用异质培养生产单克隆抗体

单克隆抗体(mABs)的生产不仅费用昂贵,而且需要特殊的组织培养设备和技能。在体外,培养杂交瘤细胞需要添加胎牛血清(FCS)以确保生长,然而胎牛血清中含有的转铁蛋白和白蛋白会污染收获的单克隆抗体上清。因此下游纯化技术要确保将污染蛋白去除,这样不仅费时、收率低,而且需要特殊设备。粗糙的纯化过程会使单克隆抗体受损或变性。     

用抗生素消除橡胶培养物中的常见污染物

在植物组织培养系统中很少有关于成功控制微生物污染物的报道。然而,Z.A.Wilson和J.B.Power说,他们已有办法消除如污染橡胶树茎切段外植体的十种常见的细菌和酵母。他们测试了21种不同的抗污染物的抗生素。结果是,没有一种能单独对所有微生物有效,链霉菌和四环素杀死了七种细菌,红霉素杀死了六种。制霉菌素能控制酵母。每毫升培养基中加入32μg红霉素,16μg制霉菌素和16μg链霉素,即可使外植体的污染程度     

用植物细胞组织培养方法生产抗癌药物

Taxol是一种经过临床试验证明,可以有效地治疗晚期乳房癌和卵巢癌的药物。此药过去是从短叶紫杉(Taxus brevifolia Nutt.)的树皮和针叶中提取的。但短叶紫杉不仅树源稀少,而且其有效成分含量很低。据统计,从6株约100年株龄的短叶紫杉提取物制取的Taxol,只能供一位癌症患者一年治疗之用。最近,美国ESCA遗传公司已经采用植物细胞组织培养方法,对短叶     

从离体培养物生产食用色素和调味剂

目前,利用合成食用着色剂的局限性导致食品工业探索天然色素,以用于食品加工。这种 betalain色素具有多种颜色,完全无毒,且非常有价值。瑞士洛桑大学和瑞士联邦技术研究所 R.R.Leather 及研究人员发现,甜菜悬浮培养物生长率高,     

利用微生物混合培养物生产沙棘果渣单细胞蛋白

以沙棘果渣作为唯一碳源进行了单细胞蛋白发酵研究。经过筛选,从４０多株霉菌、酵母菌和细菌中选育出Ｍｙ－９３１霉菌－酵母混合培养物能迅速地将沙棘果渣转变为单细胞蛋白。在最佳条件下,沙棘果渣经发酵后,其发酵产品粗蛋白含量达４４．１％。动物饲喂试验证明此发酵产品安全无毒,能部分替代鱼粉用作蛋白饲料。     

长期植物细胞悬浮培养物的游离基、体克变及再生能力

诺丁汉大学的 E.E.Benson 及其同事的研究表明,细胞培养物再生能力的逐步丧失是由于游离基损害了活细胞的结构(如质膜和细胞器)。在研究水稻细胞悬浮培养物时 Benson 小组发现,失去再生能力的细胞培养物比未丧失再生能力的细胞培养物所含的游离基活性高。失去或降低胚发生能力的水稻细胞与维持再生能力的水稻细胞相比有毒的二级脂过氧化产物的含量相当高。此外,在丧失胚发生能力的细胞系中,通常保护细胞不受游离基损害的     

10升气升环流式生物反应器培养紫草细胞

本文采用自行设计研制的10升气升环流式生物反应器培养紫草细胞,培养周期34d．前14d为细胞生长培养,细胞生长呈正常的S型曲线,细胞增长到原细胞接人量的4倍．后20d为紫草色素生产培养,细胞增长到32倍。整个周期每升培养液可生产紫草色素0．6g,在反应器中,培养液pH值的变化与细胞生长呈正相关,与紫草色素的形成呈负相关,pH值变化规律可用于监测紫草细胞在生物反应器的生长和色素形成．     

受照离体人血培养物用FPG染色的

在辐射防护剂量学中,用染色体畸变分析 方法进行剂量测定时,应观察受照后第一次分 裂的细胞。新近发展的BrdU-Giemsa (FPG 染 色技术已使之成为可能。我们在与本实验室以 往培养时间相同的条件下〔1-31,用FPG法对受 到不同剂量61Co-Y线照射的离体人血进行观 察,以求对辐射诱发染色体畸变剂量效应关系的进一步了解。     

利用气升式内环流生物反应器培养青蒿毛状根生产青蒿素

利用自制的气升式内环流生物反应器进行青蒿（ArtemisiaannuaL．）毛状根多层培养生产青蒿素。毛状根培养物在培养过程中均匀分布在生物反应器的筛网间，或以不锈钢网为附着点向四周生长，在25℃和12h／d光照周期下，经20d分批培养获得生物量干重22．57g／L，青蒿素产量374．4mg／L，并对培养过程中蔗糖、磷酸盐、硝酸盐和氨盐消耗的动力学进行了分析。     

利用气升式内环流生物反应器培养青蒿毛状根生产青蒿素

利用自制的气升式内环流生物反应器进行青蒿(Artemisia annua L.)毛状根多层培养生产青蒿素。毛状根培养物在培养过程中均匀分布在生物反应器的筛网间,或以不锈钢网为附着点向四周生长,在25 ℃和12 h/d光照周期下,经20 d分批培养获得生物量干重22.57 g/L,青蒿素产量374.4 mg/L,并对培养过程中蔗糖、磷酸盐、硝酸盐和氨盐消耗的动力学进行了分析。     

从离体植物培养物生产有价值的次级代谢产物

茴芹精油ＡｎｉｓｅＥｓｓｅｎｔｉａｌＯｉｌ从茴芹（Ｐｉｍｐｉｎｅｌａａｎｉｓｕｍ）种子中提炼出的精油广泛应用于调味品、香料和医药中。葡萄牙科学家Ｐ．Ｍ．Ｓａｎｔｏｓ和Ａ．ＣｒｉｓｔｉｎａＦｉｇｕｅｉｒｅｄｏ及其合作者们发现，发根农杆菌转化的茴芹毛根培...     

微--物发酵稻草生产饲料蛋白培养条件的研究

研究了糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)和康氏木霉(Trichoderma Koningii)发酵稻草生产饲料蛋白的培养条件.在实验室条件下,培养基的基本组成为稻草80g,麸皮20g,(NH4)2SO42g,葡萄糖2g,KH2PO4lg.原料水为13,pH5.5～6.0,接种量10%,培养温度28℃～30℃,培养周期10d.产物分析结果表明,粗蛋白含量达到22.5%,粗纤维量为25.8%.     

从1升山羊乳成功地分泌7克AT-Ⅲ

美国Genzyme Trangenies公司从1升重组山羊乳汁中以工业水平生产7克人抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。该公司决定作为以动物工厂生产的第一种医药品开发AT-Ⅲ,并着手工业化。去年11月已向美国食品与药物管理局(FDA)申报。为进入临床试验与FDA商谈重组AT-Ⅲ的安全性评价法和GMP标准(优良制造规范)等。     

用硫酸铵沉淀法从液体培养物中纯化噬菌体λDNA

噬菌体是近年来DNA克隆最常用的载体之一。因此高质量的λDNA的制备是DNA重组的一项关键性技术。所谓高质量的λDNA制品应不被宿主菌的DNA所污染,DNA链必需完整而不被折断成碎片,并能被工具酶所加工。迄今制备λDNA的方法的主要差别在于对噬菌体颗粒的纯化步骤并存在一些缺点:PEG沉淀结合CsCI梯度离心法费用大。得率低,而且费时,不适合于多个样品DNA的快速提纯。纤维素酶DE-52层析法的缺点是大量的溶菌物过柱后,DE-52会结块,而且要有多套层析设备。直接从PEG沉淀的噬菌体颗粒提取的DNA往往纯度不高,需要有亚精胺存在时才能被限制性内切酶所切割。1989年,Ziai等首先用(NH_4)_2SO_4从平板培养法制备的噬菌体溶菌物中沉淀λgtll颗粒。用RNase处理去除污染的宿主菌RNA后,先用蛋白酶K,再用NaOH处理使λ噬菌体颗粒裂解,再用酚抽     

溶葡球菌酶5升罐发酵研究

利用含溶葡球菌酶基因的枯草芽孢杆菌转化子,进行半合成培养基的５升自动发酵罐的中试发酵条件试验,在控制转速（４５０～５００ｒ／ｍｉｎ）和通气量（１：０．５～０．８）二个条件下,采用分批培养和补料分批培养,获得了一组在半合成培养上生产溶葡球菌酶的较优化条件,产酶高峰在８．５ｈ～９ｈ,酶产量达４６５ｍｇ／Ｌ。     

用微载体悬浮培养大量生产高活性鼠干扰素

用自制的MC-1型微载体进行悬浮培养,当其浓度为5mg/ml时,可较好地用以培养和增殖鼠L929细胞。当接种细胞量为30×10~4/ml左右时,一般在3天即可增殖至1×10~6细胞/ml。用25IU/ml鼠IFN起动12—24小时,用NDV作诱生剂,并采用环己亚胺(20μg/ml)和放线菌素D(2μg/ml)进行超诱导,IFN产量可高达1×10~6IU/ml左右,比活接近1.3×10~5IU/ml蛋白。尽量去除培养基,加胰酶—柠檬酸盐消化和高速搅拌,使细胞从载体上分离,再加新鲜培养基和微载体的方法进行扩大生产看来是可行的。这些实验表明采用微载体悬浮培养细胞的技术将更适于IFN的工业化生产。     

离体培养物产物

抗变应性物质Kyoto 大学科学家 H.J.Cho 及其同伙对21个葫芦科植物品种或变种产生抗变应性物质 bryonolicacid 的能力进行测定,发现其中19种植物及其愈伤培养物可产生该种物质。bryonolic acid 仅存在于成熟植株的根部或籽苗的胚根部分,但从产 bryonolic acid 植物衍生的细胞培养物无论是取自 bryonolicacid 累积器官还是不累积该化合物的部分都产生显著量的该种物质。愈伤培养物累积 bryonolic acid 的