白毒鹅膏菌人工驯化及毒力变异试验

我们对白毒鹅膏菌 [Amanitaverna (Bull.:Fr.)Pers.exvitt]进行组织分离获得了菌丝体纯培养 ,采用 3种栽培培养基作出菇比较试验 ,以杂木屑、麦皮、干牛粪组成的培养料菌丝生长最好 ,并发现依次为天然 (干品 )→母种→菌丝的减毒变异 ,对出菇生态作了观察 ,可见子实体原基形成 ,可惜未见出菇效应。     

托光柄菇属一中国新记录种

[背景] 托光柄菇属（Volvopluteus）隶属于光柄菇科（Pluteaceae）,目前世界上仅有4个种。[目的] 调查我国东北地区大型真菌资源。[方法] 采集大型真菌标本,对其形态进行详细的观察和描述,提取DNA,测定rDNA ITS序列,基于最大似然法和贝叶斯法构建系统发育树。[结果] 2019–2020年在吉林省延边朝鲜族自治州敦化市采集的标本中,有6份标本为密执安托光柄菇V.michiganensis,该种真菌此前未在我国发现。在系统发育分析中,采自我国的密执安托光柄菇V.michiganensis与该种的模式标本聚为一个分支。[结论] 密执安托光柄菇V.michiganensis为中国新记录种。     

羊肚菌菌丝标识性抗原C6A8在菌丝不同发育阶段含量的变化规律

为找寻、了解羊肚菌(Morchella esculenta)标识性抗原在菌丝不同发育阶段含量的变化规律,建立以抗C6A8抗原的单克隆抗体为包被抗体的ELISA双抗体夹心法;检测分析在液体培养条件下营养菌丝中C6A8抗原随培养时间延长其含量变化情况;检测分析单位质量羊肚菌子实体菌柄、菌盖中C6A8抗原含量差异并与营养菌丝相比较;通过对野生羊肚菌出菇地土壤基质样本的检测,分析了解在出菇时土壤基质中C6A8抗原的含量情况。羊肚菌菌丝在液体培养条件下,单位质量的菌丝内C6A8抗原含量不随着菌丝的增长量及培养时间的增加而变化,基本保持恒定,波长450nm处OD值为0.332±0.026;子实体中C6A8抗原含量菌柄高于菌盖,且子实体柄和盖的含量均高于液体培养的营养菌丝中的含量;在出菇阶段,野生羊肚菌出菇点及周围的单位质量土壤基质样本中C6A8抗原含量范围较广,高含量点比出菇点高出近1倍。     

红汁乳菇中一个聚酮合酶基因的鉴定和表达分析

聚酮化合物具有丰富的生物活性,为了解红汁乳菇(Lactarius hatsudake)中聚酮合酶基因,从红汁乳菇基因组中分离并克隆得到LhPKS1基因,通过生物信息学分析推测其功能,并通过RT-PCR验证该基因的表达量。结果显示,LhPKS1基因全长cDNA含有6 036 bp,编码2 011个氨基酸残基,结构域顺序依次为SAT-KS-AT-PT-ACP-TE,该蛋白无跨膜结构和信号肽,聚类分析显示LhPKS1蛋白与参与生物合成苔色酸的真菌PKS蛋白聚为一支。在以10%肌醇、2%和10%的山梨醇为碳源添加物及以番茄浸粉为氮源添加物时,该基因表达量较高。研究有助于通过LhPKS1基因的过表达及异源表达,为大量获取苔色酸类化合物及其骨架提供参考。     

漏斗多孔菌液体菌种培养基及其栽培条件

为实现漏斗多孔菌资源化利用,设计单因素试验,以菌丝生物量、菌球密度和菌球直径为指标,获得漏斗多孔菌Polyporus arcularius液体菌种培养基配方为马铃薯（去皮）200g、玉米粉20.0g、蛋白胨5.0g、KH₂PO₄ 3.0g、K₂HPO₄ 1.0g,MgSO₄·7H₂O 1.5g,初始pH 5.0,并优化培养条件为装液量250mL/500mL,接种量2%,培养温度32℃,转速170r/min,种龄6d;依上述条件制备液体菌种,以固体菌种为对照,进行出菇试验,调查农艺性状,试验结果表明液体菌种接种后,菌袋满袋时间提前7d,子实体原基产生时间提前8d,头潮菇鲜重提高22.5%;配方试验结果表明,以细木屑为主料的配方产量最高,头潮菇鲜重为270.6g/袋。     

中国石蕊科地衣研究之五中国石蕊属地衣一新种

本文报道了产于中国西南地区的石蕊属地衣一新种:亚厚叶石蕊(Cladoniasubincrassata S.Y.Guo),其主要的次生代谢产物为松萝酸和泽屋菇.文中还从形态、化学和地理分布方面将新种和邻近种厚叶石蕊(Cladonia incrassata)进行了比较.     

大球盖菇硒多糖体内抗氧化能力检测

采用液体发酵的方法对大球盖菇菌丝进行富硒培养,提取硒多糖进行抗氧化能力测定.结果表明,大球盖菇硒多糖能明显提高小鼠血中SOD、GSH-Px的含量,能在一定程度上显著降低血中MDA的含量,具有显著的抗氧化功能.     

中国黑粉菌补遗Ⅴ

摘要:本文报道我国黑粉菌五种新纪录。1)刺蓼轴黑粉菌(Sphacelotheca polygoni-senticosi(P. Hennings) Miyabe & Takahashi)寄生于假长尾叶蓼(Polygonum longisetum De Bruyn)和长尾叶蓼(Polygonum posumbu Hamilt.)。此种与水蓼轴黑粉菌(Sphacelotheca hydropiperis(Schum.) de Bary)的区别是黑粉孢子表面纹饰瘤状,常连接为脊状或不完全网状。2)七筋菇条黑粉菌(Urocystis clintoniae (Komarov) Vánky)寄生于七筋菇(Clintonia udensis Trautv. &Mey.)和扭柄花(Streptopus obtusatus Fassett)。3)宫部条黑粉菌(Urocystis miyabeana Togashi& Onuma)寄生于轮叶黄精(Polygonatum verticillatum (L.) All.)。4)喜马拉雅黑粉菌(Ustilagohimalensis (Kakishima & Ono) Vánky & Oberwinkler)寄生于细穗支柱蓼(Polygonum suffultumMaxim. var. pergracile (Hemsl.) G. Sam.)。5)伊朗黑粉菌(Ustilago iranica H. Sydow)寄生于远东友友草(Achnatherum extremiorientale (Hara) Keng)。     

血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxⅡC-/apxⅠA+基因缺失重组菌株的构建与鉴定

通过接合转移和SacB负向筛选方法,成功构建了一株apxⅡC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株。首先构建重组转移质粒pEHA1。将pEHA1转化供体菌大肠杆菌(E.coliβ2155),并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养约5h,然后涂到含氯霉素抗性的培养基培养,挑取阳性克隆,接种到无抗性液体培养基,培养后涂于含有蔗糖的的固体培养基,培养一定时间后挑取蔗糖抗性的克隆,即可得到目的突变株。通过PCR、遗传稳定性、外毒素分泌、重组位点序列分析证明重组菌构建成功。通过对重组菌生物学特性进行初步研究,表明突变株生长能力未受影响,对小鼠毒力显著降低。该突变株构建体系的建立为猪传染性胸膜肺炎减毒活疫苗的开发及对胸膜肺炎放线杆菌新基因的功能研究奠定了良好基础。     

平菇汤培养基的研究及应用

研究以平菇汤为基础成分,代替动物组织提取物,制备平菇液体培养基,平菇血琼脂培养基。平菇血琼脂培养基对１４０份痰及中段尿标本阳性菌的检出率为３４．３％,传统血琼脂培养基对阳性菌的检出率为３２．１％。平菇液体培养基和普通营养肉汤培养基同时对８０份分泌物标本培养,其检出率分别为３８．８％和３６．３％（ｐ＞０．０５）。平菇汤培养基制备简便,成本低廉,有较好的实用价值。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究*

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生速度极快,涂布平板３ｄ后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在ＰＧＰＭ再生培养基上再生率为０．９７～２．０％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养１～２ｄ,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达７７．６％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为１。     

网盖粉菇属新记录种

在长白山国家级自然保护区管理局寒葱沟,红松阔叶混交林内采到网盖粉菇标本,生于榆(Ulmus sp.)倒腐木上,据资料记载该种分布在英国及欧洲,在国内尚未有记载,是我国的一个新记录种,本文报道该种的形态特征及分布。     

大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究

大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生程度极快,涂布平板3d后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在PGPM再生培养基上再生率为0．97－2．0％,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养1－2d,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达77．6％,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为1。     

在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术初探

从福建三明真菌研究所(福建省三明市375000)购入红平菇优良菌株,在哈尔滨地区对其进行了用液体菌种代替固体原料的栽培技术研究。包括一级种培养基的筛选、液体菌种培养基的筛选、栽培种制作与培养以及出菇管理技术。结果表明:对于一级种,红平菇在PDA和马铃薯半组合培养基上都生长良好,菌丝洁白、粗壮、浓密,7～8d长满斜面;红平菇在玉米粉葡萄糖蛋白胨和麦麸葡萄糖蛋白胨液体培养基上生长较好,7d时菌丝长满培养液,菌丝量较多;用与平菇相似的常规方法制作栽培种、养菌处理与出菇管理,红平菇的产量达100%～150%。由于采用了液体菌种的栽培模式,从制种到采收的整个过程共需要50～60d,比二级种为固体菌种的常规方法缩短26～31d,大大地缩短了生产周期,提高了经济效益。     

杏鲍菇液体培养研究初报

采用液体摇瓶培养方法,对杏鲍菇适宜的液体培养基和液全培养条件（适宜温度,摇瓶装量,摇瓶转速,接种量,培养基初始pH等）进行了探讨。结果表明,杏鲍 菇适宜的液体培养基为：葡萄糖3%,蛋白胨0.2%,KH2PO40.05%,MgSO40.05%,pH6.5,适宜的液全培养条件为：培养温度25℃,培养基的初始pH6.5,摇瓶装量100-140ml/500ml,摇瓶转速150r/min,接种量10%,最佳培养时间7d。     

芥蓝miR156a家族进化特性及表达分析

miRNA广泛参与植物的发育过程。芥蓝形态多样,叶片发育因品种而异。为了解miR156a家族的进化特性及其在芥蓝叶片发育中的表达模式。该研究对芥蓝miR156a成员及其前体pre miR156a成员进行生物信息学分析,比较不同品种芥蓝叶形的差异,并采用qRT PCR方法分析芥蓝不同组织部位中pre miR156a的表达水平、以及叶形相似的芥蓝品种‘翠宝’和‘改良香菇’中不同类型叶片的pre miR156a成员及其靶基因的表达水平。结果表明：(1)多序列比对和进化树分析发现芥蓝miR156a家族成员和pre miR156a 3p_1在进化过程中高度保守;二级结构预测发现pre miR156a每个成员均能形成茎环结构并包含2～3个miR156a成员序列;靶基因预测显示miR156a 5p和miR156a主要靶向SPL,而miR156a 3p_1则靶向CTPS等不同的基因。(2)‘翠宝’和‘改良香菇’芥蓝的叶形最为相似,qRT PCR分析显示,pre miR156a在‘翠宝’营养生长期的叶片中高度表达。(3)pre miR156a成员在‘翠宝’和‘改良香菇’不同类型叶片中差异表达,pre miR156a主要在成熟叶和菇叶中表达,而pre miR156a 3p_1和pre miR156a 5p在第一片真叶中表达量更高。(4)靶基因分析的结果在不同品种中呈现不同趋势,‘翠宝’成熟叶中SPL10/15高表达,SPL2表达量降低;‘改良香菇’中SPL10在成熟叶和菇叶中表达降低,SPL15在菇叶中高表达,SPL2在不同类型叶片中表达无差异。研究认为,miR156a成员及其靶基因SPL2/10/15可能参与调控芥蓝叶片发育,不同品种中作用的靶基因可能存在差异,从而导致了各品种芥蓝叶片发育的差异。     

火菇属野生菌株发酵液对栽培菌株的化感效应

为探究火菇属Flammulina野生菌株发酵液对栽培菌株的影响,以火菇属野生柳生金针菇F. rossica F52、野生金针菇F. filiformis F39和栽培金针菇F. filiformis F47为供试菌株,采用固体平板培养和液体发酵的方法,对比了添加不同体积分数火菇属野生菌株发酵液对栽培菌株平板中菌丝长速、液体发酵中菌丝生物量、干质量及漆酶和淀粉酶活力的影响。结果表明：不同体积分数野生金针菇菌株F39发酵液对栽培菌株F47菌丝长速有抑制作用,对发酵液中菌丝生物量无显著影响,当添加发酵液体积分数为50%时可显著提高菌株F47发酵液中漆酶活力,当体积分数为40%时,可显著提高菌株F47发酵液中淀粉酶的活力（P<0.05）;添加不同体积分数的野生柳生金针菇菌株F52发酵液对菌株F47除淀粉酶外其他指标均影响显著,添加体积分数为30%的发酵液对栽培金针菇F47菌丝长速具有显著的促进作用,当添加发酵液体积分数为40%时,对菌株F47液体发酵中菌丝干质量和漆酶活力均有显著促进作用（P<0.05）。证明了化感效应不仅存在于属间,在同属下的种间也存在。     

多株功能菌种混合培养条件的响应面优化及其生长关系

对3种具有土壤中多种重金属污染修复和病虫害防治功能的光合细菌（Photosynthetic bacteria,PSB,包括Rhodobacter sphaeroides H菌株、Rhodopseudomonas palustris N菌株和Rhodospirillium rubrum M菌株）、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis, BS）和植物乳酸杆菌（Lactobacillus plantarum, LP）进行混合培养,利用单因素和响应面试验优化培养基配方以及培养条件。确定功能菌混合培养的最佳条件：以光合细菌培养基为基础培养基,外加碳源为10 g/L蔗糖、氮源为1.25 g/L硫酸铵、培养温度为31.5 ℃、初始pH值为7.1、接种量为接种后的初始培养活菌数1.90×10⁹cfu/mL、培养时间为28.0 h。通过功能菌的加性模型法、生长动力学以及混合培养的生长关系分析表明,光合细菌、枯草芽胞杆菌和植物乳酸杆菌的生长均存在互惠互利关系。     

临床型研究生培养与住院医师培训相结合可行性研究

目的 研究临床型研究生培养与住院医师培训相结合的可能性。方法 对上海某三级甲等医院临床型研究生和部分临床带教老师进行问卷调查。结果 对于临床型研究生培养纳入住院医师培训,对其临床能力培养是否有帮助和对就业是否有帮助,带教老师和学生之间看法具有显著差异（P ＜0.05）;临床型研究生医师资格被带教老师和学生认为是存在的障碍第一位;带教老师认为临床型研究生培养纳入住院医师规范化培训有必要的比例明显高于学生。结论 从经济上、技术上、组织管理和社会影响进行分析,临床型研究生培养与住院医师培训相结合有其可行性,两条途径的临床能力培训并轨后,将利于统一的专科医师准入制度的建立。     

裸脚菇0612-9液体菌种优化及其对后续发酵产活性物质的影响

裸脚菇0612-9次级代谢产物具有强烈抗青绿霉活性,可作为微生物源防腐剂用于柑橘保藏,但是其发酵周期长,产出能耗大效率低。用摇瓶对裸脚菇0612-9的液体菌种培养基、培养条件进行优化并对优化后液体菌种接种种龄、接种量进行探索,最后用5L发酵罐进行放大发酵验证。取样计数测定菌丝球数量、过滤称重测定菌丝干重、HPLC监测活性物质Ⅱ的积累、牛津杯法评价抗青绿霉活性。经研究最佳碳源为玉米粉和麦芽糖,最佳氮源为蛋白胨,最佳液体菌种培养基组成为：玉米粉30g/L、麦芽糖10g/L、蛋白胨15g/L、KH₂PO₄ 2g/L、MgSO₄·7H₂O 1g/L;最佳培养条件：起始pH 5、接种3×Ф7mm菌块、装液量100mL/250mL三角瓶、温度28℃、转速160r/min;优化前菌丝球数46个/10mL,菌丝干重0.28g/100mL,优化后菌球数达985个/10mL,菌丝干重达0.69g/100mL,分别为优化前的21.4倍、2.43倍;后续发酵使用种龄9d的液体菌种、接种量7.5%。优化后液体菌种在发酵罐中后续发酵周期从10d缩短至5d,缩短50%,产量比优化前提高8.28%。