对犬心丝虫病的一点认识

2000年我们购家犬50只供实验用。饲养中部分犬出现食欲不佳、胃肠功能紊乱、精神烦躁、呼吸异常等临床症状,并伴有心电图异常,甚至死亡。经解剖观察,在右心室内发现有犬恶丝虫。我们重点观察了犬心丝虫病的症状,结合系统尸体解剖,获得一些体会,供同行参考。1 动物来源农村家犬50只,收购于四川省简阳市农村。这些犬为村民散养,伺养环境一般,外观健康,年龄1～3岁以上,体重7～13kg,雌雄各半。2 临床症状及解剖观察     

犬小孢子菌病67例临床观察

犬小孢子菌病为亲动物真菌,感染人类致头皮、头发、皮肤及甲的传染性疾病,还可致头皮深在性感染引起脓癣等。以往均按其发病部位分别归人其他皮肤癣菌病如头癣、体癣等病种内报告。国内少有人将犬小孢子菌所致的病作为一独立的疾病来全面描述。为进一步认识犬小孢子菌及其所致疾病的特征,提高诊断、治疗、预防水平。作者在上海复旦大学华山医院皮肤科进修期间观察了经真菌培养为犬小孢子菌的67例癣菌病患者的真菌学特点和临床表现,并对其特征进行分析研究,现归纳报道如下。     

遍访名山始著书——评王晓鸣等《豪食犬亚科的系统发育》及王晓鸣《西？…

5年前收到王晓鸣的专著<西方犬亚科的系统发育>,曾想写篇书评将该书推介给国内同行们.陈寅恪讥讽的那种"未觅名山便著书"的"学人"形象与晓鸣其人形成了强烈的反差,于是我便顺手写下这标题.但,仅此而已…….时隔5年,最近又收到王晓鸣与戴福德和泰勒合作的新著<豪食犬亚科的系统发育>,故将晓鸣的"新书旧作朋比侃,两类狗肉一锅烹"了.     

表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定

对CAV-2的E3区的Ssp I片段进行缺失构建了E3区缺失载体pVAXΔE3,然后将CPV VP2表达盒连接到pVAXΔE3的E3区缺失处,构建了CPV VP2表达盒的转移载体pΔECPV-VP2,用SalI NruI分别对pPoly2-CAV2和pΔECPV-VP2进行双酶切,分别进行琼脂糖凝胶电泳回收目的片段,将含CPV VP2表达盒的SalI NruI片段定向克隆入pPoly2-CAV-2载体,获得了含CPV VP2表达盒重组CAV-2基因组的质粒pCAV-2/CPV-VP2。用AscI ClaI对pCAV-2/CPV-VP2进行双酶切,释放CAV-2/CPV-VP2重组基因组,将CAV-2/CPV-VP2基因组与去除SalI NruI片段的CAV-2基因组的两个片段混合,利用脂质体介导共转染DK细胞,出现病变,获得重组病毒CAV-2/CPV。并且,从形态学、基因组水平、目的基因的转录及重组病毒的生长特征等方面进行了鉴定。结果证明,CAV-2/CPV具有典型的CAV-2形态特征,CAV-2/CPV在繁殖的过程中没有对CPV VP2表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录CPV VP2的mRNA。CAV-2/CPV的繁殖速度比野生型CAV-2的繁殖速度慢。     

犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用

根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物。在建立单项PCR基础上,通过优化Mg^2 离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为：96℃180s,96℃230s,56℃30s,72℃280s,30个循环。联合PCR结果显示：CAV—l扩增片段大小为497bp,CAV-2为l019hp,CPV为719hp;细胞和其它相关病毒对照均无扩增带。上述PCR产物经用限制性内切酶酶切和克隆测序,结果均与相应病毒的应有条带和序列相同。敏感性比较试验结果表明。联合PCR比用细胞培养分离病毒敏感。将联合PCR应用于15份CAV和CPV细胞培养物,5份CAV-1、1份CAV-2和3份CPV人工感染犬病料以及30份临床病料检测,并与电镜负染、HA／HI及病毒分离等方法的结果进行比较,结果显示,联合PCR的检出率和病毒分离结果一致,高于电镜负染和HA／HI试验。以上结果说明：CAV-1／12AV-2和CPV联合PCR不仅具有很好的特异性和敏感性,而且可以在短时间内(2．5h～3h)同时鉴定出上述三种病毒。因此具有良好的实验室诊断和临床应用价值。     

圈养小熊猫几种病毒的PCR检测

本文采用巢式PCR/ RT-PCR 方法,对我国10 个动物园中无临床症状的圈养小熊猫的71 个肛拭子和61 个唾液拭子样品,进行犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、犬腺病毒(CAV)和犬疱疹病毒(CHV)的检测,以评估我国圈养小熊猫是否面临这几种病毒的威胁。对阳性PCR 结果进行测序分析,并与GenBank 上的序列进行比较。结果,在肛拭子样品中检测到3 个CPV 和6 个CCV 阳性结果,经测序后,与GenBank 上序列的同源性分别达99% 和100% 。而在唾液拭子样品中没有检测到任何阳性结果,且CDV、CAV和CCV 的检测结果均为阴性。从阳性CPV 的肛拭子样品中分离到一株细小病毒毒株,表明圈养小熊猫已受到细小病毒和犬冠状病毒的感染,今后应加强这两种病毒的预防工作。本文所采用的PCR 方法检测病毒性疾病,能检测到微量的病毒模板,可对小熊猫病毒性感染进行早期诊断。     

犬尿酸代谢途径异常与中枢神经系统疾病

犬尿氨酸代谢途径(kynurenine pathway,KP)是脑内色氨酸代谢的重要通路。该通路由不同代谢产物及酶系构成,受促炎介质和激素等影响,通过激活或改变通路中代谢产物的合成,调控神经递质释放与功能执行。近些年研究发现,多种中枢神经系统疾病的理化改变与该通路代谢紊乱相关。本文将重点介绍KP组成及其代谢产物的生理功能,并就KP与部分中枢神经系统疾病的研究进展作一综述。     

犬冠状病毒S糖蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建及其免疫原性研究

首次构建了能表达犬冠状病毒纤突糖蛋白(CCVS1)的重组犬2型腺病毒(CAV-2)。用RT-PCR方法从CCVDXMV株细胞培养物中扩增出编码S糖蛋白A、B、C和D4个抗原位点的基因片段S1,将其克隆到pVAX1中,然后将含有CCVS1基因的完整表达盒(CMV-S1-PolyA)进一步定向克隆到含有CAV-2E3区的穿梭质粒pVAXE3中,构建出pVAX△E3S1。通过SalⅠ NruⅠ双酶切pVAX△E3S1回收含有目的基因的表达盒,将其克隆入含有CAV-2全基因组的骨架质粒pPoly2-CAV-2中,获得重组质粒pCAV-2-CCV-S1。ClaⅠ AscⅠ酶切pCAV-2-CCV-S1释放重组基因组,转染MDCK细胞,获得了重组病毒CAV-2-S1。该重组病毒在MDCK细胞上能产生典型的腺病毒细胞病变。通过mRNA水平和Westernblot检测,证实重组病毒能表达CCVS1蛋白。动物免疫试验表明,该重组病毒可以有效地诱导免疫犬产生抗CCV和CAV-2抗体。     

防治犬在动物实验中手术切口感染的体会

我科从１９９４年以来,共配合完成全院科研课题中约５００例次犬实验。现就近几年来在防治实验前后切口感染问题上的一些心得体会,总结报告如下。１动物选择因实验要求不同而各有侧重。原则上选择健康、成年犬,体重约在１０－１５ｋｇ左右。性别要求,如果为腹部手术,...     

犬传染性肝炎病毒Hexon蛋白Loop1、Loop2基因的克隆与表达

腺病毒主要的中和抗原表位位于六邻体蛋白Loop1、Loop2上,目前的研究主要集中在人腺病毒,犬传染性肝炎病毒（即犬腺病毒Ⅰ型）尚未见报道。本次研究参考Genebank发表的基因序列设计引物,提取ICHV基因组DNA,分别PCR扩增六邻体蛋白（Hexon）的Loop1、Loop2基因片段,用T4酶连接在一起,克隆入原核表达载体pET28a中,测序显示本室保存病毒分离株Loop1与CLL株、RI261株和TorontoA26/61株核苷酸序列同源性分别为100%、100%和83.8%;Loop2与CLL株、RI261株和TorontoA26/61株核苷酸序列同源性分别为88.1%、88.1%和99.3%,推导的氨基酸序列同源性分别为93.6%、93.6%和98.6%。转化BL21工程菌,实现了重组Loop蛋白在大肠杆菌中的高效表达,分子质量约为36kDa,并且利用镍柱纯化重组蛋白,纯度达95%以上。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,以间接ELISA法测定血清抗病毒抗体效价达1：320以上,western blot鉴定免疫血清与ICHV特异性结合。本实验为建立新的犬传染性肝炎病毒基因工程产品奠定了良好的基础。     

犬猫常见药物过敏反应及其防治

犬猫常见的药物过敏反应包括皮疹、荨麻疹、皮炎、发热、血管神经性水肿、哮喘、过敏性休克等,其中以荨麻疹最为常见,以过敏性休克最为严重。1992-1998上半年,我中心动物医院发生药物过敏性休克多例,其中青霉素致死1例,链霉素致死3例,洁霉素致死4例,庆大霉素致死3例,银黄注射液致死1例。引起犬猫过敏反应的药物有:青霉素、链霉素、庆大霉素、卡拉霉素、洁霉素、维生素Ｂ1、地塞米松、维丁胶性钙、柴胡、红花、银黄、板蓝根、维生素Ｋ、疫苗等。由于动物本身的生理特性,毛长、皮厚、肤色多样等特点,不适宜做皮肤过敏试验。所以在给动物注射各…     

异物竹签刺破犬盲肠一例

犬胃肠道异物在临床上较常见 ,多系柔软或较为圆形的异物如塑料袋、袜子、擦桌巾、毛巾、骨头、石头等被犬吞下而发病 ,而尖锐细长的异物却罕见。笔者曾诊治过竹签刺破犬盲肠一例 ,现报导如下。1999年 4月 2 8日 ,成都某动物医院转我院一大麦町犬 ,雌性 ,2月龄 ,体重 7kg。主诉绝食、呕吐 3天 ,无其它任何症状 ,经止吐、消炎、输液治疗两天无好转。临床检查 ,病犬体温 38 5℃ ,鼻镜凉而湿润 ,不咳嗽 ,呼吸正常 ,眼神忧郁 ,但不流泪 ,无眼屎 ,3天未排大便 ,可饮水 ,尿少 ,尿色偏黄 ,看见食物可嗅其味道 ,不愿离开 ,但不采食。犬极度消瘦 ,弓…