斑马鱼二价体制备与多重带显带的方法学探讨

采用碱性低渗结合高氯仿一步显带技术获得了斑马鱼二价体高分辨多重G带,所出现的带纹丰富,反差明显。采用地高辛为标记的以限制性内切酶AfuⅠ介导的原位切口平移技术使斑马鱼二价体上呈现出类G带的多重带,获得了明暗反差强烈的带纹结果。通过比较多个不同分裂相的多条染色体,发现带纹的分布具明显特征性．并且特征一致,带纹数目基本吻合。首次从方法学上对斑马鱼二价体的制备过程及多重带显带技术进行了分析、探讨和总结,力求将该技术程序化、系统化,使其具有可重复性和可操作性,并对显带的可能机理进行了讨论。     

大鳞副泥鳅粗线期二价染色体分带研究

报道了一种鱼类二价体显带的新,采用ＰＨ值在７．２－７．４之间的低涌液对大鳞副泥鳅精巢进行整体长低渗、卡诺固定液处理方法得到粗线期二阶染色体的高分辨Ｇ带,其带纹特征和数目相对稳定且清晰可辨。与胰酶显和ＥＤＴＡ显相比具有操作简单,耗时短以及二价体分散相对较好等特点,这一方法在所有显带方法中最为简便。     

家猪减数分裂粗线期二价体与有丝分裂中期染色体的比较研究

以性成熟公猪睾丸和外周血为材料,采用长低渗、高氯仿卡诺固定液固定和外周血细胞培养制备减数分裂粗线期二价体和有丝分裂中期染色体,通过对二价体和有丝分裂中期染色体分裂指数和长度的比较研究,发现二价体的分裂指数和长度分别是有丝分裂中期染色体的5倍和3．42倍（1．87～5．98）;同时以12号染色体为例,比较了二价体上的染色粒结构带与有丝分裂中期染色体G－带,表明染色粒结构带比中期染色体G－带纹丰富,而与早中期G－带带织吻合。     

家猪减数分裂粗线期二价体与有丝分裂中期染色体的比较研究

以性成熟公猪睾丸和外周血为材料,采用长低渗、高氯仿卡诺固定液固定和外周血细胞培养制备减数分裂粗线期二价体和有丝分裂中期染色体,通过对二价体和有丝分裂中期染色体分裂指数和长度的比较研究,发现二价体的分裂指数和长度分别是有丝分裂中期染色体的5倍和3.42倍(1.87～5.98);同时以12号染色体为例, 比较了二价体上的染色粒结构带与有丝分裂中期染色体G-带,表明染色粒结构带比中期染色体G-带带纹丰富,而与早中期G-带带纹吻合。 Abstract:Meiotic pachytene bivalents were obtained from porcine testes using prolonged hypotonic treatment combined with high chloroform Carnory's fixative solution. Mitotic metaphase chromosomes were prepared from blood cell culture. Comparative studies on division index and length of pachytene bivalents and mitosis metaphase chromosomes showed that those of the former are 5 times higher and 3.42(1.87～5.98) times longer than the latter, respectively. Chromomere maps of bivalents are more abundant than mitotic metaphase G-bands, while they are correspondent with mitotic early-metaphase G-bands. The result was found by using the chromosome 12 as a sample.     

番茄的CPD带型和45S rDNA位点的鉴别

采用CPD（PI和DAPI组合）染色对番茄减数分裂粗线期和有丝分裂中期染色体进行了显带分析,随后用两种不同的45S rDNA克隆在相同的分裂相进行了荧光原位杂交定位分析。CPD染色在8条粗线期染色体上显示出了10条红色的CPD带纹,在6对有丝分裂中期染色体上显示出了12条CPD带纹。有丝分裂中期染色体上的CPD带纹与粗线期染色体上显著的带纹具有对应性。用改良的CPD染色程序清晰而稳定地显示出这些特征性的CPD带纹为番茄的染色体,特别是有丝分裂中期染色体提供了新的识别标记。用番茄的一个45S rDNA克隆进行的荧光原位杂交,不仅在位于2号染色体短臂的随体上显示了强的杂交信号,而且在粗线期染色体的5个CPD带区或有丝分裂中期染色体的4对CPD带区显示了弱的杂交信号。然而,用来自小麦的45S rDNA克隆pTa71进行的原位杂交却只在随体上显示了杂交信号。鉴于所用的两个45S rDNA克隆在序列上的差异,推断在番茄基因组中只有随体含有45S rDNA单位的编码区,即番茄只有一对45S rDNA位点。     

蛆症异蚤蝇减数分裂染色体观察

以蛹精巢和卵巢组织为材料,采用空气干燥法制备染色体标本,Giemsa和硝酸银分别染色,对蛆症异蚤蝇Megaselia scalaris减数分裂染色体行为进行研究。结果表明:蛆症异蚤蝇的染色体数目n=3,由2条中着丝粒染色体和1条端着丝粒染色体组成;粗线期,第2条二价体具有较强的嗜银性,可能为性染色体;晚粗线期,第1条二价体的同源染色体之间出现一条细线,类似于联会复合体;终变期,第2条二价体形成环状结构;晚终变期,在3条二价体染色体臂上均产生条带,根据二价体着丝粒处是否成环可以将3条二价体分开。     

牛蛙（Rana catesbeiana）染色体高分辨带显示的初步探讨

本文报道显示牛蛙染色体高分辨带的一种方法。通过2—巯基乙醇的预处理和Ohnuki低渗液和低渗及火焰干燥可使染色体伸长并显出高分辨带纹,且这种带纹和人的高分辨G带类似。初步探讨了牛蛙染色体高分辨显带机理。     

一位46,XY,t(11;18)平衡易位携带者的联会复合体分析

运用表面铺展联会复合体(synaptonemal cotnplex,SC)的电镜技术对一位46,XY,t(11;18)平衡易位携带者性细胞进行SC观察,分析了30个精母细胞(从早粗线期→晚粗线期)中SC图象,这些精母细胞中均显示了1个性二价体、20个常染色体二价体(SC)和1个四价体。对其中的21个四价体配对行为进行分析,发现有20个四价体发生部分异源配对,其中4、14和2个四价体分别发生在早、中和晚粗线期,发生在早粗线期的异源配对是一种直接的异源配对,与以前报道的发生在晚粗线期经联会调整的异源配对不同。并对该患者发生生殖失败的机制进行了讨论。     

大麦G—带变动性以及与染色粒的一致性分析

以大麦为材料,进行了Ｇ－带带纹变动性分析以及Ｇ－带与减数分裂粗线期染色粒的比较,有丝分裂早中期至中期两个不同时期Ｇ－带带纹总数减少３６％,染色体组的绝对长度缩短２５％。带数减少的幅度大于染色体长度缩短的幅度,染色体组中每条染色体之间带纹减少的比例不尽相同,变幅在０．２９－０．５０之间,不同染色体绝对长度减少的幅度在０．２７－３．７０μ之间,从早中期至中期,每单位染色体绝对长度带数具相对减少的趋势。     

大麦G－带变动性以及与染色粒的一致性分析

以大麦为材料,进行了Ｇ－带带纹变动性分析以及Ｇ－带与减数分裂粗线期染色粒的比较。有丝分裂早中期至中期两个不同时期Ｇ－带带纹总数减少３６％,染色体组的绝对长度缩短２５％,带数减少的幅度大于染色体长度缩短的幅度。染色体组中每条染色体之间带纹减少的比例不尽相同,变幅在０．２９－０．５０之间。不同染色体绝对长度减少的幅度在０．２７－３．７０μ之间。从早中期至中期,每单位染色体绝对长度带数具相对减少的趋势。选择第６染色体进行的比较显示,减数分裂的染色粒与有丝分裂的Ｇ－带带纹之间具有很好的对应关系,Ｇ－带带纹和染色粒间的数目、位置和着色程度上都具一致性。对Ｇ－带性质和植物中Ｇ－带的应用等问题进行了讨论。     

美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅲ .母株减数分裂前期Ⅰ染色体配对的光镜观察

首次报道在光镜下观察美味猕猴桃 (品种 :No.2 6原生质体植株的母株 )花粉母细胞( PMC)染色体在减数分裂前期的配对 ,发现其配对和凝缩有明显不同步性。不同细胞间染色体配对形式变化较大 ,一般以二价联会为主 ,其次由其它多种配对方式 (包括有复合配对、重复配对、着丝点或端粒处联合和多价联会 )形成多价体 ,还有少数未配对或发生内配对 (偶见 )的单价体和几条二价体之间的次级配对。粗线期观察到少数染色体有缺失 (或重复 )、倒位、易位和疏松配对等结构性改变。表明该植株是一个复杂的区段异源六位体 ,少数染色体在结构上累积有变异。还认为该植株是研究减数分裂染色体配对和联会机制的好材料。     

家畜及实验动物高分辨染色体研究进展

高分辨染色体(High Resolution chromosome HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色体分裂相,早期染色体较中中期染色体长,显带后可以得到更多更细的带纹,从而提高人们对染色体的分辨力.Yuns, J. J(1976)首先以氨甲喋呤使细胞同步化法,建立了人类高分辨染色体技术.随之国内外许多学者对人类高分辨染色体进行了广泛而深入的研究.近几年,关于家畜和实验动物的高分辨染色体研究陆续亦有一些报道,但理论和应用方面的进展依然有限.本文试图就家畜和实验动物高分辨染色体研究的方法、进展以及意义进行阐述,同时提出值得探讨的几个问题.     

中国人体细胞染色体高分辨G带模式图

本工作应用高分辨染色体技术,分析了31名健康汉族人外周血的高分辨G带,制作了中国人体细胞染色体的高分辨G带核型图。并经镜下比较和照片剪贴配对分析,认为中国人体细胞高分辨G带的带纹顺序与宽窄基本与人类细胞遗传学高分辨显带命名的国际体制(ISCN,1981)中高分辨G带模式图一致,但在850条带阶段,1、2、8和Y染色体的某些区带与ISCN(1981)的模式图有些差别,故重新描绘了这四个染色体的模式图。     

卵巢发育阻滞的人工三倍体鱼减数分裂染色体配对的光镜观察

采用界面铺张制片和硝酸银一步染色的方法,对人工三倍体水晶彩鲫卵巢发育阻滞型个体的减数分裂染色体配对进行了光镜观察。在分化有初级卵母细胞的卵巢发育阻滞型的三倍体鱼中,减数分裂粗线期细胞主要的由二价体和单价体组成,也见有少量三价体和其它多价体,其染色体成员数大多在９０左右;在不同细胞间,染色体的大小变化较大;配对联会过程中形成的配对叉和产生的特异蛋白在一些细胞中明显可见。文中讨论了三倍体染色体配对紊乱     

用放线菌素D法在植物染色体上显示高分辨带

本文探索了植物染色体高分辨显带中的放线菌素 D(actinomycin D 简称 AM D)法,并报道了该方法在一粒小麦、圆锥小麦、大麦、玉米、黑麦等植物染色体上进行高分辨显带的结果。AMD 法的流程主要包括:放线菌素 D 和秋水仙素共同预处理植物种子根尖,Ohnuki′s液低渗,纤维素酶和果胶酶酶解,3:1的甲醇冰乙酸固定液固定,涂片法制片和 Wright-Giemsa 染色。该方法在多数实验植物的染色体上均显示出丰富的高分辨带纹。在早中期,多数染色体可显示出10条左右的清晰带纹。文章还分析了植物染色体较难显示高分辨带或 G带的原因,并讨论了放线菌素 D 在显带中的应用。     

THINOPYRUM BESSARABICUM和THINO-PYRUM ELONGATUM的基因组关系研究

对 2个八倍体 C.S- Thinopyrum bessarabicum( AABBDDJJ,2 n=8x=56)和 Goshawk( GHK) - Thinopyrum elongatum( AABBDDEE,2 n=8x=56)的根尖细胞染色体进行 C-分带 ,从中分检出 Th.bessarabicum和 Th.elongatum的各自染色体进行核型分析 ,结果表明 :Th.bessarabicum和 Th.elongatum的大多数染色体都具有端带 ,但 Th.bessarabicum的端带更强 ,很少有中间带 ;而 Th.elongatum的染色体除 E1外其它染色体的端带较弱 ,而且带纹较丰富 ,有较多的中间带。对 C.S- Th.bessarabicum和 GHK- Th.elongatum进行有性杂交 ,其杂交种F1的 PMC染色体在 MI的平均配对构型为 1 5.50 5.0 3 [ 1 4.2 0 ○ 0 .40 0 .2 1 ,其中 Th.bessarabicum和 Th.elongatum染色体平均配对成 2 .5个二价体 ,由 C-分带显示大多数 Th.bessarabicum和 Th.elongatum染色体呈单价体状态。因此推断 ,Th.bessarabicum和 Th.elongatum两物种的染色体应属不同的染色体组     

植物染色体G带及螺旋的研究

本文报道了采用胰酶,尿素,SDS和NaOH原位诱导黑麦,小麦和蚕豆染色体G带和螺旋的结果,所得的G带带纹众多,分布于整个染色体上,带纹数目与染色体收缩程度相关,个别细胞的同源染色体带纹可以配对,一些晚前期染色体的带纹已达高分辨水平,G显带处理时间过长,染色体螺旋结构往往被诱导出来,螺纹数与染色体收缩程序有关,螺旋方向具有多样性,本文还首次报道了植物染色体G带到螺旋的转化现象,在光镜下显G带的染色体在扫描电镜下呈现出螺旋的特征,作者还对植物染色体G带与螺旋的关系作了初步的讨论。     

植物染色体G带及螺旋的研究

本文报道了采用胰酶,尿素,SDS和NaOH原位诱导黑麦,小麦和蚕豆染色体G带和螺旋的结果,所得的G带带纹众多,分布于整个染色体上,带纹数目与染色体收缩程度相关,个别细胞的同源染色体带纹可以配对,一些晚前期染色体的带纹已达高分辨水平,G显带处理时间过长,染色体螺旋结构往往被诱导出来,螺纹数与染色体收缩程序有关,螺旋方向具有多样性,本文还首次报道了植物染色体G带到螺旋的转化现象,在光镜下显G带的染色体在扫描电镜下呈现出螺旋的特征,作者还对植物染色体G带与螺旋的关系作了初步的讨论。     

哺乳动物染色体高分辨显带研究现状

高分辨染色体（High Resolution Chromosome, HRC）是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色休 （指晚前期、前中期、早中期染色体）分裂相,此时分裂 相的染色体较中中期染色体长,显带后可得到更多更 细的带纹,从而提高了人类对染色体的分辨力。Yunis (1976)134'首先以氨甲喋吟使细胞同步化,再使细胞 短时暴露于秋水酸胺中,从而提出了对400, 5-50,850 和1200条带时期的染色体进行研究的技术,高分辨染 色体应运而生。接着国内外许多学者对人类染色体进 行了高分辨分带研究『’一,,‘,一,‘’。人类细胞遗传学命名 常务委员会（1981)制定了人类高分辨染色体显带命名 的国际体制‘’‘’。这项工作大大促进了人类染色体高 分辨的研究,目前这项技术已经广泛应用于临床医 学‘4-1,t8,11,37 3。动物遗传学家借鉴人类高分辨染色 体技术对一些哺乳动物的染色体进行了高分辨研 究“,,,,之盆,川,但理沦和应用方面的研究均进展较'R o 本文对哺乳动物高分辨染色体研究的方法、进展以及 意义进行了阐述,同时提出了值得探讨的几个问题。     

丽纹攀蜥粗线期染色体核型及微小染色体的分析

本文以精巢、四肢骨和脊椎骨为材料,利用直接制片法制备了丽纹攀蜥（Japalura splendida）染色体标本,首次对其精巢减数分裂粗线期染色体,特别是微小染色体的长度进行了测量,描述了染色体特征,并进行了核型分析.同时与二倍体细胞染色体的核型进行了比较,发现11对微小染色体类型中包括8对中着丝粒染色体、2对端着丝粒染色体和1对点状染色体.