菠萝粉蚧和新菠萝灰粉蚧溴甲烷熏蒸处理研究

菠萝粉蚧Dysmicoccus brevipes (Cockerell)和新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes(Beardsley)是菠萝等热带水果上的重要害虫,均属我国进出境水果贸易中需要检疫处理的对象.为了建立两种粉蚧有效的除害处理方法,本文测定了溴甲烷熏蒸2h对两种粉蚧各虫龄的致死毒力.结果表明,两种粉蚧对溴甲烷具有相似的毒力反应,1龄若虫的耐药性明显低于其它各虫龄.菠萝粉蚧LC99最大值在19.4℃和28.8℃下均为3龄若虫,分别为30.32 g/m3和18.17 g/n3;新菠萝灰粉蚧LC99最大值在19.2℃和29.4C下分别为3龄若虫和成虫,分别为29.19 g/m3和18.41 g/m3.确认实验表明,在25℃下,采用熏蒸剂量25 g/m3,在19℃下采用40 g/m3熏蒸2h可以使菠萝粉蚧和新菠萝灰粉蚧达到安全检疫处理要求.     

新菠萝灰粉蚧生活习性初探

新菠萝灰粉蚧是严重为害剑麻的外来害虫。该虫主要为害剑麻的根、茎、叶片部位。本文对新菠萝灰粉蚧各个虫态的形态特征进行了描述,并对其生活习性进行了初步的研究。     

新烟碱类杀虫剂对新菠萝灰粉蚧的毒力

新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes Beardsley是近年我国新发现的一种外来物种,是危害剑麻的主要害虫之一,本研究旨在筛选出防治新菠萝灰粉蚧的有效杀虫剂。采用喷雾法测定了啶虫脒、呋虫胺、噻虫胺、噻虫嗪和烯啶虫胺等5种新烟碱类杀虫剂对新菠萝灰粉蚧不同虫态的室内毒力。研究结果表明:5种新烟碱类杀虫剂对新菠萝灰粉蚧均有显著的触杀作用,对新菠萝灰粉蚧的毒力随着龄期的增长而减小。其中,烯啶虫胺对新菠萝灰粉蚧的毒力最高,对新菠萝灰粉蚧1龄、2龄、3龄若虫和雌成虫的LC_(50)分别为0.1406 mg/L、0.1550 mg/L、0.3870 mg/L和0.5060 mg/L。啶虫脒和噻虫嗪的毒力低于烯啶虫胺,呋虫胺和噻虫胺的毒力最低。不同龄期新菠萝灰粉蚧对同一药剂的敏感性表现为:1龄2龄3龄雌成虫。烯啶虫胺对新菠萝灰粉蚧的触杀毒力最好,可作为防治新菠萝灰粉蚧的备选药剂。     

快速鉴定新菠萝灰粉蚧的分子标记技术

新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes(Beardsley)是一种严重为害剑麻、番荔枝等经济作物的入侵性害虫。由于粉蚧类昆虫体型较小,且外部形态十分相似,难以达到快速准确识别。本文利用分子标记技术,研究了新菠萝灰粉蚧的快速鉴定方法。通过对新菠萝灰粉蚧、扶桑绵粉蚧、双条拂粉蚧、杰克贝尔氏粉蚧、大洋臀纹粉蚧、木槿曼粉蚧、甘蔗粉蚧和木瓜粉蚧等8种粉蚧的序列进行分析,针对新菠萝灰粉蚧设计了1对特异性引物,其扩增片段大小为552 bp(Gen Bank登录号为MF 363108),该引物对其它7种粉蚧没有扩增能力。该引物不仅对新菠萝灰粉蚧成虫具有扩增效能,对1龄若虫、2龄若虫和3龄若虫都具有同样的扩增能力,其最低检出阈值为437.5 pg/μL。该技术的建立,实现了在剑麻等苗木调运过程中对新菠萝灰粉蚧的快速准确鉴定,同时对新菠萝灰粉蚧的检疫和监测也具有重要的意义。     

高温胁迫对新菠萝灰粉蚧不同地理种群保护酶活性的影响

为分析高温胁迫下新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes Beardsley不同地理种群保护酶活性的差异,阐明该粉蚧对高温适应性的生理响应。本研究以室内26℃处理为对照测定了高温胁迫下(35℃、38℃、41℃、44℃)新菠萝灰粉蚧4个不同地理(广西、广东、海南和云南)种群雌成虫过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)及谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性。结果表明,在35～44℃高温胁迫下,新菠萝灰粉蚧不同地理种群雌成虫POD和GST活性均高于常温对照的,PO活性均低于常温对照的(除云南种群38℃处理外);在35～44℃高温胁迫下该粉蚧3种酶活性变化均具有随着处理温度的升高呈先升高后降低趋势。在常温26℃下,该粉蚧除了广西、广东种群POD活性显著高于海南、云南种群外,4个种群的PO、GST间的活性无显著差异。在38℃、41℃和44℃高温处理下广西、广东、云南种群间的POD活性无显著差异。在相同高温处理下,除广东种群38℃处理的GST活性显著低于其它种群的外,其它相同温度处理的不同种群间的GST活性无显著差异。说明新菠萝灰粉蚧广西、广东、云南种群的POD对38℃、41℃、...     

γ-射线对新菠萝灰粉蚧辐照效应的转录组测序与分析

检疫辐照处理通过电离辐射来灭杀进出口货物中的检疫性害虫。明确辐照处理的分子机制,找到既能有效灭杀处理对象,而又能量消耗经济,且不会对货物质量造成损伤的合适辐射剂量是研究辐照处理的关键基础性问题。本研究对检疫性害虫——新菠萝灰粉蚧分别采用100 Gy和240 Gy两种辐照剂量处理,经饲养24 h后采用高通量测序技术来研究其基因表达水平的变化。结果表明低剂量组和高剂量组中分别有3.3%和4.4%的基因相对与对照组产生了差异表达,而且有2.4%基因在两组处理中都表现出了表达差异,占差异表达基因总量的一半以上,且这些基因的表达量大多发生下调。聚类分析显示,这些差异表达的基因主要富集在各种细胞组分、基因表达调控等功能类别中,说明检疫辐照主要通过损伤细胞结构和干扰生物的基因表达调控过程来实现害虫不育,且辐照强度越大,对处理虫体的损伤越大。     

基于RNA-Seq高通量测序技术的菠萝洁粉蚧转录组研究

为了探索调节昆虫世代历期的相关基因,研究了菠萝洁粉蚧在转录水平上对温度的响应。组装后获得49 898个Unigenes,其平均长度为1 007 bp;其中有15 015 (30.10%)个Unigenes被成功注释到Nr、SwissProt、KOG和KO等功能数据库中。DEG分析表明,7 960个Unigenes被诱导差异表达,其中MIX21相对于MIX27表达量上调的有5 080个,下调的有2 880个。差异基因代谢通路分析表明,差异表达基因中涉及长寿调节途径(Longevity regulating pathway)的有3个通路,其中21℃饲养下的菠萝洁粉蚧种群胰岛素/IFG-1信号通路关键因子DAF-2、雷帕霉素靶标TOR信号通路关键因子RSK-1和S6K显著下调,相关因子被抑制表达,很好地解释了其世代发育历期比27℃饲养下长的现象。21℃饲养下的菠萝洁粉蚧种群HSP60较27℃饲养下的显著上调,而HSPs有上调也有下调,显示热休克蛋白HSP对温度的反应呈现一定的多样性、复杂性。这些发现将有助于今后昆虫寿命分子调节机制的研究,DAF-2、S6K、RSK-1等相关基因未来或将应用于调节一些经济昆虫的生长周期。     

菠萝洁粉蚧天敌调查及香港角毛瓢虫的捕食作用研究

调查发现我国雷州半岛菠萝洁粉蚧Dysmicoccus brevipes的天敌有4科8种,其中香港角毛瓢虫Horniolus hisamatsui Miyatake、丽草蛉Chrysopa formosa Brauer及一种瘿蚊Aphidoletes sp是优势天敌。香港角毛瓢虫Hhisamatsui、细毛小瓢虫Scymnus (Pullus) syoitii Sasaji为广东新记录种。香港角毛瓢虫Hhisamatsui捕食菠萝洁粉蚧的量随猎物密度的增大而增加,且随着龄次的增加而增加,但当猎物密度达到一定程度后,其增长率就随猎物密度的增大逐渐减缓,即捕食量与猎物密度为逆密度制约关系,呈负加速曲线,以Holling(1959）圆盘方程进行模拟的结果是属于Holling-Ⅱ型。香港角毛瓢虫1龄、2龄、3龄、4龄幼虫和成虫对菠萝洁粉蚧2 龄若虫的理论最大捕食量分别为1153头/天、2611头/天、6173头/天、7042头/天、7407头/天。     

γ射线辐照嘧啶核苷水溶液的电子自旋共振（ESR）研究

亚硝基特丁烷（ＭＮＲ）为捕集剂,利用自旋捕集技术,对γ射线辐照嘧啶苷水溶液进行了ＥＳＲ研究,确定了胸苷、尿苷和胞苷可产生的自肇捕集自由基的类别,并讨论了自由基形成的机制。     

60Co-γ射线辐照协同氢氧化钠预处理对油菜秸杆酶解产糖的影响

研究了辐照协同氢氧化钠预处理油菜秸秆对酶解产还原糖的影响。利用响应面法对氢氧化钠反应条件进行了优化,得出最优条件为氢氧化钠浓度为2．38％,反应温度为100℃,反应时间为0．5h。这一条件预期还原糖产量为524．93mg／g,通过实验验证,实际还原糖含量（528．51mg／g）能够很好地与预期相吻合。扫描电镜观察表明,辐照协同氢氧化钠预处理后秸秆表面积明显增大,出现很多蜂窝状孔洞结构,能够有效增大酶解可及表面积,从而提高酶解效率。     

粉菠萝组蛋白去乙酰化酶基因AfHDI的克隆及在乙烯处理下的表达分析

组蛋白修饰在植物发育和防御反应中发挥着重要的作用。为研究组蛋白去乙酰化酶基因肋,的基本特征及其在乙烯调控凤梨科植物开花过程中的生物学功能,通过筛选粉菠萝茎尖转录组测序数据并结合RACE技术分离得到AfHDl基因cDNA全长序列。该基因的开放阅读框长为1548bp,编码516个氨基酸,其理论分子量为58．28kDa,等电点为5．23。由该基因编码的蛋白属于组蛋白去乙酰化酶RPD3／HDAl超家族成员,具有该家族特有的HDAC保守结构域,该蛋白与水稻和玉米中HDl蛋白的同源性均达到87％。实时荧光定量PCR分析表明,AfItDI基因的表达受乙烯诱导,处理后1d的表达量与0h相比,提高了4倍,推测组蛋白去乙酰化酶基因AfHDJ可能与粉菠萝的乙烯信号反应有关。     

60Co-γ射线辐照孤挺花诱变效应研究

用不同剂量(5 Gy、10 Gy、15 Gy、20 Gy)60Co-γ射线辐照处理3年生孤挺花鳞茎,并设置对照组,对其成活率及幼苗性状进行田间观测。结果表明:成活率、叶长、叶宽随辐照剂量的增加呈递减趋势。运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法对不同辐照剂量下的植株叶片做同工酶分析,结果表明,在5 Gy剂量辐照下,过氧化物酶和酯酶的活性最强。     

用红外光谱法研究60CO-γ射线辐照对三斑海马粉主要成分的影响

为了考察辐照剂量对名贵中药成分的影响,本研究用红外光谱法对经剂量为0、1. 5、3、4. 5、6、9、12、15、18、19. 5和21 kGy辐照的三斑海马粉进行了研究。蛋白质是三斑海马粉的主要成分,其含量高达70%以上。结果表明,经1. 5、3、4. 5和6 kGy剂量辐照,样品的红外光谱中代表蛋白质与脂类吸收带的峰形与峰位几乎没有变化,而高于9 kGy的剂量辐照后,样品的红外光谱代表蛋白质与脂类吸收带的峰形与峰位变化较大。由此可说明,辐照剂量不超过9 kGy,辐照对样品的蛋白质二级结构影响较小;剂量高于9 kGy辐照后,辐照对样品的蛋白质二级结构影响较大。此研究结果可为核辐照企业对三斑海马粉辐照剂量的设置提供参考。     

生物大分子功能的研究:--酵母甘露聚糖对8.2Gy60Coγ-射线辐照小鼠的辐射防护作用

目的：为了解酵母甘露聚糖对小鼠辐射损伤的保护作用。方法：６０ Ｃｏ γ射线以８２ Ｇｙ 照射 ６０ 只小鼠,雌雄各半。其中 ３０ 只在辐照前 １０ 分钟腹腔注射 ４００ｍ ｇ Ｍ ａｎ／ｋｇ,另 ３０ 只注射生理盐水。结果：从比较研究项目：鼠的存活率,成活天数;４０ 天体重的动态变化;外同血 Ｗ Ｂ Ｃ、 Ｒ Ｂ Ｃ及 Ｐ Ｌ Ｔ 及脾指数等的数值差异上,均显示酸母甘露聚糖对６０ Ｃｏ γ射线辐射损伤有保护作用。同时也发现该保护作用存在性别敏感性差异。结论：酵母甘露聚糖是一种比较好的辐射防护剂;酵母甘露聚糖对雄性鼠辐射损伤的保护作用显著,有统计学意义（ Ｐ＜ ００１）。     

宁夏粉蚧科昆虫研究（半翅目：蚧总科）

记述宁夏同族自治区粉蚧科Pseudococcidae昆虫24属41种,其中包括2新种:宁夏草粉蚧Fonscolombia ningxiana,sp.nov.和冰草长粉蚧Longicoccus agropyri.sp.nov.;2中国新记录种:多管刺粉蚧spinococcus multitubulatus(Danzig,1980)和孤独条粉蚧Trionymus singularis Schmutterer,1952:1新组合:赖草长粉蚧Longicoccus leymicola(Tang,1992),comb.n.(移自少粉蚧属Mirococcus Borchsenius);Puto jarudensis Tang(1992)为Ceroputopilosellae Sulc.1898的新异名.模式标本保存在山西农业大学蚧虫研究中心.     

不同浓度红景天苷对γ射线和质子辐照质粒DNA的影响

利用14．2MeV的质子和60↑Co产生的γ射线在200Gy的剂量下分别对添加了不同浓度红景天苷的pUC19质粒DNA样品进行了辐照,凝胶电泳分析结果表明,红景天苷在两种辐照过程中均对DNA具有一定的保护作用,并且随着浓度的增加保护作用增强。同时还发现质子辐照后DNA样品中出现了线性形态的,而γ射线辐照后则没有出现,再次证实质子对DNA的损伤作用强于γ射线,这应该和质子与物质相互作用复杂以及质子对物质的直接电离作用相关。     

60Coγ射线辐照处理对枇杷次生枝果实品质性状的影响

探讨了60Coγ射线照射解放钟枇杷枝条,对次生枝果实外观品质和口感品质性状的诱变规律。结果表明:在14.4 Gy~28.8 Gy辐照剂量范围内,对风味品质、果肉颜色、果皮颜色、锈斑、肉质、汁液等有较强的诱变效应(诱变频率0.48%~44.06%);诱变效应为风味>果肉颜色>果皮颜色>肉质>锈斑>汁液,有益诱变效应为:风味>果皮颜色>汁液>肉质;综合比较认为,要改善解放钟枇杷果实外观品质和口感品质,宜选用24.0 Gy左右的辐照剂量。     

60Co-γ射线辐照毛竹种子的过氧化物同工酶和RAPD分子检测的研究

利用6种不同剂量的60Co-γ射线辐照毛竹种子,对辐照后的毛竹种子进行了过氧化物酶（POD）同工酶检测和RAPD分子检测.结果表明,过氧化物酶的活性在30 Gy和120 Gy时明显增强,其原因是毛竹在60Co-γ射线辐照胁迫下的保护效应和伤害效应.RAPD分析表明毛竹不同辐照剂量之间的DNA存在明显差异,高剂量γ 射线辐照对DNA分子的影响较大,能引起碱基序列的改变;对碱基序列差异片段测序并比对,发现部分片段与已知序列有高达83 %的同源性,部分差异片段与GeneBank中的已知序列没有较高的同源性,应该属辐照引起的DNA序列变异.同工酶和RAPD分子检测为毛竹的诱变育种参数的制定提供了理论依据.     

60Coγ射线辐照花魔芋球茎的早期诱变效应研究

本试验开展了花魔芋早期诱变效应研究。通过^60Coγ射线辐照后的植株苗期发育观察和根尖细胞学检测分析,结果表明魔芋辐射诱变效应显著：辐照诱发核畸变和染色体畸变,且变异频率与剂量呈二次曲线关系;低剂量时对细胞分裂有刺激作用;辐照抑制芽体发育、苗期生长,抑制效应随剂量增加而加大,直至产生致死作用。依据花魔芋的辐射敏感性,建立了魔芋辐照诱变体系,以催芽球茎为诱变材料,诱变剂量范围为0Gy～50Gy,剂量率为1Gy／min,中等适宜剂量为7Gy～10Gy,致死剂量50Gy。     

香味蒜蓉60Co-γ射线辐照杀菌剂量计算机模糊优化的数值算法

本文首次提出香味蒜蓉～60Co-γ射线辐照杀菌单元操作方法,设计出了辐照杀菌剂量计算机模糊优化的数值算法,利用此算法设计出了FORTRAN语言处理程序,通过在FACOMM340S计算机上的实际运行,优化出了最佳杀菌剂量．