊神经节投射的探讨——CB-HRP示踪及电镜研究

本实验将１％ＣＢ－ＨＲＰ注入大鼠左侧腰４节段脊神经节（ＤＲＧ）两天后,观察到同侧相应节段脊髓前角第Ⅷ层和Ⅸ层内有ＨＲＰ标记胞体。电镜观察显示,在切断大鼠左侧Ｌ４和Ｌ５前根后５～７天,在相应节段的ＤＲＧ内见到变性纤维或终末。上述结果提示,前角运动神经元可发出纤维经前根到ＤＲＧ,及可能参与调节一级感觉信息的传入。     

家兔脊神经节内肥大细胞与肽能神经关系的观察

探讨脊神经节内肥大细胞与肽能神经的关系,采用常规组织学染色和免疫组织化学方法对家兔脊神经节内肥大细胞和P物质免疫阳性反应进行观察。结果显示：在P物质免疫反应阳性的神经元和神经纤维周围散在着肥大细胞,表明,脊神经节内,肥大细胞与肽能神经存在着组织形态学上的构筑关系。     

一氧化氮和前列腺素在内毒素引起降钙素基因相关肽释放中的作用

本实验在离体灌流大鼠肠系膜动脉床研究内毒素引起降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）释放的机制。内毒素（５０μｇ／ｍｌ）使ＣＧＲＰ释放增加１６倍,一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）底物Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）能促进内毒素引起的ＣＧＲＰ释放（４１％）。ＮＯＳ抑制剂Ｎ￣Ｇ－硝基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）及鸟苷酸环化酶抑制剂甲基蓝（ＭＢ）能使内毒素的上述作用分别降低３５％与３６％,Ｌ－精氨酸（ｔ－Ａｒｇ）能逆转Ｌ－ＮＮＡ的作用。提示内毒素的作用机制中部分是通过一氧化氮引起细胞内ｃＧＭＰ升高而介导的。用化学方法破坏血管内皮细胞,Ｌ－ＮＮＡ与Ｌ－Ａｒｇ的上述作用依然存在。提示内毒素主要是激活血管周围感觉神经末梢的神经源ＮＯＳ,而非内皮源ＮＯＳ。环氧化酶抑制剂消炎痛（Ｉｎｄｏ）与布洛芬（Ｉｂｕ）也能使内毒素引起ＣＧＲＰ释放的作用分别降低３４％与３９％,但与Ｌ－ＮＮＡ的作用不能迭加。提示内毒素可能通过激活神经源ＮＯＳ进而引起环氧化酶活化而起作用。     

抗炎药能抑制内毒素休克大鼠血浆CGRP浓度的升高

本实验观察了消炎痛、布洛芬、纳洛酮和吗啡治疗对清醒大鼠注射内毒素5 mg/kg 3 h血浆 CGRP 浓度的影响。结果表明,消炎痛、布洛芬和纳洛酮均明显地抑制休克时血浆CGRP 的升高,同时还明显地减轻休克时的肠道损伤;而吗啡治疗则无明显影响。本实验结果提示:体内炎症介质之一的前列腺素可能是引起内毒素休克时 CGRP 释放增加的重要内源性因子。     

人及大鼠胃、小肠CGRP的定位研究

本实验选用成年健康男性尸体和成年雄性Wistar大鼠各4例,死后迅速取胃、小肠各段组织.用免疫组织化学PAP法,对CGRP在人及大鼠胃、小肠中的分布进行了研究.结果表明:胃粘膜内可见CGRP免疫反应阳性的内分泌细胞,其数量人多于大鼠;胃、小肠各段均可见CGRP免疫反应阳性神经纤维分布;大鼠小肠粘膜下层及内环、外纵肌间可见单个存在的CGRP免疫反应阳性神经细胞.这些结果表明,胃和小肠中的CGRP有两种来源,即来源于神经和内分泌细胞.文内还对CGRP在胃和小肠中的可能功能进行了讨论.     

降钙素基因相关肽(CGRP)mRNA在大鼠淋巴细胞中的表达

最近,我们研究发现大鼠胸腺和淋巴结淋巴细胞中存在降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）样免疫反应活性。应用人工合成的可特异扩增降钙素／降钙素基因相关肽基因部分片断的寡核苷酸引物,通过逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,检测在大鼠脊髓背根神经节、胸腺细胞及肠系膜淋巴结淋巴细胞中是否存在ＣＧＲＰ ｍＲＮＡ,进一步研究大鼠淋巴细胞能否合成ＣＧＲＰ。结果显示,通过ＲＴ－ＰＣＲ从脊髓背根神经节（阳性对照）、胸腺和淋     

降钙素基因相关肽和心房肽对犬冠脉的舒张作用

本实验利用冠脉内给药和离体血管灌流等方法观察比较了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）和心房肽（ＡＮＰ）对犬冠脉循环的影响及其对犬大小冠状动脉的舒张作用。结果显示,ＣＧＲＰ和ＡＮＰ均能明显增加冠脉血流量、降低大小冠脉阻力,两者均呈剂量依赖性舒张大小脉冠脉血管。ＡＮＰ的作用显著小于ＣＧＲＰ,其中大冠脉对两者的反应性显著小于小冠脉,ＣＧＲＰ和ＡＮＰ对冠脉的舒张作用均无内皮依赖性。结果提示,ＣＧＲＰ和ＡＮＰ直接     

实验性结肠炎对脊髓传入神经元中降钙素基因相关肽和香草酸受体1表达的调节

本文旨在探讨肠道局部炎症对脊髓肠道感觉传入神经通路的近期及远期效应,应用三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)建立大鼠结肠炎动物模型,用DiI(3)逆行神经标记法识别支配肠道炎症部位的脊髓背根神经节(dorsalrootganglia,DRG)神经元,通过肉眼观察、平均组织损伤评分及髓过氧化物酶活性测定等方法评价肠道组织的炎症反应状态,用免疫组织化学法测定香草酸受体l(vanilloid receptor 1,VRl)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在支配结肠炎症部位的DRG神经元中的表达,比较炎症不同阶段(给予TNBS后7、21、42 d)CGRP和VRI阳性神经元的数目.结果显示,炎症急性期(即给予TNBS后7 d)结肠黏膜肉眼可见明显损伤,同时相应DRG中表达CGRP及VRl的神经元增加近2倍[(95.38±9.45)%VS(42.86±5.02)%,(89.23±8.21)%VS(32.54±4.58)%].给予TNBS后21、42 d,肠道炎症反应已完全消退,但表达CGRP及VRl的DRG神经元数目仍明显高于对照组[(86.25±8.21)%,(68.28±7.12)%VS(42.86±5.02)%;(67.22±6.52)%,(56.25±4.86)%VS(32.54±4.58)%].结果提示,肠道局部炎症可以上调支配肠道的脊髓传入神经元中CGRP和VRl的表达,这种异常表达可以持续至肠道炎症反应消退后的一定时间.