免疫细胞化学方法对胸腔积液中恶性肿瘤细胞的分类与诊断

目的应用免疫细胞化学对胸腔积液中的肺非小细胞癌分类与恶性间皮瘤的鉴别诊断。方法利用液基薄层细胞学自动涂片技术方法对筛查出的胸腔积液可疑瘤细胞及瘤细胞标本1158例进行细胞包埋连续切片,分别作肺非小细胞癌（NSCLC）肿瘤细胞标记物CK7、CK5＆6、TTF-1、E—Ca及恶性间皮瘤标记物MC（MesothelialCell,MC）、CR（Calfetinin,CR）、P53、Vimentin免疫细胞化学染色。结果1158例胸腔积液患者确诊为肺腺癌581例,鳞癌509例,腺鳞癌48例,恶性间皮瘤20例。TTF-1在腺癌中有明显高表达,阳性表达率为92．43％;CK58L6在鳞癌中有明显高表达,阳性表达率为97．45％;MC、CR在恶性间皮瘤中有明显高表达,阳性表达率为100．00％和95．00％。结论液基细胞学与免疫细胞化学技术相结合在胸腔积液鉴别诊断中有很重要的临床意义,CK7、CK58L6、TTF-1、E—ca联合应用可用于胸腔积液中NSCLC之间的分类与诊断,CK58L6、MC、CR、P53、Vimentin联合应用可用于胸腔积液中间皮瘤的定性诊断,值得在临床细胞病理学诊断中推广应用。     

恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的诊断进展

胸腔积液分为渗出液和漏出液,而渗出性胸腔积液以结核性胸腔积液和恶性胸腔积液较为常见,这两种积液的治疗和预后差异很大。因此,及时而准确地找到胸腔积液的成因,才能使患者得到早期诊断和治疗,改善患者的预后。但目前,临床工作中两者的鉴别仍较为困难,因此需要从多方面入手。系统的询问病史、体格检查是判断患者是否存在胸腔积液的第一步,然后行X线、B超、CT检查判断积液的位置及积液量,后行胸腔穿刺检查明确积液的性质是渗出液或漏出液,结合肿瘤标志物、细胞因子检查进一步判断积液病因,最后通过胸腔穿刺胸膜活检、胸腔镜检查明确病理诊断而获得确诊,对于疑难性胸腔积液,PET/CT检查也具备较好的优势。本文就近年来恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的鉴别诊断技术和方法进展作简要综述。     

循环肿瘤细胞单细胞测序——液体活检的新视角

循环肿瘤细胞是实体肿瘤原发灶或转移灶侵袭、脱落进入外周血的,具有高活力、高转移潜能的肿瘤细胞。由于肿瘤存在异质性,导致肿瘤组织高通量测序分析难以发现低丰度肿瘤干细胞的基因组特征。循环肿瘤细胞单细胞测序,通过比较患者外周血循环肿瘤细胞、肿瘤原发灶和转移灶及转移淋巴结中单细胞基因组、转录组和表观遗传组的差异,避免肿瘤异质性的干扰,为认识肿瘤的生物学进程提供了全新视角。现综述了运用单细胞测序技术分析实体肿瘤外周血循环肿瘤细胞基因组变异的主要技术和研究进展。     

恶性胸腔积液的治疗现状

恶性胸液在临床上基本上都出现在肿瘤的中、晚期,治疗的主要目的是解决患者的痛苦、提高病人的生存质量、延长患者的生命,其治疗措施随着科技的进步也在不断地改进完善,远期效果将有待于进一步提高。     

肺癌循环肿瘤细胞的单细胞EGFR基因突变检测

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）是从肿瘤原发病灶脱落并侵入外周血循环的肿瘤细胞。由于CTCs存在较大的异质性,其与癌症发展转移密切相关,但目前尚缺乏有效的CTCs单细胞异质性检测方法。鉴于此,本文发展了在单细胞层面对CTCs进行基因突变的检测方法并用于单个肺癌CTC的EGFR（Epidermal growth factor receptor）基因突变检测。首先用集成式微流控系统完成血液中稀有CTCs的捕获,接着将CTCs释放入含有多个微孔的微阵列芯片中,得到含有单个CTC的微孔,通过显微操作将单个CTC转入PCR管内完成单细胞基因组的放大,并进行单细胞的EGFR基因突变检测。以非小细胞肺癌细胞系A549、NCI-H1650和NCI-H1975为样本,通过芯片与毛细管修饰、引物扩增条件（复性温度、循环次数）的优化,结果显示在复性温度59℃、30个循环次数的条件下,引物扩增效果最优。利用该方法成功地对非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）患者的血液样本进行了测试。从患者2 mL血液中获取5个CTCs,分别对其EGFR基因的第18、19、20、21外显子进行测序,发现该患者CTCs均为EGFR野生型。研究结果证明此检测方法可以灵敏地用于单个CTC基因突变的检测,在临床研究上具有重要的指导意义。     

恶性胸腔积液综合治疗进展

恶性胸腔积液是恶性肿瘤累及胸膜,或是发生胸膜转移所致。它是癌症晚期常见的并发症,治疗难度大,预后较差。约有一半以上的癌症患者晚期出现胸腔积液。大量胸腔积液可引起胸痛,咳嗽,呼吸困难等,影响病人生存质量,治疗不及时可危及生命。因此我们治疗恶性胸腔积液的主要目的是缓解症状,有效的清除胸腔积液并防止它的再次蓄积,改善患者的生存质量,延长生存时间。目前,恶性胸腔积液治疗的方法较多,但是没有标准的治疗方法,总体疗效有限。由于其预后不佳,临床上多以姑息治疗手段为主。常见的方法有胸腔穿刺术,胸腔置管引流术,化学胸膜固定术,及胸膜剥除术等。生物免疫制剂协同其他方法治疗恶性胸腔积液被广泛应用于临床,疗效满意,毒副反应小。本文综合性的回顾恶性胸腔积液的治疗方法,就恶性胸腔积液的治疗进展进行简要分析。     

胸腔内注射重组人5型腺病毒治疗晚期肺癌恶性胸腔积液的疗效观察

目的探讨胸腔内注射重组人5型腺病毒治疗晚期肺癌恶性胸腔积液的临床疗效。方法选择我院收治的晚期肺癌恶性胸腔积液患者50例,随机分为观察组和对照组各25例。对照组患者给予胸腔注射顺铂,观察组患者给予胸腔注射重组人5型腺病毒,比较两组患者临床疗效、生活方式评分以及不良反应发生情况。结果观察组总有效率为72.00%,明显高于对照组的52.00%(P0.05);治疗后,观察组患者的生活方式各项因素评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论胸腔内注射重组人5型腺病毒治疗晚期肺癌恶性胸腔积液的临床效果显著,能有效提高患者的生活质量,且不良反应少,值得推广应用。     

一氧化氮抑制恶性胸腔积液形成的机制

本研究旨在明确一氧化氮(NO)在恶性胸腔积液(MPE)形成中的作用,探究NO是否调控MPE中Th1/Th17免疫反应.利用在野生型(WT)小鼠(Mus musculus)及诱导型一氧化氮合酶敲除(NOS2-/-)小鼠的胸膜腔内注射肺腺癌细胞或肠腺癌细胞,建立MPE模型.明确小鼠MPE中NO的含量;分析并比较WT及NOS2~(-/-)小鼠的胸水量及生存期的差异;检测NO对胸膜血管通透性的影响;以及NO对MPE中Th1及Th17细胞的影响.研究结果显示,NO在WT小鼠恶性胸腔积液中的含量显著高于外周血.与WT小鼠相比,NOS2-/-小鼠的胸膜血管通透性增强,胸水量增加,生存期缩短,其MPE中Th1细胞比例降低,而Th17细胞比例升高.NO可促进Th1细胞的分化,抑制Th17细胞的分化.本研究证实了NO通过影响MPE小鼠胸膜血管通透性而抑制MPE的形成,NO可促进Th1细胞的分化并抑制Th17细胞的分化,从而调节MPE中Th1/Th17细胞免疫反应.     

香菇多糖与金葡素治疗恶性胸腔积液的临床研究

目的:恶性胸腔积液是晚期非小细胞肺癌常见的并发症,严重影响患者的生活质量及预后。治疗恶性胸腔积液的方法虽多,但疗效有限,且目前尚无统一的治疗规范。本研究通过向胸腔内注入香菇多糖和金葡素,观察其治疗恶性胸腔积液的疗效和安全性。方法:60例恶性胸腔积液患者随机分成两组,每组30例:A组(香菇多糖组),B组(金葡素组)。通过胸腔闭式引流术排净胸腔积液后,分别向胸腔内注入香菇多糖、金葡素,评价两组的有效率和毒副反应。结果:两组疗效显著:香菇多糖组CR 11例,PR 12例,NC 3例,PD 4例,治疗有效率为76.7%,金葡素组CR 14例,PR 11例,NC 4例,PD 2例,治疗有效率为83.3%,两组疗效比较无显著性差异(x2=0.42,P0.05);两组毒副反应轻微,主要为骨髓抑制、胃肠道反应和发热,两组毒副反应比较无显著性差异(x2=0.58,P0.05),全组无毒性相关死亡。结论:胸腔内注入香菇多糖和金葡素可有效杀灭肿瘤细胞、促进胸膜粘连,显著缓解症状,提高机体免疫功能,改善生活质量和预后。二者疗效相当,不良反应轻微,值得临床大力推荐应用。     

单细胞转录组高通量测序分析新进展

细胞异质性是生物组织的普遍特征。常规转录组测序(RNA-Seq)技术需要上万个细胞,所测结果实际上是一群细胞基因表达的平均值,所以难以鉴别细胞之间基因表达的异质性。单细胞RNA-Seq技术的分辨率精确至单个细胞,为辨别异质性群体中各种细胞类型的转录组特征提供了有力的工具。近年来单细胞RNA-Seq技术发展迅速,在方法学上包括cDNA扩增方法的多样化、对灵敏度和技术噪声的定量分析、浅覆盖高通量单细胞RNA-Seq方法和原位RNA-Seq技术等;在技术应用方面应用范围从早期胚胎发育扩大到组织器官发育、免疫和肿瘤等多个领域。文章对单细胞RNA-Seq在方法学和技术应用两方面的研究进展进行了详细阐述。     

信息管理系统下胸腔镜胸膜固定术治疗恶性胸腔积液

目的:分析基于信息管理系统的胸腔镜滑石粉胸膜固定术控制恶性胸腔积液患者术后的并发症,死亡率及生存时间。方法:2011年9月至2014年10月,一共400个患者完成了胸腔镜辅下滑石粉胸膜固定术。对手术前后的患者的并发症,死亡率,成功率和中位生存时间进行评价。结果:中位随访时间为40个月(范围4-61月)。所有患者的呼吸困难症状都得到明显缓解。围手术期死亡率为0。患者对这一手术的耐受性良好,没有观察到明显的副作用。院内死亡率为2%,胸膜固定的成功率为85%。较差的KS评分及胸腔积液诊断到完成胸膜固定术之间的时间延误与院内死亡的发生明显相关。乳腺癌的生存情况最好,其次为卵巢癌,淋巴瘤和胸膜间皮瘤。结论:胸腔镜滑石粉胸膜固定术是一项安全有效的操作,胸膜固定的成功率较高,呼吸困难会能够得到长期有效的控制。     

中心静脉导管在恶性胸腔积液治疗中的临床应用分析

目的观察中心静脉导管行胸腔闭式引流术在治疗恶性胸腔积液中的临床疗效与安全性。方法将2011年3月~2013年8月我院收治的60例恶性胸腔积液患者随机分为两组,每组30例。中心静脉导管组30例患者,采用中心静脉导管闭式引流,积液引流完后胸腔内注射顺铂和人白细胞介素-2;对照组30例患者,采用传统方法穿刺抽液术,积液抽吸净后于胸腔内注射药物的剂量同导管组,并比较两组患者的疗效及不良反应。结果中心静脉导管组治疗有效率（76.67%）明显优于对照组（56.67%）,差异具有统计学意义（P〈0.05）;中心静脉导管组不良反应发生率（13.33%）显著低于对照组（36.67%）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论中心静脉导管行胸腔闭式引流术对恶性胸腔积液的疗效明确,操作简单、安全,可控性好,不良反应较少,值得临床推广使用。     

腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎和恶性胸腔积液的对比临床分析

目的：探究腺苷脱氨酶在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中的含量规律。方法：回顾分析自2010年3月至2012年5月于本院胸心外科住院的胸腔积液患者,对穿刺获得的胸腔积液,用比色法测定胸腔积液中腺苷脱氨酶的水平。测量血中腺苷脱氨酶的水平进行对比。结果：结核性胸膜炎组患者胸腔积液ADA测定值为89．67±47．85IU／L,癌性胸腔积液组水平为24．56±11．491U／L,胸腔积液ADA水平在结核性胸膜炎与癌性胸腔积液组之间存在显著性差异（P〈0．05）;以ADA〉45IU／L诊断结核性胸膜炎：则敏感性为（48／51）94．1,特异性为（48／52）88．9％,以ADA〈45IU／L一诊断恶性胸腔积水：则敏感性（（51／55）89．4％,特异性为（51／54）94．4％;结核性胸膜炎中胸腔积液ADA／血清中ADA比值为2．25±0．72,癌性胸腔积液组水平0．43＋0．1,结核性胸膜炎与癌性胸腔积液组之间存在显著性差异（P〈0．05）;以胸腔积液ADA／血清中ADA比值〉1．0为界诊断结核性胸膜炎：则敏感性为（46／51）90．1,特异性为（45／55）81．8．％,以胸腔积液ADA／血清中ADA比值〈1．0诊断恶性胸腔积水：则敏感性（47／57）82．4％,特异性为（47／53）88．7％。结论：腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎和恶性胸腔积液中的含量有明显差异。     

肺癌性胸腔积液中生存素基因检测的诊断意义探讨

目的：生存素基因（survivin）是一种新近发现的抗凋亡基因,在肿瘤组织中呈现表达。本文旨在探讨和比较肺癌性胸腔积液和结核性胸腔积液中生存素基因的表达情况,以及其联合细胞学检查对判断肺癌性胸腔积液的敏感度。方法：应用逆转录酶-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测2007年06月～2008年03月42例肺癌患者癌性胸腔积液标本,及同时期28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA表达情况,并联合细胞学检查结果进行对比分析。结果：42例肺癌患者胸腔积液标本中生存素mRNA的阳性率为52138％（22／42）;癌细胞的检出率为30．95％（13／42）;生存素mRNA检测联合细胞学检查诊断肺癌的敏感性为61．90％（26／42）,显著高于单独胸腔积液细胞学检测的敏感性（P〈0．001）。28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA阳性率为7．14％（2／28）,显著低于肺癌患者胸腔积液标本生存素mRNA的阳性率（P〈0．001）。结论：运用RT—PCR方法检测胸腔积液中生存素mRNA的表达在判断肺癌性胸腔积液中具有一定的敏感性和特异性,可能作为肺癌辅助诊断的一个新检测指标。     

683例胸腔积液病因分析

目的：目前医学证实有很多疾病的分布与民族及种族有关,而维吾尔族是新疆特有的少数民族,本文探讨了2010～2012年入住我院的诊断明确的所有683例胸腔积液（PZ）患者与其中276例维吾尔族PE患者的病因分布的差异,从而指导临床工作。方法：回顾性分析2010-2012年入住我院的683例PE患者及其中276例维吾尔族PE患者的临床资料,分析维吾尔族PE患者与入我院总的PE患者二者之间病因分别的差异。结果：入我院总的PE患者与其中维吾尔族PE患者最常见的病因相同,均为结核性PE、恶性PE、心功能不全性PE、肺炎旁PE,但二者之间这四种病因的分布有差异,前者病因分布顺序为恶性PE、结核性PE、心功能不全性PE、肺炎旁PE,而后者病因的分布顺序为结核性PE、心功能不全性PE、恶性PE、肺炎旁PE;二者在不同年龄段的病因分布也具有差异,后者在≤40岁组与41-59岁组比较、≤40岁组与≥60岁组比较有统计学差异,但41～59岁组与≥60岁组比较无统计学差异,但前者在上述三个年龄段比较均有统计学差异。结论：入我院总的PE患者与维吾尔族PE患者的最主要的病因相同,但二者这四个病因分布的顺序不同,且二者在不同年龄段的病因分布也存在差异,前者在三个年龄段的病因分布均存在差异,而后者仅在二个年龄段的病因分布存在差异。     

683 例胸腔积液病因分析

目的：目前医学证实有很多疾病的分布与民族及种族有关,而维吾尔族是新疆特有的少数民族,本文探讨了2010~2012 年入 住我院的诊断明确的所有683 例胸腔积液（PE）患者与其中276 例维吾尔族PE 患者的病因分布的差异,从而指导临床工作。方法：回顾性分析2010~2012 年入住我院的683 例PE 患者及其中276 例维吾尔族PE 患者的临床资料,分析维吾尔族PE 患者与入我院总的PE 患者二者之间病因分别的差异。结果：入我院总的PE 患者与其中维吾尔族PE 患者最常见的病因相同,均为结核性PE、恶性PE、心功能不全性PE、肺炎旁PE,但二者之间这四种病因的分布有差异,前者病因分布顺序为恶性PE、结核性PE、心功能不全性PE、肺炎旁PE,而后者病因的分布顺序为结核性PE、心功能不全性PE、恶性PE、肺炎旁PE;二者在不同年龄段的病因分布也具有差异,后者在≤40 岁组与41~59 岁组比较、≤40 岁组与≥60 岁组比较有统计学差异,但41~59 岁组与≥ 60 岁组比较无统计学差异,但前者在上述三个年龄段比较均有统计学差异。结论：入我院总的PE 患者与维吾尔族PE患者的最主要的病因相同,但二者这四个病因分布的顺序不同,且二者在不同年龄段的病因分布也存在差异,前者在三个年龄段的病因分布均存在差异,而后者仅在二个年龄段的病因分布存在差异。     

肺癌性胸腔积液中生存素基冈检测的诊断意义探讨

目的:生存素基因(survivin)是一种新近发现的抗凋亡基因,在肿瘤组织中呈现表达.本文旨在探讨和比较肺癌性胸腔积液和结核性胸腔积液中生存素基因的表达情况,以及其联合细胞学检查对判断肺癌性胸腔积液的敏感度.方法:应用逆转录酶-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测2007年06月～2008年03月42例肺癌患者癌性胸腔积液标本,及同时期28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA表达情况,并联合细胞学检查结果进行对比分析.结果:42例肺癌患者胸腔积液标本中生存素mRNA的阳性率为52.38%(22/42);癌细胞的检出率为30.95%(13/42);生存素mRNA检测联合细胞学检查诊断肺癌的敏感性为61.90%(26/42),显著高于单独胸腔积液细胞学检测的敏感性(P＜0.001).28例结核性胸腔积液标本的生存素mRNA阳性率为7.14%(2/28),显著低于肺癌患者胸腔积液标本生存素mRNA的阳性率(P＜0.001).结论:运用RT-PCR方法检测胸腔积液中生存素mRNA的表达在判断肺癌性胸腔积液中具有一定的敏感性和特异性,可能作为肺癌辅助诊断的一个新检测指标.     

苦参注射液与恩度联合顺铂对肺癌恶性胸腔积液患者血清炎症因子水平的影响

目的:探讨苦参注射液与恩度分别联合顺铂对肺癌恶性胸腔积液患者血清炎症因子水平影响。方法:收集我院以非小细胞肺癌合并恶性胸腔积液患者68例,按照就诊先后顺序分为实验组和对照组。对照组予恩度联合顺铂化疗,实验组予苦参注射液联合顺铂化疗。于患者治疗前后进行CD8~+、IL-2检测,KPS评分,并进行生活质量评价及胸腔积液疗效评价比较,以及药物不良反应评价。结果:1治疗后实验组CD8~+下降、IL-2均上升(P0.05);2治疗后实验组KPS评分较对照组明显上升(P0.05);3实验组患者生活质量评价明显好于对照组,胸腔积液疗效优于对照组(P0.05)。结论:苦参注射液联合顺铂较恩度联合顺铂对肺癌合并恶性胸腔积液患者CD8~+T淋巴细胞及IL-2水平有更明显调节作用,且安全性更佳,对肺癌合并恶性胸腔积有显著临床疗效,对提高患者生活质量、延长患者生存期有重要意义。