甘草酸二铵对百草枯中毒致急性肺损伤大鼠TLR-4表达的影响

目的探讨甘草酸二铵(DG)对百草枯(PQ)中毒致急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及其机制。方法选择健康SD大鼠50只,随机分为百草枯组(PQ组)、甘草酸二铵组(DG组)和正常对照组(NS组),PQ组和DG组予百草枯100mg/kg灌胃1次,DG组于灌胃后立即腹腔注射DG 50mg/kg,每日1次,对照组与PQ组注射等剂量的生理盐水。观察至48h处死大鼠,取肺组织检测肺湿干重比;肺组织HE染色评价肺组织损伤情况;采用RT-PCR法检测肺组织TLR-4mRNA和NF-κB mRNA的表达情况。另选择健康SD大鼠50只,分组及各组处置方法同上,观察其7天内死亡率。结果 PQ组与DG组肺湿干比、肺组织TLR-4mRNA和NF-κB mRNA表达较NS组明显升高(P0.01);DG组各指标明显低于PQ组(P0.01)。HE染色结果,NS组肺部结构正常,PQ组、DG组可见肺组织水肿、出血及炎性细胞浸润等肺损伤表现,DG组病变轻于PQ组。群体死亡率比较,PQ组7天死亡率为90%,DG组为40%,NS组无死亡。结论甘草酸二铵可减轻百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺部炎症,其机制可能与降低TLR-4、NF-κB的表达有关。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝大鼠白细胞浸润的影响

目的研究甘草酸二铵脂质配位体(DGLL)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠白细胞浸润的影响及机制。方法用高脂乳剂灌胃诱导大鼠NAFLD模型并给予DGLL干预,6周后观察肝脏组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达,酶标仪法测定肝脏组织MPO活性的变化,流式细胞技术测定外周血白细胞粘附分子表达的变化,Western blot技术检测肝脏组织内皮细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达水平。结果与高脂模型组相比,DGLL能明显降低NAFLD大鼠肝脏组织中白细胞MPO的表达和活化,下调大鼠外周血中单核细胞和粒细胞粘附分子的表达,同时显著地抑制肝脏组织中内皮细胞ICAM-1的表达。结论 DGLL能显著降低高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏组织中白细胞的活化和浸润,这种作用可能与抑制白细胞与内皮细胞粘附分子的表达相关。     

百草枯致急性肺损伤大鼠模型的建立

目的建立一种百草枯诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠模型。方法将20只SD大鼠随机分为正常对照组10只、实验组10只。实验组一次性口服灌胃百草枯（PQ）80mg／kg,于给药后1天处死大鼠,观察光镜下肺组织病理改变、肺动脉血氧分压（PaO2）、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量等。结果给予百草枯1天后肺形态学出现显著异常,PaO2及BALF蛋白含量出现显著改变。结论一次性灌胃百草枯80mg／kg成功建立急性肺损伤动物模型。     

地喹氯铵联合紫杉醇注射液对神经胶质瘤患者血清IL-6, Th17 细胞水平 及临床疗效的影响

目的:探讨地喹氯铵联合紫杉醇注射液对神经胶质瘤患者血清IL-6、Th17细胞水平及临床疗效的影响。方法:回顾性研究我院神经胶质瘤患者60例,根据电脑生成的随机数字表将所有患者随机分为实验组与对照组,每组各30例,对照组患者给予地喹氯铵进行治疗,实验组患者在对照组的基础上给予紫杉醇注射液。比较治疗前后两组患者血清IL-6,Th17细胞水平,并对两组患者不良反应发生率及临床总有效率进行统计。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的血清IL-6、Th17细胞水平均显著降低(P0.05);且与对照组相比,实验组患者血清IL-6、Th17细胞水平均较低(P0.05)。与对照组相比,实验组患者的不良反应发生率较低(P0.05);临床总有效率较高(P0.05)。结论:地喹氯铵联合紫杉醇注射液能够显著提高神经胶质瘤患者临床疗效,降低不良反应发生率,其机制可能与降低血清IL-6及Th17细胞水平有关。     

血清CysC及尿NGAL在百草枯中毒患者急性早期肾损伤中诊断价值

目的:探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)及尿性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在百草枯中毒患者急性早期肾损伤(AKI)中的诊断价值。方法:选择2011年3月至2015年3月我院收治的300例百草枯中毒患者为病例组,另选取来我院150例健康体检者为对照组,病例组根据是否发生AKI分为AKI组与非AKI组,各150例,采用酶联免疫吸附法检测NGAL、肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐(Scr)水平、免疫透射比浊法检测CysC水平,观察所有对象入院后15 min、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d、7 d CysC、NGAL以及Scr表达水平的变化。结果:AKI组和非AKI组患者入院后8 h、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d、7 d的Scr水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);AKI组患者入院后12 h、24 h、48 h、3 d、5 d、7 d Scr水平明显高于非AKI组,差异具有统计学意义(P0.05);AKI组入院后2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d、7 d,非AKI组入院后8 h、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d、7 d的NGAL水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);AKI组患者NGAL水平在入院后48 h升至峰值,而后开始缓慢下降,且AKI组入院后4 h的NGAL水平便开始明显高于非AKI组(P0.05);AKI组基本在入院后8 h、非AKI组在入院后12 h的CysC水平便明显高于对照组(P0.05),AKI组基本在入院后3d升至峰值,而后开始缓慢下降,且AKI组在入院后12 h的CysC水平便开始明显高于非AKI组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:血清CysC及尿NGAL水平在百草枯中毒后短时间内会出现异常升高,对早期诊断AKI具有积极意义。     

百草枯中毒大鼠TNF-a、IL-10的表达及大黄保护作用的研究

目的：观察大黄对急性百草枯中毒大鼠TNF-α、IL-10的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法：90只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（A组）、PQ（60 mg/kg）灌胃染毒组（B组）、生大黄（300mg/kg.d）干预组（C组）,每组30只。中毒后6h、24h、72h分批处死存活的大鼠,并且检测大鼠血浆TNF-α、IL-10水平。结果：B组、C组TNF-α、IL-10水平在染毒后6h开始升高,72h达到高峰,与A组相比,差异有统计学意义（P〈0.05、P〈0.01）,在相同时间点C组TNF-α和IL-10的表达低于B组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。B组、C组血浆TNF-α、IL-10水平与中毒时间呈显著正性相关关系（r=0.849,P〈0.01;r=0.790,P〈0.01;r=0.0.943,P〈0.01;r=0.892,P〈0.01）。结论：大黄能够通过降低百草枯中毒大鼠体内的TNF-α、IL-10水平,减轻百草枯对大鼠的损伤作用     

百草枯中毒大鼠TNF-α、IL-10 的表达及大黄保护作用的研究

目的:观察大黄对急性百草枯中毒大鼠TNF-α、IL-10的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法:90只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(A组)、PQ(60 mg/kg)灌胃染毒组(B组)、生大黄(300mg/kg.d)干预组(C组),每组30只。中毒后6h、24h、72h分批处死存活的大鼠,并且检测大鼠血浆TNF-α、IL-10水平。结果:B组、C组TNF-α、IL-10水平在染毒后6h开始升高,72h达到高峰,与A组相比,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01),在相同时间点C组TNF-α和IL-10的表达低于B组,差异均有统计学意义(P<0.01)。B组、C组血浆TNF-α、IL-10水平与中毒时间呈显著正性相关关系(r=0.849,P<0.01;r=0.790,P<0.01;r=0.0.943,P<0.01;r=0.892,P<0.01)。结论:大黄能够通过降低百草枯中毒大鼠体内的TNF-α、IL-10水平,减轻百草枯对大鼠的损伤作用。     

甘草酸二铵改善Con A致小鼠肝损伤的作用研究北大核心CSCD

探讨甘草酸二铵(Diammonium glycyrrhi zinate,DG)对刀豆蛋白(Concanavalin A,Con A)致小鼠肝损伤的保护作用及机制。连续给予ICR小鼠各保肝药的临床等效量7天后,再以Con A造成小鼠肝损伤。生化法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)含量;HE染色观察肝组织病理学特征;通过药物代谢物与转氨酶异常大鼠血清共孵育,检测DG对转氨酶活性的直接作用;免疫组化、Western blot检测肝组织中凋亡蛋白和炎性细胞因子的水平,探讨DG的保肝机制。结果显示,58. 5 mg/kg DG能够改善Con A所致小鼠肝脏病理损伤,降低小鼠血清中AST、ALT水平,而对AST、ALT的活性没有直接抑制作用;并且DG可以抑制肝细胞凋亡(下调cleaved Caspase-3、cleaved PARP以及BAX/BCL-2的表达)和炎性反应(降低TGF-β1、COX-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ等炎性因子水平)。综上所述,DG可改善Con A致小鼠急性肝损伤,其作用机制可能与抑制细胞凋亡和炎症反应有关。     

甘草酸二铵对于HCV相关性B-NHLCD25-和CD25+T细胞增殖影响研究

目的:本研究初步探究甘草酸二铵(Diammonium Glycyrrihizinate,DG)对HCV相关性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-cellnon-Hodgkin's lymphoma,B-NHL)CD25-T细胞、CD25+T细胞的免疫调控作用。方法:应用流式细胞分析仪检测HCV相关性B-NHL CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例、CD25+细胞占总PBMC比例,并与单纯HCV感染患者、健康人检测结果相对照。应用免疫磁珠分离法(MACS)分选获得CD25-和CD25+细胞,将两者和未分选的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)以CFSE标染孵育72小时后,应用流式细胞分析仪将APC CD3阳性细胞设定为门检测CD25-T细胞、未分选T细胞、CD25+T细胞的增殖情况,及甘草酸二铵干预后的CD25-T细胞、CD25+T细胞增殖情况。结果:应用流式细胞分析仪检测健康人、单纯HCV感染者和HCV相关性B-NHL患者在CD4+CD25+占总CD4+细胞比例和CD25+占总细胞比例上均呈现逐步递增的关系(分别为33.94%±2.18%,57.95%...     

甘草酸二铵对于HCV相关性B—NHLCD25-和CD25＋T细胞增殖影响研究

目的：本研究初步探究甘草酸二铵（Diammonium Glycyrrihizinate,DG）对HCV相关性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-cellnon-Hodgkin-Slymphoma,B-NHL）CD25-T细胞、CD25＋T细胞的免疫调控作用。方法：应用流式细胞分析仪检测HCV相关性B-NHLCD4＋CD25＋T细胞占CD4＋1r细胞的比例、CD25＋细胞占总PBMC比例,并与单纯HcV感染患者、健康人检测结果相对照。应用免疫磁珠分离法（MACS）分选获得CD25-和CD25＋细胞,将两者和未分选的外周血单个核细胞（peripheralblood mononuclear cell。PBMC）以CFSE标染孵育72小时后,应用流式细胞分析仪将APCCD3阳性细胞设定为门检测CD25T细胞、未分选T细胞、CD25＋T细胞的增殖情况,及甘草酸二铵干预后的CD25-T细胞、CD25＋T细胞增殖情况。结果：应用流式细胞分析仪检测健康人、单纯HCV感染者和HCV相关性B—NHL患者在CD4＋CD25＋占总CD4＋细胞比例和CD25＋占总细胞比例上均呈现逐步递增的关系（分别为33．94％±2．18％,57．95％±1．77％,70．24％±12．75％,P〈0．05;18．16％±2．23％,33．45％±1132％,54.69％±8．66％,P〈0．05）。CFSE标染后孵育72小时检测（MI＋M2）分裂相百分比呈现CD25-T细胞最高、未分选T细胞其次、CD2YT细胞最低的表现（分别为74．4％±1．2％,63．1％±5．4％,47．2％±5．9％,P〈0．05）。甘草酸二铵干预后CD25-T细胞较未干预CD25T细胞M1分裂相百分比增加（分别为57．7％±4．2％,46．5％±5．6％,P〈0．05）。甘草酸二铵干预后CD25＋T细胞较未干预cD25＋1r细胞M1分裂相百分比减少（分别为14．7％±1．3％,22．1％±4．1％,P〈0．05）。结论：HCV相关性B-NHLCIM＋CD25＋、CD25＋细胞百分比较单纯HCV感染者、健康人明显增加,提示存在T细胞免疫抑制,且抑制程度重于单纯HCV感染。去除CD25＋细胞后CD25T细胞增殖较未去除CD25＋的T细胞增殖活跃,说明HCV相关性B-NHL患者的CD25＋细胞能够抑制CD25-T细胞增殖。而DG干预后HCV相关性B-NHLCD25＋T细胞增殖M1分裂相减少,而CD25T细胞增殖M1分裂相增加,表明DG对HCV相关性B-NHL具有抑制CD25＋T细胞增殖而促进CD25-T细胞增殖的积极免疫调节作用。     

Metabolic profiling reveals the protective effect of diammonium glycyrrhizinate on acute hepatic injury induced by carbon tetrachloride

Diammonium glycyrrhizinate (DG), a constitutent of Glycyrrhiza uralensis, has a protective effect on hepatic injury, hepatisis and cirrhosis. To date, the mechanism has been poorly understood, especially at the metabolic level. A metabolomic profiling study was performed to characterize the carbon tetrachloride (CCl₄) induced global metabolic alteration and the protective effects of DG in Sprague-Dawley rats. Urinary and hepatic tissue metabolic profiling revealed that CCl₄ perturbed the amino acid metabolism (alanine, glycine, leucine), tricarboxylic acid cycle (citrate), lipid metabolism (unsaturated fatty acids) and gut microbiota related metabolites. Our results also indicated that DG was able to attenuate CCl₄ perturbed metabolic pathways and ameliorated biochemical markers of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), and Total cholesterol (TCHO). This global metabolomic approach also revealed full metabolic recovery takes longer than apparent and conventional histological and biochemical markers.     

硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤肺泡表面活性物质的影响

目的：观察脂多糖（LPS）所致内毒素性急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡表面活性物质（PS）的变化及硫化氢（H2S）对PS的影响,探讨H2S对肺脏的作用机制。方法：雄性SD大鼠共48只,随机分为6组（n=8）：空白对照组、LPS组、LPS＋NaHS低、中、高剂量组、LPS＋PPG组。空白对照组给予生理盐水,LPS组给予LPS,LPS＋NaHS低、中、高剂量组和LPS＋PPG组分别在给予LPS3h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠（NariS）或炔丙基甘氨酸（PPG）。各组均于给予生理盐水或LPS6h时电镜下观察肺泡Ⅱ型上皮细胞（AEC-Ⅱ）的形态改变,检测血浆中H2S含量、肺组织中胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）活性、肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白（1P）和总磷脂（TPL）含量、及肺组织中肺泡表面活性蛋白A、B、C（SP-A、B、C）mRNA表达的变化。结果：①与空白对照组比较,LPS组AEC-Ⅱ超微结构明显受损,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低（P〈0．05,P〈0．01）,BALF中TP的含量明显增加（P〈0．01）;②与LPS组比较,LPS＋NaHS低、中、高剂量组,AEC-Ⅱ超微结构均有所恢复,血浆中H2S含量、肺组织中CSE海性、SP-AmRNA表达均明显升高（P〈0．05,P〈0．01）;LPS＋NaHS中、高剂量组BALF中吼含量明显增高,SP-BmRNA表达升高（P〈0．05）;LPS＋NaHS高剂量组BALF中,IP含量明显降低（P〈0．05）;LPS＋NaHS各剂量组SP-CznRNA表达无明显变化;③与LPS组比较,LPS＋PPG组AEC-Ⅱ超微结构仍损伤严重,血浆中H2S含量、肺组织中CSE活性、BALF中TPL的含量、及肺组织中SP-A、B、CmRNA表达均明显降低（P〈0．05）,BALF中TP的含量明显升高（P〈0．05）。结论：PS降低是内毒素性ALI的重要病理生理过程,H2S对LPS诱导的ALI有保护性作用,其机制可能与H2S对PS的调节有关。     

葛根素对脂多糖导致的大鼠急性肺损伤组织中水通道蛋白-1的影响

目的:观察葛根素对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP1)表达、病理形态学、湿干比等的影响,探讨其对急性肺损伤的保护作用.方法:健康Wistar大鼠36只,采用腹腔内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)法复制急性肺损伤动物模型.将大鼠随机分为盐酸对照组(对照组)、LPS损伤组(损伤组)和葛根素+LPS组(葛根素组).结果:光镜下见对照组肺泡结构清晰,肺泡腔及支气管腔未见明显炎细胞及渗出物.LPS组镜下可见肺组织水肿,表面可见暗红色点、片状出血,大量炎性细胞浸润,肺泡间隔明显增厚,葛根素+LPS组损伤较LPS组明显减轻.LPS组湿干比较对照组增高,葛根素组湿干比较LPS组降低.LPS组AQP1蛋白表达较对照组减少,葛根素组肺组织AQP1蛋白表达较LPS组明显增加.结论:葛根素对脂多糖所致的大鼠急性肺损伤具有保护作用.     

复方清下汤对脓毒症大鼠肺组织细胞因子白介素-1及白介素-6基因表达的影响

目的 探讨复方清下汤对脓毒症大鼠肺组织白介素-1(IL-1)及白介素-6(IL-6)基因表达的影响,进一步探讨其减轻肺损伤机制.方法 将健康SD大鼠随机分为4组,每组10只:假手术组(SHAM组),脓毒症肺损伤组(模型组),盲肠结扎穿孔+复方清下汤组,以及盲肠结扎穿孔+头孢哌酮舒巴坦(舒普深)组,造模24 h后收集标本.应用免疫组织化学和Westernblotting法检测肺组织中IL-1、IL-6的表达,RT-PCR检测肺组织上述蛋白mRNA表达.结果 与SHAM组比较,模型组IL-1、IL-6的mRNA转录水平和蛋白水平表达均显著升高(P＜0.01);抗生素及中药处理组与模型组比较,IL-1、IL-6的表达明显降低(P＜0.01),抗生素及中药处理组两组检测数据相近.结论 脓毒症大鼠肺损伤时细胞因子IL-1、IL-6过度表达可能是造成脓毒症肺损伤的重要原因;复方清下汤处理的动物模型肺损伤减轻的同时IL-1、IL-6表达变化,提示它可能通过调控IL-1、IL-6表达起作用.     

The value of plasma paraquat concentration in predicting therapeutic effects of haemoperfusion in patients with acute paraquat poisoning

Objective

This study was aimed to analyze the scavenging effect of haemoperfusion on plasma paraquat (PQ) and to evaluate the clinical significance of PQ examination in the treatment of patients with acute paraquat poisoning.

Methods

85 patients with acute paraquat intoxication by oral ingestion were admitted in West China Hospital from Jun, 2010 to Mar, 2011. A standardized therapeutic regimen including emergency haemoperfusion was given on all subjects. A total of 91 whole blood samples were taken before (0h), underway (1h after haemoperfusion beginning) and at the end (2h) of the haemoperfusion therapy. The clearance rate was calculated and related factors were analyzed.

Results

As heamoperfusion was going on, the plasma paraquat concentration of the patients kept falling down. After 1 hour of haemoperfusion, the average clearance rate (R₁) was 37.06±21.81%. After 2 hours of haemoperfusion, the average clearance rate (R₂) was 45.99±23.13%. The average of R₁/R₂ ratio was 76.61±22.80%. In the high paraquat concentration group (plasma paraquat concentration (C₀) >300 ng/mL), both the averages of R₁ and R₂ were significantly higher than those of the low paraquat concentration group (C₀≤200 ng/mL) (p<0.05), and there was no significant difference of R₁/R₂ between these two groups (p>0.05).

Conclusions

The dynamic monitoring of plasma PQ concentration was not only critical in the clinical evaluation but also helpful in guiding the treatment of patients with acute PQ intoxication. Haemoperfusion can effectively eliminate paraquat from the plasma in patients with high initial plasma PQ concentration, while in patients with low initial plasma PQ concentration (<200 ng/ml), the clearance effect of harmoperfusion was very limited. Increasing HP time might improve the overall clearance rate of HP on plasma PQ yet decrease the elimination efficiency of HP, while repeated HP treatment was helpful against the rebound phenomena.