樟子松乙醇提取物体外抗氧化活性研究

测定了樟子松球果、树皮、树叶、木质部4个部位提取物的总抗氧化能力、总还原力、二苯代苦味酰基（DPPH·）清除能力、羟基自由基（·OH）清除能力、超氧阴离子（O^·₂）清除能力5个指标,并以抗坏血酸（Vc）为阳性对照评价从樟子松4个部位提取的松多酚体外抗氧化活性。结果表明：（1）从樟子松树皮中提取的樟子松多酚表现出较强的抗氧化能力,在较高浓度下与抗氧化剂（Vc）相差较小;从樟子松球果中提取的樟子松多酚也表现出较强的还原力,甚至超过阳性对照抗氧化剂Vc;（2）从樟子松树皮中提取的樟子松多酚在二苯代苦味酰基（DPPH·）清除能力、羟基自由基（·OH）清除能力上均为三者之中最高的,但都不超过抗氧化剂（Vc）的抗氧化能;（3）超氧阴离子（O^·₂）清除能力。三者的清除率均为负值,说明该方法测定超氧阴离子（O^·₂）清除率存在干扰因素,无法比较三者在这一指标上的能力大小。上述结果表明樟子松乙醇提取物具有较强的抗氧化能力,可作为天然的抗氧化剂。     

乌龙茶水提物的膜分离制备及其体外抗氧化活性评价

为探究乌龙茶水提液的不同膜分离工艺对产品品质、生化成分及体外抗氧化活性的影响,采用陶瓷膜(500 nm)和超滤膜(20、10、5、3.5 kD)对乌龙茶水提液进行分离,经喷雾干燥制得茶粉。通过感官品质、物理性质等方面评价不同膜分离工艺所制备的茶粉品质,并对茶粉的主要生化成分进行分析比较。同时,通过DPPH自由基清除力、FRAP氧化还原力、羟基自由基清除力、抗超氧阴离子活力方法评价茶粉的体外抗氧化活性。结果表明,陶瓷膜透过液的感官品质综合得分最高,体外抗氧化活性亦最高。500 nm陶瓷膜可有效分离与富集茶多酚(TPs)、游离氨基酸(FAAs)、咖啡碱(CAF)、可溶性糖(SPS)等物质,还可达到除杂效果,经陶瓷膜分离后的乌龙茶水提液再经超滤膜分离,对TPs、CAF、SPS、儿茶素组分无分离与富集效果。截留分子量小于10 kDa的超滤膜可有效分离与富集游离氨基酸。500 nm陶瓷膜截留液的SPS含量最高,但综合感官品质最差,抗氧化活性最低。基于品质、功效、节能3大要素考虑,500 nm陶瓷膜透过液制备的茶粉综合品质最优。     

野菊水提物和醇提物抗氧化及保肝活性研究

采用ABTS和DPPH方法评价野菊Chrysanthemum indicum水提物和醇提物的抗氧化活性;选用HepG2细胞,通过乙醇诱导损伤,检测野菊水提物和醇提物处理后细胞存活率评价其保肝效果。结果表明,野菊醇提物抗氧化能力优于水提物,其中,野菊醇提物对ABTS自由基清除作用较好。酒精性肝损伤细胞活性测定显示,5、10、20μg·mL^-1的野菊水提物和醇提物处理组较乙醇损伤组(eth)细胞的存活率显著上升,总体呈现剂量依赖性,其中野菊醇提物保肝效果更优。     

甘草提取物的体外抗氧化活性

为研究甘草提取物的体外抗氧化作用,采用60%乙醇回流提取甘草(LF),甘草粗提物(LF0)通过AB-8吸附树脂纯化制取甘草精提物(LF1),对LF0和LF1主要活性成分的含量进行测定。分别采用DPPH法、2-脱氧-D-核糖法和NBT-NADH-PMS体系、β-胡萝卜素-亚油酸体系测定LF0和LF1对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、羟自由基(OH.)、超氧阴离子自由基(.O-2)的清除能力以及LF0和LF1的总抗氧化能力;通过对LF0和LF1还原能力的测定分析LF0和LF1的抗氧化活性。研究结果显示,LF0和LF1能有效清除.O2-、DPPH.和OH.,具有良好的总抗氧化能力和还原能力,且LF1的作用比LF0好。     

海边月见草叶提取物乙醇洗脱级分的抗氧化作用

海边月见草(Oenothera drummondii Hook.)叶提取物经X-5大孔树脂吸附及体积分数10%、30%、50%和70%乙醇溶液梯度洗脱获得4个级分,研究了这4个级分对DPPH、·OH和O2-的清除作用及其在卵黄脂蛋白过氧化体系中的抗氧化作用。4个洗脱级分均表现出较强的清除DPPH和·OH的能力,清除率随各级分浓度的升高而提高,其中,30%乙醇洗脱级分的清除作用最强,对DPPH和·OH的50%抑制浓度(IC50)分别为0.069和0.741g·L-1。浓度达1.0g·L-1,4个洗脱级分对O2.均有一定的清除能力,且对卵黄脂蛋白过氧化作用的抑制率均在50%以上。结果表明,海边月见草叶提取物的不同浓度乙醇洗脱级分具有较强的清除自由基的能力,并有一定的抗卵黄脂蛋白过氧化的作用,但总体效果较槲皮素略差。     

蚕豆花水提取物的UPLC-ESI-QTOF质谱联用分析及抗氧化活性研究

为阐明蚕豆(Vicia faba L.)花水提取物的药效作用基础,采用超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(UPLC-ESI-QTOF-MS)联用技术对水提取物进行分析鉴定,并测定其抗氧化活性。结果表明,从蚕豆花水提取物中鉴定出178种化学成分,其中相对含量大于0.01%的成分有107种,相对含量较高的成分有野黄芩素-7-新橘皮糖苷、3-吲哚基-β-d-葡糖苷酸环己胺盐、螺环内脂E、芦丁、海藻酸丙二醇酯、山柰酚-3-α-d-半乳糖甙、4,8-二羟基喹啉-2-甲酸等。主要成分以黄酮类和生物碱类为主,分别有16种和17种,相对含量分别为36.53%和34.33%。清除DPPH自由基的IC50值为26.5 μg/mL,清除ABTS+自由基的IC50值为25.0 μg/mL。黄酮类和生物碱类是蚕豆花发挥功效的主要物质基础,蚕豆花水提取物具有较强的抗氧化活性,蚕豆花具有较高的应用价值。     

广叶绣球菌水提物酪氨酸酶抑制、抗氧化及保湿功能

广叶绣球菌Sparassis latifolia是新近开发的一种珍稀食药用真菌。本文对其子实体不同提取温度、不同干燥方式提取物酪氨酸酶的抑制、抗氧化和保湿功能进行评价;同时比较了子实体采摘后残留的柄部废弃物、子实体包装整形处理后的下脚料与商品子实体提取物酪氨酸酶抑制、抗氧化和保湿功能。结果发现,新鲜子实体提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性抑制率均远高于冻干和烘干样品,达到(86.43±3.33)%和(79.03±4.49)%,仅微低于阳性对照曲酸。不同干燥方式的子实体及不同温度提取物在浓度2 000μg/mL时DPPH·自由基清除率和阳性对照BHT相当,表明其具有较好的抗氧化潜力;新鲜子实体提取物DPPH·自由基清除IC₅₀值最低,为(308.08±6.77)μg/mL。不同温度下的提取物及不同干燥方式的子实体提取物保湿率均稍高于常用保湿剂甘油和透明质酸钠,证实广叶绣球菌具有较好的保湿能力。废弃柄部和下脚料水提物酪氨酸酶抑制活性低于新鲜商品子实体水提物,但是在DPPH·自由基清除率和保湿功能方面,均与新鲜商品菇提取物相当。本研究为广叶绣球菌子实体在美白护肤品领域的应用提供了实验依据,也为工厂化栽培采收后的废弃物开发提供了思路。     

桑枝提取物对高脂血症大鼠的降血脂及抗氧化作用研究

本文以降血脂药血脂康为阳性对照,对高脂血症大鼠进行降血脂试验,研究了桑枝提取物对高脂血症大鼠的降血脂作用和抗氧化活性。试验结果表明：桑枝提取物具有明显的降血脂功能,能预防动脉硬化,并具有较强的抗氧化能力。     

薄荷和罗勒提取物体外抗氧化及保肝活性研究

采用国际常用的ABTS和DPPH方法评价唇形科植物薄荷(Mentha haplocalyx) 和罗勒(Ocimum basilicum)水提物和乙醇提取物体外抗氧化活性,选用HepG2细胞,通过乙醇诱导损伤,构建体外酒精性肝损伤细胞模型,以细胞存活率评价薄荷和罗勒提取物的保肝效果。结果表明,DPPH自由基清除能力大小依次为薄荷醇提物、薄荷水提物、罗勒醇提物、罗勒水提物,半效应浓度(EC₅₀)分别为70.42 μg·mL^-1、75.77 μg·mL^-1、354.87 μg·mL^-1、451.53 μg·mL^-1。ABTS自由基清除能力大小依次为薄荷醇提物、罗勒醇提物、薄荷水提物、罗勒水提物,EC50值分别为9.04 μg·mL^-1、18.03 μg·mL^-1、22.18 μg·mL^-1、36.88 μg·mL^-1。薄荷提取物的抗氧化能力整体优于罗勒提取物,醇提物抗氧化能力优于水提物。酒精性肝损伤细胞活性检测表明,5、10、20、50 μg·mL^-1薄荷水提物、薄荷醇提物和罗勒水提物能剂量依赖性地提高乙醇诱导损伤的细胞存活率,具有一定的保肝活性。     

白芷乙醇提取物镇痛作用研究

目的:观察白芷乙醇提取物(EEAD)的镇痛作用。方法:各组小鼠连续灌胃不同剂量的白芷乙醇提取物3d,末次给药后1 h。以热板致痛法、醋酸扭体法为疼痛模型,生理盐水为阴性对照药,阿司匹林为阳性对照药,考察白芷乙醇提取物的镇痛作用。结果:白芷提取物可显著延长小鼠热板反应的潜伏期,及扭体反应出现的时间。结论:白芷乙醇提取物镇痛作用明确。     

遮光对连香树幼苗光合特性及其叶片解剖结构的影响

以2年生连香树实生苗为材料,在田间通过黑色遮阳网设置全光照(L₀)及透光率55%(L₁)、25%(L₂)和10%(L₃)4种光环境,研究遮光对连香树幼苗光合作用及叶片解剖结构的影响。结果表明：(1)连香树幼苗叶片P_n在全光和L₁处理下呈非典型的“乁”形变化,未出现“午休”现象,中午14:00出现极值,而在L₂和L₃处理下变化相对缓和,极值出现在中午12:00;叶片G_s呈现与P_n类似的变化趋势,而C_i则呈基本一致的凹形变化。(2)各处理P_n、G_s和T_r的日均值均表现为L₀＞L₁＞L₂＞L₃,而C_i的日均值则呈相反的顺序;P_n与G_s、T_r、气温和光合有效辐射均呈极显著正相关关系(P＜0.01)。(3)全光照连香树幼苗的光补偿点(LCP)、光饱和点(LSP)、暗呼吸速率(R_d)均显著高于遮光处理,并维持较高的P_n而未出现明显的光抑制;遮光导致幼苗的LCP、LSP、R_d显著降低,有利于充分利用弱光,以满足低光环境下植株的正常生长。(4)与全光照相比,遮光下连香树叶片气孔密度显著变小,但气孔器长度、气孔器宽度、单个气孔器面积显著增加,气孔器面积百分比减少,影响幼苗细胞内外的水分和气体传递。(5)遮光条件下,连香树叶片明显变薄,表皮细胞厚度减小,栅栏组织(PT)厚度降低,排列变得疏松,海绵组织(ST)厚度增加,PT/ST相应减小。(6)与全光照相比,强度遮光下(L₂和L₃)连香树幼苗生长受阻,苗高(H)和基径(D)明显减小,生物量模型D²H下降;而轻度遮光(L₁)下幼苗H和D、H/D和D₂H均未出现显著变化。研究发现,连香树具有一定的光忍耐性和喜光性,对光照条件的生态幅较宽,轻度遮光影响较小,但强度遮光对连香树幼苗气体交换参数和光合响应特征产生了显著影响,同时影响了叶片的解剖结构和气孔分布特征,从而影响连香树幼苗的生长形态。在育苗生产中,适度遮光有利于降低气温、减小蒸腾,但遮光后田间有效辐射强度应保持在自然光强的55%以上。     

一株连香树根际促生细菌LWK2的分离鉴定及其全基因组序列分析

【背景】植物根际促生细菌是一类位于植物根际并能对植物生长产生促进作用的有益菌,在微生物肥料领域具有重要的应用价值。【目的】对濒危植物连香树根际的植物根际促生细菌进行分离筛选和连香树接种效应评价,挑选对连香树生长促进作用最为显著的菌种进行促生特性分析、菌种鉴定及全基因组序列测定与促生相关基因分析。【方法】利用相应筛选培养基对连香树根际土壤中解有机磷、溶无机磷和解钾细菌进行分离筛选,通过根际接种验证各菌株对连香树实生苗的促生能力。从中选取促生作用最为显著的细菌,进行解钾能力、产吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)和1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylate,ACC)脱氨酶能力测定。利用菌体形态观察、16S rRNA基因序列分析及全基因组序列的平均核苷酸一致性比对进行菌种鉴定。最后利用基因组功能注释和比较基因组学分析对该菌株中的植物促生及重金属抗性相关基因进行解析。【结果】从连香树根际土壤中共筛选得到3株解有机磷细菌、2株溶无机磷细菌和2株解钾细菌,其中解钾细菌LWK2对连香树实生苗的生长促进作用最为显著。该菌株能够产...     

蓝花参甲醇提取物保肝作用及化学成分

蓝花参为桔梗科蓝花参属植物蓝花参的根或全草,具有益气健脾、祛痰止咳等功效。临床实践中蓝花参被用于肝病治疗,效果较好,但目前未见其保肝活性的相关报道。该研究采用80％甲醇冷浸提取蓝花参全草,提取液浓缩后经冷冻干燥得到蓝花参提取物。对以刀豆蛋白A造模的急性肝损伤小鼠分别给予联苯双酯及不同剂量的蓝花参提取物灌胃,测定血清中 ALT/AST 活性,HE 染色观察肝组织病理形态学的改变。结果表明：蓝花参提取物可以降低急性肝损伤小鼠血清中 ALT/AST 水平,且对减轻肝脏病理组织损伤有积极作用。进一步利用多种现代色谱学方法从蓝花参甲醇提取物的水溶性部位分离单体化合物,经过波谱学分析( MS、1D-NMR、2D-NMR等)并结合文献数据对比,鉴定了5个化合物的结构。其中化合物1为新化合物,命名为Wahlenoside D。其它4个已知化合物分别为demethyl syringin (2)、3,5-dihydroxyphenethyl alcohol-3-O-β-D-glucopyranoside (3)、芦丁(4)、异牡荆素(5),其中化合物3－5为首次从该植物中分离得到。该研究结果为蓝花参的保肝作用提供了科学依据,同时促进了蓝花参药材资源的进一步开发与利用。     

粤紫萁离体再生技术研究

粤紫萁(Osmunda mildei)为新近形成的自然杂交种,其分布区狭窄、种群个体数量少、有性繁殖能力极低.该文以孢子为外植体,以MS、3/4MS、1/2MS和1/4MS为基本培养基,探讨不同生长调节剂对粤紫萁孢子萌发、原叶体增殖和孢子体形成的影响.结果表明:粤紫萁孢子中极少的可育孢子在植物生长调节剂的作用下,能够萌...     

水杉凋落物水浸提液对其种子萌发和生长的化感作用

为探究水杉凋落物的化感作用是否是影响其天然更新的障碍因素,该文设置了8种水杉新鲜凋落物和自然凋落物水浸提液浓度200、100、50、20、10、5、2、1 g·L^-1和CK,分析不同类型不同浓度凋落物水浸提液对水杉种子萌发和生长的化感作用的影响。结果表明：(1)水杉新鲜凋落物水浸提液对水杉种子发芽率和发芽势影响不显著(P>0.05),对发芽指数有显著影响(P<0.05),1、100、200 g·L^-1显著抑制种子发芽;水杉自然凋落物水浸提液对水杉种子萌发3个指标影响均不显著(P>0.05),而浓度为5、10、50、200 g·L^-1时则有抑制效应。(2)水杉种子芽长、胚轴和主根长度均在不同浓度的新鲜和自然水杉凋落物水浸提液间差异显著(P<0.05),并随着水浸提液浓度的增加(≥10 g·L^-1)而逐渐降低,尤其是50～200 g·L^-1范围内抑制作用显著增强。(3)新鲜和自然水杉凋落物水浸提液对自身种子萌发后生长的抑制作用相较于对种子萌发强,并且新鲜凋落...     

Electroporation of Bradyrhizobium japonicum

Summary Electroporation offers a fast, efficient and reproducible way to introduce DNA into bacteria. We have successfully used this technique to transform two commercially important strains of Bradyrhizobium japonicum, the nitrogen-fixing soybean symbiont. Initially, electroporation conditions were optimized using plasmid DNA which had been prepared from the same B. japonicum strain into which the{imDNA was to b}e transformed. Efficiencies of 10⁵-10⁶ transformants/g DNA were obtained for strains USDA 110 and 61A152 with ready-to-use frozen cells. Successful electroporation of B. japonicum with plasmid DNA prepared from Escherichia coli varied with the E. coli strain from which the plasmid was purified. The highest transformation efficiencies (10⁴ transformants/g DNA) were obtained using DNA prepared from a dcm ^– dam ^– strain of E. coli. This suggests that routine isolation of DNA from an E. coli strain incapable of DNA modification should help in increasing transformation efficiencies for other strains of bacteria where DNA restriction appears to be a significant obstacle to successful transformation. We have also monitored the rate of spontaneous mutation in electroporated cells and saw no significant difference in the frequency of streptomycin resistance for electroporated cells compared to control cells.     

西藏虎头兰高效植株再生体系的研究

为建立西藏虎头兰(Cymbidium tracyanum)的高效快速繁殖体系,该研究以野生西藏虎头兰种子为外植体,通过分析不同基本培养基和植物激素配比对原球茎诱导、增殖和分化的影响,以及光照时间和培养温度对试管苗生长的影响,筛选出适宜西藏虎头兰植株高效再生的条件。结果表明:适宜西藏虎头兰生长的基本培养基为1/2 MS;种子萌发和原球茎诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg·L^-16-BA+0. 5 mg·L^-1NAA,培养50 d后,有95.00%的种子发育成原球茎;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+2.0 mg·L^-1NAA,培养30 d,增殖倍数为4.25;原球茎的最适分化培养基为1/2 MS+2.0 mg·L^-1NAA+60 g·L^-1土豆泥+0.5g·L^-1活性炭,培养10 d,不定芽发生率为98.33%,培养40 d,幼苗生根率为94.67%;试管苗在温度20℃、光照时间12 h·d^-1、光照强度2 000 lx的条件下培养,苗长势好,叶片生理性焦尖发生率仅为3.33%;以腐殖土作为栽培基质,试管苗的移栽成活率为97.78%。该研究结果为保护西藏虎头兰野生资源和工厂化育苗提供了科学依据和技术支持。     

体外分子定向进化研究进展

体外定向进化作为近几年发展起来的一种蛋白质改造新策略,可以在未知目标蛋白三维结构信息和作用机制的情况下,通过对编码基因的随机突变、重组和定向筛选,获得具有改进功能或全新功能的蛋白质,使几百万年的自然进化过程在短期内得以实现,因而是发现新的生物活性分子和反应途径的重要方法,已在短短几年内取得了令人瞩目的成就.     

有机栽培龙脑百里香精油对白色念珠菌体外抑菌活性的研究

【背景】白色念珠菌(Candidaalbicans)属于条件致病性真菌,可引起严重的黏膜真菌感染及全身系统性真菌感染,是导致患者高发病率和高死亡率的主要菌群之一。【目的】探究百里香精油对白色念珠菌的抑菌活性及抑制机理。【方法】测定5种百里香精油对白色念珠菌的抑菌圈直径,分析具有高抑菌活性的精油成分。在此基础上,通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)观察精油对白色念珠菌菌体细胞形态的影响。测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)含量、胞外溶液电导率并进行碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色分析,探究精油对白色念珠菌生物膜的形成与黏附及磷脂酶活性的影响,并通过实时荧光定量PCR法分析与白色念珠菌生物膜形成相关基因(凝集素样序列基因ALS4,从酵母型向菌丝型细胞的形态转变基因HWP1、磷脂酶基因PLB1)的表达水平,探究该精油对白色念珠菌的抑菌机制。【结果】筛选出了对白色念珠菌高度敏感的有机栽培龙脑百里香精油(Thymus vulgaris CT borneol essential oil, T...