日本三菱化学公司研究出一种从大肠杆菌中提取基因产物的新技术

日本三菱化学公司和名古屋大学的科学家一起,共同研究出一种从大肠杆菌(E.coli)提取基因重组产物的新技术。迄今,在使用大肠杆菌的遗传重组中的一个严重缺点是细菌细胞具有把外来翻译产物贮存在细胞内的习性。新方法可以克服这一缺点,该方法是将所需产物的外来基因与E.coli的编码细胞表面膜蛋白质的基因连接起来,该产物被分泌到细胞外,因此大大促进产物的分     

生物遗传的连锁和交换

处在同一条染色体的基因在一起遗传的现象称为连锁。由于来自双亲的同源染色体，在性细胞成熟分裂时发生交换而使原来在同一染色体上的基因不再在一起遗传的现象称为交换。连锁和交换是生物界的普遍现象。一个细胞有许多基因，如果它们各个分散，细胞分裂过程中子细胞就不可能准确地获得每个基因，因此连锁对于生命的延续是非常重要的。交换则能使染色体上的基因产生新的组合，是形成生物新类型的原因之一，它和育种工作有密切的关系。交换一般是对等的，但是也有非对等交换。非对等交换可以导致少量染色体重复，重复的染色体片段上的基因经…     

地衣芽孢杆菌WL1菌株质粒的初步研究

地衣芽孢杆菌是一种较为重要的工业生产菌,现在发现它的染色体DNA与枯草芽孢杆菌有24％的同源性,用地衣芽孢杆菌噬菌体SP-15进行转导和其它方法建立了它的遗传图,发现与枯草芽孢杆菌的遗传图也十分相近。由此可见,它不仅是一个很有开发潜力的工业生产菌,而且也可能成为重要的遗传学材料。目前,在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌之间的基因转     

小RNA的调节血管新生作用

科学家改造了大肠杆菌从而让它大量制造出了一种酶，这种酶可以保护小鼠免遭一种有机磷酸酯杀虫剂的毒性作用。该杀虫剂是一种有机磷酸酯，它是包括VX和沙林等神经毒气在内的一族化合物中的一员。研究人员认为他们的体系有可能让科学家去开发改进新的酶，用于治疗目的和防御神经毒剂。     

应用基因组工程构建新型大肠杆菌细胞工厂

基因组工程（genome engineering）是指为了实现某一目标对复制系统进行有意地、广泛地遗传修饰。大肠杆菌作为常用细胞工厂之一,在生物制造领域应用广泛,已成为合成生物学的主要研究对象。应用基因组工程改造大肠杆菌可以进一步拓展其应用范围。介绍了基因组工程最新技术发展,如基因组整合、染色体进化、多元自动化基因组工程、可寻迹多元重组工程等,及其在改造大肠杆菌提高其生产能力、稳定性及环境耐受能力等方面的研究进展。     

嗜热细菌解开早期生物进化谜团

一个长期以来备受争议的话题是：在脑部是否有一个中心时钟,或者说计时是否是大脑中不同回路的共有本领？最近科学家发现,培养皿中的脑细胞网络可以被培养成像沙漏一样精确走时的计时器,这一结果或许可以帮助人们揭示大脑追踪时间之谜。     

生物时钟调控DNA损伤反应的研究进展

随着地球的自转,哺乳动物的许多生理和行为都表现出以24h为周期的节律性振荡。生物时钟是昼夜节律产生的物质基础。在分子水平上,生物时钟由一组高度保守的时钟基因及其编码的蛋白质形成的转录-翻译反馈环路组成。它控制着许多生化反应的进行,包括细胞对基因毒性刺激等环境因素的反应。最近的研究发现,生物时钟在细胞的DNA损伤反应过程(包括DNA修复、DNA损伤检验点以及细胞凋亡)中发挥着重要的调控作用。深入了解其中的机制将为治疗相关疾病提供潜在的药物靶点,也可指导开发新的治疗方案,如时辰疗法。     

质粒pBR322在recA基因缺陷的大肠杆菌细胞内的遗传重组

使用琼脂糖凝胶电泳、DNA限制性内切酶水解以及电子显微镜等分析手段,证明在两株recA~-的大肠杆菌质粒pBR322转化子中,pBR 322 DNA的多倍周长环形寡聚物被大量合成。这个事实说明质粒pBR322 DNA在大肠杆菌细胞中的遗传重组似有独立于rec A基因的途径。本文介绍一个改进的大肠杆菌“清亮裂解液”制备法。按照这个方法制备的细菌清亮裂解液可排除染色体DNA的污染。     

核糖核蛋白体的结构与功能

核糖核蛋白体(Ribosome,亦称核蛋白体)是一种重要的细胞器。它是细胞内蛋白质生物合成的基地。无论原核细胞(细菌)或真核细胞(动植物),凡有蛋白质合成,都一定有核糖核蛋白体的参加。大肠杆菌无细胞制剂(包括核糖核蛋白体)是研究蛋白质生物合成的一个很理想的体系。它在阐明遗传密码子的编排工作中,发挥了非常重要的作用,对于分子生物学的发展有重大的贡献。鉴于上述原因,二十多年来,生物化学家与大肠杆菌核糖核蛋白体交往     

克隆的口蹄疫病毒蛋白疫苗——在牛和猪体内的反应

从口蹄疫病毒A_(12)的病毒粒子RNA中制取得到编码其致免疫的衣壳蛋白VP_3的DNA序列,并把它接到质粒上,通过大肠杆菌色氨酸起动—操纵系统表达出一个嵌合蛋白。当被这个质粒转化的大肠杆菌在无色氨酸培养基上生长时,全部细胞蛋白中有大约17％是不溶性的,稳定嵌合蛋白。纯化的嵌合蛋白与口蹄疫病毒的VP_3蛋白等克分子地竞争抗口蹄病毒的特异性抗体。给六头牛、二头猪接种这种蛋白能诱发出高水平的中和抗体和抗口蹄疫病毒侵袭的保护反应。     

核糖体基因表达的调节

核糖体是细胞制造蛋白质的场所。我们不难概括 这些微小颗粒的功能,一方面它接受遗传指令,结合 mRNA分子处理信息,另一方面它把氨基酸连接成链, 合成一个蛋白质分子。有关核塘体的现代知识,主要 来自于对E. co“核糖体的详细研究。近年来发现了 某些意想不到的核糖体遗传学问题,进一步了解了调 节核塘休合成的复杂性。本文着力叙述新近进展,早 期工作请详见有关评论。     

分子生物学中常用的大肠杆菌菌株

分子生物学中常用的大肠杆菌菌株郝林（沈阳师范学院生物系，沈阳１１００３４）关键词大肠杆菌，菌株除了少数几个例外，在ＤＮＡ重组实验中所用的菌株大多数都是大肠杆菌菌株Ｋ１２的衍生物。这些突变菌株在遗传、生化代谢等方面均有不同程度的差异，适合于做不同自菌株...     

大肠杆菌基因组图谱研究进展

大肠杆菌分布广泛,是微生物遗传学和分子遗传学重要的研究对象,对大肠杆菌遗传学研究的许多重要发现,加学了我们在分子水平上对生物遗传机制的理解;同时由于我们对大肠杆菌遗传背景有较深的了解,大肠杆菌在基因工程研究中占据着不可替代的重要地位。本文拟将大肠杆菌基因组图谱研究方向的进展作一简要综述。 大肠杆菌基因组是由超螺旋的环状DNA分子所组成,其长度为4710.4千碱基对(kb)。大肠杆菌基因组图谱有下列三种表现形式。     

Teruhiko Beppu等人研究出一种使大肠杆菌能分泌蛋白质的方法

将rDNA用在大肠杆菌中的主要缺点之一是蛋白质产物被保留在细菌细胞里。这一缺点终于被克服了。东京大学农业系的Teruhiko Beppu及其同事找到了一种能使大肠杆菌细胞中分泌出蛋白质的方法。详情还未获得,但很明显,这些研究人员将一种蛋白酶的基因(来自另一种革兰氏阴性细菌)的一个片段拼接到大肠杆菌中。虽然大肠杆菌自然产生的相应酶保留在细胞内,但该菌通常能分泌出外来蛋白酶,这对该菌来说是自然的。当将外来蛋白酶     

蒙古马遗传多样性研究进展

蒙古马是我国重要的地方马品种资源, 它具有耐力强、耐粗饲、抗病性强等优点, 这些优势遗传资源成为对其进行深入研究的动力。遗传多样性能够反映出一个物种或某一品种的所有遗传信息, 即通过遗传标记来反映品种遗传多样性丰富程度, 并确定品种遗传资源独特性程度。文中分别从细胞水平、生化水平以及分子水平对蒙古马的遗传多样性研究进展进行了详细的综述, 重点介绍了蒙古马研究中热点基因的分型及其多态性研究成果。     

小肽Cathelicidin防止尿道感染

 细菌善于潜行穿越人体的防御系统，最为常见的是当人吞咽、吸入时，或通过割伤和抓痕成功地进入人体.但在经过20年以后，科学家已发现就在免疫系统之前，人体对这种入侵者——细菌就能产生反应，即在肠、肺和皮肤建筑了第一道抗微生物的防线.有一项新研究表明，在这些抗微生物冲击的队伍中，有一种肽称为cathelicidin，它把守着另一个通道——尿道.自始至终排列于尿道直至肾脏的细胞，好不容易制造出cathelicidin来对付细菌的入侵，研究者在2006年6月的Nature Medicine上报道.进一步，炎症细胞然后向尿道瞬间释放cathelicidin，它通常用破坏细菌细胞膜的方法来杀死其接触的细菌.排列于尿道的细胞，正常时维持现有的cathelicidin的小量供应，而在尿道细胞接触到细菌的数分钟内，制造出更多的cathelicidin.研究者报道，从28个健康儿童取得的尿样中含有少量cathelicidin，而29个由细菌聚集引起尿路感染的儿童尿样中，cathelicidin的含量为健康儿童含量的8倍.在一系列实验中，研究者涉及大肠杆菌，当大肠杆菌进入小鼠的尿道后，引起小鼠尿路感染.在基因工程小鼠中，当大量细菌进入膀胱时所产生的cathelicidin比正常小鼠产生的要少.缺乏cathelicidin的小鼠也能发生比较严重的尿路感染，它们会体重减轻，而更为可能死亡.研究者报道，在发生严重尿路感染的小鼠中，一种支持性防御系统出现了，防御细胞称为中性白细胞，其携带着满足自身需要的cathelicidin大量涌入尿道，并传送该肽的第二次波动.遍及全身的中性白细胞典型地阻止细胞感染传播到血流中去.该项研究首次证明,cathelicidin有保护尿道免受感染的广泛的作用.然而，某些细菌的生长明显抵抗cathelicidin.研究者从受尿路感染的人身上获得35种不同品系的E.coli,并在实验皿中测试了cathelicidin对E.coli的抵抗作用.从尿路感染发展到膀胱上游的人身上取得的E.coli品系，最有可能抵抗cathelicidin.如果cathelicidin对微生物的抵抗力还可能不够完善，该项新研究仍然提供了攻击性的cathelicidin如何参加挡开侵袭细菌一击的意义.Cathelicidin已准备好当需要时，便穿过细胞内协调的而具爆炸性的活动链来发挥作用.公司计划开发这种产生于实验室的抗生素来创建药物，但失败了.研究者指出，cathelicidin因为毒性太大而不能内服. (李潇摘译自N.Seppa:Science News,June 10,2006,Vol.169,p.355)     

鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asl3212/all3211构成mazEF家族的毒素-抗毒素系统

大肠杆菌染色体上毒素-抗毒素系统(TA,toxin-antitoxin system)mazEF介导多种胁迫诱导的细胞死亡或生长抑制。鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asl3212/all3211具有TA系统保守的遗传结构,其编码产物与大肠杆菌mazEF系统的毒素MazE和抗毒素MazE同源,可能构成mazEF家族的TA系统。利用构建的选择性表达系统分析asl3212和all3211表达产物对大肠杆菌细胞生长活性的影响,结果显示诱导all3211表达显著抑制细胞生长,同时诱导asl3212表达使all3211编码产物抑制的细胞恢复生长。提示all3211为毒素基因,asl3212为抗毒素基因,二者组成一个功能性的mazEF家族的TA系统。     

多二硫键蛋白在大肠杆菌中的表达研究

真核生物的许多蛋白富含二硫键。由于大肠杆菌细胞质中含有二硫键还原酶,利用大肠杆菌生产具有生物活性的重组二硫键蛋白充满挑战。近年来,SHuffle菌株、超氧化性细胞的相继问世,利用分子伴侣或引入二硫键从头形成体系,使多二硫键蛋白在大肠杆菌中的表达成为可能。简要概述了野生型大肠杆菌细胞周质和经遗传改造的工程菌细胞质中二硫键的形成机制,并着重介绍了近年来重组二硫键蛋白表达策略的最新研究进展,对利用大肠杆菌反应器生产富含二硫键蛋白起指导意义。     

未来水稻遗传工程中的有利抗性基因

从技术上来讲,水稻基因工程是可行的,目前嵌合基因结构体能被整合至水稻细胞的核DNA中,具有原基因的重组细胞可再分化出植株;外源基因变成了水稻基因组的一个组分,它们可在再生植株上表达开遗传至下一代。外源基因整合位点一般是随机的,它可编码一种新蛋白或改变原受体细胞蛋白质的合成水平及位置。不过将外源基因命中至水稻基因组中的特定位点或借助工程法代替一个原有基因的技术还未达实用水平。未来的工作是增进现有转化技术的可靠性和有效性或扩大技术应用的品种范围,目前许多研究正集中在鉴定可导入水稻并表现出新的有利农艺、营养和商品价值性状的基因结构。     

药物基因组学相关P450和ABCB1多态性及SNP检测技术

药物基因组学（phamacogenomics）是临床检测遗传差异引起药物应答个体性差异的学科,它涉及药物代谢和有害的药物反应的预测等方面的内容。个性化药物和个性化治疗发展的关键条件是能够快速简便的检测出病人的遗传多态性。文章综述了药物基因相关问题,细胞色素酶1）450和ABCB1转运蛋白的遗传多态性以及检测遗传多态性的相关技术。