流行性出血热病毒经结合膜感染豚鼠的实验研究

用特制的固定装置固定豚鼠,每只豚鼠点眼100μ1 LD_(50)=10~(6·5)/0.02ml病毒悬液,使所试的15只豚鼠全部感染和发病,证明豚鼠通过结合膜可以感染流行性出血热。这种实验途径提示人们广泛地去研究疫区现场的感染途径。     

滴鼻途径建立鼠结核病模型的探讨

目的 探讨滴鼻途径建立BALB/C小鼠结核分枝杆菌感染的模型的可行性.方法 人型Mtb H_(37)Rv标准株经腹腔接种小鼠,取小鼠腹腔冲洗液100 μl接种改良罗-琴氏培养基.刮取上述培养基上生长4周已恢复毒力的结核分枝杆菌H_(37)Rv标准株,加0.05%Tween80生理盐水磨菌制成悬液,菌落计数,计数后稀释悬液为5×10~3 CFU/50 μl、5×10~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c小鼠,制作结核分枝杆菌感染模型.结果 滴鼻感染小鼠4周后,所有小鼠肺、脾组织中均可见抗酸阳性菌,在感染小鼠肺、脾组织匀浆均培养出Mtb.肺组织病理改变明显,正常肺泡结构消失,以充血实变、淋巴细胞、巨噬细胞浸润为主,增生性改变不明显,未见明显的组织坏死.脾组织病理改变主要是巨噬细胞和淋巴细胞增生.结论 滴鼻感染途径建立小鼠结核病模型简便、可行,为进一步研究开发重组BCG疫苗对鼠结核病的防治打下良好的基础. 0~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c小鼠,制作结核分枝杆菌感染模型.结果 滴鼻感染小鼠 周后,所有小鼠肺、脾组织中均可见抗酸阳性菌,在感染小鼠肺、脾组织匀浆均培养出Mtb.肺组织病理改变明显,正常肺泡结构消失,以充血实变、淋巴细胞、巨噬细胞浸润为主,增生性改变不明显,未见明显的组织坏死.脾组织病理改变主要是巨噬细胞和淋巴细胞增生.结论 滴鼻感染途径建立小鼠结核病模型简便、可行,为进一步研究开发重组BCG疫苗对鼠结核病的防治打下良好的基础. 0~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c     

结核病房医院感染与抗生素使用相关性分析

目的：探讨临床抗菌药物应用与结核病房医院感染严重程度的相关性。方法：分析3年来我院结核病房医院感染209例共计221株病原菌,细菌鉴定采用法国梅里埃ATB细菌鉴定药敏分析仪,药敏试验联合应用微量测定法与K—B纸片法。结果：在221株病原菌中革兰阴性杆菌最多为112株,占50．7％,念珠菌75株,占33．9％。主要致病菌依次为白色念珠菌61株(27．6％),铜绿假单胞菌37株(16．8％),肺炎克雷伯菌25株(10．9％)。药敏试验表明细菌耐药明显增加,大多数革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡垦、头孢他啶较敏感,金黄色葡萄球菌对万古霉素100％敏感。每例结核病患者除抗结核药物外平均使用2．67种抗菌药物。结论：结核病房医院感染主要来源于内源性感染,其严重性与抗菌药物大量、重复使用密切相关。     

干扰素-γ释放试验在结核病诊断中的价值

<正>结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test,TST)是用于检测潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)的传统方法.自从干扰素-γ释放试验(interferon-γrelease assay,IGRA)进入临床应用之后大有取代TST之势.IGRA是在体外检测T细胞经结核特异性抗原刺激之后产生和释放干扰素-γ能力的免疫学技术,藉此判断细胞介导的免疫反应.国际上广泛使用的IGRA有2种,即4澳大利亚产的Quanti FERON-TB Gold In-Tube(QFT-GIT)和英国产的T-SPOT.TB.目前在我国各地医院应用最为普遍     

结核病实验诊断技术

结核病诊断一直是控制结核病疫情的关键,快速准确、敏感特异、简便低廉的诊断方法是目前迫切需要的.从结核分枝杆菌快速诊断噬菌体法、AMPLICOR(R) MTB试验、Gen-Probe分子生物学诊断方法到T-SPOT.TB和QuantiFeron-Gold Test免疫学检测方法,结核病实验诊断方法在不断改进和完善.近年来...     

豚鼠耳蜗中ATP对一氧化氮/环磷酸鸟苷途径的激活作用

实验研究了豚鼠耳蜗中ATP和一氧化氮／环磷酸鸟苷途径(nitric oxide／cyclic guanosine monophosphate,NO／cGMP pathway)的关系。将40只耳廓反射灵敏的健康白色豚鼠随机分为5组,分别对其离体的耳蜗即刻灌流人工外淋巴基础液(artificial perilymph basic solution,APBS)以及溶于人工外淋巴基础液的ATP、一氧化氮合酶抑制剂左旋-N^G-硝基精氨酸(L-N^G-nitroarginine,L-NNA) ATP、可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1H-[1,2,4]草酸重氮[4,3-a]喹恶啉(1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one,ODQ) ATP和A-23187(Ca^2 载体),收集耳蜗组织标本,利用放射免疫方法测定耳蜗组织中的cGMP的平均含量,比较各组之间耳蜗组织cGMF平均含量的差异。试验结果显示,向刚离体的耳蜗中灌流ATP和A-23187可以引起耳蜗组织中的cGMP含量升高,而灌流L-NNA和ODQ则可以抑制ATP所引起的耳蜗组织中cGMP含量的升高,提示在耳蜗组织中ATP可以通过升高细胞内Ca^2 浓度的作用而激活NO／cGMF途径。从本实验结果可以提出假说：耳蜗中ATP从神经末梢释放,通过提高细胞内Ca^2 的浓度,有激活NO／cGMP途径的作用,而NO／cGMP又能对ATP进行负反馈调节,两者共同调节耳蜗的生理功能,在耳蜗中存在ATP／Ca^2 -NO／cGMP通路。     

牛结核病对人类健康的影响及其诊断方法

牛结核病是一种非常重要的人畜共患病,其流行不但对畜牧业的发展产生直接影响,而且会通过各种途径感染人类,给公共卫生带来严重威胁。本文主要就牛结核病的发现、与人结核病之间的关系、对人类健康的影响及其目前的诊断方法等进行介绍。     

禽结核病的诊断及防治

禽结核病的诊断及防治刘树森,张树清,宋振清（朝阳市农校１２２０００）禽结核病是由食结核杆菌引起的一种慢性传染病。某鸡场被传入食结核病,造成较大经济损失,现将诊断及防治情况报告如下：某鸡场最初发现少数成年鸡逐渐消瘦,精神萎萎冠、肉髯逐渐发白,＂皮肤干燥...     

检测脂阿拉伯甘露聚糖诊断结核病

结核病的诊断是靠直接痰涂片抗酸染色和培养。然而,直接涂片的敏感性仅22～43％,培养虽比直接痰涂片法敏感,但又耗时较长,而且只限于具备培养条件的实验室。 结核病的快速诊断方法主要有两类:一是检测结核糖菌的抗原,如结核性脑膜炎的诊断;二是采用探针技术检测结核杆菌的核酸。采用聚合酶链反应(PCR)技术诊断结核病确属一种理想的方法,     

γ干扰素释放试验与结核菌素皮肤试验筛查预测活动性结核病的比较

为评估γ干扰素释放试验（T-SPOT ．TB）和结核菌素皮肤试验（TST ）在我国活动性肺结核病患者的家庭接触者中预测活动性结核病的能力,选取157例家庭接触者行T-SPOT ．TB和TST筛查,并前瞻性随访6年。将121例参与随访的家庭接触者纳入分析,T-SPOT ．TB阳性率为49．6％,与年龄﹝ OR＝1．03（95％CI 1．00～1．05）,P＝0．032﹞和接触菌阳患者﹝ OR＝2．13（95％ CI为1．01～4．51）,P＝0．048﹞呈正相关。TST≥5 mm和TST≥10 mm的接触者分别占57．5％和37．2％,其中TST≥10 mm与接触菌阳患者呈正相关﹝ OR＝2．30（95％ CI为1．05～5．06）,P＝0．038﹞。共随访626人年,7例发展为活动性结核病,发病率为11．0／1000人年。T-SPOT ．TB的阳性预测值（PPV）为8．3％,阴性预测值（NPV）为96．7％。TST≥5 mm和TST≥10 mm的PPV分别为7．7％和9．5％,NPV均为95．8％。总之,活动性肺结核病患者的家庭接触者发展为活动性结核病的风险高于一般人群,而T-SPOT ．TB与TST对活动性结核病的预测能力相当。     

结核病血清学诊断进展

结核病的细菌学检查目前是结核病实验室诊断的金标准.由于痰涂片阳性率较低,镜检需要经验,难以区分环境分枝杆菌造成的假阳性;痰培养需时太长,因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限.随着分子生物学技术的迅速发展,用高度敏感的方法检测结核分枝杆菌(简称结核杆菌)及其特异性DNA片段,如聚合酶链反应(PCR)、生物探针和基因芯片等,需要相应的检测设备和检测费用高而未能广泛推广.血清学诊断技术有其固有的优势,如操作简便、快速、便于推广、无需特殊精密仪器,已有多种纯化的特异性抗原可采用,可以发展成自动化检测,尤其是对痰培养阴性和肺外结核病有较为重要的辅助诊断价值而受到广泛的重视.本文从靶抗原的选择和检测技术的改进等方面综述了结核病血清学诊断的现状和进展.     

滑液囊支原体不同感染途径的致病力比较

[背景]自2010年以来,我国鸡群中滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的感染率不断增高,目前MS已广泛存在于我国不同的鸡群中,包括蛋鸡、种鸡、白羽肉鸡和地方品种鸡等,其血清阳性率已超过40％,严重危害我国养鸡业,并造成了严重的经济损失.[目的]系统比较MS以不同感染途径对56日龄无特定病原体(...     

药物安全性评价中豚鼠全身过敏试验方法的研究

目的在新药临床前安全性评价中对药物致敏性的研究日益受到重视。本实验基于我国新药评价指导原则,分析探讨SFDA颁布的指导原则中豚鼠全身过敏实验方案中可能影响实验结果的问题和因素。方法在GLP条件下,以体重为300～400克的豚鼠为实验对象,以牛血清白蛋白、生理盐水等受试物为对照,研究不同致敏剂量、激发剂量、激发时间、激发途径和激发次数等条件下,豚鼠全身过敏的发生情况。结果在一定剂量范围内,豚鼠全身过敏反应的发生率与致敏剂量、激发剂量和激发途径无关,但症状发生的严重程度与致敏剂量、激发剂量和激发途径有关。结论新药过敏性评价研究应参照指导原则,注意试验的剂量设计和给药途径。     

豚鼠妊娠期感染巨细胞病毒的研究

本实验观察了豚鼠巨细胞病毒感染对怀孕豚鼠的影响。从皮下和心腔接种病毒感染动物,接种病毒的时间在动物妊娠早期。接种病毒后,二组动物都出现病毒血症,从动物的脾、肺和唾液腺均分离到病毒。病毒在唾液腺持续存在。皮下接种组和心腔接种组各有38％和44％的孕鼠的胚胎感染了病毒,各有27％和25％的孕鼠发生流产,皮下接种组还有63％的孕鼠怀有死胎。本实验为研究巨细胞病毒感染提供了动物模型,证实了血源途径也可以引起豚鼠的先天性巨细胞病毒感染。     

结核感染T细胞斑点试验对肺结核病的临床诊断价值研究

目的：评价结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT．TB）对肺结核病的临床诊断价值。方法：选择2012年2月～8月湘雅医院呼吸科住院病人中92例可疑肺结核患者进行T—SPOT．TB检测、结核菌素试验（PPD试验）、结核抗体、血沉及影像学检查及病史收集。分析和比较T．SPOT．TB与传统结核诊断方法的阳性率、特异度、灵敏度并对其检测结果进行相关性分析。结果：92例患者中,48例被确诊为肺结核,其中41例T．SPOT．TB结果阳性,44例非肺结核患者中5例T．SPOT．TB结果阳性。T—SPOT．TB检测的敏感度为85．4％,特异度为88．6％。T-SPOT．TB检测在结核组的阳性检出率（85．4％）显著高于传统检查方法PPD（37．5％,P〈0．01）、结核抗体（16．7％,P〈0．01）、血沉（66．7％,P〈0．05）,在非结核病组中的特异性（88．6％）显著高于血沉（36．6％,P〈0．0J）。PPD与T-SPOT．TB联合可提高诊断结核的阳性率（89．6％）。T．SPOT．TB检测仅与PPD试验的结果存在显著性差异（P〈0．05）。结论：T-SPOT．TB诊断肺结核的敏感性及特异性较传统的PPD实验、结核抗体更高,具有重要的I临床应用价值。     

儿童轮状病毒感染的诊断

<正>轮状病毒感染在儿童和成人之间广泛传播。在秋冬季节,占急性肠道疾病发病率的36—70%。除此之外,在医院内轮状病毒感染是在儿童间传播的一个严重问题。 由于这些原因,采用实验室方法诊断轮状病毒感染,并进行深入的研究具有重要意义。已经知道,在粪便中检查轮状病毒或它们的抗原的不同方法:直接电镜、免疫电镜、免疫扩散和酶免疫方法,以及分子杂交法。但是,所有这些方法都要专门的,价值昂贵而又操作繁重的设备,大多数实验室达不到这种要求。在粪便中,借助于凝集反应查明轮状病毒抗原的快速方法具有重大意义。只要这些方法的灵敏度和特异性高,经济,简易可行,即可很快地得出结果。尤其重要     

禽分枝杆菌对豚鼠的致病性分析

【背景】我国禽型结核菌素(avian tuberculin)的制造用菌株为CVCC 68201、CVCC 68202和CVCC 68203株,但目前仍未明确这3株菌的生物学特性及对豚鼠致病性的情况。【目的】探究禽分枝杆菌(Mycobacterium avium)的生物学特性及对动物机体的致病性,为禽结核病和牛结核病的防控工作提供技术支撑。【方法】对3株禽分枝杆菌基因组进行鉴定分析及核酸相似度分析;用3株禽分枝杆菌分别感染豚鼠,观察感染后的临床症状、病理学变化、体重增重情况分析、皮内变态反应结果、脏器系数变化等,进而分析3株禽分枝杆菌对豚鼠的致病力。【结果】种型鉴定和进化分析结果表明,CVCC 68201、CVCC 68202和CVCC 68203均为禽分枝杆菌,基因组与Mycobacterium avium subsp. avium FDAARGOS_1608最为相近;在感染前期、中期、后期对3株禽分枝杆菌感染豚鼠的体重增重情况分析发现,感染禽分枝杆菌影响豚鼠增重,主要表现为生长迟缓,感染第5周时,CVCC 68201、CVCC 68202组豚鼠的平均体重明显轻于未感染组;皮内变态反应试验结果显示,感染CVCC 68201组豚鼠的皮肤红肿面积明显大于其他2个感染组,CVCC 68201可引起机体更为强烈的迟发型变态反应;3株禽分枝杆菌感染后,豚鼠脾脏和肺脏存在不同程度的肿大与出血,其中感染CVCC 68201豚鼠的肺脏系数与未感染组相比差异显著(P<0.01);病理学观察结果显示,豚鼠肺脏可见不同程度病变,其中CVCC 68201组更为严重,表现为肿大和轻微出血。各感染组豚鼠肺脏和脾脏组织切片抗酸染色均可见红色的分枝杆菌散在浸润。【结论】3株禽分枝杆菌对豚鼠均有一定程度的致病性,可引发局部病变。本研究为禽分枝杆菌的制备和鉴定提供依据,也为牛结核病的鉴别诊断方法研究提供参考。